丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1抑制血管紧张素Ⅱ刺激的血管成纤维细胞活化

目的:观察丝裂素活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激的血管成纤维细胞增殖及胶原合成和分泌的影响.方法:用磷酸钙共沉淀的方法向血管成纤维细胞转染MKP-1的基因;测定培养的血管成纤维细胞内丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)活性、3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)及3H-脯氨酸参入.结果:10-7mol*L-1 AngⅡ刺激培养的血管成纤维细胞后其MAPK活性及3H-TdR参入较对照组增加293%(P<0.01)及190%(P<0.01);胶原的合成和分泌较对照组分别增加146%(P<0.01)和502%(P<0.01).而转染了MKP-1野生型基因的细胞与未转染时相比,AngⅡ诱导的MAPK活性和3H-TdR参入分别低65%(P<0.01)和67%(P<0.01);参入细胞内及介质中的3 H-脯氨酸分别低65%(P<0.05)和80%(P<0.01).转染MKP-1突变型及MKP-1空载体基因的细胞对于AngⅡ的上述各种刺激作用均无明显抑制.结论:MKP-1具有抑制AngⅡ刺激的血管成纤维细胞MAPK激活、成纤维细胞增殖及胶原合成和分泌的作用,提示MKP-1可能参与了AngⅡ刺激的血管重塑的调节.     

哮喘气道重塑中钙调神经磷酸酶与蛋白激酶活性的相互调节

目的:研究钙调神经磷酸酶(CaN)信号途径与蛋白激酶C(PKC)、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)和蛋白激酶A(PKA)的相互调节在哮喘气道重塑发病中的作用.方法:建立卵蛋白诱导的哮喘豚鼠模型,实验分为:哮喘组、CaN抑制剂环孢霉素A(CsA)组和对照组,采用磷酸化和去磷酸化方法测定肺组织CaN活性、MAPK活性、PKC活性、PKA活性.在离体培养的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)中,以尾加压素Ⅱ(UⅡ)为刺激因素,测定CaN,PKC和MAPK活性以及它们之间的相互调节.结果:(1)哮喘组CaN活性、MAPK活性和PKC活性分别较对照组高19%(P<0.01)、28%(P<0.01)和35%(P<0.05),PKA活性较对照组低53%(P<0.01).CsA组CaN活性、MAPK活性和PKC活性分别较哮喘组低52%(P<0.01)、18%(P<0.05)和52%(P<0.01),PKA活性较哮喘组高2.65倍(P<0.01).(2)UⅡ 10-7 mol/L孵育20 min引起ASMC PKC和MAPK活性分别较对照组增加44%和24%(P<0.01),并呈时间依赖性引起ASMC中CaN活性增加,24 h为对照组的1.67倍(P<0.01).(3)与单用UⅡ 10-7 mol/L组比,CaN抑制剂CsA 10-6 mol/L使CaN活性降低了45%(P<0.01),MAPK抑制剂PD98059 50 μmol/L对CaN活性无明显影响(P>0.05),PKC抑制剂H7 50 μmol/L使CaN活性下降21%(P<0.05).(4)CsA 10-6 mol/L 作用使UⅡ 10-7 mol/L刺激的ASMC PKC活性下降了14%(P<0.05),对MAPK活性无明显影响(P>0.05).结论:在哮喘气道重塑的发生过程中,CaN与MAPK、PKC和PKA之间存在相互调节.     

蛋白激酶C在人绒毛膜癌JAR细胞中作用的研究

目的：研究蛋白激酶C(protein kinaseC，PKC)对人绒毛膜癌JAR细胞分泌人绒毛膜促性腺激素(hCG)的影响，进一步探讨PKC在调控JAR细胞hCG分泌中的作用。方法：不同浓度的PKC激动剂phorbol 12—myristrate l3—acetate(PMA)急性和慢性刺激、PKC抑制剂chelerythrine chlorine(CHEL)分别作用JAR细胞，用ELASA法测定hCG分泌量变化，以及蛋白印迹(Western blot)法测定细胞内磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)的改变。结果：不同浓度PMA急性刺激时，抑制JAR细胞hCG分泌，在200nmol/L时，其抑制作用最强；不同浓度PMA慢性刺激时，JAR细胞hCG分泌量增加，在200nmol／L时，其作用最强。CHEL作用JAR细胞时，hCG分泌量升高，在600nmol/L时，其作用最强。对照组及各实验组都有活性的MAPK的表达，与对照组相比，PMA慢性刺激组、CHEL组MAPK磷酸化水平升高;PMA急性刺激组MAPK磷酸化水平降低。结论：PKC参与调节JAR细胞hCG的分泌，活性升高时，下调MAPK磷酸化，使JAR细胞hCG分泌减少，而活性降低时，增强MAPK磷酸化，JAR细胞hCG分泌量增加。MAPK通路激活是PKC介导的JAR细胞分泌hCG的重要机制。     

PI3K、PKC、MAPK信号转导途径及其在支气管哮喘中的作用

在支气管哮喘(简称哮喘)患者体内存在着庞大的细胞因子、黏附因子和炎性介质网络系统,研究发现哮喘患者体内存在的受体信号转导系统调控着细胞因子、黏附因子和炎性介质对机体的作用.其中,磷脂酸肌醇-3-激酶(phosphatidy linositol 3-kinase,PI3K),蛋白激酶C(Protein kinase C,PKC),丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinase,MAPK) 信号系统是最重要的参与哮喘发病机制的信号途径.本文就PKC、MAPK、PI3K信号转导途径的特点及其与支气管哮喘的关系作一综述.     

p38MAPK信号通路与前列腺炎疼痛关系研究进展

丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）是细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,它存在于大多数细胞内,是真核细胞转导细胞外信号到细胞内引起细胞反应的一类重要信号系统。p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK）信号通路为     

ox-LDL诱导内皮细胞损伤条件培养基及气血并治方有效组分配伍对平滑肌细胞MAPK、PKC活性和胞内Ca2+荧光强度的影响

目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管内皮细胞(VEC)损伤条件培养基及气血并治方有效组分D(主要为芍药苷)和E(主要为总黄酮)配伍(重量比1:2)是否对血管平滑肌细胞(VSMC)MAPK、PKC活性和胞内Ca2 荧光强度有影响.方法将VSMC正常培养液、ox-LDL诱导VEC损伤的条件培养基、辛伐他汀加ox-LDL诱导VEC损伤的条件培养基、有效组分D和E优化配伍加ox-LDL诱导VEC损伤的条件培养基等分别作用于VSMC,采用β-放射活性法测定丝裂素活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)及蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性,流式细胞仪检测VSMC内的Ca2 荧光强度.结果 VEC损伤条件培养基作用于VSMC后,与正常培养VSMC相比,细胞MAPK、PKC活性明显增加(P＜0.01),细胞内Ca2 荧光强度增加;有效组分D和E配伍作用于VEC损伤条件培养基培养的VSMC后,与模型组相比,MAPK及PKC活性明显减少(P＜0.01)、细胞内Ca2 荧光强度降低.结论气血并治方中有效组分D和E优化配伍可以拮抗MAPK、PKC活性和细胞内Ca2 荧光强度的增加,气血并治方防治动脉粥样硬化(AS)的作用可能与此有关.     

电针对慢性应激模型大鼠下丘脑及胃肠道cAMP、PKA和PKC的调控作用

目的从受体后信号转导通路上重要调节因子环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)的角度,探讨慢性应激状态下大鼠下丘脑、胃肠道受体后信号转导的变化及电针百会、印堂、天枢穴改善抑郁症消化功能障碍的作用机理。方法将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、对照组、电针组,每组10只。采用放射性同位素等方法,观察慢性应激模型大鼠下丘脑、胃窦及空肠组织的cAMP含量、PKA及PKC活性的变化及电针印堂、百会和天枢穴的干预作用。结果模型组大鼠下丘脑、胃窦及空肠组织cAMP含量及PKA活性明显低于正常组,PKC活性明显高于正常组,差异有统计学意义(P0.01);电针组及对照组cAMP含量及PKA活性明显均较模型组升高,PKC活性较模型组明显降低,两组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.01);电针组与对照组比较无明显差别。结论抑郁模型大鼠下丘脑、胃窦及空肠组织受体后cAMP、PKA信号通路下调,而PKC信号通路上调,电针改善抑郁症伴发的消化功能障碍可能与调节受体后cAMP、PKA及PKC信号通路有关。     

尾加压素Ⅱ促进肾系膜细胞增殖的细胞内机制研究

目的:研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对肾系膜细胞(GMC)增殖功能的影响以及细胞内信号转导机制。方法:①采用[3H]-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入实验研究UⅡ对GMC增殖的影响。②加入不同的细胞内信号转导阻断剂,观察UⅡ作用的信号转导通路。结果:UⅡ以浓度[(10-9～10-7)mol/L]依赖的方式促进GMC3H-TdR掺入,分别较对照组高86.9%、105.8%和134.2%(P<0.01)。UⅡ刺激3H-TdR掺入的效应能够被L-钙通道阻断剂尼卡地平、钙调素激酶(CaM-PK)阻断剂W7和蛋白激酶C(PKC)阻断剂H7所抑制,抑制率分别为42.3%、49.3%和34.1%(P<0.01)。丝裂素活化蛋白激酶阻断剂PD98059虽能轻度抑制UⅡ效应,但无统计学意义(P>0.05)。结论:UⅡ明显促进GMC增殖,该效应与胞外Ca2 内流、CaM-PK以及PKC有关,并提示UⅡ可能在肾纤维化发生和发展过程中发挥着重要作用。     

丝裂原活化蛋白激酶与缺血性脑血管病的关系

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是一类重要的细胞内信号转导物质,能将细胞外信号转导至细胞核,以应对各种不同的刺激(细胞增殖、炎症反应及应激反应等)。以往基础及临床医学研究已证明MAPK在缺血性脑血管病各阶段均可被激活,表达水平发生改变,并可能产生神经保护作用,本文将对MAPK与缺血性脑血管病的关系进行综述。     

滋阴潜阳方对高血压大鼠淋巴细胞内PKA蛋白表达和cAMP水平的影响

目的:探讨高血压的神经免疫调节机制和滋阴潜阳方对高血压大鼠淋巴细胞内信号转导作用的可能环节.方法:采用免疫组织化学染色法和DP801图像分析系统检测"二肾一夹"高血压大鼠淋巴细胞内蛋白激酶A(PKA)蛋白表达.采用放射免疫法检测环磷酸腺苷(cAMP)水平的改变.结果:模型组大鼠淋巴细胞内PKA蛋白表达和cAMP水平明显增强,滋阴潜阳组对此有抑制作用.结论:滋阴潜阳方抑制淋巴细胞内PKA蛋白表达和cAMP水平可能是其发挥神经免疫调节作用的机制之一.     

一氧化氮抑制单核-内皮细胞粘附的机制

目的：研究一氧化氮（ＮＯ）抑制单核内皮细胞粘附的机制。方法：以硝普钠作为ＮＯ的供体，用细胞粘附实验、流式细胞仪荧光强度测定、细胞ＥＬＩＳＡ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ等方法分别从细胞、蛋白表达、基因表达方面研究ＮＯ对内皮细胞粘附分子（ｖａｓｃｕｌａｒｃｅｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ，ＶＣＡＭ１）表达的影响。结果：ＮＯ抑制ＩＬ１α诱导的单核内皮细胞粘附，抑制ＩＬ１α诱发的ＶＣＡＭ１的表达并呈时间依赖性及浓度依赖性，ＮＯ在粘附分子ＶＣＡＭ１的基因表达水平上亦呈现抑制作用。结论：ＮＯ抑制ＶＣＡＭ１的表达是其抑制单核内皮细胞粘附及抗动脉粥样硬化的机制之一。     

基底外侧杏仁核注射戊巴比妥钠对睡眠和行为的影响

目的 观察基底外侧杏仁核（ＢＬＡ）内注射戊巴比妥钠对睡眠和行为的影响。方法 多导睡眠描记术和杏仁核微量注射。结果 戊巴比妥钠引起觉醒减少,慢波睡眠和总睡眠时间增多,开野实验中踩格数和修饰行为减少,而强迫游泳实验的不动时间延长。结论 戊巴比妥钠作用于ＢＬＡ可产生明显的促睡眠效应和镇静作用,ＢＬＡ参与了睡眠和行为的调节。     

DNA去甲基化引起人二倍体成纤维细胞端区缩短并加速衰老进程

目的:研究DNA甲基化水平变化对细胞衰老进程和端区长度的影响.方法:从细胞形态和Southern印迹杂交测定端区长度两方面观察5-氮胞苷处理对人胚肺二倍体成纤维细胞衰老进程的影响.结果:5-氮胞苷处理使老年细胞衰老表型更为突出,其端区长度缩短较年轻细胞亦为显著(约为对照细胞的96%).结论:甲基化水平降低及其导致的端区缩短的共同作用可能在细胞衰老过程中发挥着重要的作用.     

脑内谷氨酸在外测下丘脑-穹窿周围区升压反应中的作用

目的：分析外侧下丘脑-穹窿周围区升压反应的机制。方法：大鼠脑内或静脉注射不同药物，观察血压和心率的变化。结果：L-谷氨酸钠（Glu）兴奋外侧下丘脑-穹窿周围区（LH／PF）引起的升压反应可分别被双侧室旁核或延髓头端腹外侧区（RVL）内注入谷氨酸二乙酯（Glu拮抗剂）削弱，也可分别被酚妥拉明、心得安或甲基阿托品（i．v．）衰减。结论：室旁核和RVL内的Glu均参与LH／PF升压反应，该反应系通过交感神经活动加强、副交感神经活动减弱而实现。     

抗癫疒间药对未成年大鼠空间变换学习记忆及脑内蛋白激酶Cγ的影响

目的:探讨临床常用抗癫药苯巴比妥、卡马西平及丙戊酸对未成年大鼠空间变换学习记忆的影响及其与以海马为主的脑内蛋白激酶Cγ(protein kinase Cγ, PKCγ)的相关性,从而研究抗癫药对认知功能影响的细胞及分子机制.方法:将30只21日龄Wistar 大鼠随机分为对照组(未训练组)、训练组、苯巴比妥组(PB 每日60 mg*kg-1)、卡马西平组(CBZ 每日60 mg*kg-1)及丙戊酸组(VPA每日500 mg*kg-1),每组6只.其中后4组每日行饮水为奖励的空间变换学习训练,共10 d,计算各组正确反应率.末次训练后用免疫组化法了解海马CA1-2区、CA3-4区、齿状回、内嗅皮层及杏仁核区PKCγ的染色阳性程度.结果:(1)苯巴比妥组、卡马西平组及丙戊酸组大鼠末次正确反应率均明显低于训练组;(2)训练组海马CA1-2区PKCγ免疫反应阳性程度(用平均光密度表示)明显高于对照组及苯巴比妥组、卡马西平及丙戊酸组与训练组无差异;海马CA3-4区、齿状回、内嗅皮层的免疫反应阳性程度各组间无差异;(3)海马CA1-2区PKCγ免疫反应阳性程度与空间变换学习记忆训练的末次正确反应率成正相关.结论:空间学习伴随脑内海马PKCγ的激活,苯巴比妥、卡马西平及丙戊酸对未成年大鼠空间学习记忆的形成有一定影响,其影响机制是多方面的,PKCγ激活受阻可能是苯巴比妥影响学习记忆的分子机制之一,而CBZ及VPA则可能通过影响PKC的功能或底物或其他机制影响学习记忆.     

褪黑素对结肠黏膜上皮细胞氧化应激的影响

目的 探讨褪黑素对大鼠结肠黏膜上皮细胞氧化应激的影响。方法 在分离培养正常大鼠结肠黏膜上皮细胞基础上，利用FeSO4 H2O2产生*OH攻击制备结肠黏膜细胞氧化损伤模型，同时预先加入褪黑素并观察损伤减轻程度。实验设正常对照组、模型对照组、5-氨基水杨酸给药组(0.1mmol／L)，褪黑素给药组(0．01、0．1、l.0mmol／L)。培养一定时间后，取上清测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)和黏液含量。结果 模型组大鼠结肠黏膜上皮细胞：MDA、LDH和NO水平增高，CAT、GSHPX、SOD和黏液含量减少。不同剂量褪黑素呈剂量依赖性的减少LDH释放，抑制MDA和NO的形成，恢复黏液、CAT、GSHPX及SOD水平。结论 褪黑素对大鼠结肠黏膜氧化损伤具有保护作用。     

静注异丙酚、咪唑安定对血流动力学及呼吸功能的影响

目的：比较静注异丙酚和咪唑安定对血流动力学及呼吸功能的影响。方法：60例ASAⅠ~Ⅱ吸择期手术患者随机分为异丙酚组（P组，n=30）和咪唑安定组（M组，n=30），静注等效剂量的异丙酚和咪唑安定，观察时血流动力学和呼吸功能的影响。结果：异丙酚组MAP HR SVRI的下降幅度明显大于咪唑安定组，CI两组之间无显著性差异。给药后呼吸暂停发生率及持续时间、PaCO2上升幅度异丙酚组亦明显高于咪唑安定组。结论：咪唑安定对心血管和呼吸系统的抑制轻于异丙酚。     

绝经期激素替代疗法

SUMMARY Hormone replacement therapy (HRT) was initiated almost half a century ago to treat menopausal symptoms. Initially, its use remained limited even among symptomatic women and the move toward postmenopausal hormone use for disease prevention came later. Improved treatment schedules and delivery systems expanded the use of HRT worldwide. However, large trials of postmenopausal hormones with disease outcomes were even later in coming and today HRT has become a specialized, multidisciplinary area of research. As the population continues to grow older, there has been an increased focus on the effects of ageing. HRT may affect length and quality of life through disease prevention. It may have possible beneficial effects on cognition, on the incidence of hip fracture, myocardial infarction and stroke, and adverse effects on the incidence of breast cancer, endometrial cancer, and venous thromboembolism.Today's attitudes about the hormonal treatments for the menopausal transition have moved from expansive optimism to contracting disappointment amidst safety concerns and equivocal results and faces greater skepticism and scrutiny. The health and well being of large numbers of women are at stake, and researchers, clinicians and the general public are watching and weighing the options.     

匹多替莫的免疫增强作用及对淋巴因子表达的影响

Objective: To study the immune-potentiating actions and the expressing lymphocytefactor of Pidotimod. Methods: The immune-potentiating effects of Pidotimod on phsgocytosis ofmacrophage, proliferation of splenocyte stimulated by ConA and serum hemolysin were observed innormal and immune-depressed mice induced by cyclophosphamide. Using RT-PCR method to detectthe expression lymphocyte factor of the mice which was treated with different dosage Pidotimod.Results: Pidotimod can significantly potentiate the phagocytosis of macrophage, spleen's T cellproliferate response and increase the content of serum hemolysin. The PT-PCR results showedPidotimod can increase the expression of some Lymphocyte Factor Conclusion: PT can potentiatenormal and immune-depressed mice immune-system function.     

地氟醚和异氟醚麻醉对神经外科患者血液动力学及心肌肌钙蛋白Ⅰ的影响

目的　研究地氟醚和异氟醚麻醉对神经外科手术患者血液动力学及心肌肌钙蛋白Ⅰ (cTnⅠ )的影响。方法　选择神经外科手术患者 30例 ,随机分为对照组、地氟醚组和异氟醚组 ,每组各 10例。芬太尼、咪唑安定、异丙酚、维库溴铵麻醉下气管插管。Ⅰ组不给吸入麻醉药 ,Ⅱ组吸入地氟醚 ,Ⅲ组吸入异氟醚 ,记录麻醉前、麻醉后 30min、6 0min、90min、12 0min、术毕的SBp、DBp、HR、SPO2 、PETCO2 、ETAC。麻醉前、术毕、术后 2 4h抽静脉血 2ml检测cTnI。结果　患者麻醉后SBp、DBp均有下降 ,但差异无显著性。SPO2 、PETCO2 麻醉前后在正常值范围。术毕、术后 2 4hcTnⅠ比麻醉前升高 (P <0 0 5 ) ,但组间比较均差异无显著性。结论　地氟醚与异氟醚麻醉对血液动力学有一定影响 ,对cTnⅠ无明显影响 ,地氟醚与异氟醚麻醉对神经外科手术患者的血液动力学及cTnⅠ的影响相似。