不同剂量UVA1辐射硬皮病鼠模型的研究

目的 探讨不同剂量的UVA1辐射硬皮病鼠模型后皮肤厚度和胶原含量的变化。方法 用100 μL（400 μg/mL）的博来霉素皮下注射BALB/c小鼠背部,共4周,建立硬皮病的小鼠模型,然后将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、UVA1照射组（100 J/cm2、60 J/cm2、20 J/cm2）及阴性对照组。每周照射3次,共10周,观察并比较各组小鼠皮肤组织病理改变、皮肤厚度和胶原含量的变化。结果 模型对照组与空白对照组相比,皮肤厚度（t = 4.945,P < 0.001）和胶原含量（t = 3.712,P < 0.01）的差异均有统计学意义。UVA1照射组小鼠皮肤变软、变薄,但只有HD-UVA1组小鼠皮肤厚度、胶原含量与模型对照组、阴性对照组比较,差异有统计学意义（P < 0.05）。照射组之间相互比较,皮肤厚度差异F = 14.853,P < 0.01,胶原含量差异F = 6.317,P < 0.01,尤其是HD-UVA1与MD-UVA1和LD-UVA1之间有显著差异。结论 HD-UVA1照射能明显改善博来霉素所致的硬皮病鼠模型的皮肤厚度、胶原含量的变化,可能与其抑制皮肤的胶原增生、降低胶原含量有关。     

不同剂量UVA1辐射对硬皮病鼠模型皮肤匀浆CD34和M30的影响

目的 比较硬皮病鼠模型经不同剂量UVA1辐射后皮肤匀浆中CD34和M30的变化,初步探讨UVA1光疗法对硬皮病血管内皮细胞功能的影响。方法 建立硬皮病鼠模型,并随机分为模型对照组、UVA1照射组（按剂量又分为100 J/cm2、60 J/cm2、20 J/cm2组,每周照射3次,共10周）及未照射组,每组10只,共50只。治疗结束后处死小鼠,取背部造模处皮肤一份行组织病理检查,另一份制成5%匀浆,ELISA法检测各组小鼠皮肤匀浆中CD34和M30含量。结果 UVA1照射组小鼠治疗30次后,肉眼观察皮肤变软、变薄,以100 J/cm2组改变最为明显;组织病理见小鼠真皮厚度变薄,胶原无明显增生,皮下脂肪层内见毛囊结构。未照射组皮肤匀浆中CD34、M30含量分别为（22.25 ± 8.91） μg/L和（162.41 ± 58.00） U/L,模型组分别为（31.97 ± 17.97） μg/L和（195.71 ± 71.09） U/L。UVA1组皮肤匀浆中CD34含量增加,M30含量降低,以100 J/cm2 UVA1组的改变最为明显,分别为（72.39 ± 13.04） μg/L和（38.06 ± 19.89） U/L,与模型组及未照射组比较,差异均有统计学意义（P < 0.01）。不同剂量UVA1照射组间经单因素方差分析,FCD34 = 21.23,P < 0.01,FM30 = 15.32,P < 0.01,三组间差异均有统计学意义。结论 UVA1光疗法可上调硬皮病小鼠皮肤CD34,降低M30含量,且其作用与照射强度、累积剂量有关。     

UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞Ⅰ型胶原和MMP-1表达的影响

目的 探讨UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞中Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶1(MMP-1)表达的影响.方法 局限性硬皮病患者(6例)和健康人(4例)皮肤活检标本进行成纤维细胞培养,荧光定量PCR法检测不同强度UVA-1照射前后及相同强度UVA/UVA-1照射后两组皮肤成纤维细胞中COL1A1和MMP-1 mRNA的表达水平.结果 局限性硬皮病组与健康对照组相比,成纤维细胞中COL1A1表达量增加(P＜0.05),MMP-1表达量下降(P＜0.05).UVA-1照射未能明显减少局限性硬皮病患者成纤维细胞中COL1A1表达(P＞0.05),但可使MMP-1 mRNA表达明显增加(P＜0.05).相同剂量UVA对局限性硬皮病患者成纤维细胞中Ⅰ型胶原的抑制作用和MMP-1的刺激作用优于UVA-1.结论 UVA-1照射治疗可以抑制Ⅰ型胶原的表达,刺激MMP-1的表达,且中等剂量UVA-1的疗效优于小剂量,相同照射剂量UVA疗效优于UVA-1.     

UVA1对硬皮病小鼠模型影响的实验观察

目的：观察UVA1对硬皮病小鼠模型的影响。方法：用波长365nmUVA1照射博来霉素诱导的硬皮病小鼠模型,观察照射前后局部皮肤的变化,进行皮肤病理检查、羟脯氨酸含量测定及免疫组化法测定核心蛋白多糖、TGFβ1及TGFβ2等因子。结果：照射组与模型组相比,局部硬化皮肤明显软化,羟脯氨酸含量显著降低（P〈0.05）;病理示真皮层变薄,胶原纤维排列疏松,数量减少;免疫组化示核心蛋白多糖无阳性表达;TGFβ1和TGFβ2呈阳性表达,且照射对其阳性表达有影响。结论：UVA1照射的有效性可能与其下调与硬皮病相关的细胞因子TGFβ1和TGFβ2等表达有关。     

强功率UVA1照射对增生性瘢痕动物模型瘢痕形成的影响

目的 探讨不同剂量UVA1对全层皮肤缺损诱导的兔耳增生性瘢痕模型的影响情况。方法18只新西兰白兔双耳腹面手术切除2 cm × 5 cm全层皮肤至筋膜,建立兔耳增生性瘢痕模型后,随机分成3组,每组6只兔,将每只兔左耳分别于伤后即刻、1个月、2个月开始用不同剂量大功率UVA1照射,右耳为非照射组。各照射组又分为两个剂量照射组,兔耳分别每次照射UVA1 60 J/cm2、110 J/cm2,连续30次。结果 创伤建模1个月、2个月后开始照射UVA1组,与照射前比较,高剂量组照射后瘢痕处真表皮厚度（282.32 ± 58.60;336.50 ± 98.34）和真皮胶原含量（24.91 ± 16.88;34.47 ± 8.90）均显著降低（P < 0.05）;照射组与非照射组在UVA1照射前后差值的比较,高剂量组照射后瘢痕处表真皮厚度差值（-143.52 ± 42.91;-142.44 ± 49.96）和真皮胶原含量差值（-56.39 ± 15.04;-48.35 ± 10.44）的差异有统计学意义（P < 0.05）;各照射组UVA1对瘢痕皮肤厚度（811.68 ± 79.03;659.08 ± 178.98）和胶原含量（67.80 ± 9.06;61.35 ± 12.91）的影响均存在剂量依赖性（P < 0.05）。而创伤建模的同时照射UVA1组,两种剂量的UVA1照射后瘢痕处皮肤厚度和胶原含量较非照射耳均显著增加（P < 0.05）。结论 上皮化后开始UVA1照射可使瘢痕变软,皮肤变薄,胶原含量降低。创伤同时照射UVA1不仅不能阻止瘢痕模型的建立,反而加重瘢痕。     

UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞I型胶原和MMP-1表达的影响

目的探讨UVA-1及UVA照射对局限性硬皮病患者成纤维细胞中I型胶原和基质金属蛋白酶1（MMP-1）表达的影响。方法局限性硬皮病患者（6例）和健康人（4例）皮肤活检标本进行成纤维细胞培养,荧光定量PCR法检测不同强度UVA-1照射前后及相同强度UVA／UVA-1照射后两组皮肤成纤维细胞中COL1A1和MMP-1mRNA的表达水平。结果局限性硬皮病组与健康对照组相比,成纤维细胞中COL1A1表达量增加（P〈0．05）,MMP-1表达量下降（P〈0．05）。UVA-1照射未能明显减少局限性硬皮病患者成纤维细胞中COL1A1表达（P〉0．05）,但可使MMP-1mRNA表达明显增加（P〈0．05）。相同剂量UVA对局限性硬皮病患者成纤维细胞中I型胶原的抑制作用和MMP-1的刺激作用优于UVA-1。结论UVA-1照射治疗可以抑制I型胶原的表达,刺激MMP-1的表达,且中等剂量UVA-1的疗效优于小剂量,相同照射剂量UVA疗效优于UVA-1。     

辛伐他汀对硬皮病小鼠模型的影响

目的 探讨辛伐他汀对硬皮病小鼠模型胶原合成的影响。方法 采用博来霉素诱导的动物模型,分早期给药组和硬化后给药组。用5 mg·kg-1·d-1辛伐他汀处理,用药4周后收集标本,采用HE染色观察皮损组织病理改变并测量表真皮厚度,比色法检测皮损羟脯氨酸含量,并利用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测小鼠硬皮病皮损前胶原（pro-COL1α1） mRNA的表达情况。结果 早期给药组中,模型组与阴性对照组比较,小鼠真皮内胶原增粗,表真皮厚度和羟脯氨酸含量及pro-COL1α1 mRNA 表达明显增加（P < 0.01）;而5 mg·kg-1·d-1辛伐他汀处理组较模型组小鼠真皮厚度变薄（P < 0.05）,羟脯氨酸含量降低（P < 0.01）,皮损pro-COL1α1 mRNA表达下降（P < 0.05）。硬化后给药组中,辛伐他汀处理组与空白对照组比较小鼠真皮厚度、羟脯氨酸含量均无明显改善,但pro-COL1α1 mRNA表达下降（P < 0.05）。结论 早期予以辛伐他汀处理可以减轻博来霉素诱导的小鼠皮肤硬化程度。硬化后予以辛伐他汀处理则皮肤硬化改善不明显。     

中剂量UVA1光疗对11例斑块状硬皮病的临床疗效观察

目的：了解中剂量UVA1光疗对斑块状硬皮病的临床疗效。方法：对11例斑块状硬皮病患者采用中剂量UVA1（30 J／cm2）局部治疗30次，以皮损弹性、面积、颜色、疼痛、硬度变化等指标设计临床疗效评价表，对皮损治疗前、中、后行组织病理检查，结束后随访6月，观察疗效。结果：治疗后患者临床疗效评分明显下降（Z＝－3.85，P＜0.05），组织病理表现改善，临床疗效随访6月无变化。结论：中剂量UVA1治疗斑块状硬皮病疗效肯定。     

TGF- β1、ET-1及Ang Ⅱ在博来霉素诱导小鼠硬皮病模型体内的表达

采用免疫组化法、酶联免疫法检测20只博来霉素诱导硬皮病小鼠动物模型皮肤、血浆及肺组织TGF-β1、ET-1、AngⅡ的表达水平,并以20只正常小鼠作为对照.①免疫组化法检测博来霉素诱导硬皮病小鼠皮损中TGF-β1表达程度高于对照,纤维化肺组织中表达程度也高于对照；皮损及纤维化肺组织中ET-1表达程度也高于对照；但AngⅡ在皮损及纤维化肺组织中表达与对照无明显差异.②ELISA法检测博来霉素诱导硬皮病小鼠血浆及肺组织中TGF-β1表达上调；ET-1在血浆中表达水平两组无显著差异,在肺组织中表达水平明显高于对照；AngⅡ在血浆及纤维化肺组织中表达均明显高于对照.提示博来霉素诱导硬皮病小鼠发病与上述细胞因子异常表达有关.     

长波紫外线照射对HaCaT细胞iNOS/NO表达的影响

目的 探讨不同剂量长波紫外线 （UVA） 照射HaCaT细胞后不同时间点诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）的表达情况。方法 1 J/cm2、5 J/cm2和10 J/cm2 UVA照射HaCaT细胞后继续培养24 h、48 h和72 h,倒置相差显微镜下观察细胞形态的变化;分别用RT-PCR、Western印迹和Griess法检测HaCaT细胞iNOS mRNA、蛋白及NO的表达。结果 所有UVA剂量组HaCaT细胞iNOSmRNA在光照后24 h有表达,48 h达高峰,72 h后下降,各时间点间表达量差异有统计学意义（P < 0.05）;1 J/cm2 UVA照射后3个时间点均未见iNOS蛋白表达,而5 J/cm2和10 J/cm2 UVA照射后iNOS蛋白在24 h增加,48 h达高峰且显著高于24 h（P < 0.05）,照射后72 h无iNOS蛋白表达。所有UVA剂量组HaCaT细胞NO表达量在24 h升高,48 h显著升高,72 h平稳升高,3个时间点NO表达量均比正常对照组明显增加（P < 0.05）。对照组HaCaT细胞无iNOS mRNA和蛋白表达,NO表达量低。结论 HaCaT细胞iNOS和NO的表达变化与UVA照射存在时间和剂量关系。     

皮肤光老化动物模型的建立和超微结构观察

目的:构建光敏剂结合UVA诱导的小鼠皮肤光老化模型。方法:ICR小鼠分为3组:模-型组外用1%甲氧沙林溶液(8-MOP)后进行UVA照射、单纯UVA照射组和空白对照组。照射后观察皮肤外观表现、病理学变化和超微结构特点,确定各组诱导皮肤光老化进程的累积照射剂量和时间。结果:单纯UVA照射组在第45天,UVA剂量约720 J/cm~2时,肉眼观察皮肤外观、组织病理方面和-超微结构都呈现比较典型的光老化表现;模型组(8 MOP/UVA)小鼠在第3天,UVA累积剂量约47 J/cm~2时,透射电镜下可见角质形成细胞和基底层黑素细胞的显著凋亡(核固缩);第5天,UVA累积剂量约78 J/cm2时,病理示:真皮层部分弹性纤维变性;随着照射剂量的增加,第6天UVA累积剂量达95 J/cm~2时,出现典型的光老化表现,透射电镜下可清晰观察到弹性纤维和胶原蛋白束的病理改变。结论:8-MOP/UVA可以快速诱导小鼠皮肤光老化模型的建立。     

miRNA-1246靶向MAPK14在长波紫外线诱导人成纤维细胞光老化中机制的研究

【摘要】 目的 探讨长波紫外线（UVA）诱导人成纤维细胞（HSF）光老化中miRNA-1246的表达及上调miR-1246表达对靶基因MAPK14及细胞老化的影响。方法 HSF分离自苏州大学附属儿童医院收集的健康儿童包皮环切术后皮肤标本,每日以10 J/cm2 UVA照射HSF,在初次照射及照射3、7、14 d采用实时定量PCR检测miR-1246的表达。将HSF细胞分为空白对照组、UVA组、miR-1246组、UVA + miR-1246组,通过慢病毒转染上调miR-1246的表达和照射UVA 14 d后,收集各组细胞,采用MTT检测细胞增殖活性,β半乳糖苷酶染色检测细胞老化,RT-PCR和Western印迹检测MAPK14、基质金属蛋白酶1（MMP-1）的表达。多组间均数的比较用单因素方差分析,组间两两比较采用LSD-t检验。结果 在照射7 d、14 d时,UVA组HSF的miR-1246相对表达水平（4.69 ± 0.85、3.59 ± 0.45）均低于空白对照组（8.42 ± 0.75、7.61 ± 0.49）,差异均有统计学意义（t = 29.84、31.93,均P < 0.01）。上调miR-1246的表达和照射UVA后,MTT结果显示,空白对照组、UVA组、miR-1246组、UVA + miR-1246组细胞增殖活性（0.82 ± 0.03、0.23 ± 0.02、0.81 ± 0.02、0.61 ± 0.02）差异有统计学意义（F = 34.90,P < 0.05）,UVA组低于空白对照组（t = 28.14,P < 0.01）,UVA + miR-1246组低于miR-1246组（t = 10.61,P < 0.01）,高于UVA组（t = 20.30,P < 0.01）。β半乳糖苷酶染色检测显示,4组老化细胞阳性率（3.93% ± 1.11%、81.29% ± 2.53%、5.50% ± 1.15%、54.13% ± 2.09%）差异有统计学意义（F = 16.14,P < 0.05）,其中UVA组高于空白对照组（t = 48.46,P < 0.01）,而UVA + miR-1246组高于miR-1246组（t = 35.31,P < 0.01）,低于UVA组（t = 14.32,P < 0.01）。RT-PCR和Western 印迹均显示,4组细胞MAPK14、MMP-1的mRNA、蛋白相对水平差异均有统计学意义（均P < 0.05）,其中UVA组高于空白对照组（P < 0.05）,UVA + miR-1246组高于miR-1246组（P < 0.05）,低于UVA组（P < 0.05）。结论 UVA照射诱导的HSF光老化中,miR-1246的表达受到抑制,上调miR-1246的表达可抑制其靶基因MAPK14及老化相关蛋白MMP-1的表达,起到抗细胞光老化的作用。     

强功率UVA1对兔耳增生性瘢痕模型影响的机制研究

目的 探讨不同剂量UVA1对全层皮肤缺损诱导的兔耳增生性瘢痕模型的影响的可能机制。方法 24只新西兰白兔双耳腹面手术切除2 cm × 5 cm全层皮肤至筋膜建立兔耳增生性瘢痕模型后,随机分成4组,每组6只,将每只兔左耳分别于伤后即刻（U0）、1个月（U1）、2个月（U2）、3个月（U3）开始强功率UVA1照射,右耳为非照射组;各照射组分为两个剂量组［60 J/cm2（M）,110 J/cm2（H）］,分别在照射前后进行MMP-1、TIMP-1、TGF-β1、PCNA和α-SMA的免疫组织化学染色和透射电镜检查。结果 与照射前比较,中高剂量组照射后瘢痕处MMP-1表达：U1组分别为10.43 ± 1.61、11.16 ± 1.57;U2组分别为8.63 ± 2.61、7.33 ± 1.58;U3组分别为5.74 ± 1.43、3.11 ± 0.27;均显著增加（P < 0.05）。TGF-β1表达：U1组分别为12.51 ± 4.13、12.02 ± 5.02;U2组分别为18.74 ± 6.42、19.69 ± 4.52;U3组分别为20.51 ± 1.78、29.45 ± 6.55。PCNA表达：U1组分别为2.67 ± 0.44、2.04 ± 0.65;U2组分别为4.50 ± 0.97、5.82 ± 0.68;U3组分别为7.45 ± 1.47、8.16 ± 1.07;均显著降低（P < 0.05）。只有高剂量组显著降低TIMP-1表达,U1组为12.74 ± 4.58,U2组为15.17 ± 3.26,U3组为20.72 ± 3.31（P < 0.05）。只有U1H、U1M、U2H组α-SMA表达（1.33 ± 0.34、2.04 ± 0.20、3.60 ± 1.75）显著降低（P < 0.05）。U0组：与对照组比较,高剂量组MMP-1表达（2.25 ± 0.38）显著降低（P < 0.05）,而TGF-β1表达（23.90 ± 2.92）显著增加（P < 0.05）。中、高剂量组PCNA（7.42 ± 0.65、7.59 ± 0.31）、TIMP-1（29.82 ± 1.94、33.51 ± 1.19）及α-SMA表达（6.31 ± 0.61、2.97 ± 0.56）均显著增加（P < 0.05）。透射电镜结果显示：强功率UVA1照射后胶原纤维直径变细;成纤维细胞胞质变少,细胞器欠发达,多数为静止的纤维细胞。结论 UVA1对瘢痕的作用可能与其抑制TGF-β1、TIMP-1、PCNA和α-SMA的表达,同时促进MMP-1的表达,从而促进基质蛋白降解及抑制成纤维细胞和肌成纤维细胞的增值活性有关。如果UVA1过早干预,则会出现相反的结果。     

MAPK信号通路调控长波紫外线诱导的皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K表达

【摘要】 目的 研究MAPK信号通路调控长波紫外线（UVA）诱导皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K（CatK）的表达。 方法 原代培养的皮肤成纤维细胞取自儿童包皮。Western印迹检测10 J/cm2 UVA照射前及照射后0.75、1.5、3和6 h皮肤成纤维细胞中磷酸化JNK（p-JNK）、JNK、磷酸化P38（p-P38）、P38蛋白的表达。800 nmol/L SP600125（SP）、10 μmol/L SB203580（SB）分别孵育皮肤成纤维细胞,实验分为无UVA照射的对照组、SP组、SB组及10 J/cm2 UVA照射的对照（UVA）组、UVA-SP组、UVA-SB组。先以Western印迹检测各组UVA照射后1.5 h磷酸化c-Jun（p-c-Jun） 和磷酸化MAPKAPK2（p-MAPKAPK2）表达,再以RT-PCR 和Western印迹检测各组照射后48 h CatK mRNA、蛋白的表达。 结果 皮肤成纤维细胞在UVA照射后0.75、1.5 h,p-JNK表达的灰度值分别为4.77 ± 0.19和4.68 ± 0.09,p-P38分别为2.44 ± 0.13、2.30 ± 0.04,均较照射前（p-JNK为3.2 ± 0.27,p-P38为1.61 ± 0.08）显著升高（均P ＜ 0.05）;而在照射后3、6 h的表达与照射前相比差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。p-c-Jun在UVA-SP组表达（2.55 ± 0.48）、p-MAPKAPK2在UVA-SB组表达（1.16 ± 0.12）均显著低于UVA组（分别为4.85 ± 0.96和2.46 ± 0.09）,均P ＜ 0.05。UVA-SP组、UVA-SB组CatK mRNA、蛋白的表达分别降为UVA组的38.9%、28.7%和55.7%、49.6%（P ＜ 0.05）,UVA-SP组CatK mRNA、蛋白的表达也均显著低于UVA-SB组（P ＜ 0.05）。 结论 JNK和P38信号通路在调控UVA上调的皮肤成纤维细胞CatK表达中起重要作用。     

Animal model of sclerotic skin. III: Histopathological comparison of bleomycin-induced scleroderma in various mice strains

Abstract We have recently established a mouse model for scleroderma by repeated local bleomycin treatment. In this study, we compared the susceptibility to bleomycin in the development of dermal sclerosis among Balb/c, C3H/He, C57BL/6J, A/J, DBA/2, B10.BR, B10.A, and B10.D2 mouse strains. After either bleomycin or PBS treatment, skin from the injection site was histologically examined. Dermal sclerosis was induced by bleomycin treatment for 4 weeks in all of the strains examined. In particular, C3H/He, DBA/2, B10.D2 and B10.A mice developed intense dermal sclerosis characterized by deposition of homogeneous material in the dermis and thickened collagen bundles. Dermal thickness showed a more than twofold increase following bleomycin treatment, as compared with PBS treatment, except in C57BL/6J and DBA/2 mice. In A/J, C3H/He, B10.A, and B10.D2 mice, dermal thickness showed a more than 2.5-fold increase. Mast cell numbers in sclerotic skin were significantly greater than in PBS-treated skin in Balb/c and B10.A mice after 4 weeks of treatment. We also examined whether bleomycin treatment for 3 weeks could induce dermal sclerosis in C3H mice. Histological examination revealed that epidermal thickness as well as dermal sclerosis was increased in C3H mice following bleomycin treatment for 3 weeks. Increased hydroxyproline content as well as mRNA expression of α1(I) collagen, as determined by Northern blot analysis, were observed following bleomycin treatment. Taken together, we conclude that C3H/He and B10.A mouse strains are bleomycin-’susceptible’, and these strains are considered to be a suitable experimental model of bleomycin-induced scleroderma. Received: 8 June 2000 / Revised: 1 August 2000 / Accepted: 4 September 2000     

IL-1对UVA辐射成纤维细胞基质金属蛋白酶表达的影响机制探讨

目的探讨IL1(IL1α,IL1β)对长波紫外线(UVA)辐射后成纤维细胞基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)表达的影响机制。方法用ELISA法检测UVA辐射后成纤维细胞培养上清MMP1和MMP2的表达。接着用IL1α和IL1β分别处理UVA辐射后的成纤维细胞,用Western免疫印迹法检测其丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活性;用RTPCR方法检测cfos和cjun的mRNA表达。结果不同剂量UVA(0,1,5,10J/cm2)辐射的成纤维细胞分泌MMP1逐渐上升,对MMP2分泌没有影响。IL1α和IL1β(0,1,10,100ng/ml)促进UVA(10J/cm2)辐射成纤维细胞的MAPK活性表达,并以剂量依赖方式促进cjun的mRNA表达。IL1α还显著增加cfosmRNA表达,但IL1β对cfosmRNA表达无明显影响。IL1α和IL1β促进UVA辐射成纤维细胞分泌MMP1,于100ng/ml时有显著性差异(P均<0.05),但对MMP2分泌无明显影响。结论UVA辐射成纤维细胞分泌MMP1增加,对MMP2分泌没有影响。IL1(IL1α和IL1β)通过促进MAPK活性和cjunmRNA表达,IL1α还促进cfosmRNA表达使UVA辐射成纤维细胞MMP1表达增加,表明IL1在皮肤光老化的真皮胶原过度降解中发挥着重要的作用。     

枸杞多糖通过调控α-MSH蛋白的表达抑制UVA诱导的细胞黑色素生成

 目的 探究枸杞多糖（LBP）对UVA诱导细胞黑色素生成的影响。 方法 用不同浓度LBP(0、20、50、100、200、300、400、500 μg/mL)处理HaCaT细胞和HEM细胞，采用CCK8法检测对细胞增殖的影响，筛选出适宜浓度的LBP进行后续实验。使用300 μg/mL LBP、20 μM N-1A处理被30 J/cm2 UVA照射的HaCaT细胞和HEM细胞，多巴氧化法测定细胞中tyrosinase活性、NaOH裂解法测定黑色素含量。通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测 LBP对细胞内α-MSH蛋白表达的调控，应用Western blot检测细胞黑色素生成相关蛋白MITF、tyrosinase、TRP1和TRP2的表达水平。 结果 CCK8实验结果提示，当LBP浓度等于300 μg/mL时，HaCaT细胞和HEM细胞的增殖无明显变化（t=1.89、0.07，P=0.107、0.947）。相较于UVA组， LBP在体外可以明显抑制UVA诱导的HEM细胞中tyrosinase活性（t=33.19，P=0.001）以及减低黑色素含量（t=7.13，P=0.019）；ELISA结果提示，UVA照射可以促进HaCaT细胞和HEM细胞的α-MSH蛋白分泌（t=-3.79、-3.41，P=0.043、0.046）， LBP能够抑制HaCaT细胞和HEM细胞中α-MSH的蛋白表达水平（t=3.75、3.41，P=0.044、0.048）；Western blot结果显示， LBP可显著下调UVA诱导的黑色素生成相关蛋白MITF、tyrosinase、TRP1和TRP2的表达。 结论 LBP可显著抑制UVA诱导的细胞黑色素生成，其机制可能通过调控HaCaT细胞和HEM细胞中α-MSH蛋白水平实现。