用单克隆抗体研究和分析霍乱弧菌抗原

本文用ELISA以12株单克隆抗体(McAb)对55株EL-Tor霍乱弧菌和用遗传学方法突变的28株霍乱弧菌的菌体抗原进行了研究1同时与四种常规分型方法进行对比试验。结果用12株McAb可将55株EL-Tor霍乱弧菌分成11种抗原决定簇和18个McAb型,将遗传学方法的突变株分成9种抗原决定簇和10个McbA型。其中一株McAd 2B_1H_1F_3能识别所有55株EL-Tor弧菌和大部份突变株霍乱弧菌,表明有种的特异性;其余11株McAb与各型霍乱弧菌的抗原     

用单克隆抗体研究和分析霍乱弧菌抗原(摘要)

本文用ELISA以12株单克隆抗体(McAb)对55株EI Tor霍乱弧菌和用遗传学方法突变的28株霍乱弧菌的菌体抗原进行了研究,同时与四种常规分型方法进行对比试验。结果用12株McAb可将55株EI Tor霍乱弧菌分成11种抗原决定簇和18个McAb型,将遗传学方法的突变株分成9种抗原决定簇和10个McAb型。其中一株McAb 2B_1H_1F_3能识别所有55株 EI     

O1群小川型霍乱弧菌单克隆抗体的制备与鉴定

目的制备抗O1群小川型霍乱弧菌(VibriocholeraeO1serotypeOgawa)特异性单克隆抗体(McAb),为霍乱的早期快速诊断提供有力的抗体工具。方法以灭活的O1群小川型霍乱弧菌免疫Balbc小鼠,通过杂交瘤技术制备针对O1群小川型霍乱弧菌的McAb,以间接ELISA法对所需的杂交瘤细胞株进行筛选,分析其亚类,检测其效价及相对亲和力,以间接ELISA和Westernblot鉴定McAb特异性,并进行McAb结合表位分析。结果融合了602株能分泌抗O1群小川型霍乱弧菌McAb的杂交瘤细胞株,最后得到5株能稳定分泌特异性的针对该McAb的细胞株,其抗体亚类分别为3株IgG1,1株IgG2b,1株IgG3;腹水效价均达1×10-6;亲和常数在1×108～1×109之间。间接ELISA法及Westernblot证实所获的McAb可与O1群小川型霍乱弧菌发生特异性反应。ELISA相加实验结果显示除有2株McAb识别相同的抗原表位外,其余均识别不同的抗原表位。结论获得霍乱弧菌O1群小川型特异性McAb,为O1群小川型霍乱早期快速诊断和发病机理的研究提供基础。     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究—Ⅰ.霍乱弧菌单克隆抗体的敏感性和特异性检测结果

将所获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体(McAb),用不同年代的霍乱弧菌(两种生物型)及常见的肠道菌(含不凝集弧菌),以试管凝集试验法测定它们的敏感性和特异性,并以霍乱弧菌多克隆抗体比较。结果表明,12株霍乱弧菌单克隆抗体,对各型霍乱弧菌(9株)均有不同程度的抗体效价(1:40～1280),其中四株单克隆抗体对各型霍乱弧菌的凝集效价比多克隆抗体的凝集效价高,所以较敏感;所有12株单克隆抗体,对不凝集弧菌等9种、株肠道菌的凝集效价,均<1:140,而多克隆抗体对这些肠道菌有不同程度交叉凝集(1:40～220)的却有2/4,证明这些单克隆抗体的特异性比多克隆抗体高,适合于诊断应用。     

抗人胃腺癌细胞株SGC-7901单克隆抗体的建立及初步临床应用

本文报道了抗人胃腺癌细胞株SGC-790单克隆抗体(McAb)的研究结果,探讨了McAb的特性及相应抗原的性质,并报道了初步临床应用结果。 一、抗胃癌细胞株SGC-7901杂交瘤细胞株的建立及抗体特性分析:三次融合共获4株     

霍乱弧菌稻叶型McAb杂交瘤细胞建株及其特异性敏感性的研究

本文报道的是采用化学缸简易法(另文发表)建立霍乱弧菌稻叶型杂交瘤细胞株,及其单克隆抗体(McAb)的特异性和敏感性的研究。用经煮沸除鞭毛的霍乱弧菌稻叶型菌体免疫BALB/c小鼠后,取脾按常规方法进行融合,用间接血凝法(IHA)筛选,从中筛选8株较     

天津地区抗霍乱弧菌单克隆抗体(McAb)细胞系的建立及其应用的研究

应用天津市防病中心保存的EL-Tor霍乱弧菌小川型和稻叶型菌体抗原,混合免疫BALB/c小鼠,小鼠免疫脾细胞与骨髓瘤细胞Sp 2/0-Ag 14融合,采用ELISA法筛选抗霍乱弧菌McAb阳性孔,细胞融合率为328/384(85.2％);经过三次克隆化后筛选出9株分泌抗霍乱弧菌菌体抗原的McAb杂交瘤细胞系。取其中两株细胞进行分析研究;培养上清抗体效价在     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅱ.酶标霍乱弧菌单克隆抗体快速检测霍乱弧菌的实验研究

本文就所获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体中有种特异性的三株(2B_1H_1C_6,2B_1H_1F_6及2B_1H_1F_3)单克隆抗体及抗霍乱弧菌多克隆抗体,作酶标抗体直接法和间接法,对霍乱弧菌模拟标本进行快速检测,探究在临床诊断应用中的价值。结果表明,酶标McAb较酶标多克隆抗体敏感,前者在10~4/ml菌时可以检出,后者要在10~4～10~6/ml菌时才能检出;同时表明酶标间接法比直法敏感,特异性实验结果显示酶标单克隆抗体对10株霍乱弧菌有很高的     

霍乱弧菌稻叶型McAb的研制与鉴定

<正> 为了制备特异敏感的诊断霍乱弧菌的试剂,我们于1984年曾建立霍乱弧菌小川型McAb,并对其诊断应用的价值进行了一系列的研究。但因所制备的McAb主要是针对霍乱弧菌小川型菌株,为了制备对本菌配套诊断试剂,我们使用化学CO_2缸法又成功地建立了霍乱弧菌稻叶型McAb杂交瘤细胞系,并对其所分泌的抗体进行了鉴定。现将结果报道如下。     

用鼠型单克隆抗体鉴定欧洲肾综合征出血热病毒抗原变异特点

本文报道了应用Puumala(Puu)病毒自然宿主—(?)鼠的脾细胞制备抗Puu单克隆抗体(McAb)的方法,并用所制的McAb对11株HFRS病毒的抗原变异进行了分析。Puu病毒为欧洲流行性肾病的病原体。近年来,尽管制备了许多抗汉坦病毒的鼠McAb,     

细粒棘球蚴单克隆抗体的研制和应用

<正> 棘球蚴病的免疫诊断方法主要是检测病人血清中的特异抗体,现有检测方法的敏感性和特异性仍不理想,与所采用的抗原性质有关。由于缺乏标准化的诊断抗原,不同实验室的检测结果不一,也无法比较。因此对棘球蚴囊液抗原有进一步研究必要。本文采用淋巴细胞杂交瘤技术制备了高效特异的单克隆抗体(McAb),对不同宿主的棘球蚴囊液抗原组分的理化特性和抗原性进行了分析。 以初步纯化的人源棘球蚴囊液抗原免疫BALB     

大鼠-小鼠淋巴细胞杂交瘤细胞株的建立

<正> 在建立针对小鼠共有抗原的单克隆抗体(McAb)的淋巴细胞杂交瘤细胞株时,若仍以小鼠(同种)作致敏淋巴细胞的供者,很难使小鼠对这类抗原致敏,因此有必要免疫异种动物以解决这问题。本文报道产生针对小鼠 IgE 决定簇的 McAb 的大鼠-小鼠淋巴细胞杂交瘤的建株。作者用小鼠抗天花粉蛋白的 IgE McAb TE-1(见顾华、叶敏,第三     

单克隆抗体在轮状病毒抗原分析和病原诊断上的应用

轮状病毒(RV)是人类及其他哺乳类、禽类急性胃肠炎的主要病原。RV性腹泻主要见于2岁以下婴幼儿，对新生儿、老年人及免疫缺陷者亦可感染，最近在我国还发现了引起成人腹泻流行的成人腹泻轮状病毒。显然研制出RV疫苗对预防腹泻、保证公众健康是非常必要的。单克隆抗体(McAb)是针对复杂抗原上单一决定基的抗体，鉴予这一性质，McAb可以从分子水平进行抗原定位，分析抗原结构及与功能的关系，对予病毒的病原诊断分型，疫苗研制等有重要作用。国外近几年对RV McAb研究较多，而国内仅见于潘兆千等的报道。本文就RV McAb在抗原分析及病原诊断分型上的应用做一综述。     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅳ.McAb吖啶橙(McAb-AO)简易免疫荧光菌团法快速检定霍乱弧菌的实验研究

将获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体中的一株“2B_1H_1C_6”的McAb与荧光素吖啶橙标记制成简易AOFA、对霍乱弧菌模拟标本进行快速检测,研究其敏感性,特异性和实用性同时以霍乱弧菌多克隆抗体比较。结果表明:McAb-AO比PcAb-AO敏感度高,特异性强(前者仅对霍乱弧菌呈现荧光菌团,对其它肠道菌无交叉反应),在每毫升类模拟标本中含10个     

单克隆抗体分析西安地区单纯疱疹病毒的抗原性

应用15种抗HSV型共同性和2种分别抗HSV-1和HSV-2型特异性McAb,分析了自西安地区分离出的43株HSV临床株的抗原性。间接免疫荧光试验的结果表明,从宫颈炎病人中分离出的15株HSV除1株为HSV-1外,14株为HSV-2。从口唇、眼部感染分离出的28株HSV均为HSV-1。用15种型共同性McAb对HSV的抗原性分析表明,6种McAb对所有临床株均呈阳性反应,另外9株McAb仅与部分HSV毒株呈阳性反应。43株HSV分离株中22株(51.2％)可与所有型共同性McAb反应,21株(48.8％)仅与部分McAb反应。比较HSV-1和HSV-2分离株与型共同性McAb反应的结果发现,HSV-2毒株的抗原性改变仅发生于3个抗原位点上,而HSV-1毒株的抗原性改变可发生于9个抗原位点上。同时对3株HSV参考株的抗原性分析表明,HSV-2参考株333仅与7种型共同性McAb反应且不与抗HSV-2型特异性McAb反应。研究结果表明,由同一地区分离出的HSV在抗原性上有明显差异,对造成这种抗原性差异的原因有待进一步研究。     

抗单纯疱疹病毒单克隆抗体的研究——Ⅲ、单克隆抗体的体外中和作用及动物体内保护作用

单克隆抗体(McAb)具有高度特异性,在病毒性疾病的诊断、防治及研究中具有广阔的应用前景。作者曾报道建立了产生抗单纯疱疹病毒(HSV)McAb的杂交瘤细胞系,并在临床检测HSV抗原中应用抗HSV McAb,发现其具有特异性强、敏感度高等优点。本文报道抗HSV McAb在体外及动物体内HSV感染中的中和作用及保护作用,旨在为研究抗HSV McAb的免疫学特性及临床治疗应用提供实验证据。     

霍乱弧菌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立(摘要)

用霍乱弧菌稻叶型35A3菌体抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞,与骨髓瘤细胞Sp2/0～Ag14融合,获得了841C71、841C72两个分泌抗霍乱弧菌菌体抗原单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞系。其产生的抗体与同名菌0抗原做ELISA、间接血凝及微量杀菌试验,测知培养上清抗体滴度为1:8～1:64,腹水抗体滴度为1:1280～1:5120,对小川型O抗原滴度     

供应霍乱弧菌单克隆抗体

<正> 由上海第二军医大学微生物教研室研制的霍乱弧菌单克隆抗体(稻叶型和小川型)已经专家鉴定。认为可用于霍乱弧菌的实验诊断和科学研究(包括对霍乱弧菌抗原的分析研究等)。本单克隆抗体比多克隆抗体特异和敏感,效果佳,需要者可与该室吴挹芳同志联系。     

抗细菌外毒素的单克隆抗体的研究进展

近年来,对细菌外毒素的研究已从胞细水平,分子水平进入基因水平。目前已对一些常见的外毒素如霍乱弧菌肠毒素、大肠杆菌的ST和LT、白喉杆菌外毒素、破伤风杆菌痉挛毒素等高产菌株的外毒素进行基因克隆,并报道了产毒条件,提纯方法、分子结构 理化生物学特性及检验技术。使人们可为制备抗外毒素单克隆抗体(McAb)提供充足的外毒素抗原,用于外毒素分子结构与     

抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原单克隆抗体的研制

目的应用杂交瘤技术制备抗脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原的单克隆抗体。方法用脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原免疫雌性Balbc小鼠,取其致敏脾脏淋巴细胞与SP20小鼠骨髓瘤细胞融合。间接ELISA法筛选阳性克隆,制备腹水。检测McAb效价、抗体亚类和杂交瘤细胞核型。结果获得4株阳性杂瘤细胞株,选择一株制备腹水,ELISA效价为1∶2.4×106,中和试验效价1∶1.3×104,蛋白浓度为27.2mgmL。McAb与Ⅱ型Sabin株C抗原(ⅡC)、Ⅰ型Sabin株及Ⅲ型Phizer株D抗原(ⅠD、ⅢD)不发生交叉反应,具有高度特异性。结论成功的制备了针对脊髓灰质炎病毒Ⅱ型Sabin株D抗原的McAb,为进一步研究IPV效力检测奠定了基础。