郑州地区不同人群HCV感染及HCV基因型研究

目的 :了解郑州地区不同人群 HCV感染情况及基因分型。方法 :应用酶联免疫检测技术 (EL ISA)检测郑州地区 2 6 6 5例不同人群血清的抗 - HCV情况 ,再对 6 4例抗 - HCV阳性血清用逆转录 -套式多聚酶链反应检测 HCV-RNA。然后对其中 5 3例 HCV- RNA阳性者用限制性片段长度多态性分析法进行基因分型。结果 :抗 - HCV阳性在郑州地区总人口中的发生率是 0 .5 6 %～ 0 .78% ,原发性肝癌患者抗 - HCV的发生率明显高于其他各组。HCV基因型分布HCV- ,HCV- 和 HCV- / ,分别为 90 .5 6 % ,5 .6 6 %和 1.89%。结论 :原发性肝癌患者其 HCV的感染危险较高 ;HCV- 型是本地区的优势株 ;HCV各基因型在不同人口中的分布没有明显差异。(P>0 .0 5 ) HCV基因型可能与丙型肝炎病情轻重有关。     

输血传播HCV:供血者血清HCV-RNA滴度和基因型是决定感染后果的主要因素吗?

本文报告1993年～1994年对抗HCV补充试验阳性供血者的一项回顾性调查结果,包括22例输过血液或血液成分的受血者,其血液由15名供血者提供。对这些个体进行了血清学试验和RT/PCR检测。对所有阳性供血者检测了HCV-RNA滴度。测定了包括供血者和受血者在内的所有HCV-RNA阳性个体的基因型别。作者观察到,在接受过阳性供血者血液的受血者中,小于50％的变为HCV感染的血清学标志物阳性。     

南京地区丙型肝炎病毒基因分型的研究

目的 了解南京地区丙型肝炎病毒(HCV) 基因型分布的特点.方法 采用针对HCV三种主要基因型1,2,3和1b亚型设计的型-特异性引物,通过RT-PCR和套式PCR扩增HCV基因组高度保守的5'端非编码区,检测55例HCV IgG阳性血清的HCV RNA,并对其中40例进行基因分型.结果 PCR检测的抗HCV IgG阳性血清标本55例中,50例为HCV RNA阳性,阳性率为90.91%;对40例HCV RNA阳性的血清进行分型,发现23例为1b型,15例为2,1 b混合型,HCV-1b亚型含有率为95%,其余两例分别为2型和1,2混合型.结论 该地区HCV流行优势株为1b亚型.     

28098名献血者HCV-RNA检测及部分阳性者的随访调查

目的评价逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测献血者HCV-RNA的意义,调查献血者HCV感染的“窗口期”情况。方法用RT- PCR检测大批正常献血者的HCV- RNA,并对其中部分HCV -RNA阳性者做随访研究。结果在28098名常规化验项目均正常的献血者中,HCV-RNA阳性77人,占0.27%,对11名HCV -RNA阳性献血者跟踪,其中9例在随访检查的常规项目中,ALT和(或)抗HCV均出现不正常,出现的时间距首次HCV -RNA阳性至少4周。结论RT- PCR检测血液HCV- RNA能早期发现HCV感染者,为提高输血安全性,宜在献血者中开展HCV-RNA检测。     

法国丙型肝炎病毒不同基因型的血清学反应

本文研究在丙型肝炎病毒(HCV)感染病人中.HCV基因型与HCV抗原血清学反应之间的关系。作者在1989年11月和1992年12月对92例非甲非乙型肝炎病人和12例无症状血清学HCV阳性供血者作了研究。酶免疫法抗HCV均为阳性和5’非编码区引物做PCR扩增HCC RNA阳性。样品基因分型为从200μl血清中提取HCV RNA,转至cD-NA,HCV cDNA扩增由网式PCR非结为区蛋白3(NS3)。HCVI型原型采用两步法合成。5’-AGACT-GTAATACGTGTGCACC-3’为外部引物(nt4571-     

环介导等温扩增技术用于HCV基因分型的初步研究

目的建立适用于临床的常见HCV基因型的快速、敏感、有效的核酸逆转录环介导等温扩增技术(RTLAMP)。方法根据不同HCV亚型的标准序列设计HCV-1b、2a、3b和6a型特异性引物,建立及优化针对各HCV亚型的RT-LAMP试验方法;收集55例已确认为HCV RNA阳性的临床标本做检测及分型。结果本组HCV-RNA阳性标本,运用LAMP法的检出率为94.55%(52/55),其中HCV-1b型占40.38%(21/52)、2a型占9.62%(5/52)、3b型占23.08%(12/52)、6a型占26.92%(14/52)。结论建立了针对不同HCV基因型的LAMP检测方法,该法快速、敏感,适合于在临床应用。     

丙型肝炎患者基因分型与抗HCV、HCV-RNA的相关性研究

目的探讨丙型肝炎患者基因分型与抗HCV、HCV-RNA的相关性,为丙型肝炎的防治提供参考。方法选取2015年6月-2016年6月期间诊治的80例丙型肝炎患者,以ABI3500dx基因测序仪对基因分型进行测序,确定基因分型,以化学发光法检测抗HCV浓度,计算测定值/临界值(S/CO)比值,采用荧光定量PCR技术检测HCV-RNA浓度。结果患者基因分型主要为1b、1c、2a分别有48例、14例、8例,占60.00%、17.50%、10.00%,其中1型共62例、非1型18例,分别占77.50%、22.50%;抗HCV阳性者79例、HCV-RNA阳性者53例,阳性率分别为98.75%、66.25%;基因型1型的患者抗HCV(S/CO)比值、HCV-RNA浓度分别为(13.27±3.33)、(6.54±1.24)×106 copies/ml均高于非1型患者(11.28±3.25)、(5.86±1.03)×106copies/ml,比较差异有统计学意义(P0.05);HCV-RNA阳性患者抗HCV(S/CO)比值为(13.33±4.39)高于阴性患者(9.74±3.84),比较差异有统计学意义(P0.05)。结论丙型肝炎患者基因分型主要为1b、1c、2a,不同基因型时抗HCV、HCV-RNA浓度不同,基因分型与抗HCV、HCV-RNA的之间存在一定相关性。     

低病毒载量时丙型肝炎病毒基因分型研究

目的探讨丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)低病毒载量时,HCV核心蛋白(Core)和Core/包膜蛋白1(envelope protein 1,E1)区直接测序法对HCV基因分型的影响。方法 HCV-RNA 10~3~10~4拷贝/mL患者30例,采集其血清标本,采用巢式PCR对Core和Core/E1区分别扩增,产物直接测序,构建进化树进行基因分型。结果Core区扩增阳性25例(83.3%),其中1b型15例,2a型5例,3a型2例和6a型3例;Core/E1区扩增阳性19例(63.3%),其中1b型11例,2a型4例,3a型2例和6a型2例。结论当HCV-RNA载量较低时,Core区较Core/E1区有较高扩增效率和准确性,是临床或科研中应用直接测序法对HCV基因分型较理想的基因区。     

5'-非编码区型特异性引物检测HCV基因型

我们探索建立一种HCV基因分型方法,用5'非编码区(5'NCR)1,2,3,1b型特异性引物,应用逆转录套式PCR,对HCV RNA阳性血清进行分型 .对65份HCV RNA阳性血清的分型率为90.8%(59/65).59例中混合感染7例,1型50例,其中1b亚型46例;3型2例.从而认为:所用的型特异性引物可成功地对HCV基因分型,分型结果证实南京市HCV流行优势株为1b亚型.     

三种不同检测方法对婴幼儿丙型肝炎病毒感染的诊断价值

目的探讨不同检测方法对婴幼儿丙型肝炎病毒感染诊断结果的影响。方法对66例ELISA法检测抗HCV阳性孕妇所生婴幼儿血清,分别用ELISA法检测抗HCV和HCV-cAg,用荧光定量PCR法检测HCV-RNA,并对结果对比分析。结果 66例婴幼儿血清中,61例抗HCV阳性,阳性率92.4%;9例HCV-cAg阳性,阳性率13.6%;11例HCV-RNA阳性,阳性率16.6%。结论抗HCV检测阳性率过高,且有可能漏诊。建议采用HCV-RNA检测和HCV-cAg综合诊断婴幼儿HCV感染。     

丙型肝炎病毒感染的献血者10年追踪观察

目的　追踪观察发生HCV感染的献血者的疾病进程和健康状况。方法　从 1993年 10月～ 2 0 0 4年 2月 ,对 30名HCV感染的献血者定期抽取血液标本 ,观察所得到的 4 4 2份系列标本的血清ALT、抗 HCV和HCV RNA的动态变化 ,并进行HCV分型测定 ,重点分析了其中 10名自愿者肝组织的病理检查结果和血清ALT、抗 HCV与HCV RNA的动态变化。结果　① 30名HCV感染者系列标本中 ,ALT异常率 37.6 % (16 6 / 4 4 2 ) ;抗 HCV阳性率97.1% (42 9/ 4 4 2 ,ELISA法 ) ;HCV RNA阳性率 74 .9% (331/ 4 4 2 )。② 10名HCV感染的献血者 10年系列血清中抗 HCV大多数持续存在 (94 4 % ,15 1/ 16 0 ) ,其HCV RNA时有间隙性阴性 ,阳性率 6 7 5 % (10 8/ 16 0 )其血清ALT水平异常率 33 6 % (5 0 / 14 9)。③HCV分型测定 :HCVⅡ / 1b型占 85 % (2 2 / 2 6 ) ,Ⅲ / 2a型占 15 % (4/ 2 6 )。④ 10名HCV感染者肝组织检查显示均为轻度慢性肝炎。结论　肝组织的病理变化同血清抗 HCV、HCV RNA和ALT的异常有明显相关性。虽然HCV感染后 10年的疾病进程大多是缓慢的 ,但应采取适当治疗措施以控制慢性肝炎的发展。     

Application of a new enzyme-linked immunosorbent assay for detection of total hepatitis C virus core antigen in blood donors

Recent studies have shown that total hepatitis C virus (HCV) core antigen, both free and antibody bound, is an accurate indirect marker of viral replication that can be used in clinical practice. The aim of the present study was to evaluate the performance of a new total HCV core antigen enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection and quantification of total core antigen in blood donors, testing positive for anti-HCV antibodies and for prospective low-risk population screening. A population comprising 257 samples, from blood donors detected reactive for anti-HCV antibodies [137 recombinant immunoblot assay (RIBA) positive and 120 RIBA indeterminate], were tested by using a new total HCV core antigen ELISA. HCV-RNA was quantified by using quantitative polymerase chain reaction (PCR) assays in all RIBA-positive samples and RIBA-indeterminate samples that were positive for the total core antigen. Specificity of the assay was studied in 1070 healthy blood donors negative for anti-HCV antibodies. Compared with quantitative PCR assays, the total HCV core antigen assay showed 97.37% sensitivity. The three HCV-RNA-positive samples, which tested negative for the total core antigen, had a low viral load (< 1.4 x 10(4) IU mL(-1)). All samples with more than 1.4 x 10(4) IU mL(-1) of viral RNA were positive for total core antigen, independent of the HCV genotype. Concentration of total core antigen correlated significantly with those of HCV-RNA (r = 0.614, P < 0.0001). Overall specificity in freshly collected blood donor specimens was 99.63%. Our data indicate that the total HCV core antigen ELISA has a sensitivity close to PCR assays in diagnosing HCV infection in blood donors with anti-HCV antibodies and shows an excellent specificity in volunteer donors. This assay, in combination with anti-HCV antibodies screening tests, could be an alternative to molecular assays for HCV infection screening in blood donors.     

库血HCV-RNA的检测分析

目的 为探索提高库血丙型肝炎病毒(HCV)的检出率。方法 采用逆转录套式聚合酶链反应(RT-PCR)技术，检测4530份抗-HCV阴性的库血HCV-RNA。结果 4530份库血中HCV-RNA阳性55份，阳性率1．2l％．其中个体献血者血液2110份，HCV-RNA阳性40份，阳性率1．90％；无偿献血者血液2420份，HCV-RNA阳性15份，阳性率0．62％。结论 RT-PCR可用于检测库血HCV-RNA，以减少因输血造成HCV感染。     

Risk factors in hepatitis C virus-infected blood donors

Risk factors of parenteral and nonparenteral exposure to hepatitis C virus (HCV) infection were studied in 125 blood donors in The Netherlands who were positive for anti-HCV on enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Risk factors were related to confirmatory test results of four-antigen recombinant immunoblot assay (4-RIBA) and polymerase chain reaction (PCR) of the HCV 5' untranslated region. Twelve (10%) of the 125 anti-HCV C100 ELISA-positive blood donors were 4-RIBA positive. Eleven (92%) of 12 4-RIBA-positive blood donors were PCR positive, and all 113 remaining 4-RIBA-negative or -indeterminate donors were PCR negative. Eleven (92%) of 12 4-RIBA-positive blood donors had a risk factor of parenteral exposure, as compared to 17 (15%) of 113 4-RIBA-negative or -indeterminate donors. The prevalence of confirmed HCV infection among Amsterdam blood donors is calculated at 0.04 percent; parenteral exposure appears to be the major risk factor for HCV infection.     

无偿献血者ALT报废域值与NAT-HBV/HCV检测结果分析

目的探讨无偿献血者ALT与核酸扩增技术(NAT-HBV/HCV)检测结果的相关性,为优化血液筛查策略提供理论依据。方法回顾性调查本站2006年12月—2007年12月共28 800份无偿献血者样本,用速率法进行ALT检测,ALT单项不合格样本用NAT-HBV/HCV检测;分析ALT值与ELISA-HBV/HCV-OD值的分布规律。结果共筛查出2 516份ALT单项不合格样本;经NAT-HBV/HCV检测出8份阳性,其中HBV-DNA阳性5份,HCV-RNA阳性3份;ALT≤80 U/L的献血者NAT-HBV/HCV阳性率明显低于ALT>80 U/L献血者(P<0.01);经ELISA-HBV/HCV检测OD值,95%ALT单项不合格样本ELSIA-HBV/HCV的OD值相似文献   

HCV-RNA与HCV-Ab,HCV-cAg相关性分析研究

目的 探讨丙型肝炎患者中HCV-RNA与HCV-Ab,HCV-cAg三种检测指标的相关性和临床应用效果。方法 采用酶联免疫法分别检测实时荧光定量PCR法检测阳性的140例HCV患者血清中的HCV-Ab和HCV-cAg,以了解检测结果及符合率。结果 在140例HCV-RNA阳性血清中,HCV-cAg阳性127例,符合率90.71%; HCV-Ab阳性110例,符合率78.57%; 对不同HCV-RNA浓度的血清进行HCV-cAg检测结果其阳性检出率随着HCV病毒含量的升高而增高; 不同HCV-RNA浓度的血清进行HCV-Ab检测结果无明显变化。结论 通过对HCV-RNA阳性患者中HCV-Ag和HCV-Ab的检测观察分析,HCV-cAg检测与HCV-RNA的检测结果具有较高的符合率。因此HCV-cAg检测可作为HCV-Ab的补充检测,为HCV“窗口期”感染以及免疫低下人群感染的筛查提供简便、廉价方法; 同时为不具备HCV-RNA检测条件的基层医疗单位,作为HCV感染的快速筛查提供诊断依据。     

Hepatitis C virus RNA testing by nested PCR in blood preparations in Yugoslavia

Patients receiving any kind of human blood preparations are in permanent danger of any infection including hepatitis C (HCV) infection. Testing for the presence of HCV in blood preparations is one of the steps towards safe medical treatment. One of the approaches for this testing is a detection of HCV nucleic acid. In this paper we describe a simple method for isolation of HCV RNA from blood preparations and control of HCV RNA presence in 19 intravenous and intramuscular products, manufactured in the National Blood Transfusion Institute in Belgrade. RT-PCR was performed according the rules saving RNA. Primers were located in 5' conserved region. Seven out of 19 batches of gamma-globulin, albumin, anti-tetanus and anti-rabies immunoglobulin preparations were found to be HCV RNA positive. For the time being, the PCR method is too expensive for routine HCV RNA testing of hundreds of blood donors per day. Serological screening test of blood donors and nested PCR testing for HCV RNA in blood preparations could be an efficient combination of tests in prevention of posttransfusion hepatitis C.     

核酸扩增技术在献血者血液HBV DNA、HCV RNA及HIV-1 RNA筛查中的应用研究

目的探讨在我国无偿献血者的血液筛查中引进核酸扩增技术(NAT)的必要性,了解献血者血清学病毒标志物检测阴性、NAT检测阳性的感染状况。方法应用Roche PCR、PCR-微流芯片、实时荧光PCR方法对深圳市131 174人(次)血清学检测病毒标志物阴性的献血者进行HBV DNA、HCV RNA和HIV-1 RNA检测,对NAT阳性献血者追踪检测并做定量分析。结果HBV DNA阳性22例,阳性率为1/5 962,其中15例为抗-HBc阳性,阳性率为1/8 745;HCV RNA阳性1例,阳性率1/131 174;HIV-1 RNA未检出阳性。对14名HBV DNA阳性者的追踪发现,8人发生了血清转换现象。结论采用高灵敏度的NAT筛查献血者血液中的HBV和HCV,有助于提高输血及血液安全。     

维持性血液透析患者并发病毒性肝炎的临床研究

目的 了解维持性血液透析患病毒性肝炎的感染率及其有关因素。方法 用酶联免疫法(ELISA)检测53例乙型肝炎病毒(HBV)标志物、丙型肝炎病毒(HCV)抗体，逆转录一套式PCR法检测HCV—RNA。回顾分析53例维持性血液透析患的临床资料。结果 53例维持性血液透析患肝炎病毒感染率分别为乙型肝炎病毒(HBV)22．6％、丙型肝炎病毒(HCV)41．5％、HBV／HCV总感染率49．1％，HCV感染组、非感染组在输血次数、透析年限的差异有显性，而HBV感染组、非感染组在输血次数、透析年限的差异无显性。结论 病毒性肝炎仍是血液透析(HD)的主要并发症之一，其中以HCV的发生率最高。严格消毒措施，血源筛选，减少输血，对减少透析中肝炎感染至关重要。