粉防己碱对戊四唑致大鼠皮层电图和海马超微结构的影响

目的:探讨钙拮抗剂粉防己碱(tetradrine,Tet)对戊四唑(Pentylentetrazol,PTZ)诱导的大鼠癫(癎)模型的作用.方法:健康SD大鼠24只,随机分为4组,对照组和Tet 3个剂量组(15 mg/kg,30 mg/kg,60 mg/kg)各6只.观察大鼠腹腔注射PTZ前后癫(癎)发作的情况,按Racine分级标准分级,同时记录皮层电图(ECoG),观察PTZ注射后到出现(癎)样放电的潜伏期及1 h内(癎)样放电累加的持续时间.电镜观察海马神经元超微结构的改变.结果:对照组给PTZ后均出现癫(癎)发作,程度均为5级,Tet组发作程度明显减轻.ECoG上出现(癎)样放电的潜伏期延长,(癎)样放电在1 h中的持续时间缩短.同时,Tet也能明显减轻PTZ致(癎)大鼠海马CA1区锥体细胞线粒体的损伤程度.结论:Tet对PTZ诱导的癫(癎)大鼠的发作有明显的对抗作用,对海马锥体神经元的拟伤具有保护作用.     

粉防己碱对戊四唑致(癎)大鼠皮层电图和海马超微结构的影响

目的:探讨钙拮抗剂粉防己碱(tetradrine,Tet)对戊四唑(Pentylentetrazol,PTZ)诱导的大鼠癫(癎)模型的作用.方法:健康SD大鼠24只,随机分为4组,对照组和Tet 3个剂量组(15 mg/kg,30 mg/kg,60 mg/kg)各6只.观察大鼠腹腔注射PTZ前后癫(癎)发作的情况,按Racine分级标准分级,同时记录皮层电图(ECoG),观察PTZ注射后到出现(癎)样放电的潜伏期及1 h内(癎)样放电累加的持续时间.电镜观察海马神经元超微结构的改变.结果:对照组给PTZ后均出现癫(癎)发作,程度均为5级,Tet组发作程度明显减轻.ECoG上出现(癎)样放电的潜伏期延长,(癎)样放电在1 h中的持续时间缩短.同时,Tet也能明显减轻PTZ致(癎)大鼠海马CA1区锥体细胞线粒体的损伤程度.结论:Tet对PTZ诱导的癫(癎)大鼠的发作有明显的对抗作用,对海马锥体神经元的拟伤具有保护作用.     

戊四氮致癫癎状态对大鼠长期行为和脑电的影响

目的：建立一种戊四氮（ＰＴＺ） 致癫癎状态（ＳＥ） 模型,并探讨ＰＴＺ 致惊厥与癫癎形成之间的关系。方法：观察ＰＴＺ 致抽搐发作（ 抽搐组） 和ＰＴＺ致抽搐延长发作即癫癎状态（ＳＥ 组） 对大鼠长期行为和脑电（ＥＥＧ） 的影响,同时观察二者是否产生海马、皮质神经元损伤。结果：ＰＴＺ 致抽搐延长发作能够产生具有某些癫癎特征的长期效应,如自发癎样放电、惊厥阈下剂量ＰＴＺ 可诱导癫癎发作以及皮质和海马神经元损伤,而单次抽搐发作不具有这些长期效应。结论：ＰＴＺ 致抽搐延长发作模型更符合ＳＥ 模型特点,惊厥持续时间与癫癎形成密切相关。     

醒脑静对戊四氮致癎大鼠行为学及脑电图的影响

目的：探讨中成药醒脑静（XingNaoJing,XNJ）对戊四氮慢性点燃癫癎大鼠行为学及脑电图的影响。方法：将健康雄性SD大鼠50只随机分成5组（每组10只）：正常对照组、单纯模型组、制模并药物干预的醒脑静组、苯巴比妥组及中西药合用（醒脑静＋苯巴比妥）组,观察分析醒脑静对戊四氮点燃癫癎大鼠首次出现发作时间、各阶段发作级别、发作潜伏期及持续时间和脑电图的影响。结果：醒脑静组首次出现癫癎发作时间较模型组延迟（P〈0．01）,发作级别降低（P〈0．05,P（0．01）,发作潜伏期明显延长（P（0．01）,发作持续时间明显缩短（P〈0．01）,癫癎发作波频率和波幅降低。醒脑静组与苯巴比妥组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。中西药合用组各指标与醒脑静单用组或苯巴比妥单用组比较差异均有统计学意义（P（0．05）。结论：醒脑静具有抑制戊四氮诱发癫癎的作用,与抗癫癎西药合用抗癫癎作用更强。     

丹参对急性痫性痉挛大鼠模型的影响

目的观察丹参对急性痫性痉挛模型大鼠行为学、脑电图和脑内胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）表达的影响,观察丹参的抗痫效果。方法将24只大鼠随机分为戊四氮（PTZ）致痫组、丹参干预组和正常对照组,戊四氮致痫组大鼠腹腔注射戊四氮（75 mg/kg）;丹参干预组先给大鼠腹腔注射丹参注射液（10 ml/kg）,30 min后再腹腔注射戊四氮;正常对照组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。大鼠注射戊四氮后,观察其行为学改变,描记脑电图。各组大鼠于戊四氮注射24 h和72 h后处死,取含有海马的脑组织行GFAP免疫组织化学染色,光镜观察、照相,并用图像分析系统对各组大鼠海马结构内GFAP阳性细胞进行计数和平均灰度值测定。结果 （1）行为学改变：丹参干预组大鼠痫性发作等级和发作时间明显小于戊四氮致痫组（P〈0.05）。（2）脑电图显示,两组在发作期无明显的脑电图改变;在发作后恢复期,丹参组与PTZ组相比,脑电图出现棘波的频率低（1次/5s vs 8次/5s）,波幅低。（3）免疫组织化学结果显示：①24 h组：与正常组大鼠相比,PTZ组海马内GFAP表达量增多,以齿状回和CA3区最为明显。GFAP阳性细胞突起增多、增粗、分支增多,细胞着色加深。丹参治疗组GFAP表达较注射PTZ组增多,阳性细胞数量增加,突起数目增多,长度增长,细胞着色更深。②72 h组：PTZ组和丹参组与正常组相比,GFAP的表达无明显差异。结论丹参可以明显降低急性痫性痉挛模型大鼠的发作等级和发作时间,癫痫发生后24 h海马内GFAP表达增多对机体可能有保护作用;丹参可能是通过促进GFAP表达增高来发挥治疗作用。     

二苯乙烯苷对大鼠癫(癎)引发的学习记忆功能的影响及保护作用

目的:研究二苯乙烯苷(tetrahydroxy stilbene glucoside,TSG)对癫(癎)大鼠脑损伤的保护作用及可能机制.方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、TSG干预组,应用立体定向脑室内微量注射的方法建立海人藻酸(KA)诱导的大鼠癫(癎)模型.5d后通过Morris水迷宫实验测定大鼠学习记忆功能;取脑行Nissl染色观察大鼠海马神经元的形态及数目改变.结果:与假手术组相比,模型组大鼠学习记忆能力明显降低,海马CA1区神经元大量丢失,结构紊乱.而TSG干预组可使癫(癎)引发的学习记忆能力降低的情况得到改善,抑制海马CA1区神经元的丢失,改善神经元结构.结论:TSG对癫(痫)引发的脑损伤,尤其是对海马区神经元迟发性凋亡具有明显的改善作用.     

roTOR信号在KA诱导幼鼠癎性发作后的表达变化研究

目的：研究哺乳动物雷帕霉索靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）信号在幼鼠癎性发作后的表达变化。方法：海人藻酸（KA）诱导幼鼠癎性发作,根据疝性发作后不同的时间点（1h、3h、16h、24h、3d、5d、1w、2w、6w）进行取材,从大脑中分离KA注射侧海马组织,提取全蛋白进行westernblot检测观察癎性发作后mTOR信号通路活化的标志物核糖体蛋白56（p-S6）蛋白的表达变化。免疫组织化学检测海马区P-S6免疫阳性细胞的表达。结果：KA海马内注射1h、3h、16h、24h,3d,5d,1w,2w,6w大鼠海马组织进行westernblot检测,发现在急性期P-S6的表达量呈现持续升高的表达变化。KA致癎1w后,海马区p-S6阳性细胞表达相对于手术对照组明显增高（76±12VS25±5）。在大鼠大脑皮层神经元亦可见到致癎后大量表达的p-S6阳性神经元（88±13 VS 15±3）。结论：mTOR信号活化标志物p-S6蛋白在KA诱导幼鼠癎性发作后表达明显增加,抑制mTOR信号的异常活化或许成为预防癫癎形成的新靶点。     

氟桂利嗪对青霉素致癎大鼠海马细胞单位放电特征的影响

目的：探讨青霉素癫癎模型大鼠海马神经元单位放电的特征。方法：36只Wistar雄性健康大鼠,随机分为正常对照组、癫癎模型组、癫癎预处理组,各12只。①正常对照组记录单位放电后处死;②癫癎模型组用青霉素钠按600万U／kg体重腹腔注射制作成癫癎模型,记录单位放电后处死;③癫癎预处理组制作模型前用盐酸氟桂利嗪按20mg／kg体重每隔12h灌胃共两次,第二次给药后2h制作成癫癎模型,然后作单位放电记录后处死。结果：①正常对照组大鼠共记录到24个单位海马神经元放电;②癫癎模型组共记录到78个单位海马神经元放电;③癫癎预处理组共记录到47个单位海马神经元放电。与正常对照组比较,癫癎模型组海马神经元单位放电频率增加,放电形式多为混合型,差异有极显著意义（P〈0．01）;与癫癎模型组比较,癫癎预处理组海马神经元单位放电频率降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：①癫癎大鼠是以暴发放电为主的混合型放电,抽搐时多表现为束簇状;②盐酸氟桂利嗪对癫癎大鼠放电有显著的抑制作用。     

宽叶缬草提取物对戊四氮诱导慢性癫癎大鼠行为及脑电的影响

目的:探讨宽叶缬草提取物(VOL)对戊四氮(PTZ)致癫大鼠模型的脑电和行为变化的影响.方法:用PTZ 37.5mg/kg腹腔注射Wistar大鼠28天建立慢性癫癎模型,同时胃管分组给予VOL 500 mg/kg、1 000 mg/kg、1 500 mg/kg,每天三次,观察大鼠行为及脑电变化.结果:PTZ致癫癎大鼠在28天时87%为重度发作,脑电发作潜伏期及癎波密度分别为4.01±1.70 min,145.75±19.84个/min ,应用三种不同剂量的VOL治疗三周后大鼠癫癎发作程度明显减轻,脑电发作潜伏期延长,分别为7.36±2.18 min、9.42±2.05 min、11.19±1.95 min,癎波密度减少与PTZ模型对照组比较,P<0.05;且高剂量组更明显.结论:VOL能有效对抗PTZ的点燃作用,且有剂量依赖性,在第3周时才开始显效.     

γ-羟基丁酸致大鼠失神发作的行为学及皮层电图的对比研究

目的:研究γ-羟基丁酸(GHB)诱导的失神癫癎大鼠模型的行为及皮层脑电图(ECoG)的表现.方法:将20只成年SD大鼠(体重200 g)随机平均分为四组:实验1组,腹腔注射GHB的前体物质γ丁内酯(GBL)100 mg/kg;实验2组,腹腔注射GBL 200 mg/kg;实验3组,腹腔注射GBL 400mg/kg;对照组,腹腔注射生理盐水1 ml.注射后观察比较各组大鼠行为和ECoG的变化.结果:实验1组GBL 100 mg/kg注射8～10 min后行为活动轻度抑制,ECoG背景活动波幅降低;实验2组GBL 200mg/kg注射后见典型失神发作的行为表现伴ECoG上3～5 Hz棘慢波;实验3组GBL 400 mg/kg注射后大鼠的行为活动停止,昏迷,ECoG上伴高幅棘波阵发,间隔5～12 s的长时间抑制波;对照组生理盐水注射后,行为表现正常,ECoG表现为35～42 Hz,波幅20～40μV的快节律,无棘慢节律.结论:GBL能诱发SD大鼠典型的失神发作,对成年SD大鼠致癎的适宜剂量为200 mg/kg.     

戊四氮点燃大鼠癫痫发作和癫痫形成过程中海马5-HT水平的变化

目的：研究戊四氮（PTZ）点燃大鼠癫痫形成过程中行为、脑电及海马5-羟色胺（5-HT）水平的变化。方法：对大鼠腹腔注射PTZ35mg／（kg·d）,观察行为变化,在不同时间点（第7、14、21、28天）,进行脑电记录,微透析取海马组织间液,活体观察24只自由活动大鼠在点燃过程和诱发发作前后脑电、海马5-HT及其代谢产物5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）水平及其5-HT转化率（5-HIAA／5-HT）的变化。结果：开始PTZ注射后,发作潜伏期逐日缩短,发作程度逐日加重,点燃时间在10～14d。在制模过程中有一只鼠死亡。海马脑电随着发作的加重而出现癫痫波潜伏期缩短,癫痫波量增加,发作间期出现自发放电。点燃早期（第7天）,发作间期大鼠的海马5-HT水平略有升高,随着点燃时间延长,5-HT水平逐渐降低,在点燃后（第14天）维持点燃（第21、28天）5-HT水平持续下降,与点燃前5-HT水平比较,差异无显著意义（P〉0．05）;5-HT转化率在点燃过程变化差异无统计学意义;5-HIAA水平在点燃时期和维持点燃时期呈逐步降低,点燃期、维持点燃期与对照组比较差异有显著意义（P〈0．05）。结论：PTZ点燃大鼠癫痼形成过程中,在点燃前,发作间期的海马5-HT水平呈阶段性升高,点燃后,发作间期的海马5-HT水平逐渐降低;点燃后,发作间期的海马5-HT水平明显低于正常水平;随着维持点燃时间延长,发作间期的海马5一HT水平呈进行性下降。     

COX-2抑制剂对幼鼠反复痫性发作后神经发生的影响

目的：研究环氧合酶-2（COX-2）在痫性发作活化后的表达特点,探讨COX-2抑制剂塞莱昔布（eeleeoxib,Cel）对痫性活动后海马区神经发生的影响。方法：模型制作：随机将120只体重为50～60g的3周龄健康Wistar幼鼠分为匹鲁卡品致痫组（EPOnly组）（n=45）和Cel干预致痫组（EP—Cel）（n=45）和生理盐水正常对照组（NS组）（n=30）3组。随机在EP—only及EP—Cel组各取10只匹鲁卡品成功诱导急性发作幼鼠进行腹腔注射溴脱氧尿核苷（BrdU）：（1）行为学观察：根据Racine分级评价急性期和慢性期痴性发作行为;（2）形态学检测：各实验组分别在急性发作后第14天,第28天处死大鼠制备组织切片进行免疫组化检测COX-2阳性细胞在各组的表达变化趋势,以及BrdU＋神经元特异性核蛋白（NeuN）和BrdU＋星形胶质细胞胶原纤维酸性蛋白（GFAP）荧光免疫双标阳性细胞的表达,观察神经前体细胞的增殖及分化在各组的差异。结果：（1）动物行为学观察：在急性期,EP-only组全身性自发反复性癫痫发作（SRS）发作率（90％）明显高于EP—Cel组（560）（P〈0．01）;EP—only组痫性发作Racine分级强度（3．7±1．3）明显高于EP—Cel组发作强度（2．5±1．1）（P〈0．05）;在慢性期,EP—Only组SRS发生率（500）明显高于EP—Cel组（30％）（P〈0．05;岔检验）;EP—Only组平均每天SRS发生的频率（1．9±0．58）明显高于EP=Cel组（0．6±0．3）（P〈0．01,t检验）;（2）形态学检测免疫组化结果：①COX-2免疫反应阳性细胞的表达：匹鲁卡品致痫第14天后,海马区COX-2阳性细胞表达在EP—Only组明显高于EP-Cel组[（158±18）vs（118±20）]（P〈0．01）;②BrdU＋NeuN和BrdU＋GFAP免疫双标结果：急性期发作第28天后,BrdU＋NeuN免疫双标阳性细胞在EP-Only组明显高于EP—Cel组[（36±4）vs（22±3）];同时EP-Only组门区有BrdU＋GFAP免疫双标阳性的新生的胶质细胞明显比EP—Cel组高[（26±3）vs（14±2）3。结论：COX-2在痂性发作后被迅速诱导表达,COX-2抑制剂Cel能抑制痫性发作激活的异常神经发生和星形胶质细胞增生,减少慢性期SRS。     

抗癫痫药物或非药物治疗反射性癫痫伴异常脑电图的临床观察

目的i比较抗癫痫药物或非药物治疗反射性癫痫的临床疗效和脑电图改变。方法i将27例患者分为3组：第1组为反射性癫痫伴脑电图异常（痫样放电1～4次／24h）,未用抗癫痫药者;第2组：反射性癫痫伴脑电图异常（痫样放电1～4次／24h）,使用抗癫痫药者;第3组为反射性癫痫伴脑电图异常（痫样放电≥5次／24h）,使用抗癫痫药者。各组均需避开诱因。根据患者既往最长癫痫发作间期的3倍时间随访其癫痫发作次数和视频脑电图表现。结果：各组无1例临床加重患者,临床总有效率为63％～100％,各组之间比较差异无统计学意义。脑电图改善总有效率3个组之间有明显差异（P〈0．05）。脑电图异常（痫样放电1～4次／24h）病人用药与否脑电图改善总有效率比较差异有显著意义（P〈0．01）。结论：各组反射性癫痫预后良好,伴脑电图异常的反射性癫痫建议给予抗癫痫药治疗。     

地塞米松对海人酸致（癇）大鼠脑P-糖蛋白表达的影响

目的：探讨地塞米松对海人酸致痫大鼠脑P-糖蛋白（P-gp）表达的影响.方法：将SD大鼠随机分为假手术组（Sham组,n=8）、癫痫组（EP组,n=12）、地塞米松干预癫痫组（DEX组,n=12）.后两组采用海马注射海人酸方法制作癫痫模型,DEX组癫痫造模前30 min给予腹腔注射地塞米松0.4 mg/kg.分别记录各组大鼠达到Ⅲ级和Ⅴ级发作时所需的时间（潜伏期）,初次至第6次≥Ⅳ级发作的间隔时间作为评价癫痫发作严重程度的指标;大鼠术后24 h处死,使用HE染色和免疫组织化学方法,比较各组海马CA3区、齿状回、杏仁核复合体区P-gp表达及脑损伤情况.结果：①Sham 组未见癫痫发作;DEX组与EP组达到Ⅲ级发作的潜伏期分别为（87.92±45.80）min和（67.50±22.91）min,达到Ⅴ级发作的潜伏期分别为（103.33±51.27 ）min和（75.60±22.10）min,差异均无统计学意义（P〉0.05）;与EP组相比,DEX组样发作严重程度降低（P=0.004）;②与EP组相比,DEX组于所观察的脑区损伤均减轻,以海马CA3区和杏仁核复合体区较为显著;③与Sham组比较,EP组各观察脑区P-gp表达均明显升高（P〈0.01）;与EP组相比,DEX组海马CA3区和杏仁核复合体区P-gp表达显著减少（P〈0.05）,而在齿状回表达量差异无统计学意义（P=0.078）.结论：地塞米松可降低海人酸致痫大鼠发作严重程度和脑损伤,抑制P-gp表达上调,其中以海马CA3区和杏仁核区较为显著.     

人参皂甙Rd对慢性颞叶癫痫大鼠空间学习记忆能力的影响

[ 目的：研究人参皂甙Rd（GsRd）对氯化锂一匹罗卡品点燃慢性白发性颞叶癫痫（TLE）大鼠空间学习记忆能力及海马苔藓纤维发芽（MFS）的干预作用。方法：建立氯化锂一匹罗卡品点燃TLE大鼠模型,将24只造模成功的TLE大鼠随机分为单纯TLE组（生理盐水10ml／kg腹腔注射）12只及加用GSRd干预组12只（GsRd2mg／kg腹腔注射）,另选6只正常大鼠作为正常对照组。采用Morris水迷宫进行行为观察以了解各组大鼠空间学习记忆能力,取脑进行Timms染色作病理学观察以了解海马MFS情况。结果：与正常对照组相比,TLE组大鼠空间学习记忆功能下降,海马齿状回MFS明显增多（P〈0．05）;与TLE组相比,GSRd干预组可显著提高大鼠空间学习记忆能力及减少MFS（P〈0．05）。结论：GSRd可能通过抑制MFS减轻TLE大鼠的认知功能损害,有助于阻断慢性自发性TLE的形成和发展。     

神经生物反馈治疗难治性癫痫的临床研究

目的：观察神经生物反馈（又称脑电图生物反馈,EEG biofeedback,EBF）治疗难治性癫痫的临床疗效。方法：采用随机、单盲、对照方法。试验组进行EBF训练来强化Ca导联12～15Hz的感觉运动节律（SMR）而同时抑制θ节律,共30次为一疗程。对照组患者进行空白对照。对试验前后的临床发作情况和脑电图进行观察。结果：共56例完成了30次的EBF训练,其中36例为试验组患者,20例为对照组。经EBF治疗后,试验组癫痫发作明显减少,总有效率为69％,对照组中总有效率为25％。试验组重度异常脑电图所占的比例由47％降至28％,总好转率为56％（20／36）。结论：难治性癫痫患者进行EBF训练,在强化C4导联SMR节律的同时抑制θ节律,可以减少癫痫发作。     

耐抗癫痫药大鼠模型脑内P-糖蛋白的表达

目的：通过耐丙戊酸钠（VPA）、耐卡马西平（CBZ）大鼠惊厥模型探讨癫痫耐药机制。方法：采用大鼠腹腔注射戊四氮（PTz）21d的点燃方法,建立大鼠惊厥模型。在此基础上分别以CBZ及VPA灌胃14d,建立耐CBZ及耐VPA大鼠惊厥模型。实验分4组：正常对照组、惊厥对照组、耐CBZ组及耐VPA组,每组8只鼠。以惊厥潜伏期和Racine行为学分级作为评定药效指标。采用免疫组化法检测大鼠脑内P-糖蛋白（Pgp）的表达变化;统计分析各组大鼠脑内Pgp表达量,探索癫痫大鼠的耐药机制。结果：①24只大鼠在连续腹腔注射PTZ21d达点燃标准,成功建立惊厥模型;②取16只惊厥大鼠分两组各灌胃CBZ及VPA14d后,两组大鼠惊厥潜伏期（5．84士2．94和6．23土2．57min）较惊厥对照组的惊厥潜伏期（3．32±1．83min）显著延长（P〈0．01）,提示耐CBZ及耐VPA模型制备成功;③惊厥对照组PgP的表达（12．40±10．35）比正常对照组（1．62±0．85）增高,差异有统计学意义（P〈0．01）;耐CBZ组（38．67±17．28）及耐VPA组大鼠的PgP的表达（42．33±15．54）较惊厥对照组（12．40±10．35）增高,差异有显著意义（P〈0．01）;而耐CBZ组与耐VPA组之间PgP的差别则无统计学意义（P〉O．05）。结论：①大鼠腹腔注射PTz21d,建立惊厥模型,再进一步分别灌胃CBZ及VPA14d,成功建立耐CBZ及耐VPA模型;②CBZ和VPA可显著诱导Pgp的表达,而长期惊厥发作对其表达也可能有一定的诱导Pgp表达的作用。