氨氮胁迫下凡纳滨对虾抗病力和副溶血弧菌噬菌体防病效果研究

在水体不同氨氮条件下,对对虾抗病力指标和副溶血弧菌噬菌体生物防治效果进行了研究。实验设置0．05mg／L（对照）、0．15mg／L低浓度组、0．75mg／L低浓度组、1．50mg／L中浓度组、3．00mg／L高浓度组5个氨氮的质量浓度作为胁迫组,计在此基础上加入副溶血弧菌设置感染组,加入副溶血弧菌和噬菌体设置噬菌体防治组。在胁迫组,低浓度氨氮使凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei血清P0、ACP和SOD活力增强,但是在第14天时所有实验组对虾的THC、虮清PO、CAT、ACP、SOD活力均远低于对照组,差异显著（P〈0．05）。感染组对虾THC、血清PO、CAT、ACP、SOD活力受到显著影响,各实验组的对虾抗病力指标均低于相对应的胁迫组,差异显著（P〈0．05）。低浓度氨氮的噬菌体防治组各项指标与感染组比较差异显著（P〈0．05）,肝胰脏的副溶血弧菌计数的差异显著（P〈0．05）。在第14天时,低浓度氨氮防治组指标和感染组差异显著（P〈0．05）,和胁迫组相近。以上结果说明噬菌体防治弧菌病在水体低浓度氨氮条件下,有更好的效果。     

尾加压素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞iNOS表达的影响

目的：探讨尾加压素Ⅱ（UⅡ）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）诱导型一氧化氮舍酶（iNOS）mRNA表达及一氧化氮（NO）合成的影响。方法：用不同浓度的UⅡ（10^-9～10^-7mol／L）干预体外培养的HUVEC,用硝酸酶还原法及比色法检测细胞培养上清液中NO的水平及iNOS的活性,半定量逆转录一聚合酶联反应（RT—PCR）法检测内皮细胞iNOSmRNA的表达。结果：UⅡ干预24h后,与空白对照组相比,UⅡ呈浓度依赖性显著刺激NO的合成（P〈0．05）,增加iNOS的活性（P〈0．05）,上调iNOSmRNA的表达（P〈0．05）。结论：UⅡ能刺激HUVEC的iN—OSmRNA的表达和NO的合成,提示UⅡ可能通过激活iNOS／NO途径而发挥舒张血管的作用。     

一氧化氮促进体外培养大鼠脑室下区神经干细胞的分化

目的：探讨一氧化氮（NO）对新生大鼠体外培养的神经干细胞（NSCs）分化的作用。方法：采用常规方法分离新生大鼠脑室下区（SVZ）组织,进行NSCs体外培养。用DETA／NO作为NO供体,用L-NAME作为一氧化氮合酶（NOS）抑制剂。免疫荧光法检测NSCs标志物-巢蛋白（nestin）、神经元标志物-8Ⅲ型微管蛋白（Tuj-1）和星型胶质细胞标志物-胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的表达,还检测了神经元型NOS的表达。用Greiss还原法检测培养液中总NO的浓度。结果：培养的神经球均为nestin阳性、BIdu阳性和nNOS阳性。NSCs和40μmol／L、50μmol／L、60μmol／LDEFA／N0共培养5d,实验组培养液中N0浓度较对照组显著增高（P〈0．01）,相应实验组分化的神经元数和星型胶质细胞数较对照组明显增加（P〈0．01和P〈0．05）。NSCs和100μmol／L、150μmol／L、200μmol／LL-NAME共培养5d,实验组培养液中NO浓度较对照组降低（P〈0．05）,相应实验组分化的神经元数和星型胶质细胞数也较对照组减少（P〈0．05）。结论：NO能直接促进大鼠SVZ体外培养的NSCs分化。     

奥帕曲拉对内皮素-1诱导的心脏成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨奥帕曲拉（omapatrilat,OMA）对内皮素-1（ET-1）诱导的心脏成纤维细胞（CFs）增殖的干预作用及可能机制．方法：经差速贴壁法培养的新生大鼠CFs,随机分为7组：对照组,ET-1组,OMA组,ET-1＋OMA10^-9mol／L组,ET-1＋OMA10^-8mol／L,ET-1＋OMA10^-7mol／L组．ET-1＋OMA10^-6mol／L组.采用四氮唑盐（MTT）比色法测定CFs数目,流式细胞分析仪（FCM）检测CFs细胞周期,液体闪烁计数仪测定CFs^3H-脯氨酸掺入率,硝酸还原酶法测定细胞培养上清液中NO含量：结果：与对照组相比,10^-7mol／LET-1能显著增加CFs的吸光度A190值及[^3H]-Pro掺入率,降低CFs生成NO的量（均P〈0．01）,10^-9-10^-6mol／L OMA呈浓度依赖性的降低ET-1诱导的A190值和[^3H]—Pro掺入率升高（均P〈0．01）,促进CFsNO的生成（均P〈0．05）;细胞周期分析表明ET—1能显著提高S期细胞百分率（P〈0．01）,10^-7mol／LOMA抑制ET-1诱导S期细胞百分率上升（P〈0．01）.结论：OMA对ET-1诱导的CFs增殖及胶原合成有抑制作用,该作用可能和NO生成有关.     

依地酸钠对黏液型铜绿假单胞菌生物膜的作用

目的探讨金属螯合剂依地酸钠（EDTA）对黏液型铜绿假单胞菌（PA）成熟生物膜的杀菌作用和对其结构的影响。方法平板法培养成熟铜绿假单胞菌生物膜,微量肉汤稀释法测量EDTA、环丙沙星的最低抑菌浓度,平板计数法计算EDTA、环丙沙星单独及联合对生物膜菌落数的影响,荧光探针FITC-ConA染细菌胞外多糖、荧光显微镜下观察EDTA作用前后多糖差别,荧光探针SYT09／H标记生物膜内细菌、激光共聚焦显微镜观察结合BF图像结构分析软件（ISA）对EDTA作用前后的生物膜结构参数进行定量分析。结果当EDTA浓度为5MIC时达到对PA生物膜的最大杀菌效应,可使菌落数由10^7CFU／ml降至10^4CFU／ml,0．1MIC、5 MIC的EDTA均可增强环丙沙星对生物膜的杀菌作用,高浓度组效果更明显、使菌落数降至10^2CFU／ml。EDTA作用后荧光显微镜下可见多糖被破坏,明显减少。激光共聚焦显微镜下可见EDTA作用后生物膜死茵比例增加,菌落变稀疏。ISA软件分析结果显示：5MIC的EDTA作用后生物膜厚度（d）由（22．59±4．13）μm降至（8．97±2．45）μm,t=8．515,P〈0．05;AP（区域孔率）由0．89±0．07增加至0．97±0．02,t=-2．653,P〈0．05;ADD（平均扩散距离）由3．08±0．96降至1．59±0．24,t=4．510,P〈0．05;TE（结构熵）由6．25±0．79降至3．02±0．67,t=9．375,P〈0．05;0．1MIC的EDTA效果没有5MIC明显。结论EDTA可以破坏铜绿假单胞菌生物膜的结构,增强抗生素对生物膜杀菌活性。     

酪酸梭菌活菌散辅助治疗手足口病对患儿血清超敏C反应蛋白和肿瘤坏死因子-α水平的影响

目的探讨酪酸梭菌活菌散辅助治疗手足口病（HFMD）对患儿血清超敏C反应蛋白（hs—CRP）和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平的影响。方法选取的HFMD患儿70例,随机将患儿分为观察组和对照组,每组35例。两组患儿均予以利巴韦林、重组人干扰素ctlb及退热、营养支持等常规治疗。观察组患儿在此基础上加用酪酸梭菌活菌散,其中≤1岁,0．5g/次,2次／d;〉1岁,1．0g／次,2次／d,温开水冲服。对照组患儿除不使用酪酸梭菌活菌散外余治疗同观察组。观察两组患儿治疗前和治疗3d后血清hs—CRP和TNF—α水平的变化,进行临床疗效的观察。结果治疗3d后,两组患儿血清hs-CRP和TNF—α水平均较前明显下降（P〈0．05或P〈0．01）,且观察组下降的幅度较对照组更明显（P〈0．05）。观察组患儿治疗后的总有效率（94．29％）明显高于对照组（77．14％）（x^2=4.20,P〈0．05）。结论酪酸梭菌活菌散辅助治疗对HFMD患儿的效果较好,能降低血清hs—CRP和TNF—α水平,从而抑制患儿的免疫性炎症反应过程,达到治疗的目的。     

红景天苷对LPS诱导的HSC-T6细胞增殖作用及机制研究

目的：观察红景天苷（Salidroside,Sal）对大鼠肝星状细胞（hepaticstellatecell,HSC）一T6增殖的影响,并探讨一氧化氮（NO）在此过程中的作用。方法：选择脂多糖（LPS）活化HSC—T6,采用不同浓度的Sal,作用于经LPS活化的大鼠HSC-T6,24小时后进行如下实验：噻唑兰（MTT）比色法检测HSC—T6增殖;NO荧光探针（DAF-FMDA）检测细胞内NO浓度;Westem-blot检测INOS蛋白水平。结果：在LPS作用于HSC．T6细胞24小时后,与对照组相比,细胞增殖增加（P〈0．01）,在Sal作用下,HSC-T6细胞增殖与LPS组相比受到抑制（P〈0．01）,并呈浓度依赖性;在Sal处理HSC．T6细胞24小时后,细胞内NO水平有所上升,并呈浓度依赖性增加（P〈O．01）;Sal预处理后的HSC—T6细胞,iNOS蛋白表达有所升高（P〈0．01）。结论：Sal对HSC—T6细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用,NO可能是抑制增殖的因素之一。     

一株假单胞菌HZ-1降解石油烃的初步研究

从石油废水活性污泥中分离到一株可以较好降解石油烃的假单胞菌（Pseudomonas sp）HZ-1,采用生物膜法对该菌株在30℃条件下降解某炼油厂废水中的烃类物质进行了研究.研究结果表明不同营养盐NH4NO3、NaH2PO4、NH4Cl对菌株HZ-1处理石油废水的作用不同,终浓度为1000mg/L的NH4NO3对菌株HZ-1处理石油废水效果最佳.并在30℃和pH 8.0的条件下,初步研究了该菌株降解萘的情况,在萘浓度低于78 mg/L的情况下,120 rpm好氧振荡培养144h,这株菌对萘的降解率在86%以上.     

饲料蛋白对翘嘴鲔生长和内分泌激素的影响

选择健康的翘嘴鲌（Culter alburnus）为试验鱼,以红鱼粉为蛋白源,配制5个蛋白水平的等能、等必需氨基酸（EAA）平衡关联度的半精制饲料,又以豆粕替代鱼粉,大豆蛋白分别替代不同水平的鱼粉蛋白,配制5个EAA关联度的等蛋白、等能的半精制饲料,探讨饲料蛋白对鱼类生长和内分泌激素等的影响。结果表明：饲料蛋白水平对翘嘴鲌的特定增重率（SGR）具有显著影响（P〈0．05）,40．89％饲料蛋白组的SGR显著高于31．04％、35．51％饲料蛋白组（P〈0．05）,但与46．62％和50．33％饲料蛋白组没有显著性差异（P〉0．05）。血清T3水平与饲料蛋白水平正相关（P〈0．05）。血清GH水平与饲料蛋白水平和生长负相关（P〈0．05）,血清IGF—I水平与饲料蛋白水平和生长正相关（P〈0．05）。适宜蛋白水平通过提高翘嘴鲌血清T,和IGF—I的水平来调控生长。当大豆蛋白分别替代54．0％的鱼粉蛋白时,翘嘴鲌的SGR与对照组差异显著（P〈0.05）。翘嘴鲌血清T1与饲料大豆蛋白对鱼粉蛋白的替代量负相关（P〈0．05）。40．5％和54．0％替代组的血清GH显著高于对照组（P〈0．05）,且与饲料中豆粕对鱼粉替代水平正相关（P〈0．01）,与生长负相关（P〈0．05）。血清IGF—I与饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白替代量负相关（P〈0．05）,与生长正相关（P〈0．05）。大豆蛋白的替代亦通过对内分泌激素的影响来调控生长。     

结直肠癌中Claudinl、ZEB-1和E-cadherin的表达及意义

目的探讨Claudinl、ZEB-1和E-cadherin在结直肠癌中的表达及三者之间的关系与临床病理的联系。方法免疫组织化学技术检测51例结直肠癌及癌旁组织中Claudinl、ZEB-1和E—cadherin蛋白的表达情况。结果在结直肠癌组织中Claudinl、ZEB-1、E—cadherin的表达率分别为68．6％、23．5％、56．9％,癌旁组织分别为37．3％、0、98．0％。三种蛋白在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达差异均具有显著性（P〈O．01）。Claudinl及ZEB-1的表达率在III_IV期组（87．5％、41．7％）高于I-II期组（51．9％、7．4％;P〈0．01、P〈0．01）,有淋巴结转移组（90．9％、45．5％）高于无淋巴结转移组（51．7％、6,9％;P〈0．01、P〈0．01）,ZEB-1表达率在高级别组（42．1％）高于低级别组（12．5％;P〈0．05）。E—cadherin的表达率在I—II期组（74．1％）高于Ⅲ—IV期组（37．5％;P〈O．05）,无淋巴结转移组（72．4％）高于有淋巴结转移组（36．4％;P〈0．05）。Claudinl、ZEB-1与E-cadherin的表达均呈负相关（P〈0．05）,Claudinl与ZEB-1的表达呈正相关（P〈0．05）。结论Claudinl、ZEB-1和E-cadherin在结直肠癌发展,浸润和转移中起着重要作用,三者可能存在协同作用。     

Influence of nitrate and COD on phosphorus, nitrogen and dinitrotoluene (DNT) removals under batch anaerobic and anoxic conditions

In this study, the effects of COD to NO(3)-N ratio in the feed on PO(4)-P removal was investigated. Maximum PO(4)-P uptake was obtained in the anoxic reactor when the COD to NO(3)-N ratios were between 2 and 3.75. With the influent COD of 800-1500 mg COD/L a total of the maximum removable PO(4)-P was 56 mg PO(4)-P/L through 20 days of anaerobic/anoxic incubation, indicating 98% P removal in the anoxic reactor. Similarly, for the COD to NO(3)-N ratios varying between 2 and 3.75 maximum denitrification was observed. Through anoxic operation the poly-P bacteria are capable of removing NO(3)-N using VFA, COD as carbon source and NO(3)-N as the electron acceptor after methanogenesis has been completed. High NO(3)-N concentrations stopped significantly the P uptake. A total of 97-99% dinitrotoluene removal efficiencies in the reactors containing COD to NO(3)-N ratio of 2 and 3.75 after 20 days of incubation period. For maximum NO(3)-N and PO(4)-P removals optimal COD to NO(3)-N ratios, COD and NO(3)-N concentrations were 2-3.75, 2000-4000 mg COD/L and, 800-1500 mg NO(3)-N/L, respectively.     

Uptake rates of nitrogen and phosphorus in the water by Eichhornia crassipes and Salvinia auriculata

The main goal of this research was to survey information about the physiology of Eichhornia crassipes and Salvinia auriculata and their capacity to remove nitrogen and phosphorus from the environment, after quantifying the concentrations of the nitrogen (NO3-N, NH4-N and total-N) and phosphorus (PO4-P and total-P) compounds in the water. The macrophytes were incubated in the laboratory in plastic vials of approximately 1.5 litters containing a previously prepared solution of NH4NO3, NH4Cl and KH2PO4. Eichhornia crassipes exhibited the highest rates of nutrient reduction and the concentrations of NO3-N, NH4-N and PO4-P in the water influenced the uptake rates of nitrogen and phosphorus of the E. crassipes and S. auriculata. This information can help to reach adequate management strategies for aquatic macrophytes in order to reduce the eutrophication process in Imboassica lagoon.     

不同基因型水生植物对铵态氮和硝态氮吸收动力学特性研究

针对不同营养状况的富营养化水体修复而选择吸收养分效率较强的水生植物,采用改进常规耗竭法比较研究了6种不同基因型水生植物凤眼莲(Eichhornia crassipes Solms)、黄花水龙(Jussiaea stipulacea Ohwi)、再力花(Thalia dealbata Fraser)、美人蕉(Canna glauca L.)、水芹[Oenanthe javanica(Bl).DC]和豆瓣菜(Nasturtium officinaleR.Br.)对铵态氮和硝态氮吸收动力学特性。结果表明,不同基因型水生植物吸收铵态氮和硝态氮的动力学特性可用Michaelis-Menten方程来描述。在低浓度培养下,不同基因型水生植物对NH4+-N和NO3--N吸收的动力学参数Imax和Km差异较大,其吸收NH4+-N和NO3--N的Imax最大是水芹,其次是豆瓣菜;Km值最小的是水芹,其次是豆瓣菜;且水芹对NH4+-N和NO3--N不仅具有较强的亲和力,还具有较高的离子吸收速率。结果还表明,当介质中氮浓度较低时,水芹有优先吸收硝态氮的趋势,而豆瓣菜和再力花有优先吸收铵态氮的趋势。     

反硝化基因工程菌株YP4S的构建及对污水除氮特性研究

从养殖场污泥中筛选出菌株YP4,经16S rDNA分子发育树的同源序列比对,确定为克雷伯什菌属(Klebsiella sp.)。由NCBI数据库查编码亚硝酸还原酶(Nir)的基因nirS序列,设计引物,以铜绿假单胞菌PAOI基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增目的片段nirS,经过双酶切、克隆和转化,得到重组质粒pYP4S,然后转化野生菌株YP4,构建反硝化基因工程菌YP4S。菌株生长曲线测定表明,工程菌株YP4S与YP4的生长特性基本一致。工程菌株YP4S对模拟污水COD、TN、NH_4^+-N和NO_3^--N具有较高的去除率,YP4S与YP4相比,对NO_2^--N积累的减少量为(32.44±3.96)%,明显减少了NO_2^--N的积累。通过正交试验获得工程菌株YP4S在C/N=10、T=30℃、r=200 r/min和pH=7.0的最佳组合条件下,对模拟污水TN去除率较高。应用工程菌株YP4S处理猪场沉淀池的实际污水,COD、TN、TP、NH_4^+-N和NO_3^--N去除率分别为(95.87±0.82)%、(76.38±3.84)%、(97.13±0.54)%和(75.35±2.57)%,NO_2^--N积累量为(3.31±1.24) mg/L,表明工程菌株YP4S具有较好反硝化作用,对含氮量高的实际污水修复具有潜在的应用前景。     

Effect of carbon source on biological nutrient removal in a sequencing batch reactor

Sequencing batch operation was used for nutrient (COD, NH4-N, NO3-N, PO4-P) removal from synthetic wastewater by using different carbon sources. Operation consisted of anaerobic, anoxic, oxic, anoxic and oxic (An/Ax/Ox/Ax/Ox) phases with durations of 2/1/4.5/1.5/1.5 h. Glucose, acetate and a mixture of glucose/acetate were used as carbon source to yield a COD/N/P ratio of 100/5/1.5 in the feed. Sludge age was kept constant at 10 days. COD, NH4-N, NO3-N and PO4-P removal efficiencies were maximum at the levels of 96%, 87%, 81% and 90% respectively, when a mixture (50/50) of glucose and acetate was used.     

汉沽化工废水渔业利用的研究

汉沽化工废水成分复杂,含有较高浓度的BOD_5,COD,NH_3-N、PO_4-P、氯化物、汞等。经多级模拟生物氧化塘处理后,废水得到有效净化。净化后的污水,因氯化物浓度过高不宜用于农灌。但可用于养鱼,进行综合利用,实现污水资源化。 在净化后污水中进行罗非鱼(Tilapia mossambica)养殖实验,历时132天。在未人工投饵的情况下,试鱼生长、繁殖正常,而且肌肉中汞的积累不明显,最高汞含量变化在0.35—0.40μg/g之间,接近食用要求。 污水中藻类等饵料生物丰富,生物生产力较高。在浮游植物生产量和底栖动物生物量的基础上,估算了改建后污水库鱼类的生产能力。 鱼类养殖是氮、磷丰富的台盐、含汞化工废水回用和生物去氮,去磷的重要途径。而且是含汞废水净化效果的重要指标。     

广东大中型供水水库的氮污染与富营养化分析

20 0 0年丰水期和枯水期对广东大中型水库的氮污染和富营养化现状进行了调查。结果表明 ,在调查的 2 0个大中型供水水库中 ,水质现状总体较好 ,70 %的水库处于中营养状态以下 ,30 %的水库开始出现富营养化现象。水库的总氮浓度普遍偏高 ,氮污染成为水库富营养化的重要原因。水库的总氮和DIN浓度存在地区性差异和季节性差异。枯水期水库的总氮及DIN浓度与叶绿素a的相关性极显著 ,而丰水期则无明显相关性。NO3 N是水体无机氮的主要组成部分 ,平均占DIN的 72 6 % ,而水库的NH3 N含量明显低于NO3 N ,平均占DIN的2 5 5 %。NO2 N的含量一般很低。水库的总氮、DIN和有机氮含量是判断水库营养状态的重要指标 ,而NO3 N和NH3 N在DIN中所占比例则是推测污染物来源的重要依据     

Effects of ammonia and phosphate limitation on the activated sludge treatment of calcium-containing chemical waste

Laboratory-scale biotreaters were used to study the effects of NH(3)-N and PO(4)-P nutrients on the activated sludge treatment of a chemical waste containing soluble calcium (1300 mg/L). Units receiving high or low levels of NH(3)-N and PO(4)-P were similar in their ability to remove organic compounds from the waste. Adaptation of sludges to low PO(4)-P levels (<0.1 mg/L effluent) resulted in a marked accumulation of CaCO(3) in the biosolids, whereas those receiving high PO(4)-P (2-4 mg/L effluent) had little CaCO(3). Microscopic observations of CaCO(3) containing sludges showed substantial amounts of CaCO(3) crystals imbedded in the biomass. These flocs also appeared to be enriched with nonfilamentous bacterial species in contrast to flocs devoid of CaCO(3) which had a floc structure of filamentous and nonfilamentous organisms. Scanning electron micrographs of flocs grown under low NH(3)-N showed a microbial fibrillar network of exocellular material interconnecting cells in the floc matrix. The sludges adapted to low NH(3)-N also produced higher amounts of extractable polysaccharide. CaCO(3) containing biosolids were more dense, larger, and settled better (low SVI, high ISV) than flocs devoid of the precipitates. It is not known from our experiments whether PO(4)-P or some inorganic or organic polymer produced by the floc bacteria are involved in inhibiting CaCO(3) precipitation in the activated sludge treatment of calcium-containing wastes.     

真江蓠(Gracilaria verrucosa)对网箱养殖海区的生态修复及生态养殖匹配模式

2006年8～9月,在浙江象山港花鲈(Lateolabrax japonicus)养殖网箱中吊养真江蓠(Gracilaria verrucosa)对网箱养殖造成的水体富营养化进行生态修复研究.通过45d内的平面监测、定点跟踪监测和断面监测,结果表明:该网箱养殖区水体呈严重富营养化状态,营养状态指数(E)为32.00,其营养盐分布由高浓度的中心区向周围150m非养殖水域扩散;真江蓠对养殖区的富营养化海水具有较好的修复效果:江蓠生态修复区及其相邻网箱中水体PO4-P、NO2-N、NH4-N和NO3-N含量显著低于非修复区(P＜0.01),修复区海水PO4-P、NO2-N、NH4-N和NO3-N浓度比非修复区分别降低22%～58%、24%～48%、22%～61%和24%～47%.养殖真江蓠45d后,修复区水体DO浓度和透明度显著高于非修复区(P＜0.05),DO平均提高28%,透明度平均提高30%;而修复区水体Chl-a浓度显著低于非修复区(P＜0.05),平均降低49%.通过建立基于N平衡的鱼藻生态养殖模式,每收获1kg花鲈至少需要匹配江蓠4.7 kg wet wt才可实现对鱼类排放N的完全吸收.因此网箱内栽培江蓠的混合生态养殖模式,可平衡因经济动物养殖所带来的额外营养负荷,有利于实现动物养殖环境的自我修复.     

para-Chlorophenol inhibition on COD, nitrogen and phosphate removal from synthetic wastewater in a sequencing batch reactor

COD, nitrogen, phosphate and para-chlorophenol (4-chlorophenol, 4-CP) removal from synthetic wastewater was investigated using a four-step sequencing batch reactor (SBR) at different sludge ages and initial para-chlorophenol (4-CP) concentrations. The nutrient removal process consisted of anaerobic, oxic, anoxic and oxic phases with hydraulic residence times (HRT) of 1/3/1/1 h and a settling phase of 0.75 h. A Box-Wilson statistical experiment design was used considering the sludge age (5-25 days) and 4-CP concentration (0-400 mg l(-1)) as independent variables. Variations of percent COD, NH4-N, PO4-P and 4-CP removals with sludge age and initial 4-CP concentration were investigated. Percent nutrient removals increased with increasing sludge age and decreasing 4-CP concentrations. Low nutrient removals were obtained at high initial 4-CP concentrations especially at low sludge ages. However, high sludge ages partially overcome the adverse effects of 4-CP and resulted in high nutrient removals. COD, NH4-N, PO4-P and 4-CP removals were 76%, 72%, 26% and 34% at a sludge age of 25 days and initial 4-CP concentration of 200 mg l(-1). Sludge volume index (SVI) also decreased with increasing sludge age and decreasing 4-CP concentrations. An SVI value of 104 ml g(-1) was obtained at a sludge age of 25 days and initial 4-CP of 200 mg l(-1).