卵泡存活因子对不同发育阶段卵泡细胞凋亡的调控

哺乳动物卵巢中的卵泡在发育的每个阶段都要经过层层筛选,最终只有1个或几个成熟排卵,而99.9%以上的卵泡都发生闭锁—即一个由激素及相关因子调控的细胞调亡过程[1] 。在各阶段的筛选过程中,对于卵泡的生存与否,一些激素及因子起到了决定性的作用,因而将其统称为存活因子(survivalfactor)。存活因子对卵泡发育的调控具有阶段依赖性,也就是说,不同发育阶段的卵泡需要不同种类和数量的存活因子。否则,细胞会通过激活Caspases蛋白级联反应,使其自身发生凋亡,从而导致整个卵泡的闭锁和退化。1　卵泡发育的模式目前认为哺乳动物卵泡发育主要存在…     

生后大鼠发育不同时期各级卵泡凋亡的观察

目的：观察研究生后不同阶段大鼠卵巢卵泡的生长发育与卵泡凋亡的关系、凋亡过程及规律，探索性激素血液浓度变化与卵泡凋亡的内在联系。方法：用DNA缺口原位末端标记检测法，对生后20-140天不同阶段大鼠卵巢卵泡的生长发育及卵泡凋亡进行了光镜观察，同时对生后各阶段鼠血液孕激素(progesterone P）,卵泡刺激素（follicle stimulating hormone FSH)、黄体生成素(luteinizing lormone LH)、雌二醇(estradiol E2)浓度进行放免检测。结果：生后20天鼠卵泡即可见到凋亡发生，卵泡凋亡始于卵母细胞，继则是与其相邻的卵泡细胞，卵泡细胞的凋亡从内向外依次发生。卵泡的凋亡数目随着卵巢的生长发育而逐渐增多，生后40天可见到黄体细胞凋亡发生，至50-60天可见到卵泡膜内膜细胞凋亡及白体形成，出生80天后卵巢发育已完全成熟，此时卵泡的凋亡数也达到了高峰；放免结果经方差分析显示孕激素P＞0．05，差异显著，推测其浓度变化与卵泡凋亡有内在联系。     

PUMA在卵巢衰老中的作用研究进展

卵子储存在原始卵泡中,每个卵泡都包含一个未成熟的卵母细胞,该卵母细胞被单层颗粒细胞包裹。PUMA(p53-up-regulated modulator of apoptosis)作为调节生殖细胞死亡的关键因子,在卵子迁移阶段和性腺中卵母细胞数量的维持方面发挥重要作用。PUMA是卵巢发育过程中生殖细胞数量的关键决定因素,PUMA敲除可以保护诱导DNA损伤的原始卵泡,维持卵泡正常生育能力。本文综述PUMA在卵母细胞数量维持、DNA损伤的原始卵泡以及颗粒细胞凋亡中的作用机制,为预防卵巢早衰提供新的思路。     

卵泡闭锁调控机制研究进展

卵泡闭锁是卵巢卵泡发育，成熟，排卵过程中重要的生理过程。它受多种因素的综合影响，如ＧｎＲＨ，雌激素，ＩＬ－６，ＴＮＦ，Ｆａｓ促进卵泡闭锁，而雌激素，促性腺激素，ＥＧＦ／ＴＧＦ－α，ＩＧＦ，ｂＥＧＦ则抑制卵泡闭锁。     

大鼠卵泡细胞的程序发育和类胰岛素生长因子Ⅱ的表达

用孕马血清，人绒毛膜促性腺激素刺激２０ｄ雌性大鼠，然后在ｈＣＧ刺激的不同时程处死动物，用细胞生物学方法和分子生物学原位杂交方法，观察卵泡细胞形态学的改变，以及卵泡内的类胰岛素生物因子－Ⅱ在该动物卵泡细胞的动态表达。在ＰＭＳＧ刺激４８ｈ后，卵泡开始发育成对促性腺激素有应答反应或对其依赖的卵泡、内泡膜细胞和颗粒细胞增殖、甘油三脂滴大量堆积在内泡膜细胞浆中，外泡膜细胞不含ＴＧＤ，同时ＩＧＦ－Ⅱ基因开始在     

育龄妇女衣原体感染与雌激素、促卵泡激素水平的相关性研究

目的研究育龄妇女在衣原体感染后雌激素（E2）水平及促卵泡激素（FSH）水平的变化,探讨衣原体感染对育龄妇女激素的影响以及对受孕造成的影响。方法运用聚合酶链反应技术检测衣原体,对阳性的育龄妇女运用电化学发光法检测其感染期及治疗后3个月及6个月的雌激素及促卵泡激素水平,并进行比较分析。结果育龄妇女感染衣原体后雌激素水平下降而FSH升高,随着治疗雌激素逐渐恢复,而促卵泡激素恢复的稍慢,至少需要6个月才能基本恢复感染前水平。结论衣原体感染影响育龄妇女的雌激素及FSH的分泌,进而影响受孕,注意避免衣原体感染非常重要。     

卵泡闭锁调控机制研究进展

卵泡闭锁是卵巢卵泡发育、成熟、排卵过程中重要的生理过程。它受多种因素的综合影响，如ＧｎＲＨ、雄激素、ＩＬ－６、ＴＮＦ、Ｆａｓ促进卵泡闭锁，而雌激素、促性腺激素、ＥＧＦ／ＴＧＦ－α、ＩＧＦ、ｂＦＧＦ则抑制卵泡闭锁。     

PCOS患者卵泡液微环境中的亚急性炎症反应

目的:回顾性分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者及对照者卵泡液微环境中局部脂代谢紊乱及炎症反应状态及其形成机制。方法:比较2组患者外周血清脂代谢指标、性激素、炎症细胞及炎症介质水平差异;测定卵泡液中炎症介质及载脂蛋白含量;分析卵巢颗粒细胞中炎症介质及载脂蛋白基因表达。结果:PCOS患者具备典型肥胖、高脂血症及高雄激素血症,外周血中炎症细胞及各类炎症介质水平显著增加;卵泡液中同样具有显著增加的炎症细胞因子浸润,颗粒细胞内炎症介质及载脂蛋白基因表达增加。结论:PCOS组患者卵泡液内所含高水平载脂蛋白表明卵泡液内可能存在高脂蛋白状态。循环中的高脂血症及亚急性炎症各类因子可能通过血清-卵泡液屏障主动渗透。颗粒细胞通过主动摄取(例如载脂蛋白A)抑或自主合成(如炎症因子IL-1、IL-6及TNF-α等)等多种方式进行卵泡液局部微环境的稳态调节。卵子发育生理性卵泡液微环境的脂质代谢紊乱、炎症细胞浸润、高雄激素血症等均可能影响到卵母细胞和胚胎的正常发育。     

早卵泡期与优势卵泡后加用FSH方案治疗小卵泡排卵不孕疗效比较

目的比较早卵泡期与优势卵泡后加用FSH方案治疗小卵泡排卵的疗效。方法将小卵泡排卵62例102个治疗周期,随机分成2组：A组早卵泡期肌肉注射尿促卵泡激素（丽申宝FSH）。B组卵泡≥12mm时肌肉注射尿促卵泡激素（丽申宝FSH）。观察、比较2组的妊娠率、早期流产率等。结果 B组与A组相比妊娠率、早期流产率无明显差异,但多胎率及OHSS（卵巢过度刺激综合征）发生率明显低于A组。结论优势卵泡后加用FSH方案是有效且安全的治疗小卵泡排卵的促排卵方案。     

卵泡刺激素和睾酮在支持细胞中的信号通路

卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)和睾酮(testosterone)是正常的生精作用所不可缺少的的两种激素.在睾丸中,睾酮和FSH都分别作用于支持细胞(sertoli cells),激活多种信号通路并合成生精细胞发育所需要的多种生长因子.近年来,有关这两种激素在支持细胞中所激活的信号通路的研究取得了较大的进展.     

内分泌和旁分泌因子在腔前卵泡体外培养中的作用

内分泌和旁分泌因子调节着卵泡和卯母细胞发育和成熟。可以对不同时期的卵泡进行体外培养来研究这些因子的作用机制。在卵泡体外培养中.经常使用啮齿类动物作为模型动物,其优势是培养时间短,例如小鼠卵泡的体外生长期为11～12 d,但是人类长达85 d;另外,啮齿类动物卵巢皮质较疏松,卵泡体积较小且数量较少,因此分离小鼠腔前卵泡就相对容易一些;从啮齿类动物试验中所得知的卵母细胞生长因子的作用在人类试验中也得到了证实。本文主要探讨促性腺激素、旁分泌因子、血清和其他添加成分在腔前卵泡生长和分化中的作用。     

卵泡抑素在爪蟾胚胎发育过程中的时空表达模式及在早期心形成过程中的作用

目的:研究爪蟾胚胎发育过程中卵泡抑素基因的时空表达模式及其在心形成过程中的作用.方法:收集发育过程中从第10～32期不同阶段的胚胎,MEMPHA固定并进行胚胎整体原位杂交.切下发育第14期形成心的胚胎组织加入卵泡抑素进行培养,检查了早期心形成过程中的转录因子及特异性标记物Nkx2.5的变化.利用Morpholin Oligo技术减弱卵泡抑素表达,也检查了Nkx2.5的变化.结果:在胚胎发育过程中卵泡抑素开始表达在脊索前中胚层和脊索中胚层.随着发育的进行,卵泡抑素的表达覆盖了脑和整个脊索.另外,卵泡抑素也表达在前肾、心形成区和血岛;过量或缺乏卵泡抑素均影响心形成区Nkx2.5的表达.结论:卵泡抑素参与胚胎早期神经系统、前肾、心和血岛的形成并在心的形成过程中起了十分重要的作用.     

睾酮对小鼠卵泡体外发育的影响

目的探讨高浓度睾酮对体外培养的小鼠卵泡生长发育的影响。方法以出生后12日龄的ICR雌鼠体外培养卵泡为研究模型,将卵泡随机分为以下4个组,每组30个:正常对照组(control组)、10-4mol/L睾酮处理组、10-5mol/L睾酮处理组和10-6mol/L睾酮处理组。将卵泡随机分为以下3个组,每组30个:正常对照组(control组)、睾酮处理组(T组,T=10-5mol/L)和雄激素受体拮抗剂氟他胺预处理后再加睾酮处理组(F+T组,F=10-5mol/L,T=10-5mol/L)。在60mm无菌细胞培养皿上进行微滴培养,每天在倒置显微镜下观察卵泡轮廓,颗粒细胞增生情况,卵母细胞形态以及有无卵母细胞逸出等,并记录卵泡存活和退化的情况。结果 10-4mol/L睾酮能抑制卵泡的生长,而10-5mol/L睾酮能够促进颗粒细胞的增殖和卵泡的生长;同时,在卵泡生长前期,睾酮能刺激卵泡的发育,在后期则呈抑制作用,即卵泡发育停滞、退化或死亡。结论在初级和次级卵泡阶段,10-5mol/L睾酮能促进卵泡的发育,而在窦状卵泡阶段则抑制卵泡的发育。     

多囊卵巢综合征卵泡颗粒细胞提前对黄体生成素反应

目的： 探讨多囊卵巢综合征（PCOS）卵泡液中激素和颗粒细胞黄体生成素（LH）受体mRNA表达的关系。方法: 对PCOS组12例和对照组15例患者于月经周期的第7-10 d手术获取卵泡和卵泡液，采用微粒子化学发光法检测卵泡液中卵泡刺激素（FSH）、LH、孕酮（P）、雌二醇（E2）和胰岛素（insulin）的水平，采用ELISA检测卵泡液中雄烯二酮（A）的水平，对颗粒细胞和卵泡膜细胞LH受体mRNA进行RT-PCR半定量检测。结果: PCOS组卵泡液中LH［（3.8±2.1 vs 1.7±0.8)U/L, P<0.01］、A［(600.0±373.4 vs 212.4±205.4)μg/L, P<0.05］和颗粒细胞LH受体mRNA的表达(0.29±0.16 vs 0.12±0.13, P<0.01)显著高于对照组， PCOS组卵泡的颗粒细胞提前表达LH受体mRNA; 对照组卵泡直径小于 7 mm 时，RT-PCR检测不到颗粒细胞LH受体mRNA表达，而PCOS组卵泡直径达到 4 mm 时，发现颗粒细胞LH受体mRNA已提前表达。颗粒细胞LH受体mRNA的表达与卵泡液中LH(r=0.67,P<0.01)、胰岛素(r=0.51,P<0.05)及卵泡膜细胞LH受体mRNA表达的水平(r=0.6,P<0.01)呈正相关。结论: PCOS的卵泡液中存在高水平的LH，PCOS卵泡颗粒细胞提前对LH反应，颗粒细胞和卵泡膜细胞合成A和P增强，这可能是PCOS卵泡发育停滞的原因之一。     

角质细胞生长因子及其受体在人卵泡膜细胞和颗粒细胞的分布

目的　探讨角质细胞生长因子 (KGF)及其受体 (KGFR)在人卵泡膜细胞和颗粒细胞的表达。方法　采用原位杂交和免疫组化方法分别观察KGF、KGFR在人卵泡膜细胞和颗粒细胞的分布。结果　KGFmRNA存在于正常人卵泡膜细胞和颗粒细胞中 ,KGFmRNA的表达为卵泡膜细胞高于颗粒细胞 (P <0 .0 5 ) ,KGFR的表达为颗粒细胞高于卵泡膜细胞 (P<0 .0 5 ) 。结论　人卵泡膜细胞分布有KGF ,颗粒细胞分布有KGFR ,两者可能存在旁分泌的调节作用。     

卵泡功能的调节

哺乳类动物卵巢的基本功能单位是卵泡。每一个卵泡由外层的膜细胞和内层的颗粒细胞组成。卵泡细胞特别是颗粒细胞是多激素受体系统,这些受体与之配体特异性相互作用主要影响各种甾体激素的合成和颗粒细胞分化。其中最重要的内分泌调控系统是来自腺垂体的激素包括糖蛋白激素FSH和LH以及非糖蛋白激素PRL,这些激素与卵巢相互作用与传统的内     

卵泡发育与多囊卵巢综合征相关因素的研究进展

多囊卵巢综合征（PCOS）是育龄期女性最常见的生殖内分泌紊乱疾病,可表现为高雄激素血症,高胰岛素血症,胰岛素抵抗（IR）,并可引起生殖功能的障碍,该病与卵泡发育异常密切相关。人类卵泡的发育过程包括原始卵泡的募集、生长、发育、最终只有一个优势卵泡发育成熟并排卵。在这个过程中,生殖激素、内分泌、旁分泌,肽类细胞生长因子对卵泡生长发育进行规律而有序的调节,在PCOS患者中这些机制出现异常。本文就卵泡发育异常,及其与PCOS之间相关因素做一简要综述。     

微小RNA在卵巢中的调控作用

内分泌激素和卵巢内调控因子对正常的卵泡发育和其他的卵巢功能有重要作用。这些调控因素的紊乱可以导致不同的卵巢功能障碍,从而引起不孕、多囊卵巢综合征以及卵巢肿瘤发生。微小RNA(MicroRNA,miRNA)是近年来发现的一种转录后调节因子,本文对正常和病理条件下miRNAs在卵巢中的表达以及潜在的调控功能作一综述,以了解miRNA在卵母细胞的成熟、卵泡发育及卵巢病理中的调控作用。     

两种激素对小鼠初级卵泡体外成熟培养的实验研究

目的：探讨卵泡刺激素（FSH）和人绝经期尿促性腺激素（hMG）对小鼠初级卵泡体外培养成熟的作用。方法：从小鼠卵巢组织人工分离所获的初级卵泡，在添加胎牛血清（FBS）以及FSH或hMG的Waymouth medium MB752/1培养液中比较培养。结果：小鼠初级卵泡在添加100 μg/L hMG的培养液中有15.94%（n=69）发育成小囊腔卵泡，在添加300 μg/L hMG的培养液中有28.57%（n=56）发育成大囊腔卵泡；在添加FSH的各培养组中，无囊腔卵泡的形成。结论：培养液中添加适当浓度的hMG比FSH对卵泡的生长有利。     

黄体生成素和卵泡刺激素在大鼠垂体前叶的细胞共定位研究

为探讨卵泡刺激与黄体生成生素分泌及基因表达与调控用抗人ＬＨ－β亚单位单克隆抗体和扩ＦＳＨ－β亚单位单克隆抗体进行免疫细胞化学定位的研究。通过连续切片免疫酶技术，免疫细胞化学双标记及电镜免疫金双标记技术，在大鼠垂体前叶进行ＦＳＨ和ＬＨ的免疫细胞化学共定位研究。本文对垂体前叶ＧＴＨ细胞存在着３种激素基因表达形式的可能原因进行了探讨。