大肠杆菌不耐热肠毒素突变体LTR72增进肽抗原诱生CD4+T细胞和分泌γ干扰素的能力

皮肤富含免疫活性细胞 ,将抗原与佐剂一同涂于皮肤上是新近开发的一种能将抗原送至表皮免疫活性细胞的无针、无痛、非侵入性免疫接种方法。作者研究了两种大肠杆菌不耐热肠毒素 ( LT)突变体 LTR72和L TK6 3的免疫原性以及其与肽抗原联合用于皮肤时的佐剂性。研究所用的肽抗原为合成肽 TT:830 - 84 3和 HA:30 7- 31 9(分别带有破伤风毒素和流感病毒血凝素的 T辅助细胞表位 )。所用动物为 6～ 8周龄 BALB/c小鼠。　　结果显示 :( 1 )两种 LT突变体均能诱生血清抗体应答 ,加强免疫后 ,L TR72的免疫原性强于 L TK6 3。若与 LT诱导的…     

麻疹疫苗新策略

已设计出代表麻疹病毒(MV)糖蛋白表位的合成肽,以诱生中和抗体和保护性抗体。那些可逃避被动获得的抗全病毒抗体识别的肽,有可能用作“前疫苗”的成分,该疫苗可用于儿童期早期而不必顾及存留的母体抗体。与重组蛋白疫苗不同,表位疫苗可以设计使之适合于随后用常规减毒活疫苗加强免疫。合成肽可能只诱生短期免疫,但它们能封闭幼婴中的麻疹易感豁口直至9～15月龄可接种常规减毒活疫苗为止。     

麻疹病毒多肽的免疫原性与佐剂的影响

由相关B和T细胞表位组成的多肽抗原，可诱生针对病原体的保护性免疫应答，已作为安全的、可供选择的疫苗抗原，用来预防多种疾病。但这种化学合成的低分子量抗原比蛋白或全病原体疫苗的免疫原性弱。用来防御麻疹病毒的基于表位的肽抗原正在研制中。克罗地亚免疫学研究所Halassy等对能否通过免疫程序提高基于表位的肽抗原的免疫原性以及单独用肽聚糖单体（PGM）佐剂或PGM与油佐剂联用能否增强多肽特异性体液免疫应答进行了研究。     

Epimmune公司开发疟疾和肝炎表位疫苗

美国Epimmune公司利用其合成的通用辅助性T细胞（HTL）表位——Pan-DR表位（Padre）肽研制出治疗或预防疟疾和肝炎的表位疫苗。 在第一项研究中,用与尤氏疟原虫（Py）抗原的单个B细胞表位连接的Padre分子接种小鼠,可诱生持久的高滴度IgG抗体应答。这种环子孢子蛋白（PyCSP）-Padre疫苗可保护75％的小鼠抵抗Py子孢子攻击,与PyCSP-多种抗原肽（MAP）疫苗的结果相仿。由恶性疟原虫和PyCSP-Padre肽诱生的抗体在体外可阻止子孢子侵入肝细胞。目前,研究人员正在确定疫苗接种的时间和方法。     

口服合成肽诱导的全身免疫应答

麻疹病毒融合蛋白的288-302位残基为小鼠辅助性T细胞表位,而404-414位残基为B细胞表位。作者将T细胞表位的氨基末端或者羧基末端通过两个甘氨酸臂分别与B细胞表位线性连接,合成两个嵌合肽TT/B和B/TT。以每剂2mg,加或不加霍乱毒素(CT)佐剂,经胃管口饲TO品系小鼠2～3次,间隔3周。采集接种小鼠血清,以合成肽包被的间接ELISA法测定其抗体滴度,并与~(125)I标记合成肽作液相放射免疫试验测定抗体对B细胞表位的亲和力,观察嵌合肽的免疫原性及小鼠的全身免疫应答。 结果显示,口服嵌合肽加CT的小鼠对两种嵌合肽和B细胞表位(404-414)肽均有抗体应答,且抗体特异性主要针对嵌合肽中的B表位部分;而口服嵌合肽加生理盐水的小鼠未产生抗体应答。     

利用多种合成载体配以已准许的佐剂来增强避孕疫苗的免疫原性

人绒毛膜促性腺激素 ( h CG)由着床前后的胚胎产生 ,是早期妊娠的关键。用化学方法连接蛋白质载体已被用作克服对 h CG免疫耐受的策略。与破伤风类毒素连结的 h CG B亚单位 ( TT- h CG)在动物和人体中都能诱生抗 h CG抗体。但在有些个体中没有达到保护性抗体水平。其中一个原因可能是载体介导的表位抑制作用 ,但现已表明对复合蛋白质抗原的 T细胞应答往往针对少量或单个免疫显性表位。因此 ,本文研究了三种无选择性Th表位作为载体的可行性。　　三种 Th表位分别是 :与麻疹病毒融合蛋白 2 88- 30 2位残基一致的 p MVF,与流感病毒血凝…     

有希望的多价疟疾疫苗

美国疾病控制和预防中心（CDC）和印度的研究者研制了一种疟疾疫苗,此疫苗能攻击处于复杂生活周期各期的疟原虫。研究者构建了一种能编码12个B细胞表位、6个T细胞表位和3个细胞毒性T淋巴细胞表位的合成基因,这些表位来自9个期特异性疟原虫抗原。疫苗与不同佐剂一起接种。家兔间隔3周肌注4剂疫苗,疫苗能诱生高水平和持久的抗体应答,第4剂后达到高峰。14周内抗体一直维持高水平,从13周到50周抗体水平下降10～15倍。     

麻疹疫苗新策略

已设计出代表麻疹病毒（MV）糖蛋白表位的合成肽，以诱生中和抗体和保护性抗体。那些可逃避被动获得的抗全病毒抗体识别的肽，有可能用作“前疫苗”的成分，该疫苗可用于儿童期早期而不必顾及存留的母体抗体。与重组蛋白疫苗不同，表位疫苗可以设计使之适合于随后用常规减毒活疫苗加强免疫，合成肽可能只诱生短期免疫，但它们能封闭幼婴中的麻疹易感豁口直至9－15月龄可接种常规减毒活疫苗为止。     

乳胶过敏原Hev b1二级结构及抗原表位的预测

目的利用生物信息学软件预测乳过敏原Hevb1的二级结构及B细胞和T细胞的抗原表位。方法在Uniprot数据库中获得Heyb1蛋白序列,通过GOR4在线软件预测其二级结构;采用DNAStar的Protean模块预测Hevb1蛋白的亲水性、表面可及性、柔韧性及抗原指数,从而综合预测其B细胞表位;应用NetMHCⅡ2．2在线服务器预测Hevb1蛋白的T细胞表位。结果乳胶过敏原Heyb1的B细胞优势抗原表位为1—14,40一46;T细胞优势抗原表位为56—64,76—84,97—116。结论通过生物信息学分析获得乳胶过敏原Hevb1的B细胞和T细胞优势抗原表位,可为乳胶过敏原Hevb1的抗体设计、过敏原性改浩等研奔打下略宴的基础．     

CDAP活化多糖用于多糖-蛋白结合菌苗制备

许多细菌的荚膜多糖为T细胞非依赖性2型抗原(TI-2抗原),婴幼儿对TI-2抗原的免疫应答很差,不能产生具有保护水平的血清抗体.当TI-2抗原与蛋白共价偶联后,能转变为T细胞依赖性抗原,并能在婴幼儿中诱生抗体.多糖在与蛋白结合之前,通常需先活化.作者用1-氰基-4-二甲胺基吡啶(钅翁)四氟硼酸盐(CDAP)活化多糖.先用乙腈将CDAP配成100mg/ml的溶液,随后加入到多糖水溶液中,在有三乙胺存在的条件下,或用己二胺作间隔基,或直接与蛋白〔牛血清白蛋白(BSAD)〕结合.分别测定多糖的衍生度和含量及蛋白的含量,同时比较多种因素(时间、pH、CDAP、多糖和蛋白量)对多糖活化的影响.用结合物免疫DBA/2小鼠,用ELISA法测定其免疫原性.     

前列腺特异性抗原细胞毒性T淋巴细胞表位多抗原肽的抗肿瘤免疫效应研究

目的:研究前列腺特异性抗原(PSA)来源的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位多抗原肽对前列腺癌的抗肿瘤免疫效应。方法:体外分离培养来源于人白细胞抗原(HLA)-A2.1阳性的健康志愿者外周血单个核细胞的成熟树突状细胞(DC),按单抗原肽组(PSA146-154)、多抗原肽组(PSA146-154-MAP4)、阴性对照组(人类免疫缺陷病毒表位肽HIVpol476-484)培养制备相应的效应细胞,以前列腺癌细胞株LNCaP、DU-145和结肠癌SW480细胞为靶细胞,采用标准4 h51Cr释放试验检测不同效应细胞/靶细胞细胞个数比(效/靶比,10∶1、20∶1、40∶1、80∶1)的特异性杀伤效应(以特异性杀伤效率为指标),酶联免疫斑点(ELISPOT)法检测各组效应细胞分泌γ干扰素(IFN-γ)的CD8+效应细胞数量。结果:各组效应细胞对DU-145、SW480细胞均无特异性杀伤效应,单抗原肽组和多抗原肽组效应细胞对LNCaP细胞具有明显的特异性杀伤效应,且多抗原肽组强于单抗原肽组,与效/靶比呈正相关。与阴性对照组比较,单抗原肽组和多抗原肽组分泌IFN-γ的CD8+效应细胞数量明显增加;与单抗原肽组比较,多抗原肽组分泌CD8+细胞数量明显增加(P<0.05)。结论:PSA多抗原肽能诱导机体产生强于单抗原肽的PSA特异性抗肿瘤免疫效应,并可以在一定程度上增强非特异性的抗肿瘤效果。     

人对HIV-1gp160亚单位疫苗的CD4~+细胞溶解T淋巴细胞应答

在理想的情况下,由纯化的1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)外膜蛋白重组体制成的亚单位疫苗应能诱生抗原特异性记忆CD4~+T细胞,后者能帮助抗原特异性B细胞     

合成短肽与人类相容性佐剂诱导的抗HIV-1蛋白的CTL应答

全球性预防艾滋病的希望寄托于开发有效的疫苗。诱导抗不同人类免疫缺陷病毒( HIV)表位的抗体应答和广泛的细胞毒性 T细胞 ( CTL)应答可消除感染初期宿主体内的病毒。为使机体产生强有力的免疫应答 ,作者使用合成短肽与免疫刺激剂佐剂一同接种转基因小鼠 ,观察了抗 HIV- 1蛋白 CTL应答的诱导情况。　　作者合成了 6种 HIV短肽 ( RT4 76 -484、 p1 777- 85、 gp1 6 0 31 8- 32 7、 RT346 -354、gp4 1 81 4 - 82 3及 RT956 - 96 4) ,将合成肽同 1 4 k Da( D,L-聚乳酸 -乙醇酸共聚物( PL GA)制成微球。微球的大小通过激光散射技术…     

人α-半乳糖苷酶的表达抑制NIH 3T3细胞主要异种抗原表位Galα（1，3）Gal的生成

目的：检测人α-半乳糖苷酶在NIH3T3细胞系中对Gal抗原表位生成的抑制作用、方法：流式细胞术比较G抗原、H抗原和人天然抗体(IgG和IgM)的表达水平．Western blot检测G抗原糖蛋白的表达。四唑盐(MTT)比色试验检测NIH3T3细胞在人血清介导的裂解作用下的活力．结果：克隆了人α-半乳糖苷酶并在NIH3T3细胞上建立了永久细胞系．Western blot结果表明，在表达人α-半乳糖苷酶的NIH3T3细胞中，人的天然抗体与细胞表面糖蛋白的结合能力显著降低，甚至完全消失．同时凝集素Gs-IB4结合分析也进一步证明人α半乳糖苷酶的稳定表达能有效地抑制NIH3T3细胞上Gal抗原表位的生成．流式细胞检测结果则表明，由Gal抗原表位与人IgG，IgM和3C3c介导的异种反应性分别降低了73．4％，22．3％和47．9％，随后发生的细胞裂解反应也被显著抑制、结论：人α半乳糖苷酶能够有效抑制鼠成纤维细胞NIH3T3细胞表面Gal抗原表位的生成以及Gal抗原表位与人天然抗体共同介导的免疫排斥。     

丙型肝炎脂质体多肽疫苗诱导转基因小鼠产生CD8~+T细胞[英]

慢性丙型肝炎患者的T细胞免疫功能低下或不足是丙型肝炎病毒(HCV)持续存在的主要原因。瑞士风湿病与临床免疫学/变态反应医院Engler等应用脂质体包裹HCV的不同T细胞表位多肽,免疫HLA-A2.1转基因小鼠,观察其激活和诱生针对不同HCV表位的T细胞应答的能力。将200mg/ml的大豆卵磷脂、25mg/ml的胆固醇、1.2mg/ml的DL-α-维生素E共同溶解在体积比为1∶1的甲醇/亚甲基氯化物中,再分别与HCV1a基因型的10种CD8+T细胞表位多肽(4mg/ml)混合,制得包裹有HCV不同CD8+T细胞表位的脂质体多肽疫苗。将HBV核壳蛋白的一段多肽或PADRE多肽添加到…     

26价A群链球菌疫苗的免疫原性

A群链球菌性咽炎是学龄儿童最常见的细菌性感染。M蛋白是 A群链球菌的主要毒力决定簇和保护性抗原。每种 M蛋白的型特异性由位于氨基末端 40～ 50个氨基酸残基上的表位决定。因此 ,作者通过联合氨基末端M蛋白肽 ,构建了 2 6价 M蛋白疫苗 ,并用此疫苗进行免疫接种以确定其诱生保护性抗体的可行性。　　作者用聚合酶链反应 ( PCR)产生的 M蛋白或 Spa片段构建了 4种杂交 DNA分子。将完整的杂交 DNA分子与表达质粒p T5连接后用于转化大肠杆菌 JM1 0 5株。然后通过层析、电泳等步骤纯化获得的重组多价疫苗组分融合蛋白和每个重组二聚体 …     

基于配子抗原的合成肽避孕疫苗的抗原性及免疫原性

乳酸脱氢酶 C4同功酶 ( L DH- C4)和透明带糖蛋白 3( ZP3)分别是精子和卵子的独特 B细胞表位 ,因此 ,被认为是疫苗的候选物。为进一步提高疫苗的种属特异性 ,作者将B细胞表位合成肽与多种辅助性 T细胞表位连接构建成候选疫苗 ,并对不同疫苗候选物的抗原性进行了研究。　　以来源于狐狸的 L DH- C4的序列肽ENL IEEDKSQ ( B1) (与其他动物包括人类的序列一致 )作为 B细胞表位 ,与白喉类毒素载体蛋白 ( T细胞表位 )连接后作为疫苗候选物。将其免疫狒狒后使生殖力降低 75 %,换用破伤风类毒素作为载体并且用 GPSL序列连接两个表位也…     

鼻内免疫麻疹病毒合成肽诱导的全身性免疫应答

诱导强的粘膜和全身性免疫力对于抵抗以呼吸道途径侵入体内的传染因子最为重要。一些动物和人体研究表明,通过鼻内免疫,可提供对一些病毒和细菌性粘膜病原体的免疫力。鼻内免疫的优点是能刺激粘膜和全身性免疫力,简便、安全,可用于大规模人群免疫;此外,共同粘膜免疫系统的存在使在一处粘膜诱生的保护免疫应答可在其他粘膜处表现出来。 作者用含麻疹病毒融合蛋白中2个T细胞表位拷贝和1个B细胞表位拷贝的嵌合肽（TTB）鼻内接种小鼠（不用佐剂）,结果     

黑素瘤抗原-3表位及基因治疗研究进展

<正>黑素瘤抗原-1(Melanoma antigen-1,MAGE-1)是Vander Bruggen等[1]于1991年在研究恶性黑素瘤时发现的人类第一个肿瘤特异性抗原,现已形成拥有24个结构上相似的MAGE基因成员的家族[2]。MAGE蛋白及其细胞毒性T淋巴细胞(Cytolytic T lymphocyte,CTL)表位不仅能在体外有效诱     

由B和T细胞决定簇共聚作用构建合成疫苗

作者把两种分别含B细胞和T细胞特异性决定簇的合成肽共聚,并对此共聚体的免疫效果进行了观察。本实验中采用4种合成肽:24型化脓性链球菌M蛋白(M24)部分氨基酸的合成肽S-34,合成的HBsAg多肽H(99-121)、H(110-137)及合成的前S多肽(120-145)。以腹股沟淋巴结LN)细胞增殖试验检测T细胞决定簇,有限稀释分析法估计抗原特