外泌体转运linc-UFC1促进胃癌细胞增殖和迁移

目的探讨外泌体(exosome)来源linc-UFC1对胃癌细胞增殖和迁移的作用及机制。方法采用linc-UFC1高表达的胃癌细胞系BGC-823来源的外泌体处理胃癌细胞系MKN-45 48 h后,q RT-PCR检测linc-UFC1含量变化,细胞生长曲线和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;采用sh RNA敲减BGC-823细胞来源的外泌体中的linc-UFC1,作用于MKN-45细胞系,检测MKN-45细胞的linc-UFC1含量、增殖和迁移能力。结果与胃黏膜上皮细胞GES-1来源的外泌体相比,BGC-823细胞来源的外泌体中linc-UFC1的水平明显升高(q=56.12,P0.01),而MKN-45来源的外泌体中linc-UFC1表达水平明显降低(q=5.98,P0.01);经BGC-823外泌体处理后,与PBS组相比,MKN-45细胞内linc-UFC1水平明显升高(q=20.03,P0.01),细胞增殖速率加快(q=25.84,P0.01),平板克隆形成能力(q=48.73,P0.01)和细胞迁移能力也明显增强(q=57.95,P0.01);Linc-UFC1经敲减后,BGC-823外泌体中linc-UFC1水平明显降低(t=11.67,P0.01);与对照外泌体处理组相比,外泌体上调胃癌细胞内linc-UFC1水平的作用被减弱(q=14.08,P0.01),促进细胞增殖(q=14.45,P0.01),平板克隆形成(q=18.58,P0.01)及迁移(q=16.61,P0.01)的作用被抑制。结论外泌体可通过转运linc-UFC1促进胃癌细胞增殖及迁移。     

血清外泌体源性长链非编码RNA RP N2-4在胃癌中的表达及其筛查价值

目的探讨外泌体源性长链非编码RNA RPN2-4(lncRPN2-4)在胃癌患者血清中的表达及其筛查胃癌的价值。方法收集47例胃癌患者与32例行胃镜检查者血清标本;用试剂盒法分离外泌体,并提取RNA;粒径分析和透射电镜法鉴定外泌体;qRT-PCR法检测外泌体lncRPN2-4的表达水平;电化学发光法检测血清CEA、CA19-9与CA72-4的表达水平;利用ROC曲线评价其筛查胃癌的效能。结果与胃部良性疾病组[0.91(-2.98,6.92)]相比,胃癌组血清外泌体中lncRPN2-4的表达水平[3.78(-0.06,9.12)]明显降低(U=343,P0.01);LncRPN2-4的相对表达量与肿瘤分化程度(P=0.005)和淋巴结转移(P=0.033)有关; lncRPN2-4筛查胃癌时的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.772(95%CI:0.662～0.882,P0.01),当cut-off值为1.31时,其敏感性为87.2%,特异性为59.4%。结论血清外泌体来源的lncRPN2-4在胃癌患者中低表达,可能作为胃癌筛查的肿瘤标志物。     

血清外泌体源性长链非编码RNA H19在骨肉瘤中的表达及其临床意义

摘要:目的?检测骨肉瘤患者血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA) H19的表达水平，分析其与患者临床病理参数的关系，探讨其在骨肉瘤诊断中的价值。方法?采用实时荧光定量RT-PCR分别检测46例骨肉瘤患者及50例体检健康者血清外泌体LncRNA H19的表达水平；采用ELISA法检测各组血清中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、胰岛素样生长因子2(IGF-2)的表达水平；分析血清外泌体LncRNA H19表达水平与骨肉瘤患者临床病理参数的相关性；绘制ROC曲线，并分析血清外泌体LncRNA H19对骨肉瘤的诊断价值。结果?血清外泌体LncRNA H19的表达水平与骨肉瘤患者的病程及是否发生远处转移相关，差异有统计学意义(P均<0.01)，而与患者的性别、年龄、居住地及发病部位均无显著相关性(P均>0.05)；骨肉瘤患者血清外泌体中LncRNA H19的表达水平显著高于健康人对照组(P<0.01)；血清外泌体LncRNA H19诊断骨肉瘤的ROC曲线下面积(AUCROC) 为 0.881，敏感性为87.2%，特异性为75.6%，均高于其余各单项指标组。结论?外泌体高表达的LncRNA H19可能成为骨肉瘤诊断、靶点的个体化治疗及疗效监测的生物学标志物。     

血浆外泌体hsa_circ_0064910在胃癌诊断中的临床应用价值

目的:评估血浆外泌体源环状RNA（circRNA）hsa_circ_0064910在胃癌中的诊断效能,分析其与胃癌患者临床病理特征的相关性。方法:回顾性研究,纳入2019年10月至2020年12月在河南大学第一附属医院入院治疗的60例胃癌患者,30例慢性胃炎患者（疾病对照组）以及同期健康体检的30名健康者（健康对照组）...     

外泌体lncRNA在肝细胞癌中的作用

<正>肝细胞癌(HCC)是最常见的原发性肝癌,在中国,HCC发病率、病死率分别位于恶性肿瘤的第6位和第3位^[1]。HCC发生的具体病因尚未明确,其主要危险因素包括乙型/丙型肝炎病毒感染、酗酒、非酒精性脂肪性肝炎等^[2]。恶性肿瘤严重影响人类的健康,由于恶性肿瘤的发病机制复杂、进展迅速且不易早期诊断,因此,当前恶性肿瘤的早期诊断、精准诊疗成为研究热点。肿瘤的发生、发展依赖于肿瘤细胞和肿瘤微环境之间的相互作用,     

miR-494-3p在胃癌患者血清外泌体中的表达及价值

摘要:目的探究微小 RNA-494-3p(miR-494-3p)在胃癌患者血清外泌体中的表达水平及临床意义。方法采用 TaqMan探针 法RT-qPCR检测44例胃癌患者和44例健康人对照组血清外泌体中miR-494-3p的表达水平,采用ROC曲线分析并评估其对 胃癌的鉴别诊断价值。同时,在14例胃癌组织和16例胃良性疾病对照患者胃组织中进行进一步验证。结果与健康人对照 组( 1.00+0.36)相比,胃癌组血清外泌体中miR-494-3p的相对表达水平(0.21+0.03)显著降低,差异有统计学意义(Z=3.64,P< 0.01);胃癌组织中miR-494-3p的相对表达水平(0.22+0.07)亦显著低于胃良性疾病对照组( 1.00+0.39),差异有统计学意义 (Z= 2.66, P<0.01)。血清外泌体miR-494-3p筛查胃癌和健康人的ROC曲线下面积( AUCROC )为0.725( 95% CI :0.622 ~0.829 , P<0.01),当ecut-off 值为0.370时,其敏感性为50.0%，特异性为86.4%,阳性预测值为63.3%,阴性预测值为78.6%,准确性为 68.2%。结论miR-494-3p 在胃癌患者血清外泌体中呈低表达，有望成为胃癌筛查和辅助鉴别诊断的潜在生物学标志物。     

工程化外泌体靶向治疗急性心肌梗死研究进展

急性心肌梗死是临床常见心血管疾病,目前经皮冠状动脉介入、溶栓等治疗方法有一定疗效,但存在心肌缺血再灌注损伤、出血等风险。外泌体作为细胞间通讯和非编码RNA、蛋白质和脂质的载体,具有受损心肌修复作用,是心肌梗死的潜在治疗途径。但天然外泌体存在稳定性较差、组织靶向性不足等缺点,使其临床转化应用受限。近年采用生物工程技术对外泌体进行修饰,获得有特定功能的工程化外泌体,有望在急性心肌梗死治疗中发挥重要作用。本文就工程化外泌体靶向治疗急性心肌梗死的研究进展作一综述。     

血清外泌体 miR-221 和 miR-378 水平检测在胃癌诊断中的应用研究

目的　研究血清外泌体中 miR-221 和 miR-378 水平及其联合检测对诊断胃癌的价值。方法　选取延安市人民医院收治的胃癌患者 92 例为试验组,选取同期诊断为胃息肉的患者 68 例和同期健康体检者 50 例为对照组,空腹采集静脉血提取血清外泌体用 Western Blot 和 Nanosight 法鉴定,用实时荧光定量 PCR 检测血清外泌体 miR-221 和 miR-378水平,用 ROC 曲线分析 miR-221 和 miR-378 联合检测对胃癌的诊断效能。结果　血清外泌体标本经 Western Blot 蛋白标志物检测鉴定和 Nanosight 颗粒浓度检测鉴定,结果显示所提取的标本中确实含有外泌体。用实时荧光定量 PCR 对标本进行定量检测结果显示,血清外泌体中 miR-221 和 miR-378 水平胃癌组高于胃息肉组,胃息肉组又高于健康对照组,差异均有统计学意义（F=7.112~10.986,均 P ＜ 0.01）。ROC 曲线分析显示,miR-221 和 miR-378 联合检测对胃癌诊断的特异度、灵敏度、诊断符合率以及阴性预测值都明显高于单独检测,差异均有统计学意义（P ＜ 0.05）,说明这两种miRNA 联合检测对胃癌的诊断效能高于单独检测。结论　血清外泌体 miR-221 和 miR-378 水平联合检测对诊断胃癌有潜在的应用价值     

血清外泌体LncRNA 00853、LncRNA FAM72D-3在AFP阴性肝细胞癌患者中的表达及临床预后价值

目的 探讨血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA)00853、LncRNA FAM72D-3在甲胎蛋白(AFP)阴性肝细胞癌(AFP-NHCC)患者中的表达及临床预后意义。方法 选取2018年12月至2019年6月该院诊治的AFP-NHCC患者102例为AFP-NHCC组,以同期于该院行健康体检的体检健康者80例为对照组。实时荧光定量PCR检测血清外泌体LncRNA 00853、LncRNA FAM72D-3水平;比较两组血清外泌体LncRNA 00853、LncRNA FAM72D-3水平,分析血清外泌体LncRNA 00853、LncRNA FAM72D-3水平与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier生存分析血清外泌体LncRNA 00853、LncRNA FAM72D-3对AFP-NHCC患者生存预后的影响;采用单因素及多因素Cox回归分析影响AFP-NHCC患者生存预后的因素。结果 AFP-NHCC组血清外泌体LncRNA 00853、LncRNA FAM72D-3相对表达水平分别为3.12±0.86、2.95±0.78,明显高于对照组的1.22±0.36、1.16...     

尿液外泌体提取优化及冷冻对外泌体RNA含量的影响

目的对现有沉淀法提取尿液外泌体进行优化,并探讨不同的储存条件对尿液外泌体RNA含量的影响。方法分别用先浓缩后沉淀法和直接沉淀法提取人尿液标本中的外泌体,比较两种方法的分离效率和成本;采用ExoQuick-TC~(TM)沉淀试剂盒提取外泌体;纳米粒子跟踪分析技术(NTA)检测外泌体浓度及粒径分布;动态光散射技术(DLS)检测外泌体电位;透射电镜(TEM)观察外泌体形态;western blot检测外泌体标记分子CD63及Alix蛋白的表达;另取10例临床尿液标本验证先浓缩后沉淀的提取方法,以证实优化方法的可靠性。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测20例前列腺癌患者尿液外泌体经过反复冻融(新鲜、1、3、5次)及9例前列腺癌患者尿液外泌体在-80℃冷冻不同时间(新鲜、1周、2周、1个月)时外泌体RNA标志物let-7c和PSA mRNA的表达量,并采用Wilcoxon秩和检验进行统计学分析。结果 NTA检测两种方法提取的外泌体粒径分布为30～150 nm,均为单峰;DLS结果显示,两种方法提取的外泌体电位均呈负值;透射电镜观察两种方法提取的外泌体大小较为一致,直径分布为30～150 nm;western blot检测证实优化方法存在外泌体标记分子CD63及Alix蛋白;10例尿液标本提取的外泌体浓度约为10~9～10~(11) particles/mL。外泌体经过5次冻融后let-7c和PSA mRNA含量明显下降,Z值分别为-1.69、-1.73(P均0.05)。而外泌体在-80℃冷冻1个月后其RNA含量保持稳定。结论优化后的外泌体提取方法在保证外泌体浓度和质量的前提下极大地降低成本,分离得到的外泌体在-80℃短时间冷冻后其RNA含量保持稳定,但不能反复冻融超过5次。     

血清外体内fibulin-1检测在胃癌诊断中的应用

目的评价血清外体(exosome)内fibulin-1蛋白分子在胃癌诊断中的临床应用价值。方法 Exosome沉淀法提取胃癌细胞及胃上皮细胞上清、胃癌患者及体检健康人血清exosome;western blot、ELISA法检测exosome内fibulin-1蛋白的表达水平,绘制ROC曲线并进行诊断效能分析。结果胃癌细胞及其上清exosome内fibulin-1表达水平显著低于胃上皮细胞及其上清exosome;胃癌患者血清exosome内fibulin-1的表达水平(31.94±16.92)μg/mL明显低于体检健康者(47.16±17.27)μg/mL(P=0.045);胃癌患者血清exosome内fibulin-1的ROC曲线下面积(AUCROC)是0.727 5,95%可信区间(CI)为0.569 4~0.885 6,cut off值为43.19μg/mL,敏感性为70%,特异性为75%。结论血清exosome内fibulin-1分子有望作为胃癌诊断的潜在新型分子标志物。     

胃癌患者血清中exosome的水平及临床意义

目的探讨胃癌患者血清中外体(exosome)的水平及其临床意义。方法用ELISA法检测77例胃癌患者、34例体检健康者血清中EXOSC2(exosome component 2)的含量,以评估血清中exosome的水平,并分析其与胃癌患者临床病理特征的关系。结果胃癌患者血清中EXOSC2含量为[670.92(572.49,1 287.59)]pg/mL,健康对照组为[585.49(493.63,862.10)]pg/mL,两组间差异有统计学意义(P0.05)。胃癌患者中,淋巴结转移组血清中exosome水平明显高于无淋巴结转移组(P0.01);Ⅲ、Ⅳ期exosome水平明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P0.05);低分化组水平明显高于高分化组(P0.05)。胃癌患者不同年龄、性别、肿瘤浸润深度、有无远处转移和肿瘤大小间exosome水平差异无统计学意义(P0.05)。结论胃癌患者血清中exosome水平的升高与肿瘤淋巴结转移、TNM分期及分化程度有关,测定血清中exosome的水平有助于判断胃癌的进展。     

胃癌外体（exosome）内miRNA-1的检测分析

目的检测胃癌细胞系来源外体(exosome)及其胃癌组织和血清中exosome内miRNA-1的表达水平并分析其临床意义。方法采用实时荧光定量RT-PCR分别检测胃癌细胞系来源exosome、胃癌患者组织及血清exosome内miRNA-1的表达水平,分析其与临床资料相关性,并绘制ROC曲线进行效能分析。结果 miRNA-1在人胃癌细胞系MGC-803(6.51±0.41)和SGC-7901(14.81±1.30)中的含量明显高于胃上皮细胞系GES-1(1.05±0.25),差异有统计学意义(t分别为11.26、10.38,P均0.01);而MGC-803、SGC-7901细胞培养上清exosome内miRNA-1的表达水平(49.98±11.77和28.68±4.66)显著高于GES-1来源exosome(1.00±0.02)差异有统计学意义(t分别为4.162、5.942,P均0.01);25对胃癌组织标本中有18例癌组织miRNA-1表达上调,7例表达下调,胃癌组织[1.110(0.070,4.307)]平均表达水平高于癌旁组织[1.149(1.110,2.075)],差异有统计学意义(Z=-1.897,P0.05)。miRNA-1在胃癌患者血清exosome内的表达水平[4.130(0.151,12.720)]较体检健康者血清exosome内表达水平[0.704(0.077,7.243)]明显增高(Z=-2.407,P0.05),且与胃癌的淋巴结转移相关;胃癌患者血清exosome内miRNA-1的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.723 0,95%可信区间(CI)为0.627 0~0.818 7,cut off值为2.39,敏感性为66%,特异性为68%。结论胃癌组织及其胃癌患者血清来源exosome内富含miRNA-1,有望成为新的胃癌诊断标志物。     

胃癌患者血清LINC00978表达及其临床意义

目的检测胃癌患者血清中LINC00978表达水平,评估其表达水平与临床病理参数的关系,并探讨其临床诊断价值。方法实时荧光定量RT-PCR检测LINC00978在胃癌细胞、体检健康者、胃良性疾病及胃癌患者血清中的表达水平,分析其与胃癌患者临床病理参数的相关性,并用ROC曲线分析其诊断效能。结果 LINC00978在人胃癌细胞系MGC-803中的表达水平(18.88±1.15)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.00±0.03),差异有统计学意义(t=-21.926,P0.05)。LINC00978在胃癌患者血清中的平均含量[3.525(1.385,8.954)]较胃良性疾病患者[0.419(0.258,1.369)]和体检健康者[0.814(0.351,2.510)]均明显升高(Z值分别为-4.834和-4.686;P均0.01),且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关(r分别为0.448、0.369和0.383,P均0.01);胃癌患者术后血清中LINC00978的表达水平[0.17(0.15,0.39)]较术前[0.98(0.59,1.61)]明显降低(Z=-5.731,P0.01)。与体检健康者相比,LINC00978在胃良性疾病患者血清中表达差异无统计学意义(Z=-1.693,P0.05)。胃癌患者血清LINC00978的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.807,95%可信区间(CI)为0.723~0.882,当cut-off值为1.806时,其诊断胃癌的敏感性为71.4%,特异性为75.9%。结论 LINC00978在胃癌患者血清中呈高表达,且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关,有望成为潜在的胃癌诊断的生物学标志物。     

血清胃蛋白酶原1、2在胃癌诊断中的价值

目的 探讨血清胃蛋白酶原（PG）检测对胃癌诊断价值.方法 采用胶乳增强免疫比浊法对36例非萎缩性胃炎、39例胃溃疡、31例萎缩性胃炎及42例胃癌患者血清PG1、PG2水平进行了检测.结果 非萎缩性胃炎组、胃溃疡组、萎缩性胃炎组及胃癌组中血清PG1水平及PG1/ PG2比值（PGR）逐渐降低,以胃癌组降低最为明显,显著低于其他三组患者（P〈0.01）,胃溃疡组血清PG2水平显著高于其他三组（P〈0.01）,其他三组血清PG2水平无统计学差异（P〉0.05）,以PG1〈70 μg/L,且PGR〈3.0为判断界值,其诊断胃癌的敏感性为78.6%,特异性为85.8%.结论 血清PG1及PGR明显降低可作为胃癌及癌前病变的一项血清学诊断指标,对于提高胃癌早期诊断率和早期治疗率,从而降低病死率具有积极意义.     

胃癌患者血清Chemerin水平的测定及临床意义

目的观察胃癌患者血清Chemerin的水平变化,并探讨其与胃癌临床病理特征的关系。方法共纳入胃癌组121例及健康对照组86例。用酶联免疫吸附试验（ELISA）测量每组患者的血清Chemerin水平。结果胃癌组患者血清Chemerin水平明显高于健康对照组[（1 879.51±262.65）与（1 135.28±152.72）ng/L],差异有统计学意义（P〈0.01）。血清Chemerin水平随着胃癌TNM分级的增加而升高并与TNM分级呈显著正相关（r=0.258,P〈0.05）。结论胃癌患者血清Chemerin水平显著升高且升高程度与肿瘤的TNM分级相关,Chemerin可能成为诊断胃癌发病及预测胃癌进展程度的重要血清学标记物。     

胃癌组织标本中lncRNA RN7SK的表达及其筛查价值

目的检测胃癌组织中长链非编码RNA(lnc RNA)RN7SK表达水平,并探讨其在临床筛查中的价值。方法 q RT-PCR检测lnc RNA RN7SK在胃癌细胞、胃癌组织中的表达水平;绘制ROC曲线,分析其用于筛查胃癌的效能。结果 lnc RNA RN7SK在人胃癌细胞系SGC-7901(3.91±0.53)、MGC-803(3.44±0.29)、HGC-27(4.04±0.87)和BGC-823(4.30±1.13)中的表达水平明显高于人胃粘膜上皮细胞系GES-1(1.02±0.27),差异具有统计学意义(t分别为12.33、7.48、7.20、4.90,P0.05)。lnc RNA RN7SK在55例胃癌组织中有47例(85.5%)表达上调,8例(14.5%)表达下降。lnc RNA RN7SK筛查胃癌患者的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.827,95%可信区间(CI)为0.746~0.907,当cut-off值为0.618时,敏感性为0.836,特异性为0.782。结论 lnc RNA RN7SK在胃癌组织中高表达,且具有较高的筛查效能,可作为潜在的胃癌诊断分子标志物。     

外泌体lncRNA在肿瘤中的研究进展

外泌体是肿瘤液态活检的明星分子,作为"胞间通讯"的信使可以在全身体液循环.随着科学家们对长链非编码RNA(lncRNA)的深入研究,发现lncRNA在表观遗传修饰、转录调控与转录后调控等多个层面发挥作用.在肿瘤发生、发展过程中,外泌体携带的lncRNA能够改变肿瘤微环境,介导肿瘤细胞增殖、转移和耐药,促进血管生成和介导...