柱前衍生化高效液相色谱法检测硫酸阿米卡星注射液中卡那霉素含量的改进

目的 改进柱前衍生化-HPLC方法用于定量测定硫酸阿米卡星注射液中已知杂质卡那霉素。方法 采用更低浓度的样品检测溶液,色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C₁₈柱 (4.6 mmá150 mm,5 μm);流动相:0.27%磷酸二氢钾溶液(用2.2%的氢氧化钾溶液调节pH值至6.5)-甲醇(30:70);检测波长:340 nm;进样量:50 μl;流速:1.0 ml/min;柱温:30℃。结果 卡那霉素在2~80 μg/ml(r=0.999 8)浓度范围内呈线性关系,平均回收率为(93.08±9.65)%,样品稳定性提高。结论 本法专属性强,灵敏度高,准确度好,为硫酸阿米卡星注射液的安全性评价提供了一个新的角度。     

硫酸卡那霉素及其注射液的HPLC衍生化测定

以异硫氰酸苯酯（ＰＩＴＣ）为衍生试剂，用柱前衍生化反相ＨＰＬＣ分离测定硫酸卡那霉素及其注射液。对杂质卡那霉素Ｂ采用归一化法进行了检查。     

HPLC柱前衍生化法测定硫酸依替米星的含量

目的 :采用反相高效液相色谱柱前衍生化法测定硫酸依替米星的含量。方法 :衍生化条件 :衍生化试剂为邻苯二醛 ,反应温度为 6 0℃ ,反应时间为 15min。色谱条件 :色谱柱为KromasilC1 8柱 (5 μm ,2 0 0mm× 4 6mm) ;流动相为水 冰醋酸 甲醇 (2 0∶5∶75 )配制的 0 0 2mol L的庚烷磺酸钠溶液 ;检测波长为 330nm ;流速为 1ml min。结果 :线性范围 :0 1～ 1 0mg ml,r=0 9999;该方法与微生物法测定结果基本一致 ,衍生化产物稳定。结论 :所建立的反相高效液相色谱柱前衍生化法能准确测定硫酸依替米星的含量 ,重复性好     

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定硫酸小诺霉素的含量

目的:建立测定硫酸小诺霉素含量的柱前衍生化反相高效液相色谱法。方法:色谱柱:KromasilC18柱（4.6mm×150mm,5μ）;流动相:水-冰醋酸-甲醇（30:5:65）配制的0.02mol/L的庚烷磺酸钠溶液;检测波长:330nm。结果:线性范围为0.0976-0.9760mg/ml（r=0.9999）,重复性试验的相对标准偏差RSD为1.0％（n=6）。结论:本法专属性强、准确、灵敏,可以作为硫酸小诺霉素含量测定的首选方法。     

柱前衍生化HPLC法测定左卡尼汀中光学异构体的研究

目的:建立柱前衍生化HPLC法测定左卡尼汀中光学异构体的含量。方法:左卡尼汀样品通过与衍生化试剂发生衍生化反应,用C18柱,以三乙胺缓冲溶液和四氢呋喃作为流动相,进行梯度洗脱,将左卡尼汀与其光学异构体分离;采用荧光检测器,激发波长234 nm,发射波长360 nm。结果:右卡尼汀在0.3～1.6μg.mL-1范围内线性关系良好,线性方程为Y=0.0173X+0.073 9r,=0.999 1,平均回收率为100.6%,RSD为1.97%(n=9)。结论:本法可用于检测左卡尼汀中光学异构体的含量,方法简便、准确、重现性好。     

柱前衍生-HPLC法测定硫酸庆大霉素注射液的含量

目的 建立一种测定硫酸庆大霉素含量的PHLC法.方法 硫酸庆大霉素经氯甲酸芴甲酯衍生化后用HPLC法测定.以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱,流动相为乙腈:0.1mol·L-1醋酸盐缓冲液(75:25);流速1mL·min-1,检测波长为265nm.进样量20μL.结果 硫酸庆太霉素在浓度13～256 U·mL-1的范围内线性良好(r=0.9996,n=6).平均回收率为99.64±1.55,RSD%为1.55(n=9).结论 本法简便、准确,灵敏,可作为硫酸庆大霉素注射液的含量测定方法.     

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定硫酸新霉素的含量

目的建立测定硫酸新霉素含量的柱前衍生化反相高效液相色谱法。方法采用SHIMADZU VP-ODS(5μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱,以甲醇-水(40∶60)(含0.2 mol/L醋酸和0.013 mol/L庚烷磺酸钠)为流动相,检测波长为380 nm。结果新霉素在10.00~65.97μg/mL范围内线性关系良好(r=0.998 9),方法精密度RSD=1.1%。结论此法简便、快速,可作为硫酸新霉素质量控制方法。     

柱前衍生化RP-HPLC法测定肌肽的含量

目的建立简单、快速测定肌肽含量的方法。方法采用2,4-二硝基氯苯柱前衍生化RP-HPLC法。衍生化试剂:2,4-二硝基氯苯;色谱柱:DiamonsilTM C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.15 mol.L-1乙酸钠缓冲溶液(体积比1∶5);流速:1.0 mL.min-1;检测波长:360 nm。结果肌肽质量浓度在2.0~20.0 mg.L-1(r=0.999 4)内与其衍生化物峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为96.8%,RSD为0.8%(n=9)。结论2,4-二硝基氯苯柱前衍生化RP-HPLC法可用于测定肌肽含量。     

DNFB柱前衍生化RP-HPLC法测定氨肽素的氨基酸含量

目的用二硝基氟苯 (DNFB)柱前衍生化RP HPLC法测定氨肽素中氨基酸的含量。方法采用二硝基氟苯为衍生试剂进行衍生 ,ODS(KromasilC18,4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm)色谱柱分离 ,以乙腈 0 0 5mol·L-1乙酸钠水溶液为流动相 ,梯度洗脱 ,3 60nm检测 ,在 3 0min内 ,测定氨肽素的氨基酸组成与含量。结果线性范围 (总氨基酸 1 4种 )为 0 1 5～ 0 75 g·L-1;回收率为 94 8%～ 1 0 3 5 % ;RSD为0 2 6%～ 1 47% (n =5 )。结论DNFB柱前衍生化RP HPLC法可有效控制产品质量     

RP-HPLC柱前衍生化法测定白舒非血药浓度

目的建立测定人血浆中白舒非浓度的柱前衍生高效液相色谱法。方法以1,5-戊二醇二甲磺酸酯为内标,血浆样品经二乙基二硫代氨基甲酸钠衍生化处理后,以乙腈-0.7%冰醋酸水溶液(69∶31)为流动相,流速1.0mL·min-1,采用XterraP18色谱柱分离,在280nm波长下进行检测。结果白舒非线性范围为0.20～4.00mg·L-1,以加权最小二乘法计算得到回归方程为Y=2.56X+16.7(r=0.9993,n=7),提取回收率81.01%～82.72%,方法回收率96.50%～97.90%,日内、日间精密度(RSD)均小于10%。最低血浆检测质量浓度为0.080mg·L-1。结论柱前衍生高效液相色谱法准确、灵敏,适用于白舒非血浆浓度的测定及其药代动力学研究。     

柱前衍生HPLC法测定丙戊酸钠的血药浓度

目的 建立快速柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸钠(VPA) 血药浓度的方法.方法 选择ε-溴苯乙酮为衍生化试剂,环己烷羧酸为内标,Hypersil ODS-C18柱(250mm×4.6mm,5μm) 为分析柱;流动相为甲醇-水(80∶20) ,检测波长为248nm,流速1mL·min-1,柱温室温.结果 内标环己烷羧酸和VPA的保留时间分别7.7min、13.3min,丙戊酸钠(VPA)血药浓度在15～200mg·L-1范围内呈良好线性关系(r=0.9996),平均相对回收率和绝对回收率分别为99.6%、82.4%,日内、日间RSD均＜3.5%.结论 本法快速、简便、准确,适合临床常规监测需要.     

柱前衍生化HPLC法测定硫酸庆大霉素和硫酸新霉素的含量

目的 :建立一种测定硫酸庆大霉素滴眼液中庆大霉素和复方地塞米松滴眼液中硫酸新霉素含量的HPLC法。方法 :硫酸庆大霉素和硫酸新霉素经氯甲酸芴甲酯 (FMOC Cl)衍生化后用HPLC法分析。采用AgilentC18柱 (15 0mm× 4 6mm ,5 μm)为色谱柱 ,乙腈 -水 (95∶5 ,V/V)为流动相 ,紫外检测波长 2 6 5nm ,流速 1mL·min-1,柱温 2 5℃。结果 :硫酸庆大霉素在 2～ 10 0mg·L-1浓度范围内有良好的线性关系 (r=0 9997,n =6 ) ,回收率为 (98 5± 0 6 5 ) % ,RSD =0 6 6 % ,(n =9) ,最低检测质量浓度为 1mg·L-1;硫酸新霉素在 1～ 10 0mg·L-1浓度范围内有良好的线性关系 (r =0 9993,n =7) ,回收率为 (99 2 6± 1 70 ) % ,RSD =1 71% ,(n =9) ,最低检测质量浓度为 0 5mg·L-1。结论 :本方法可以用于硫酸庆大霉素滴眼液和复方地塞米松滴眼液的质量控制     

柱前衍生HPLC法测定硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的研究

摘要：目的 建立柱前衍生HPLC法测定硫酸阿米卡星及其制剂中基因毒性杂质肼的含量。方法 以5%苯甲醛甲醇溶 液为衍生化试剂,采用Agilent Zobax Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,5 μm),流动相A为0.1%甲酸溶液,流动相B 为乙腈,进行线性梯度洗脱,流速1.0 mL/min,DAD紫外检测器,检测波长300 nm,柱温25℃,进样量20 μL。结果 肼在 0.5022~12.5543 μg/mL浓度范围与峰面积的线性关系良好(r=0.9994),硫酸阿米卡星、注射用硫酸阿米卡星、硫酸阿米卡星注射 液的平均回收率分别为94.8%、94.1%和94.3%。国内企业硫酸阿米卡星、注射用硫酸阿米卡星、硫酸阿米卡星注射液中的肼分 别为未检出~1.8 μg/g、未检出~0.2 μg/g、未检出~3.1 μg/g;日本Nichiiko公司的注射用硫酸阿米卡星和硫酸阿米卡星注射液均未 检出肼。结论     

柱前衍生高效液相色谱法测定缩宫素的氨基酸组成

目的:建立一种测定缩宫素氨基酸组成的柱前衍生化-HPLC法。方法:缩宫素经酸水解产生的游离氨基酸用异硫氰酸苯酯衍生后,以0.1mo·lL-1醋酸钠溶液-乙腈(97∶3,pH 5.20)和乙腈-水(4∶1)为二元流动相,流速为1.0 mL.min-1,经RP-C18色谱柱梯度洗脱,于254 nm处测定。通过外标法计算样品的氨基酸组成。结果:氨基酸浓度在0.12～0.28μmol.mL-1范围时与峰面积呈良好的线性关系(r均大于0.999);定量限介于4.73～31.7ng;回收率范围为90.4%～101.8%,RSD范围为0.25%～3.2%。结论:本实验建立的分析方法分离效果好、灵敏、可靠,成功用于缩宫素的氨基酸组成测定研究。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸钠血药浓度

目的建立快速柱前衍生-高效液相色谱法测定丙戊酸钠(VPA)血药浓度的方法.方法选择2-溴-对硝基苯乙酮为衍生试剂,环己烷羧酸为内标,Nova-pak C18柱(150 mm×3.9 mm,4μm)为分析柱;流动相为甲醇-水(7723,V/V),检测波长为262nm,流速1 mL·min-1,柱温25℃.结果内标环己烷羧酸和VPA的保留时间分别为3.0 min和4.5 min,线性范围为20～180mg·L-1,平均回收率为100.2%,日内、日间RSD均＜3.5%;230例服用VPA的癫癎患者应用本法监测,有77.8%的患者血药浓度在有效浓度范围之内,还有22.2%的患者血药浓度低于或高于有效浓度.结论本法快速、简便、准确,适合临床常规监测需要.     

柱前衍生高效液相色谱法测定人血清中丙戊酸钠浓度

目的建立人血清中丙戊酸钠浓度测定方法。方法将血清酸化,用乙醚提取,ω-溴苯乙酮衍生,采用高效液相色谱法测定,色谱柱:Hypersil ODS C18柱(250 mm×4.0 mm,5μm),流动相:甲醇-水(68∶32),检测波长:262 nm。结果丙戊酸钠浓度在9.2~183.1μg.mL-1苯甲酰甲基丙戊酸和苯甲酰甲基环己烷羧酸的峰面积比与丙戊酸钠浓度呈现良好线性关系,r=0.999 3,平均回收率>98.11%,日内和日间RSD<5.8%。结论该方法快速、简便、准确,适合于临床血药浓度监测。     

柱前衍生-HPLC法测定人血清中丙戊酸钠的方法改进

目的建立快速柱前衍生-HPLC法测定人血清中丙戊酸钠（VPA）。方法选择对溴苯甲酰甲基溴为衍生化试剂,壬酸为内标,HypersilBDSC18（4.6mm×200mm,5μm）为分析柱;流动相为乙腈-水（75∶25,V/V）;检测波长254nm;流速1.0ml/min;柱温40℃。结果 VPA的血清浓度在25.0～250.0mg/L范围内线性关系良好（r=0.9991）,平均回收率为（100.43±0.73）%,日内、日间RSD均〈5%;123例服用VPA的癫痫患者应用本法监测,有53.7%的患者血药浓度在有效浓度范围之内,46.3%的患者血药浓度低于或高于有效浓度。结论本法快速、简便、准确,适合临床常规监测VPA血清浓度需要。     

反相高效液相色谱-柱前衍生法测定人血清中丙戊酸浓度

目的 建立人血清中丙戊酸浓度测定方法。方法 将血清酸化,用乙醚提取,以环己烷羧酸为内标,α-溴苯乙酮为衍生化试剂,采用高效液相色谱法测定。色谱柱:Eclipse Plus C₁₈柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-水(70:30),检测波长:248 nm,流速:1.0 ml/min。结果 血清中丙戊酸浓度线性范围为8.65~173 μg/ml,平均回收率>99.27%,日内和日间RSD<5%。结论 本法快速、简便、准确,适合于临床血药浓度监测。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定盐酸度洛西汀原料甲醛含量

目的采用HPLC法定量检查盐酸度洛西汀原料残留的甲醛。方法盐酸度洛西汀原料中残留的甲醛与2,4-二硝基苯肼生成具有强紫外吸收的衍生物,通过HPLC检查该衍生物含量,从而检查甲醛的含量。结果甲醛衍生物检查方法的专属性,进样精密度、灵敏度、重复性、线性和准确性均符合检测要求。S/N约为10∶1时,甲醛的灵敏度为0.011%,S/N约为3∶1时,甲醛的灵敏度为0.003%;甲醛浓度在0.04～2.00μg/ml范围内,甲醛浓度与峰面积呈良好的线性关系Y=53 119X+2 286.6(r=0.999 7);平均回收率为101.42%。色谱条件和衍生条件的耐用性均良好。结论所用方法可用于盐酸度洛西汀原料中残留的甲醛检测。     

柱前衍生高效液相色谱法测定知母中菝葜皂苷元的含量

目的建立用苯甲酰氯与菝葜皂苷元进行柱前衍生化反应,以HPLC-UV法测定知母药材中菝葜皂苷元的含量。方法采用Agilent C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比99∶1),检测波长为230 nm,流速为1.1 mL.min-1,柱温为33℃。结果菝葜皂苷元质量浓度在0.20~4.00 g.L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 6),平均回收率为98.3%(n=9),RSD为2.1%。结论本法可用于菝葜皂苷元的定量分析。