578.2 nm激光照射对兔视网膜的损伤效应研究

研究578.2 nm激光照射对兔视网膜的作用特点,以新西兰白兔5只10眼为实验对象,铜蒸汽激光(578.2 nm)通过裂隙灯照射兔视网膜后极部,照射时间为100 s,光斑直径为2 mm,照射剂量分别为60 J/cm2、80 J/cm2、100 J/cm2、120 J/cm2、160 J/cm2、200 J/cm2,每组4个光斑。照后1 h及24 h进行眼底照相及光镜观察。照光后可见,随激光功率密度的增加,兔视网膜的损伤也逐渐加重,并且照后24 h的损伤要重于照后1h。80 J/cm2和60 J/cm2在照后1 h和24 h均未发现明显改变。578.2 nm激光照射白兔后的主要病理学改变位于脉络膜。因此,以578.2 nm激光作为光动力治疗眼底疾病的光源时,照射剂量不宜超过80 J/cm2。     

光化学反应诱导大鼠视网膜水肿模型

目的:通过静脉注射光敏剂Erythrosin B联合激光照射诱导大鼠视网膜水肿模型,并观察该模型中大鼠视网膜及血管形态改变.方法:大鼠尾静脉注射光敏剂Erythrosin B后,使用532nm Nd:YAG激光(1.95±0.05 mw)照射大鼠视网膜8分钟.分别于建模后第1、2、3、5、7及14天进行眼底照相、眼底荧光造影(FFA)及视网膜光学相干断层扫描(OCT)检查.并在OCT图像上测量大鼠视网膜厚度(RT).结果:眼底照相、FFA及OCT结果显示大鼠视网膜在激光照射后可立即出现血管损伤及视网膜厚度增加,但未发现视网膜血管栓塞.激光照射前RT为219±2 μm,激光照射后第1天RT即增加至283±6μm,并在第2天到达顶峰(302±7μm),之后开始下降,至第5天恢复到激光照射前水平(234±9 μm),到第14天时视网膜发生明显萎缩,RT较激光处理前减小(198±6μm).结论:这一通过光化学反应诱导的视网膜水肿模型具有可靠及可重复性,可被运用于视网膜水肿的病理学及动力学研究.     

脉冲1.338μm激光角膜损伤效应研究

目的:实验研究脉冲1.338μm激光的角膜损伤效应,确定其损伤阈值,并与10.6μm激光角膜损伤特点进行比较。方法:采用输出波长1.338μm、脉冲宽度5 ms的Nd:YAG激光为照射光源,角膜光斑直径1.7 mm,以不同剂量的激光照射新西兰白兔角膜,于照后1 h观察角膜损伤情况,统计损伤发生率,采用加权概率单位法计算损伤发生率为50%时所对应的激光剂量,即损伤阈值ED50。在1.5倍阈值剂量下比较该激光与10.6μm激光角膜损伤的特点。实验中注意观察晶状体和眼底是否有损伤。结果:脉冲1.338μm激光角膜损伤阈值为27.0 J/cm2(95%置信区间25.8～28.1 J/cm2)。阈值水平下,角膜损伤斑肉眼观察呈淡淡的灰白色,裂隙灯下可见一与角膜同厚的灰白色反光带,晶状体或视网膜正常;1.5倍阈值剂量下,角膜损伤斑为清晰的瓷白色,裂隙灯下可见一与角膜同厚的白色反光带,同时观察到晶状体前表面白色反光点,但视网膜无变化。与之相比,10.6μm激光角膜损伤在裂隙灯下仅观察到一很窄的亮白反光条,位于角膜表层。结论:脉冲1.338μm激光在光斑直径1.7 mm,脉冲宽度5 ms条件下的角膜损伤阈值为27.0 J/cm2。角膜损伤特点是,损伤斑呈灰白色或瓷白色,累及角膜全层,而10.6μm激光损伤仅累及角膜浅层。     

532 nm波段连续激光对视网膜和脉络膜生物学作用的观察

目的：探讨532nm波段激光不同光剂量参数对眼底组织的损伤特点及损伤阈值。方法：以新西兰兔为实验对象,532nm连续激光照射眼底,眼底光斑直径1．5mm～2．5mm,功率密度从500mW／cm^2：～2400mW／cm^2,照射时间100s～300s,每组参数10个光斑。在照射后1h和24h进行眼底观察和荧光眼底造影,计算三种照射时间情况下视网膜的损伤阈值。结果：在照射后第1h,功率密度为902mW／crn2,照射时间300s开始出现视网膜灰色改变,病灶范围接近照光面积,在24h后颜色微加重。随着照光剂量的增加,在功率密度达1479mW／cm2,照射时间300s,照射后1h出现视网膜灰白色改变,在24h后出现脉络膜出血;而且随着照光剂量的增加,病灶范围扩大越明显。出血量越多。随着照光剂量的减少,当功率密度1003mW／cm^2,照射时间200s时,在照光后1h眼底没有改变,24h出现视网膜灰白色改变,面积接近照光面积;光剂量降低到1002mW／cm^2,照射时间100s时,在24h才出现视网膜灰白色改变,变化的视网膜范围小于照光面积。统计学计算在照射时间为300s、200s和100s,照光后1h视网膜损伤阈值分别为911．15628mW／cm^2,1167．64770mW／cm^2,1513．89832mW／cm^2,24h视网膜损伤阈值分别为827．09664mW／cm^2。1003．73143mW／cm^2,1154．17863mW／cm^2。结论：在光线照射后24h之内,视网膜损伤是一个逐渐增强的过程。从视网膜没有明显可见改变到视网膜出现灰白色可见损伤,变化范围从小于照光面积到接近照光面积,甚至超过照光面积,并出现脉络膜出血,出血面积随着照光剂量的增加而范围变大。相同能量密度的光剂量对视网膜损伤轻重取决于激光的功率密度。     

激光视网膜损伤治疗的实验研究

为研究碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）,地塞松和维生素C对激光视网膜损伤的治疗作用,将采用氩离子激光照射致视网膜损伤的青紫蓝灰兔分9组（照射对照组、球后注射bFGF0.5、1.0、2.0μ.k.3D组和地塞米松1.0m.k.3D;肌肉注射bFGF1.0、2.0、4.0μ.k.D组和地塞米松2.0mg加维生素C200.0mg组）。恒河猴分4组（照射对照组、bFGF1.0、2.0μ.k.3D组和地塞米松1.0m.k.3D组）。通过视网膜电流图、检眼镜、眼底照相机、损伤斑面积测量、光镜和电镜观察,结果表明bFGF对视网膜损伤斑有明显的促进修复愈合作用。     

420～750 nm超连续谱光源和532 nm激光致兔视网膜损伤修复

超连续谱(SC)光源是一种宽光谱、高亮度、眼睛危害大的新光源,有关它致视网膜损伤研究却未见报道。为了观察SC光源致视网膜损伤特点和修复过程,试验将波长420～750 nm的SC光源与532 nm激光进行比较,采用两者平行光入射,在0. 1 s照射时间,3 mm角膜光斑直径条件下,用略高于视网膜损伤阈值的功率照射青紫蓝灰兔视网膜;通过检眼镜和HE染色观察视网膜照后4 h,1、3、7、14 d损伤修复过程。SC光源和532 nm激光致视网膜的损伤在检眼镜下为灰色小圆斑。照后4 h出现视网膜外核层固缩深染,感光细胞外节与视网膜色素上皮层(RPE)粘连;随后RPE层色素增生、损伤的外核层细胞丢失,损伤进行性加重; 3 d后色素细胞开始向外核层和内核层迁移,胶质细胞填充损伤区域。由此可见,波长420～750 nm的SC光源主要损伤视网膜外核层和RPE层,后期色素颗粒和胶质细胞填充损伤区域。其视网膜损伤特点和修复过程与532 nm激光类似。     

810nm弱激光照射对大鼠急性脊髓损伤后巨噬细胞极化的作用研究

本研究构建急性大鼠脊髓夹伤模型,并将大鼠随机分为单纯脊髓损伤对照组及脊髓损伤联合弱激光照射组。照射组应用810 nm波长,150 m W照射功率,照射光斑0.3 cm^2的弱激光对脊髓损伤区进行经皮照射,连续照射3天,7天或14天。应用免疫荧光、免疫印迹实验方法,测定脊髓损伤区巨噬细胞及小胶质细胞的极化表达。应用酶联免疫吸附法测定脊髓损伤区白细胞介素4的表达情况。应用坚牢蓝髓鞘染色测定两组损伤脊髓中髓鞘保留的差异。采用BBB评分对两组大鼠后肢运动功能的恢复进行评估。结果表明,810 nm弱激光对脊髓损伤区连续照射3天,7天后,可显著减少M1型巨噬细胞及其标志物诱导型一氧化氮合酶的表达,在7天时间增加M2型巨噬细胞及其标志物精氨酸酶1的表达。弱激光照射组白细胞介素4的表达明显增加。损伤后14天,弱激光照射组脊髓损伤区髓鞘保留面积比值明显提高。损伤后7天及14天时,弱激光照射组大鼠的BBB评分明显升高。该实验结果表明,810 nm弱激光经皮照射,可增加大鼠急性脊髓损伤区M2型巨噬细胞及小胶质细胞的表达,并减少脊髓损伤后的髓鞘脱失,促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复。     

595 nm脉冲染料激光非损伤嫩肤治疗对皮肤羟脯氨酸含量的影响

羟脯氨酸的含量是反映胶原纤维变化的敏感生化指标.本文利用昆明小鼠作为动物模型,研究不同能量的595 nm脉冲染料激光对皮肤羟脯氨酸含量的影响.20只昆明小鼠随机分为两组,1个实验组和1个对照组.三种能量的激光各照射5次,每次间隔3天,光斑有10%的重叠.照射后测皮肤羟脯氨酸含量的变化,SPSS进行数据分析. 8 J/cm2、10 J/cm2和12 J/cm2组羟脯氨酸含量分别比对照组增加39% 、50% 和58%(p<0.05),12 J/cm2能量组的效果最好,但他们之间没有统计学上的显著差异,表明595nm的脉冲染料激光照射能明显增加皮肤羟脯氨酸的含量,用于非损伤嫩肤治疗是有效的.     

强激光作用下生物组织光致破裂效应的研究

基于激光与生物组织作用时产生的光致破裂效应,利用脉冲激光直接聚焦于孕囊内的胚胎内部,激光产生的光致破裂效应对胚胎心脏造成损伤,造成胚胎的快速死亡,初步证明利用激光进行减胎手术有望成为一种新方法。采用输出波长1 064 nm、脉宽8 ns、单脉冲能量60～96 mJ可调的脉冲激光作用于牛肌肉组织样品,并用光学相干层析成像(OCT)系统测量实验样品的损伤直径和损伤深度,建立了不同的激光参数与被作用样品的损伤直径及损伤深度之间的关系。得出结论:样品的损伤深度和损伤直径与激光的脉冲能量成正相关关系,而与激光的脉冲频率成负相关关系。这对于激光应用于减胎手术时参数的优化和精确控制起到一定的指导作用。     

大鼠脊髓损伤的弱激光治疗参数选择

弱激光在周围神经损伤治疗中取得了理想效果,但在脊髓损伤修复方面的研究很少.本实验应用Allen＇s造模法构建大鼠急性脊髓损伤模型,通过测量穿透功率及组织温度变化筛选出用于脊髓损伤治疗的弱激光照射参数,照射组按照筛选出的参数连续治疗14 d,于术后1、3、7、14、21 d应用BBB评分法评价大鼠后肢运动功能的恢复情况,苏木精-伊红染色（HE染色）观察脊髓病理变化并测量空洞面积.结果显示应用筛选出的照射参数（810 nm、光斑面积0.2 cm2、500 mW/cm2、510 J/cm2）连续照射14 d,术后21 d照射组的运动功能评分显著高于未照射组（P＜0.05）,术后7、14、21d照射组脊髓空洞面积显著小于未照射组（P＜0.05）.结果表明810 nm、光斑面积0.2 cm2、500 mW/cm2、510 J/cm2的弱激光照射能促进急性脊髓损伤大鼠后期运动功能的恢复.     

国产Nd:YAP激光组织热损伤效应的比较研究

目的:通过比较1 341 nm Nd:YAP与临床常用激光器脉冲Nd:YAG和连续Nd:YAG对皮肤、肌肉、静脉和肝脏组织的热损伤效应,了解Nd:YAP激光的作用特点,为其临床应用提供实验依据。方法:以大鼠作为实验对象,分为皮肤、肌肉组和静脉、肝脏组。皮肤、肌肉组:Nd:YAP激光、连续和脉冲Nd:YAG选择能量密度1000 J/cm2、2 000 J/cm2,静脉、肝脏组采用Nd:YAP激光和连续Nd:YAG两种激光器,能量密度选择500 J/cm2和1 000 J/cm2,对组织进行非接触式点状照射。照射过程中观察组织变化和损伤直径大小,并于照射后即刻、3天取材做病理切片,光镜下观察病理变化,比较相同能量密度下三种激光器对组织的热损伤和损伤修复情况。结果:皮肤、肌肉组:Nd:YAP激光在1 000 J/cm2条件下对组织的损伤以热凝固效应为主,2 000 J/cm2条件下组织发生明显气化、有一定的切割作用。相同能量密度下,脉冲Nd:YAP激光气化作用较两种Nd:YAG激光显著,而凝固损伤范围较连续Nd:YAG浅,较脉冲Nd:YAG深。肝脏、静脉组:Nd:YAP激光对肝脏的热凝固效应与Nd:YAG激光近似,气化作用明显;Nd:YAP激光对血管及其周围组织的凝固及气化作用均较连续Nd:YAG激光明显。结论:Nd:YAP激光具有良好的凝固与气化作用。     

Nd:YAG激光致视网膜感光细胞损伤及相关基因的表达

目的：观察兔眼视网膜激光损伤后不同时间点感光细胞的改变以及相关基因的表达变化。方法：北京青紫蓝灰兔随机分为正常对照组和激光损伤组,在调Q倍频Nd：YAG激光损伤后不同时间采用超微结构观察、凝胶电泳、TUNEL染色、原位杂交(ISH)以及Northern blot等方法检测了感光细胞损伤特点并分析相关基因的表达改变。结果：电镜、核酸电泳和TUNEL结果表明视网膜感光细胞照射后出现明显的凋亡特征,在伤后不同时间,其分布和强度都有改变。而杂交结果表明c—fos和bax在照后表达增强,尤其以照后第1天为最,而bcl—2和p53在损伤后无明显改变。结论：大量感光细胞的凋亡是临床上低剂量倍频Nd：YAG激光致视网膜损伤、视功能下降的主要机制。c—fos和bax基因的表达可能介导了视网膜细胞凋亡的过程。     

1064nm Nd：YAG激光对5种甲真菌病重要致病菌的作用

目的观察1064nmNd：YAG激光对5种甲真菌病重要致病菌（红色毛癣菌、须癣毛癣菌、白念珠菌、近平滑念珠菌、烟曲霉）生长的影响。方法将各菌的菌悬液均匀点种于培养基上,生长至形成一定大小的菌落,给予不同能量1064nmNd：YAG激光照射,皮肤癣菌类观察激光照射后第1、3、6天菌落生长受抑制的直径变化情况;念珠菌类观察其次代培养存活率的差异;烟曲霉菌悬液铺满整个平皿,观察经不同能量激光照射受抑制的菌落空白处直径大小差异。结果在体外,当激光能量累计达到3200J／cm^2时,可对培养基上生长的以上各菌产生生长抑制作用,且随着能量增大,抑制作用增强,甚至可发生杀灭作用。结论1064nmNd：YAG激光当能量累计达到一定量时可对甲真菌病致病菌产生明显的生长抑制或杀灭作用。     

1．06μm激光致皮肤痛觉效应的研究

目的：研究1．06μm激光所致人手背皮肤的痛觉效应。方法：以输出波长为1．06μm的脉冲Nd：YAG激光照射人手背皮肤,记录每次刺激激光的能量以及受试者的反应。采用加权概率单位算法计算诱发痛觉概率为50％时对应的激光剂量ED50,即为痛觉阈值。改变光斑大小和脉冲宽度,测定三种不同刺激条件下的痛觉阈值,并探索温度对激光所致痛觉效应的影响。结果：当皮肤温度约为30℃,分别使用光斑直径1．20mm、脉冲宽度85μs,光斑直径1．20mm、脉冲宽度20ns和光斑直径2．56mm、脉冲宽度20ns的激光刺激时,痛觉阈值分别为394mJ／mm^2、36．4mJ／mm^2和8．92mJ／mm^2。在第一种刺激条件下,当皮肤温度为25℃时,剂量为383mJ／mm^2的激光诱发痛觉的概率为16．7％;当皮肤温度为39℃时,剂量为361mJ／mm^2的激光诱发痛觉的概率为56．7％。结论：1．06“m激光所致痛觉的阈值随脉冲宽度的减小、光斑面积的增大和皮肤表面温度的增加而减小。     

In Vitro Laser Ablation of Natural Marine Biofilms

We studied the efficiency of pulsed low-power laser irradiation of 532 nm from an Nd:YAG (neodymium-doped yttrium-aluminum-garnet) laser to remove marine biofilm developed on titanium and glass coupons. Natural biofilms with thicknesses of 79.4 ± 27.8 μm (titanium) and 107.4 ± 28.5 μm (glass) were completely disrupted by 30 s of laser irradiation (fluence, 0.1 J/cm²). Laser irradiation significantly reduced the number of diatoms and bacteria in the biofilm (paired t test; P < 0.05). The removal was better on titanium than on glass coupons.     

应用Nd：YAG激光消除晶体后囊膜皱褶

目的：观察应用Ｎｄ：ＹＡＧ激光,消除人工晶体植入术后,影响视力的后囊膜皱褶之效果。方法：国产ＪＹＺ－１Ａ型ＹＡＧ激光眼科治疗机。用单脉冲能量０．３５ｍＪ－１．５ｍＪ,治疗总能量１１．２ｍＪ６４．５ｍＪ击射晶体后囊膜皱褶深处,形成３４ｍｍ孔径管亮区。     

自然和热凝固的人肝组织对KTP/YAG激光的光学特性的比较研究

本文采用双积分球测量系统和Inverse Add ing-Doub ling方法,研究了自然和热凝固的人肝组织对532nm的KTP激光和1 064 nm的Nd:YAG激光的光学特性。结果表明:热凝固的人肝组织对532 nm的KTP激光的吸收系数较自然的肝组织的吸收系数增大了23.5%(P<0.05),热凝固的肝组织对1 064 nm的Nd:YAG激光的吸收系数较自然的肝组织的吸收系数减小了34.3%(P<0.05)。热凝固的人肝组织对532 nm的KTP激光的散射系数较自然的肝组织的散射系数增大了4.50倍(P<0.05),热凝固的肝组织对1 064 nm的Nd:YAG激光的散射系数较自然的肝组织的散射系数增大了6.41倍(P<0.05)。热凝固的人肝组织对532 nm的KTP激光的各向异性因子较自然的肝组织的各向异性因子减小了5.47%,热凝固的肝组织对1 064 nm的Nd:YAG激光的各向异性因子较自然的肝组织的各向异性因子减小了1.95%。     

Generation of ROS in cells on exposure to CW and pulsed near-infrared laser tweezers.

We report the results of a study on generation of reactive oxygen species (ROS) and changes in the membrane potential of mitochondria of carcinoma of cervix (HeLa) and Chinese hamster ovary (CHO) cells following exposure to continuous wave (cw) or pulsed Nd: YAG laser (1064 nm). For a given laser irradiation, the generation of ROS and induced changes in the membrane potential of mitochondria were more pronounced for HeLa cells as compared to CHO cells. However, in both the cells the laser dose required to elicit a given change was much lower with pulsed laser exposure compared to that required with a cw laser exposure. This suggests involvement of photothermal effects in the laser irradiation induced changes. Mechanistic studies using quenchers for ROS suggest that laser irradiation leads to generation of hydroxyl radicals.     

In vitro laser ablation of natural marine biofilms

We studied the efficiency of pulsed low-power laser irradiation of 532 nm from an Nd:YAG (neodymium-doped yttrium-aluminum-garnet) laser to remove marine biofilm developed on titanium and glass coupons. Natural biofilms with thicknesses of 79.4 +/- 27.8 microm (titanium) and 107.4 +/- 28.5 microm (glass) were completely disrupted by 30 s of laser irradiation (fluence, 0.1 J/cm2). Laser irradiation significantly reduced the number of diatoms and bacteria in the biofilm (paired t test; P < 0.05). The removal was better on titanium than on glass coupons.