bFGF对脑缺血大鼠海马及顶叶皮质c-Myc蛋白影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元c-Myc蛋白表达影响及机制.方法 30只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、bFGF组,每组10只;应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞2 h再灌注损伤24 h,采用原位末端标记法(TUNEL)、免疫组织化学法检测海马及顶叶皮质内神经元凋亡和c-Myc蛋白表达.结果 假手术组大鼠海马及顶叶皮质偶见凋亡细胞,神经元内少见c-Myc蛋白阳性细胞;缺血再灌注组海马及顶叶皮质神经元凋亡增加,顶叶皮质及海马神经元内c-Myc蛋白表达灰度值为(88.16±2.43),(86.72±1.23),bFGF组神经元凋亡减少,神经元内c-Myc蛋白表达灰度值为(97.61±1.78),(95.35±2.34).结论 bFGF可减少缺血神经元凋亡,抑制脑缺血诱导的c-Myc蛋白的表达,对脑缺血再灌注海马及顶叶皮质神经元具有保护作用.     

尤瑞克林对脑缺血再灌注损伤大鼠模型p38M APK信号通路的影响

目的探讨尤瑞克林对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型的神经保护作用及其可能的机制。方法 60只SD大鼠随机分为3组:假手术组、缺血再灌注损伤模型组和尤瑞克林治疗组,用线栓法制作大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h再灌注24 h后,观察各组大鼠神经行为学评分,HE染色观察神经细胞组织形态变化,免疫组化法检测磷酸化p38MAPK的表达,TUNEL法检测凋亡细胞。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经行为学评分明显升高(P<0.01),HE染色神经细胞受损明显(P<0.01),脑组织磷酸化p38MAPK表达水平、凋亡神经细胞数量明显增加(P<0.01)。与模型组比较,尤瑞克林治疗组大鼠的神经功能缺损得到改善、神经元形态结构损伤减轻、磷酸化p38MAPK表达水平以及神经细胞凋亡数量回降(P<0.01)。结论尤瑞克林对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有神经保护作用,其机制可能与抑制p38MAPK活化、减少神经细胞凋亡有关。     

bFGF对脑缺血大鼠脑组织HSP70 mRNA表达影响

目的 研究大鼠脑缺血再灌注后热休克蛋白70(HSP70)mRNA的表达,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元HSP70 mRNA的调节作用及机制.方法 应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞1h再灌注损伤24h,采用原位缺口末端标记法(TUNEL)、RT-PCR法检测海马及皮质内神经元凋亡和HSP70 mRNA的表达.结果 大鼠缺血再灌注海马及顶叶皮质内神经元凋亡数增加而HSP70mRNA表达较正常组增加.注射bFGF后神经元凋亡数减少,HSP70mRNA表达明显高于缺血再灌注组.结论 bFGF抑制缺血神经元凋亡,参与HSP70 mRNA的调节,对缺血神经元有保护作用.     

西维来司钠对大鼠脑出血保护作用机制的实验研究

目的:通过实验的方法来研究和探讨西维来司钠对大鼠脑出血的保护作用。方法:随机将Wistar大鼠分成五组,将此五组大鼠在动物造模24h按标准对各组进行神经缺损评分,测定脑含水量并进行病理学的观察。结果:神经病学评分方面以model组评分为最高,sham组评分为0但是也均高于高、中、低剂量组。脑含水量方面,model组脑含水量升高很明显,明显高于sham组和高、中剂量组,与低剂量组差别不大。病理形态方面,sham组没有明显的炎症细胞浸润,model组和ICH组明显出现炎症细胞浸润。结论:西维来司钠对大鼠脑组织有明显的保护作用,可在一定程度上减轻大鼠脑损伤。     

中药脑泰方保护脑缺血再灌注损伤中血管内皮细胞凋亡机制探讨

目的从凋亡信号通路探讨中药保护脑缺血再灌注损伤中血管内皮细胞凋亡机制。方法将64只清洁级sD大鼠随机分为4组（每组16只）：假手术对照组、脑缺血再灌注组、脑缺血预处理组和中药预处理组;再将脑缺血再灌注组、脑缺血预处理组和中药预处理组按不同时相分为1、7、14及21d的4个亚组,中药预处理组应用中药脑泰方提取物进行干预。取大鼠大脑中静脉血管内皮细胞,分别行Hoechst33258染色后计数以及DNA“梯状”条带检测内皮细胞凋亡情况,再应用Western—blot分析中药脑泰方对Caspase-3,8,9活化和Bid裂解的影响情况;从凋亡信号通路探讨中药保护脑缺血再灌注损伤中血管内皮细胞凋亡机制。结果中药脑泰方提取物可抑制脑缺血再灌注损伤中血管内皮细胞凋亡,能明显抑制缺血再灌注损伤所致的Caspase-3,8,9活化,也抑制了Bid裂解成tBid。结论中药脑泰方提取物从凋亡信号通路抑制了脑缺血再灌注损伤中血管内皮细胞凋亡。     

bFGF对大鼠缺血性脑损伤CaMKⅡmRNA表达影响

目的 研究大鼠脑缺血再灌注后Ca2 >/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMK(Ⅱ)mRNA的表达,探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对脑组织缺血再灌注神经元CaMK Ⅱ mRNA的调节作用及机制.方法 应用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,大脑中动脉阻塞1 h再灌注损伤24 h,采用TUNEL法、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测海马及皮质内神经元凋亡和CaMK Ⅱ mRNA的表达.结果 大鼠缺血再灌注海马及顶叶皮质内神经元凋亡数增加,而CaMKⅡ mRNA表达较假手术组减少,注射bFGF后神经元凋亡数减少,CaMK Ⅱ mRNA表达明显高于缺血再灌注组.结论 bFGF抑制缺血神经元凋亡,参与CaMK Ⅱ mRNA的调节,对缺血神经元有保护作用.     

不同持续时间亚低温对缺血新生鼠脑的保护作用

目的 研究亚低温对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）形成后,其保护作用的干预最短有效持续时间。方法 建立HIBD新生大鼠模型,通过HE染色、电镜、原位末端标记手段对比观察HIBD新生大鼠亚低温干预后不同时间各脑区的凋亡细胞等。结果 常温组HIBD后24小时为凋亡细胞表达高峰,亚低温组HIBD后24小时凋亡细胞数目减少,凋亡高峰延迟出现,持续时间6、15小时比3小时保护作用明显,持续6小时与15小时脑保护作用相近。结论 HIBD后31℃亚低温干预可明显抑制凋亡的表达,保护脑神经,持续时间越长保护作用越明显,超过6小时之后延长干预时间无意义。     

丙酸睾酮预处理对HIBD新生鼠脑细胞神经生长因子表达的影响

【目的】观察丙酸睾酮预处理对新生鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)大脑皮质和海马区神经生长因子(nerve growth factor,NGF)的表达及神经细胞凋亡的影响,并探讨其保护作用机制。【方法】新生3日龄SD大鼠随机分为3组:正常对照组(n=24),HIBD组(n=24),T预处理组(n=24)。T预处理组大鼠于3日龄时给予T预处理。HIBD组和T预处理组大鼠于7日龄时进行HIBD模型制作。于HI后12、24、72h、7d观察各组脑组织病理形态及应用Nissl染色法测定神经元数目而间接检测神经细胞坏死和凋亡。并于HI后24、72h、7d制作石蜡切片,用免疫组化SABC法观察NGF在各组大鼠大脑皮质和海马表达的动态变化。【结果】HI后24、72h和7d,正常对照组和HIBD组大鼠脑皮质和海马区仅见极少量阳性细胞表达,而T预处理组大鼠于HI后24h和72h NGF表达水平明显增高(P<0.05)。正常对照组和HIBD组大鼠海马区偶尔可见NGF免疫阳性细胞表达,T预处理组大鼠海马区于HI后72h出现NGF免疫阳性细胞表达轻微增多,与正常对照组和HIBD组比较差异均有显著性(P<0.01)。【结论】丙酸睾酮预处理可明显见减轻大脑皮质神经细胞凋亡、增加HIBD新生大鼠脑皮质和海马区NGF表达,从而发挥神经保护作用。     

缺血后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后环氧合酶-2的影响

目的 探讨缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤环氧合酶-2(COX-2)表达的影响,以探讨其脑保护的机制.方法 成年健康SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组(Sham),缺血再灌注损伤组(I/R),缺血后处理组(IPO).线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注模型.缺血再灌注24h后留取大脑皮质组织,免疫组化、Western blot检测COX-2蛋白的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测COX-2 mRNA表达.结果 脑缺血再灌注24 h后,脑皮质内COX-2 mRNA和COX-2蛋白的表达增加(P＜0.05).应用缺血后处理能显著地减少脑缺血再灌注后脑组织内COX-2蛋白的表达(P＜0.05).缺血再灌注24h后,与假手术组相比,缺血再灌注损伤组和缺血后处理组COX-2 mRNA和COX-2蛋白表达明显增多(P＜0.05);但与缺血再灌注损伤组相比,缺血后处理组COX-2 mRNA和COX-2蛋白表达减少(P＜0.05).结论 缺血后处理能抑制大鼠脑缺血再灌注损伤皮质内COX-2的表达,这可能是其脑保护作用的部分机制.     

美满霉素对阿尔茨海默病模型大鼠认知功能的影响研究

目的 观察美满霉素对阿尔茨海默病模型（AD）大鼠认知功能和前额叶皮质葡萄糖调节蛋白（Glucose - Regulatedprotein 78,GRP78）和C/EBP同源蛋白( C/EBPhomologousprotein,CHOP）的表达的影响,探讨美满霉素对AD大鼠脑保护作用的机制。方法 侧脑室注射Aβ25-35建立AD大鼠模型。健康雄性 SD 大鼠随机分成对照组、模型组和美满霉素(50 mg/kg)治疗组。Morris水迷宫和跳台仪检测认知行为学改变,免疫荧光组织化学法和Western blotting法检测前额叶皮质GRP78与CHOP蛋白的表达,TUNEL法检测前额叶皮质神经细胞凋亡。结果 行为学检测结果显示,美满霉素可以明显改善侧脑室注射Aβ25-35导致的大鼠学习记忆障碍,提高认知功能;免疫荧光组织化学法和Western blotting法检测结果显示,与对照组比较,模型组大鼠前额叶皮质GRP78与CHOP表达均上调（P＜ 0.01）,与模型组比较,美满霉素治疗组大鼠前额叶皮质GRP78与CHOP表达明显减少（P＜ 0.01）;TUNEL法检测结果显示,与对照组相比,模型组大鼠前额叶皮质神经细胞凋亡数量显著增高（P＜0.05）;与模型组比较,美满霉素治疗组前额叶皮质凋亡细胞明显减少,但高于对照组（P＜0.05）。结论 美满美素可能通过降低AD大鼠脑组织GRP78与CHOP的表达,抑制内质网应激,减少神经细胞凋亡,改善AD大鼠认知功能,发挥脑保护作用。     

胡黄连苷Ⅱ对脑缺血损伤后COX-2表达的影响及意义

目的探讨胡黄连苷Ⅱ对脑缺血损伤后COX-2表达的影响及其神经保护作用机制。方法应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,按照随机对照原则,动物分为对照组、模型组、胡黄连苷组、LPS组和U0126组,每组再分为缺血6 h、12 h和24 h三个亚组。改良的神经功能评分(m NSS)法评价大鼠神经行为功能;原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡;蛋白免疫印迹法检测脑组织COX-2表达水平。结果大鼠脑缺血损伤后,随着时间的延长模型组大鼠神经功能评分升高,皮质区神经凋亡增多,COX-2蛋白表达增强。胡黄连苷组和U0126组大鼠皮质区神经细胞凋亡和COX-2表达较模型组明显降低,LPS组大鼠早期神经细胞凋亡细胞与COX-2表达水平较高,但后期COX-2表达水平有所下降,损伤略有恢复。结论胡黄连苷Ⅱ可能通过降低COX-2通路的活化,抑制脑缺血后神经细胞凋亡和炎性反应而保护神经系统。     

丙酸睾酮预处理对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用及其机制研究

目的 观察丙酸睾酮（testosterone propionate．T）预处理对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生鼠皮质及海马区雄激素受体（androgen receptor，AR）表达及神经细胞坏死和凋亡的影响，探讨其保护作用的可能机制。方法 新生3d龄SD大鼠随机分为3组，①正常对照组（n=24）；②HIBD组（n==24），③T预处理组（n=24）。T预处理组大鼠于3d龄时给予T预处理。HIBD组和T预处理组大鼠于7d龄时进行HIBD模型制作。于缺氧缺血（HI）后12h，24h，72h，7d观察各组脑组织病理形态及应用Nissl染色法测定神经元数目，间接检测神经细胞坏死和凋亡。并于HI后24h，72h，7d制作石蜡切片，用免疫组化法观察各组大鼠大脑皮质和海马AR表达的动态变化。结果 HIBD组大脑皮质和海马区细胞数明显比正常对照组减少，差异有显著意义（P＜0．05），而T预处理组神经元坏死较HIBD组有所减轻，差异有显著意义（P＜0．05），缺血侧（左侧）神经细胞排列较整齐、结构较完整，神经元变性、坏死程度均较HIBD组轻，细胞凋亡少见。HI后24h，72h和7d，正常对照组和HIBD组大鼠脑皮质和海马区仅见极少量AR阳性细胞表达，而T预处理组大鼠于HI后24h和72hAR表达水平明显增多（P＜0．05）。结论 T预处理可明显增加HIBD新生大鼠脑皮质和海马区AR的表达水平，减轻神经细胞凋亡，从而发挥神经保护作用。     

阿魏酸钠对MCAO小鼠脑缺血再灌注损伤神经细胞保护作用

目的:观察阿魏酸钠对MCAO小鼠缺血再灌注损伤的保护作用Caspase-3表达的影响.方法:采用线栓法阻塞小鼠大脑中动脉(middlcerebralartery,MCAO)建立局灶性脑缺血实验模型,观察阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)灌胃及脑缺血再灌注损伤后小鼠的神经行为学评分及脑梗死体积的影响;分别采用TTC染色、FJB染色细胞凋亡的数量改变.结果:TTC染色显示空白组未见脑梗死灶,模型对照组、阿魏酸钠组脑梗死体积百分比分别有改善.FJB结果显示细胞凋亡减少.结论:阿魏酸可降低神经细胞的损伤,降低细胞凋亡的发生,并可通过抗氧化和抗凋亡作用协同起到保护作用.     

异丙酚对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨异丙酚对大鼠脑缺血／再灌注损伤的保护作用。方法采用改良longa法制备大鼠脑缺血／再灌注模型．随机分为假手术组、对照组、异丙酚组，观察异丙酚对脑缺血／再灌注损伤的保护作用并研究其机制。结果异丙酚明显抑制脑缺血／再灌注后血炎性细胞因子（TNF—α、IL-1β.IL-6、IL-8）升高的程度，改善光镜下脑组织结构的损害，明显升高脑组织超氧化物歧化酶（SOD）的活性，减少丙二醛（MDA）的生成。结论异丙酚抑制脑缺血佴灌注时炎性细胞因子的合成和释放，抑制脂质过氧化物MDA的积聚，提高氧化酶SOD的活性，减轻脑组织皮层的损害，减少海马CA1区神经元的死亡，具有脑保护作用。     

胰蛋白酶抑制剂在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中脑保护作用及其分子机制的研究

目的　研究胰蛋白酶抑制剂在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的脑保护作用及其分子机制。方法　采用线栓法建立大鼠大脑中动脉 (MCAO)缺血 1h再灌注 2 4h模型 ,2 4只雄性大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组和胰蛋白酶抑制剂治疗组。采用Zea -Longa评分法观察神经功能缺损程度 ,采用免疫组织化学方法、TUNEL法分别观察各组P53 蛋白表达和细胞凋亡。结果　神经功能缺失评分假手术组为 0分 ,生理盐水对照组为 2 8± 1 0分 ,胰蛋白酶抑制剂治疗组为 1 3± 0 7分 ;P53 蛋白染色阳性细胞数假手术组为 0个 ,生理盐水对照组为 12 3± 2 5个 /高倍视野 ,胰蛋白酶抑制剂治疗组为 5 5± 1 3个 /高倍视野 ;凋亡细胞数假手术组为 0个 /高倍视野 ,生理盐水对照组为 7 6± 1 0个 /高倍视野 ,胰蛋白酶抑制剂治疗组 3 5± 0 9个 /高倍视野。胰蛋白酶抑制剂治疗组各项数据均较生理盐水对照组显著减少 ( P <0 0 1)。结论　胰蛋白酶抑制剂可明显减轻局灶性脑缺血再灌注损伤 ,抑制神经细胞P53 蛋白的表达 ,抑制细胞凋亡 ,是脑保护作用的分子机制之一。     

艾司洛尔对脓毒症大鼠肠黏膜屏障的影响

目的:探讨艾司洛尔对脓毒症大鼠肠黏膜屏障的保护作用. 方法:建立脓毒症大鼠模型,将大鼠随机分为对照组(脓毒症组)和艾司洛尔组(脓毒症模型+艾司洛尔组),每组8只.观察大鼠的基本生命体征、体外肠道的通透性和血清内毒素变化.同时,通过肝、脾和肠系膜淋巴结细菌培养观察细菌易位情况.最后,根据H-E染色结果评估大鼠肠道损伤. 结果:艾司洛尔组大鼠心率明显低于基础值(P＜0.05).与对照组比,艾司洛尔组大鼠细菌易位减少,体外肠道通透性降低.两组大鼠血清内毒素水平无显著性差异.艾司洛尔组大鼠肠道病理评分明显低于对照组. 结论:艾司洛尔能保护脓毒症大鼠肠黏膜屏障,减轻肠损伤.     

脑心通对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨脑心通对大鼠脑缺血的保护作用.方法 应用线栓法制备大鼠脑缺血模型.将大鼠分为假手术组、模型组、低剂量组和高剂量组,各组分别于术后给予不同剂量脑心通灌胃,术后24、48、72、96h取脑组织进行HE染色、TTC染色及测定bcl-2表达的动态变化.结果 低、高剂量组均能减少大鼠脑梗死体积;提高脑缺血区bcl-2的表达.结论 脑心通对大鼠脑缺血损伤有保护作用.     

前列地尔对大鼠局灶性脑缺血的保护作用

目的探讨前列地尔对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制.方法选用健康SD大鼠30只,随机分为假手术组、缺血对照组和前列地尔低剂量组(1.25μg/kg)、前列地尔中剂量组(2.50μg/kg)和前列地尔高剂量组(5.00μg/kg),采用大脑中动脉闭塞法(MCAO)建立局灶性脑缺血动物模型,24h后进行神经功能评分,并制备脑组织匀浆,检测内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGBP)含量.结果与假手术组相比,缺血对照组神经功能评分显著升高,前列地尔各组神经功能评分均显著低于缺血对照组;前列地尔各组ET含量均低于缺血对照组,前列地尔各组CGRP含量均高于缺血对照组,差异显著(P＜0.05).结论前列地尔对局灶性缺血性脑损伤具有保护作用,其机制可能是通过调整脑缺血后ET和CGBP的平衡失调,对抗脑血管收缩和促进脑血管扩张,从而对脑缺血起到保护作用.     

绞股蓝总甙对酒精性脂肪肝大鼠肝保护与TNF-α的关系

目的 建立酒精性肝病大鼠模型,研究绞股蓝总甙在酒精性脂肪肝大鼠肝脏中的保护作用与TNF-α的关系.方法 SD雄性大鼠建立大鼠酒精性肝病模型,干预组在建模同时以绞股蓝总甙200 mg/kg灌胃,每日1次.12周末处死大鼠,分别检测ALT、AST、TC、TG指标,采用ELISA试剂盒检测TNF-α;选取部分肝组织进行HE染色,光镜下观察肝组织病理学改变,取部分肝脏制备肝脏匀浆,使用流式细胞仪进行肝细胞凋亡检测.结果 研究显示,与模型组相比,干预组血清ALT、AST、TC、TG以及TNF-α水平均降低(P＜0.05),差异均有统计学意义.干预组病理评分为0.51 ±0.49分,显著低于模型组(P＜0.05);模型组凋亡率明显高于正常组(P＜0.05),干预组凋亡率明显低于模型组(P＜0.05);结论 绞股蓝总甙对酒精性肝病大鼠肝脏具有较好的保护作用.明显减轻酒精对肝脏的组织学损害,增强肝细胞抗氧化能力,对抗脂肪变性,尤其在抗凋亡中发挥较大的作用,其作用机制可能是通过下调细胞因子TNF-α水平来得以实现.     

脂肪乳剂对急性肺损伤大鼠肺组织病理形态的影响

目的:了解脂肪乳剂预处理后对急性肺损伤(ALI)大鼠肺系数和肺组织病理形态的影响。方法:幼年雄性大鼠100只,随机分为五组,分别为对照(blank)组、内毒素(LPS)组、Inralipid(Intra)组、Clinoleic(Cli-no)组和Omegaven(Omega)组,每组20只。五组大鼠分别用等渗盐水或3种脂肪乳剂行肠外营养(PN)7 d。blank组大鼠给予气管内滴入等渗盐水,其余四组滴入LPS,建立ALI大鼠模型。8 h后,取大鼠肺组织并称重,行H-E染色和TUNEL检测。结果:ALI模型组大鼠的肺系数、病理评分和细胞凋亡指数均显著高于blank组(P<0.05或P<0.01);ALI模型组大鼠均有不同程度的肺间质水肿、出血,炎性细胞浸润,凋亡细胞较多。采用PN的大鼠病理评分均显著轻于LPS组(P<0.05或P<0.01);Clino组和Omega组的凋亡细胞指数显著低于LPS组(P<0.05或P<0.01)。结论:脂肪乳剂能减轻ALI大鼠肺组织的病理改变,Clinoleic和Omegaven还能显著减少细胞凋亡。