RP-HPLC测定麸煨肉豆蔻中去氢二异丁香酚的含量

目的:建立麸煨肉豆蔻饮片中去氢二异丁香酚的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以甲醇-水(75∶25)为流动相,柱温为室温,检测波长为274 nm。结果:去氢二异丁香酚的进样量在0.075～0.60μg呈现良好现性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.22%(n=6),RSD为1.9%。结论:采用高效液相色谱法测定麸煨肉豆蔻饮片中去氢二异丁香酚的含量,方法简便、灵敏、准确,可用于麸煨肉豆蔻饮片的质量控制。     

肉豆蔻药材的质量标准研究

目的建立肉豆蔻药材的质量标准。方法采用薄层鉴别、水分检查、挥发油测定及高效液相色谱法进行研究。结果对10批药材的薄层、水分进行了检查并同时进行了挥发油及去氢二异丁香酚的含量测定。结论所建立的方法操作简便、准确可靠、重现性好,制订的标准限度合理,可用于肉豆蔻药材的质量控制。     

二十味肉豆蔻丸质量标准研究

目的: 建立二十味肉豆蔻丸(肉豆蔻、沉香、丁香、红花等)的质量控制方法。方法: 采用薄层色谱法(TLC)对处方中乳香、丁香、降香、沉香进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)测定肉豆蔻中去氢二异丁香酚,色谱柱为Comatex C₁₈ (4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相甲醇-水(68:32),检测波长274 nm,体积流量1.0 mL·min^-1。结果: 薄层鉴别均斑点清晰,阴性对照无干扰。去氢二异丁香酚在0.036 8~0.184 μg线性关系良(r=0.999 6),平均回收率为100.17%,RSD 1.11%。结论: 研究建立的方法专属性强、简便、灵敏、重复性好,能有效控制二十味肉豆蔻丸的内在质量。     

肉豆蔻对照品去氢二异丁香酚制备工艺

目的:优化制备去氢二异丁香酚中药化学对照品的工艺.方法:以去氢二异丁香酚提取率为考察指标,在单因素试验的基础上,通过L9(34)正交试验确定最佳提取条件并放大到中试量.结果:采用80％乙醇,料液比10∶1回流提取药材2次,每次2h,提取物经无水乙醇、乙酸乙酯萃取后,经硅胶柱层析、重结晶,获得9 g对照品.结论:本工艺高效、简便、低成本,适用于去氢二异丁香酚对照品的制备.     

肉豆蔻的化学成分研究

目的:研究肉豆蔻(Myristica fragrans Houtt)的化学成分。方法:采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、开放ODS柱色谱和HPLC等手段分离化合物,通过理化性质和波谱数据分析确定化合物的结构。结果:在肉豆蔻70%乙醇渗漉物中分离得到7个已知化合物,分别鉴定为:3-(3,4-二甲氧基苯基)-1,2-丙二醇(1)、反式-3,4-二甲氧基肉桂酸(2)、2-羟基-3-甲氧基-5-(2-丙烯基)苯酚(3)、去氢二异丁香酚(4)、愈创木素(5)、邻苯二甲酸(6)、熊果酸(7)。结论:化合物1～3、6为首次从肉豆蔻属植物中分离得到,化合物4、5用圆二色谱法测定了其绝对构型。     

肉豆蔻制霜新工艺优选及质量评价

目的: 建立机械压榨法制备肉豆蔻霜的新工艺,并与传统工艺进行比较。 方法: 以出油量及性状为指标,采用单因素试验考察压榨次数和温度对机械压榨工艺的影响。以制霜前后脂肪油、挥发油、总木脂素、去氢二异丁香酚的含量为指标,考察传统法与机械压榨法制霜工艺对肉豆蔻中化学成分的影响。采用HPLC测定去氢二异丁香酚含量,色谱条件为Diamonsil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温30 ℃,流动相甲醇-水梯度洗脱,检测波长274 nm,流速1.0 mL·min^-1,进样量20 μL。 结果: 优选的机械压榨制霜工艺为压榨温度80~90 ℃,压榨2次,出油率达30.8%。与生品相比,肉豆蔻机械制霜后脂肪油、挥发油、总木脂素、去氢二异丁香酚的含量均降低,但与传统压榨后含量相近。 结论: 机械压榨法方便、快捷,利于工业化生产,可替代传统压榨法。     

HPLC法测定肉豆蔻中脱氢二异丁香酚的含量

采用高效液相色谱法,色谱柱为日本岛津Shim-pack,clc-ODS(6.0 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇:0.025 mol/L磷酸三乙胺(70:30),柱温为室温,检测波长为274 mm.结果表明,脱氢二异丁香酚在0.1096～0.9864 μg的范围内呈现良好现性关系(r=0.9999),肉豆蔻中脱氢二异丁香酚的平均含量为2.38%.     

肉豆蔻炮制品的化学成分分离与鉴定

目的:对肉豆蔻Myristica fragrans Houtt.种仁炮制后的化学成分进行分离鉴定。方法:采用麦麸煨制法炮制肉豆蔻,SephadexLH-20和ODS反相硅胶柱色谱等方法对制肉豆蔻的95%乙醇提取物进行化学成分分离,结合理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:从麸制肉豆蔻中分离得到9个化合物,分别鉴定为消旋-去氢二异丁香酚[(±)-dehydrodiisoeugenol,1]、利卡灵-B(licarin-B,2)、愈创木素(guaiacin,3)、肉豆蔻醚(myristicin,4)、malabaricone A(5)、malabaricone B(6)、malabaricone C(7)、β-谷甾醇(β-sitosterol,8)、胡萝卜苷(daucosterol,9)。结论:化合物5～7为马拉巴酮衍生物,在生品中至今未见国内有分离报道,推测炮制使该类成分含量明显增加。     

商品肉豆蔻药材的指纹图谱研究

目的建立商品肉豆蔻药材甲醇提取液的指纹图谱分析方法，以考察不同地区市售肉豆蔻药材质量的均一性。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18（4．6mm×150mm，5μm）；流动相：甲醇-乙腈-水（25：35：40），流速1mL／min，柱温：30℃；检测波长：270nm。以去氢二异丁香酚为参照物。结果建立了肉豆蔻药材的指纹图谱，共有17个共有峰，指纹图谱相似度均在0．9以上。结论不同地区市售的商品肉豆蔻药材无差异性，该法准确、可靠，为肉豆蔻药材的质量控制提供了科学依据。     

肉豆蔻化学成分和药理作用研究进展及其质量标志物（Q-Marker）预测分析

肉豆蔻Myristicae Semen是常用药食同源中药,具有温中行气、涩肠止泻的功效,主要包括木脂素类、挥发油类和多酚类等化学成分,具有调节消化系统、抗癌、抗炎镇痛、抗菌、抗氧化等药理作用。通过对肉豆蔻化学成分、药理作用、毒性和临床应用进行综述,根据中药质量标志物（quality marker,Q-Marker）理念,从植物亲缘、采收时期和炮制方法、药效、药性、配伍、化学成分可测性等方面对肉豆蔻的Q-Marker进行预测分析,初步预测去氢二异丁香酚、肉豆蔻醚、安五脂素、甲氧基丁香酚、榄香素、丁香酚和α-蒎烯等为其可能的Q-Marker,为肉豆蔻质量评价和药品研发提供参考。     

桂花三萜类成分及降血脂作用的研究

目的： 从桂花中分离出三萜类成分,并对其降血脂作用及抗氧化活性进行研究。方法： 采用索氏提取法提取桂花,富集三萜类成分,采用灌胃高脂乳剂法建立高脂血症小鼠模型,考察桂花三萜对高脂血症小鼠降血脂作用和抗氧化能力的影响。结果： 与高脂模型组相比,三萜类成分给药组血清中TC,TG,LDL-C水平均显著降低,SOD水平显著升高,MDA水平显著下降。结论： 桂花三萜类成分具有明显的降血脂和抗氧化活性,其作用机制有待进一步研究。     

补骨脂-肉豆蔻配伍前后血中移行成分的UPLC-Q-TOF/MS分析

目的分析鉴定口服补骨脂-肉豆蔻药对后大鼠血中移行成分,进一步研究补骨脂-肉豆蔻配伍对移行成分的影响。方法采用超高效液相色谱-四极杆飞行质谱(UPLC-Q-TOF/MS)技术快速分析补骨脂-肉豆蔻药对提取物在大鼠体内移行成分,并结合Peakview软件进行分析。结果与体外补骨脂提取物相比,有15个原型成分入血;与体外补骨脂-肉豆蔻药对提取物相比,有26个原型成分入血;与体外肉豆蔻药材提取物相比,有6个原型成分入血。结论 UPLC-Q-TOF/MS能快捷、准确、较全面地鉴定补骨脂-肉豆蔻药对的化学成分,为补骨脂-肉豆蔻药对的药效物质基础和质量控制等研究奠定了基础。     

一测多评法测定香鳞毛蕨有效部位中10种间苯三酚类成分

目的建立香鳞毛蕨DryopterisFragrans有效部位中10种间苯三酚类成分的一测多评测定方法。方法采用高效液相色谱法,以绵马素BB为内参物,测定其与绵马素PB、绵马素AB、黄绵马酸BB、田基黄绵马酸A、黄绵马酸PB、异黄绵马酸PB、黄绵马酸AB、Compound VI和绵马酚B的相对校正因子,采用相对校正因子计算这9种间苯三酚成分的量,实现一测多评。同时采用外标法测定有效部位中该10种成分的量,并比较2种测定方法的差异,以验证一测多评法的可行性和准确性。结果各相对校正因子重复性良好,12批有效部位中10种间苯三酚成分量的计算值与实测值无显著性差异。结论在缺少对照品的情况下,以绵马素BB为内参物,建立的一测多评法可用于香鳞毛蕨有效部位的定量分析,为香鳞毛蕨多指标成分质量评价提供参考。     

香鳞毛蕨有效部位乳膏对糠秕马拉色菌所致豚鼠感染模型的影响

目的:评价香鳞毛蕨有效部位乳膏(DF乳膏)对糠秕马拉色菌所致豚鼠感染模型的治疗作用。方法:构建糠秕马拉色菌豚鼠皮肤感染模型,按皮损评分值随机分成模型组,酮康唑组(1.33 mg·g-1),DF乳膏高、中、低剂量组(含生药2,1,0.5 g·g-1),通过测定肉眼评分、菌落计数(CFU),真菌学转阴率及组织病理检查4项指标,评价DF乳膏对糠秕马拉色菌所致豚鼠感染模型的治疗作用。结果:与模型组比较,DF乳膏高、中、低剂量组均可显著降低糠秕马拉色菌所致感染模型豚鼠皮损评分(P0.05),明显减少病变皮肤菌落形成数(P0.05),提高真菌培养的转阴率(P0.05,P0.01);皮肤病理切片结果表明DF乳膏高、中剂量可明显减少感染组织皮肤角质层孢子数。结论:DF乳膏对糠秕马拉色菌所致的豚鼠感染有较好的治疗作用。     

基于UFLC-Q-TOF-MS/MS技术及PCA分析的不同产地杏香兔耳风药材差异研究

该研究建立UFLC-Q-TOF-MS/MS技术结合多元统计分析法快速、简便、准确鉴别不同产地杏香兔耳风药材差异性的方法。采用超高速液相-飞行时间串联质谱仪(UFLC-Q-TOF-MS/MS)对江西、云南、江苏和河南地区等产地的杏香兔耳风药材进行检测,质谱采用ESI源的负离子模式,利用Markerview等软件对数据结果进行PCA和OPLS-DA聚类分析及t检验。结果显示在负离子模式下不同产地的药材主成分得到了良好的区分,聚类结果同时体现了杏香兔耳风药材在地域间的差异性和相似性,共鉴定出40种差异成分。该研究建立的鉴别杏香兔耳风药材产地差异性的方法具有快速准确和简便等优势,为杏香兔耳风不同产地的药材质量评价奠定了基础。     

香鳞毛蕨4CL基因密码子使用特性及表达预测分析

目的研究蕨类植物中4CL基因的表达与分析,为蕨类植物次级代谢产物的积累和调控奠定理论基础。方法运用CHIPS、CUSP和Codon W在线程序对自主克隆的香鳞毛蕨4CL基因(Df4CL)序列进行分析,并与大肠杆菌、酵母菌、拟南芥、烟草等基因进行比较,对了解Df4CL基因密码子使用特性,为其选择合适的表达系统具有重要意义。结果 Df4CL基因对ATGC选择没有偏向性,并且与小立碗藓的密码子使用偏好性相一致。在密码子使用频率上,Df4CL基因与拟南芥的差异小于与烟草、大肠杆菌、酵母的差异;基于4CL基因的密码子使用偏性的系统聚类分析表明,香鳞毛蕨与小立碗藓、拟南芥聚为一类。结论预示Df4CL基因更适合在拟南芥中外源表达。     

木蹄复方体外抗肿瘤作用的实验研究

目的:筛选木蹄复方抗肿瘤活性提取物,初步分析其化学成分并观察其体外抗肿瘤效应.方法:常规水提和醇提的方法提取复方中水溶和醇溶性组分.MTT法测定木蹄复方水提取物(distilled water extract of compound Fomes fomentarius,WECF)和木蹄复方乙醇提取物(ethanol extract of compound F.fomentarius,EECF)对体外培养肿瘤细胞A549,Hela,QGY生长的抑制效应.系统预试法分析WECF化学组成.流式细胞术检测WECF对A549细胞凋亡的影响.结果:WECF对A549,Hela,QGY 3种细胞的IC50分别为(0.28±0.02),(0.40 ±0.06),(0.28±0.05) g·L-1;EECF对3种细胞的IC50分别为(0.50±0.04),(0.50±0.03),(0.60 ±0.06)g·L-1,WECF对肿瘤细胞的生长具有较强的抑制作用.WECF含有有机酸,氨基酸、多肽和蛋白质,糖、多糖和苷类,皂苷,内酯、香豆素及其苷类,植物甾醇、三萜成分以及挥发油和油脂,多糖含量为(16.1±0.5)％.WECF对A549,Hela,QGY,DU145,MDA-MB-435S,SGC-79016种细胞的IC50分别为0.29,0.45,0.32,0.32,0.83,0.23g·L-1; WECF 1 g·L-1作用于A549 24 h后,细胞凋亡率为22.0％.结论:WECF具有较强的体外抗肿瘤效果,对多种肿瘤细胞的生长具有非常明显的抑制作用,并可诱导A549细胞凋亡.     

补骨脂-肉豆蔻药对配伍前后主要成分的UPLC-MS/MS测定及药代动力学研究

采用UPLC-MS/MS多反应监测(MRM)定量分析,以氯霉素为内标物在正离子模式下建立血浆中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚及氢二异丁香酚药物浓度的测定方法,研究口服补骨脂-肉豆蔻药对配伍前后主要成分的药代动力学过程。将36只SD大鼠随机分为3组(A组、B组、C组)并分别灌胃补骨脂提取液、补骨脂-肉豆蔻药对提取液、肉豆蔻提取液,于不同时间点采集血浆样品。血浆样品中补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂酚和去氢二异丁香酚分别在0.098 125~39.25,0.084 375~33.75,0.046 875~18.75,0.11~2.2 mg·L~(-1)线性关系良好,精密度、稳定性的试验结果表明,该类成分的血药浓度测定方法稳定可靠。采用DAS 2.0计算所得药代动力学参数在配伍前后均有不同程度的差异,结果表明补骨脂和肉豆蔻配伍能影响主要成分在体内的药动学过程,使分布更广泛,代谢消除更快。     

苍耳子中毒性成分总苍术苷的含量测定

目的:建立和完善苍耳子中总苍术苷的含量测定方法.方法:采用水提取苍耳子中总苍术苷,以羧基苍术苷为对照,通过UV测定总苍术苷含量.结果:羧基苍术苷在0～0.24 g·L-1与吸光度呈良好线性关系(r=0.998 2),平均回收率100.96％,RSD 3.57％.结论:建立的含量测定方法简单、成本低、重复性好.     

铁苋菜多糖体外抗氧化研究

目的:研究不同醇沉浓度下铁苋菜多糖的体外抗氧化活性.方法:用质量浓度为30％,45％,60％,75％,80％的无水乙醇分级沉淀的方法得到不同组分的铁苋菜多糖,分别采用高铁还原法、对二苯代苦味酰基(DPPH·)体系、光照核黄素法、硫代巴比妥酸法比较它们的总还原力(T-AOC)、对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O2-·)、羟基自由基(·OH)的清除作用及对卵黄脂蛋白脂质过氧化物(LPO)的抑制效果.结果:醇沉浓度为75％时对DPPH·的清除率达到了73.85％,其余各组分多糖都有良好的抗氧化效果,其中对O2-·和·OH的清除作用最为明显,清除率分别达到了92.47％和95.89％,几乎与抗坏血酸的清除作用相当,75％醇沉条件下的多糖对LPO也有较强的抑制作用.结论:铁苋菜各组分多糖都有较强的抗氧化作用.