血友病A的分子诊断：因子Ⅷ基因重排分析

采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对１８个无亲缘关系的中国血友病Ａ家系共５２名成员的因子Ⅷ基因重排进行了分析。结果表明８个家系显示Ⅷ基因倒位，其中７个为远端倒位，１个为近端倒位。证实因子Ⅷ基因倒位是中国人血友病Ａ患者的普遍分子基础，从而为血友病Ａ的分子诊断提供了科学依据。     

倒棱辊的制造与再修复的探讨

由于高强度钢板的大量出现,突显倒棱机系统压力不足。在不改变系统压力的前提下,改变倒棱辊踏面的形式使其具有一定的锥度,可以减少倒棱辊踏面与工件的接触面积使其压力更为集中。倒棱辊制造材料的选择直接影响倒棱辊热处理后的硬度、凸台的强度、R位的耐磨性等主要性能。而倒棱辊热处理工艺、方式决定了倒棱辊热处理后的各项性能指标的高低。正确选择倒棱辊的制造材料和热处理工艺,可以提高倒棱辊的一次使用周期;正确选择倒棱辊的再修复方法可以延长倒棱辊的使用寿命。     

考虑库存信息的钢管批量计划优化算法

在考虑库存信息的基础上对钢管批量计划优化问题进行研究,建立了批量计划轧制位置与垛位钢坯多对多关系的批量计划模型,实现对倒垛次数的优化。结合问题特征,设计了一种基于钢坯连续倒垛的两阶段批量计划优化算法：第1阶段,确定当前最优钢坯,进而搜索同垛位上的下层钢坯,匹配最佳的连续轧制钢坯;第2阶段,针对每个轧制位置搜索垛位上的连续轧制钢坯,改进第1阶段的解。通过基于实际生产数据的实验验证,相对经典启发式算法,倒垛次数显著降低,算法和模型是可行且有效的。     

长距离PCR技术检测重型血友病甲Ⅷ因子基因倒位的进一步研究及推广应用

将已研究成功的长距离ＰＣＲ（ＬＤ－ＰＣＲ）技术在热循环条件，模板ＤＮＡ用量及ｄＮＴＰ用量等方面进行了进一步优化和探索。应用优化后的ＬＤ－ＰＣＲ技术检测了来自天津，江苏，北京，湖北，四川等省市１０８个重型血友病甲家系共１５７份ＤＮＡ，发现４７例患者有凝血因子Ⅷ基因倒位，占重型患者的４４％，查出基因倒位携带者３０余名。     

内球面半径的测量

详细地介绍了在万能工具显笛镜上利用自制的倒锥测头及光一位器和测高表测量内球面半径的具体方法。     

市政给排水施工中的相关问题及措施

1 市政工程给排水管道的施工常见问题分析 1.1 常见问题总结 (1)管道位里偏移域积木 管道位里偏移域积木产生原因是测量差错,施工走样和意外的避让原有构筑物,在平面上产生位置偏移,立面上产生积水甚至倒坡现象.     

采用倒牵法张力展放大截面导线的探究

针对500kV胪岗至祯州送电线路工程(汕头段)A37～A47放线段中A47塔没有设置牵引场的运输条件,经现场多次踏勘,最后在A37塔位设置张力场,在A44塔位设置牵引场,在A47塔位设置转向场,经计算验证可行性后采取倒牵法进行A37～A47放线段大截面导线的张力展放施工。     

《分数倒谱及其在机械故障诊断中应用研究》

论述了分数倒谱的定义和算法,提出了一种基于分数倒谱的机械故障诊断方法。并与倒谱分析方法进行对比分析。实验研究表明,分数倒谱优于传统的倒频谱分析方法,分数倒谱能有效抑制干扰,提高图谱质量。     

为理想一生追求不止——追记江西景德镇老民警李杰

9月10日,在江西景德镇高速公路口上,100多名普通群众、公安民警迎接一位特殊老民警"回家"。8日下午3时半,因积劳成疾,景德镇市公安局昌江公安分局站前派出所外勤民警李杰突发心脏病,倒在外地执行公务的路上,再也没有醒来。9月13日,省公安厅决定追记李     

串联倒摆的空气弹簧隔振器中倒摆的稳定性分析

为解决串联倒摆的空气弹簧隔振器在使用过程中出现的倒摆容易偏至一侧无法回复至初始平衡位置或回复时间过长等稳定性问题,以倒摆为研究对象,在深入分析各个结构参数对倒摆稳定性影响的基础上,利用牛顿力学法建立倒摆稳定性的力学模型,通过理论分析推导出回复力和回复力矩的数学模型,再结合具体实例对该数学模型进行仿真分析,寻找影响倒摆稳定性的主要结构参数。分析结果表明,倒摆摆长和上活塞半径是影响倒摆稳定性的主要因素。     

携带小片段红系特异增强子的人β—珠蛋白基因在小鼠体内表达的研究

采用回体（ｅｘ ｖｉｖｏ）基因转移策略，分析了人β－珠蛋白基因在小鼠体内的整合和表达。研究发现，在小鼠ＣＦＵ－Ｓ１２中检测到转移的人β－珠蛋白基因的整合，其表达水平约为内源性鼠α－珠蛋白基因的０．５％～５％。在两只长期造血重建小鼠的骨髓、脾及胸腺和另一只小鼠的骨髓及脾中整合有人β－珠蛋白基因，人β－珠蛋白基因在一只重构建小鼠的骨髓和脾中表达，表达水平约为鼠内源α－珠蛋白基因的７％，表明反转录病毒载     

应用AFM观察小白鼠心肌核DNA片段的基因体外转录

用AFM直接观察到心肌核DMA片段中各种活性基因两头的调控序列可能与某些特定蛋白质等活性因子特异结合,形成大小不同的“基因节”,“基因节”之间有“间隔”起分隔作用。用AFM意外观察到在转录中心肌核DNA片段由3－4－5个基因节及其相对应的“间隔”,它们可能按某种“排列组合”,同时形成多种大小不同的“基因系”。各种“基因系”转录时分别形成相对应3倍基因节数量的多种RNA链状复合体,每一多种RNA链状复合体与相对应的“基因系”两边的接口相连。DNA片段上同一“基因节”可能按不同的排列组合,可能参与形成不同的基因系,故形成与基因系相对应的RNA链状复合体相交叉,可能参与形成不同的基因系,故形成与不同的基因系相对应的RNA链状复合体相交叉,起始转录点与基因系个数相同,DNA分子中全部基因系从相对应的起始转录点可能同时高效转录。本工作展示了未来运用AFM来研究在转录过程DNA分子中的基因节组成基因系的多样性和基因节转录的高效性等生物学反应的前景。     

腺病毒载体介导的人凝血因子IX基因的离体和活体表达

为血友病Ｂ的基因治疗探索了高效转移和表达载体，建立了重组腺病毒载体介导的基因转移系统（Ａｄｈｆｉｘ），并进行了离体和活体表达研究。结果显示：腺病毒离体基因转移效率可达９８％以上并可在多种细胞中高效表达，ｈＦＩＸ蛋白最高可达６．８６μｇ／１０６细胞／２４ｈｒ。小鼠血浆中ｈＦＩＸ蛋白含量最高可达１０７２ｎｇ／ｍｌ血浆，并可持续表达１０周左右；以腹腔注射效果最好；免疫抑制剂环磷酰胺可明显延长表达持续时间。结果表明重组腺病毒载体可介导ｈＦＩＸｃＤＮＡ在离体细胞和活体组织中高效转移和表达。     

Enhancement of gene transfer to cervical cancer cells using transferrin-conjugated liposome

Transferrin-conjugated cationic liposome (T_f -DDAB liposome) was developed as a targeted gene delivery system by using heterobifunctional cross-linking agent, N-succimidyl-3-(2-pyridyldithio)propionate (SPDP), and gradient metrizamide ultracentrifugation method. Physico-chemical properties of T_f -liposome were determined by scanning/transmission electron microscopy (SEM/TEM) and dynamic laser-light scattering method (DLS) with a mean diameter of 584±15 nm. Gel retardation assay was performed using various DDAB:DNA ratios, and proved that the 6:1 weight ratio formulation gave the most neutralized complex. In vitro transfection was done in human cervical cancer cells, HeLa, and the transfection efficiency of T_f -liposome was found to be fivefold higher than that of unconjugated (plain) DDAB liposome and twofold higher than that of Lipofectin™. In conclusion, a target-oriented T_f -DDAB liposome was made successfully and proved to be very efficient in DNA delivery into the cervical cancer cells in culture.     

Enhancement of Gene Transfer to Cervical Cancer Cells Using Transferrin- Conjugated Liposome

ABSTRACT

Transferrin-conjugated cationic liposome (T_f -DDAB liposome) was developed as a targeted gene delivery system by using heterobifunctional cross-linking agent, N-succimidyl-3-(2-pyridyldithio)propionate (SPDP), and gradient metrizamide ultracentrifugation method. Physico-chemical properties of T_f -liposome were determined by scanning/transmission electron microscopy (SEM/TEM) and dynamic laser-light scattering method (DLS) with a mean diameter of 584±15 nm. Gel retardation assay was performed using various DDAB:DNA ratios, and proved that the 6:1 weight ratio formulation gave the most neutralized complex. In vitro transfection was done in human cervical cancer cells, HeLa, and the transfection efficiency of T_f -liposome was found to be fivefold higher than that of unconjugated (plain) DDAB liposome and twofold higher than that of Lipofectin?. In conclusion, a target-oriented T_f -DDAB liposome was made successfully and proved to be very efficient in DNA delivery into the cervical cancer cells in culture.     

人GM－CSF在链霉菌中的表达

报道了ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ基因表达质粒的构建，以及该重组质粒在变铅青链霉菌Ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓＴＫ５４中的表达，结果表明：ＰＩＪ４５９／ＧＭ－ＣＳＦ质粒具有表达ｈＧＭ－ＣＳＦ的功能。重组菌株细胞裂解液经ＴＦ－１细胞培养及集落形成实验均证实了其生物学活性。并分析了影响外源基因表达的某些因素，如ＳＤ序列与ＡＴＧ之间的距离，时间对表达的诱导等，探讨了外源基因高效表达的适宜条件。     

快生型大豆根瘤菌（Rhizobium fredii）3．7Kb增效片段的亚克

利用柯氏质粒ｐＬＡＦＲ１为载体构建了快生型大豆根瘤菌Ｂ５２菌株的基因文库，并通过植物结瘤试验筛选到一个３．７Ｋｂ增效片段，将其导入慢生型大豆根瘤菌２２１０，能提高其共生固氮效率。所得高效菌株ＨＮ３２在黑龙江、四川和广西大面积应用，平均增产１１．４％（５）。本文测定了３．７Ｋｂ片段的核苷酸序列，计算机分析发现含有两个开放阅读框架（ＯＲＦｓ）。ＯＲＦ１编码含１９０个氨基酸的多肽，与已报道基因和多肽的同源性很低，但其Ｎ端１９个氨基酸与发根农杆菌的乳糖转移酶高度同源。ＯＲＦ２编码含２３５个氨基酸的多肽，与碗豆根瘤菌的ｈｕｐＥ及苜蓿根瘤菌的糖基转移酶基因显示５４％的同源性。     

壳聚糖基非病毒转基因载体的研究进展

高效的转基因载体是基因释放系统的核心。作为一种天然碱性多糖，壳聚糖具有良好的生物相容性、耐血清性和独特的跨细胞膜特性。本文就近年来壳聚糖基非病毒转基因载体的发展作一综述。