白藜芦醇预处理介导Wnt/β-catenin信号通路保护脑缺血再灌注大鼠海马区神经元损伤

目的:研究白藜芦醇(resveratrol,Res)预处理对脑缺血再灌注(ischemia reperfusion,I/R)大鼠海马区Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达量、星形胶质细胞及神经元形态的影响,探讨白藜芦醇对脑缺血再灌注大鼠海马区神经元损伤的保护作用机制。方法:将SD大鼠60只随机分为四组,每组15只:正常对照组(Control)、假手术组(Sham)、缺血再灌注组(I/R)和白藜芦醇治疗组(Res)。Res组大鼠连续7 d腹腔注射白藜芦醇(每日30 mg/kg,由2%DMSO溶解),Sham组和I/R组注射同等量2%DMSO;7 d后Res组和I/R组采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MACO)模型,缺血90 min,再灌注24 h。Sham组仅分离暴露一侧颈内动脉,不插入线栓;24 h后对各组大鼠进行神经功能学评分;脑组织TTC染色;尼氏染色;免疫组化检测海马区GSK-3β和星型胶质细胞(GFAP)数量及形态变化;Western Blot分别检测Wnt信号通路相关因子GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin蛋白水平表达量。结果:再灌注24 h后,尼氏染色显示与I/R组相比Res组海马区仅有少量的神经元破碎和消失,形态尚完整(P0.05),同时行为学评分和梗死面积也低于I/R组(P0.05)。免疫组化显示,与I/R组相比Res组GSK-3β的表达量明显降低,伴随星形胶质细胞活化状态和数量减少(P0.05)。Western Blot显示,与免疫组化表达趋势结果一致Res组GSK-3β的的表达量明显低于I/R组,而p-GSK-3β、β-catenin的表达量均增高(P0.05)。结论:白藜芦醇可能是通过调节Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达进而有效的降低大鼠脑缺血再灌注后神经元的损伤。     

食欲素-B抑制大鼠脑缺血再灌注损伤

目的研究食欲素-B(orexin-B,OXB)对大鼠脑缺血再灌注的神经保护作用及其分子机制。方法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),将大鼠随机分为:假手术组(control)、缺血再灌注组(I/R)、缺血再灌注+PBS组(I/R+PBS)和缺血再灌注+orexin-B组(I/R+OXB);通过神经功能评分确定模型是否成功;TTC染色法测定大鼠脑梗死体积;Western blot检测海马区食欲素受体2(OX2R)、p-AKT和p-GSK-3β蛋白表达;跳台实验检测大鼠学习与记忆。结果 I/R组海马中OX2R及p-AKT蛋白表达较对照组减少(P<0.05),p-GSK-3β蛋白表达增加(P<0.05),而I/R+OXB组上述变化明显减轻(P<0.05);I/R+OXB组脑梗死体积明显减少,I/R组潜伏期时间减少,错误次数增多(P<0.05),而I/R+OXB组上述变化显著减小(P<0.05)。结论食欲素-B抑制脑缺血再灌注损伤,可能与增强p-AKT活性、抑制p-GSK-3β活性有关。     

神经节苷脂对脑缺血再灌注大鼠海马ARMS与CrkL表达的影响

目的探讨单唾液酸神经节苷脂(GM1)对脑缺血再灌注大鼠海马ARMS与CrkL表达的影响。方法96只SD大鼠随机分为:假手术组(Sham,32只)、神经节苷脂治疗组(GM1,32只)、缺血再灌注组(I/R,32只)。GM1治疗组和I/R组依据缺血后再灌注的不同时间点再细分为6 h、12h、24 h、3 d 4个组。应用免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠海马ARMS与CrkL蛋白的表达。结果免疫组织化学方法及Western blot检测发现,假手术组大鼠海马有微量ARMS与CrkL表达,而经过脑缺血再灌注处理后,ARMS与CrkL表达水平在6 h已显著升高,在24h时达到峰值最高,3d时表达较假手术组仍显著升高;与同一时间点的缺血再灌注组大鼠比较,GM1治疗组的ARMS与CrkL蛋白阳性表达亦显著升高(P0.05)。结论GM1对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用可能与上调ARMS与CrkL蛋白的表达相关。     

异丙酚对脑缺血再灌注损伤大鼠内质网应激的影响及作用机制

目的 探讨异丙酚对脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠的神经保护作用及机制。方法 30只SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham)、缺血再灌注组(I/R)及异丙酚组，每组10只。采用Zea Longa评分评估神经功能损伤；HE染色观察大鼠大脑缺血区形态结构；流式细胞仪与TUNEL检测海马神经元凋亡率；免疫荧光检测葡萄糖调控蛋白78 (GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)表达；Western blot检测脑组织内质网应激相应蛋白p-PERK、p-EIF-2a、ATF4和CHOP的表达。结果 与Sham组相比，I/R组大鼠神经功能评分明显升高、海马神经元凋亡率显著升高、p-PERK、p-eIF2α、ATF4和CHOP蛋白表达明显上调；给予异丙酚治疗后，神经功能缺损评分、海马神经元凋亡率均显著降低，p-PERK和p-eIF2α、ATF4和CHOP蛋白的表达降低。结论 异丙酚通过抑制p-PERK-p-elF2α-ATF4-CHOP通路和内质网应激保护脑缺血再灌注损伤大鼠的脑神经。     

姜黄素对大鼠脑缺血再灌注海马神经元凋亡及PI3K信号因子表达的影响

目的探讨姜黄素对大鼠脑缺血再灌注致海马神经元凋亡及PI3K信号通路相关因子表达的影响。方法采用线栓法阻塞SD大鼠大脑中动脉(MCAO),建立大鼠局灶性脑缺血/再灌注实验模型,将40只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血/再灌注组(I/R组)和姜黄素处理组(C组);各组于再灌注后24h,大鼠放血处死,取静脉血分离血清,ELISA检测血清中炎症因子IL-6,TNF-a及脑损伤标志物S-100β的变化;另取脑组织,一部分浸泡福尔马林,HE染色观察脑组织变化,TUNEL法观察脑组织细胞凋亡情况;采用Western blot法检测海马P-PI3K、Akt和Caspase-3蛋白表达变化。结果姜黄素可以减轻大鼠脑缺血再灌注致海马神经元凋亡,降低血清中IL-6、TNF-a、S-100β含量,抑制脑组织中caspase-3、PI3K和Akt蛋白表达水平(P0.05)。结论姜黄素减轻缺血再灌注导致的脑损伤可能与PI3K信号通路相关。     

肢体缺血后处理通过激活MAPK途径保护大鼠海马区缺血性神经元

目的探讨肢体缺血后处理对缺血性神经元损伤的作用,观察大鼠海马CA1区ERK1/2的磷酸化及其蛋白表达的变化情况。方法健康成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组(sham)、全脑缺血再灌组(四动脉闭塞全脑缺血模型ischemia/reperfusion,I/R)、肢体缺血后处理组(limb ischemia postconditioning,Lpost)、肢体缺血后处理+ERK1/2抑制剂组(Lpost+PD98059)。光镜下焦油紫染色法观察各组大鼠海马CA1区神经元存活情况;Western blot法检测海马CA1区ERK1、2磷酸化及蛋白表达情况。结果 Western blot结果显示脑缺血再灌注各时间点Lpost组p-ERK1/2水平均较I/R组高,且于再灌注后10min、1d出现两个高峰,给予ERK1/2上游激酶抑制剂PD98059后能够抑制再灌注后1dp-ERK1/2水平的升高;而各时间点各组ERK1/2水平之间无明显差异。焦油紫染色结果显示再灌注1d后,I/R组与sham组相比,海马CA1区存活神经元数量明显减少;Lpost组较I/R组海马CA1区存活神经元数量明显增加;而给予ERK1/2上游激酶抑制剂PD98059后(Lpost+PD98059)神经元生存数量较Lpost组大幅下降。结论肢体缺血后处理具有抗大鼠海马CA1区缺血性神经元损伤的作用,激活ERK1/2通路可能是其发挥保护作用机制之一。     

脑缺血预处理诱导海马CA1区神经元Bad磷酸化及其蛋白表达的变化

目的: 观察大鼠脑缺血预处理(CIP)后不同时间点海马CA1区胞质及线粒体中Bcl-xl/Bcl-2相关死亡促进因子(Bad)和p-Bad蛋白水平变化,探讨其在缺血耐受机制中的作用.方法: 采用SD大鼠4动脉结扎全脑缺血模型,利用焦油紫染色、免疫印迹法检测神经元的损伤及蛋白表达.结果: 焦油紫染色显示,脑缺血再灌注(I/R)3d,CA1区神经元大量损伤,与I/R组相比,CIP组CA1区存活的神经元增加;免疫印迹结果显示,CIP组胞质中Bad磷酸化水平于再灌注3h和3d出现高峰,而其蛋白表达无明显变化;与I/R对应时间点相比,CIP后再灌注3h和3d p-Bad升高.CIP后线粒体中p-Bad在再灌注不同时间点无明显变化,而其蛋白表达在再灌注后期(6h～3d)逐渐下降.结论: 脑缺血预处理可有效减轻海马CA1区神经元损伤;同时诱导神经元胞质中p-Bad蛋白水平升高,线粒体Bad蛋白表达降低.脑缺血预处理后Bad线粒体转位的降低可能是缺血耐受的重要机制.     

缺血后适应对大鼠脑缺血再灌注损伤Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:研究缺血后适应预适应对Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达的影响,以此探讨缺血后适应预适应可能的内源性保护机制。方法:40只雄性SD大鼠,随机分成假手术组,缺血再灌注预适应组,缺血再灌注后适应组和缺血再灌注组共4组。每个亚组10只。按Longa法制作局灶性脑缺血模型。免疫组化染色检测Bcl-2和Bax蛋白,计算细胞阳性率。结果:缺血后适应预适应组Bcl-2阳性率较缺血再灌注组显著增加;缺血后适应预适应组Bax阳性率较缺血再灌注组显著下降。结论:缺血后适应预适应能促进Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达,可能是缺血后适应预适应在脑缺血再灌注损伤中发挥内源性脑保护作用的机制之一。     

行为学训练对大鼠海马缺血后神经干细胞增殖的影响

目的:探讨穿梭箱训练对大鼠海马缺血后糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)表达及对神经干细胞增殖分化的影响机制。方法:采用大脑中动脉栓塞(MCAO)制作大鼠血管性痴呆模型,免疫组织化学检测穿梭箱训练后海马神经干细胞BrdU的表达,观察穿梭箱训练对血管性痴呆大鼠神经干细胞增殖分化的影响。检测缺血海马GSK-3β的表达,观察穿梭箱训练对血管性痴呆大鼠GSK-3β的影响。结果:脑缺血再灌注第3天缺血海马神经元BrdU阳性细胞明显增多,第7天达高峰。GSK-3β反应产物脑缺血再灌注第7天较正常组增多,随缺血再灌注时间的进一步延长逐渐减少,第14天后持续低水平表达。穿梭箱训练后BrdU、GSK-3β蛋白的表达明显增加。结论:穿梭箱训练促进神经干细胞的增殖及缺血脑组织GSK-3β的表达,其作用可能由GSK-3β信号介导。     

瑞舒伐他汀预处理对局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠Bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨瑞舒伐他汀预处理对大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织Bcl-2和Bax表达的影响。方法:48只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血/再灌注组(I/R组)、溶剂对照组(Vehicle组)和瑞舒伐他汀预处理组(Ros组)。Ros组在模型制备前用瑞舒伐他汀5 mg/kg/d连续灌胃10 d,1次/d;Vehicle组用相同体积的生理盐水连续灌胃10 d。线栓法制作大鼠大脑中动脉脑缺血/再灌注模型,于缺血2 h后再灌注24 h后行神经功能评分,断头取脑,免疫组织化学法和RT-PCR法观察脑组织Bcl-2和Bax表达水平的变化。结果:大鼠脑缺血/再灌注损伤后,Bcl-2和Bax显著增多;与I/R组和Vehicle组相比,Ros组神经功能改善,Bcl-2的表达显著上调,Bax的表达显著下调,Bcl-2/Bax比值显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:瑞舒伐他汀预处理对大鼠脑缺血/再灌注损伤有神经保护作用,其机制可能与上调脑组织中Bcl-2的表达,下调Bax的表达,Bcl-2/Bax比值增加,从而抑制胞凋亡有关。     

脑缺血再灌注后大鼠海马CA1区p-JNK表达和Bax的相关性的试验研究

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区活化的JNK蛋白的表达情况,探讨缺血性脑损伤后神经细胞凋亡相关机理.方法:参照Zea Longa报道的线栓法制备缺血再灌注动物模型,随机将雄性SD大鼠分为正常对照组、缺血再灌注组及假手术对照组.并分别在不同时间点断头取脑制作标本,连续切片作p-JNK、Bax免疫组化染色及HE染色.结果:脑缺血再灌注后海马CA1区p-JNK表达与Bax的表达呈正相关(r=0.838,P＜0.01).p-JNK明显表达时间(2h)略早于Bax的表达,且产生的高峰时间亦稍早.结论:海马CA1区p-JNK表达与Bax的表达呈正相关.     

棕榈酰转移酶ZDHHC3对脑缺血-再灌注损伤的影响

目的:探讨棕榈酰转移酶ZDHHC3在脑缺血-再灌注损伤大鼠及氧糖剥夺/复氧(OGD/R)细胞模型中的表达和保护作用。方法:制备大脑中动脉闭塞(MCAO)的SD大鼠模型,缺血90 min,再灌注24 h后,RT-qPCR和Western blot测定大鼠大脑皮层和海马组织中ZDHHC3的mRNA和蛋白水平。免疫荧光双标测定ZDHHC3在大鼠脑中的细胞定位。建立OGD/R的PC12细胞模型,RT-qPCR和Western blot测定PC12细胞中ZDHHC3的mRNA和蛋白表达水平。在OGD/R模型中,转染ZDHHC3过表达质粒,Western blot检测ZDHHC3蛋白的表达情况及过表达ZDHHC3后突触相关蛋白突触后致密蛋白95(PSD95)和AMPA受体2(AMPAR2)及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达水平,MTT法检测细胞活力,流式细胞术分析细胞凋亡程度。结果:与对照组相比,ZDHHC3和PSD95在MCAO大鼠大脑皮层和海马及OGD/R损伤的PC12细胞中的mRNA和蛋白表达水平降低(P0.05)。ZDHHC3在大鼠神经元中表达,但在星形胶质细胞中不表达。与模型组相比,过表达ZDHHC3的细胞中PSD95和AMPAR2表达增加,Bcl-2表达增加,Bax表达下降(P0.01),细胞活力增强,细胞凋亡率减少(P0.05)。结论:ZDHHC3可能通过激活突触相关蛋白,调节突触可塑性,减少细胞凋亡,从而对脑缺血-再灌注损伤大鼠发挥保护作用。     

重组人促红细胞生成素对脑缺血再灌注小鼠海马IL-1β表达的影响

目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)对脑缺血再灌注小鼠白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)表达的影响。方法 96只昆明小鼠随机分为3组,每组32只:假手术组(Sham);rHuEPO治疗组;缺血再灌注组(I/R)。每组依据缺血后再灌注不同时间点再分6 h、24 h、3 d、7 d 5个小组。免疫组化和Western blot检测各组小鼠IL-1β的表达。TUNEL法检测海马细胞凋亡情况。结果缺血再灌注组IL-1β蛋白表达量和凋亡细胞数明显高于假手术组(P<0.05),而rhEPO治疗组IL-1β蛋白表达量和凋亡细胞数则明显少于缺血再灌注组(P<0.05)。结论 rHuEPO很可通过下调IL-1β的表达参与脑缺血再灌注损伤。     

氟伐他汀预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠凋亡相关因子表达的影响

目的:观察氟伐他汀预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织凋亡相关因子Bcl-2和Bax的变化,探讨氟伐他汀的脑保护作用。方法:40只雄性SD大鼠随机分为四组:假手术组(Sham组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、溶剂对照组(Vehicle组)和氟伐他汀预处理组(Flu组)。Flu组在模型制备前用氟伐他汀10 mg/kg,连续灌胃14 d(1次/d);Vehicle组用相同体积的生理盐水连续灌胃14 d。线栓法制作大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注损伤模型,于缺血2 h再灌注24 h后断头取脑,免疫组织化学法和RT-PCR法检测Bcl-2和Bax表达水平的变化。结果:与I/R组和Vehicle组相比,Flu组Bcl-2表达显著上调,Bax表达显著下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:氟伐他汀预处理能够明显上调脑缺血再灌注大鼠Bcl-2的表达,并下调Bax的表达,其机制部分可能与抑制细胞凋亡有关。     

神经节苷脂对脑缺血再灌注大鼠海马CREB表达的影响

目的探讨单唾液酸神经节苷脂(GM1)对脑缺血再灌注大鼠海马cAMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响。方法 72只SD大鼠随机分为:假手术组(Sham,8只)、神经节苷脂治疗组(GM1,32只)、缺血再灌注组(I/R,32只)。GM1治疗组和I/R组依据缺血后再灌注的不同时间点再细分为6h、12h,24h、3d,共4个小组。应用免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠海马CREB蛋白的表达。结果免疫组织化学方法检测时发现,缺血处理后,CREB表达水平迅速增高,在6h时最高,之后持续激活,至12h时开始降低,与假手术组相比,CREB阳性产物的平均光密度值(MOD)显著升高(P0.01);与相同时间点的缺血组比较,GM1治疗组的CREB蛋白阳性表达水平明显升高(P0.01)。Western blot方法也得到了相同的结论。结论 GM1对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用可能与上调CREB蛋白的表达相关。     

去甲肾上腺素和缺血预处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡、Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:研究去甲肾上腺素预处理(NE-P)和缺血预处理(IP)对大鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。方法:复制缺血再灌注损伤(IRI),采用末端标记技术(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;应用免疫组化SABC法检测Bcl-2和Bax蛋白表达。结果:I/R组凋亡细胞较多,NE-P组及IP组凋亡细胞明显少于I/R组(P＜0.01)。在I/R组Bcl-2的表达少而Bax的表达较多,NE-P组及IP组Bcl-2的表达明显高于I/R组(P＜0.01),而Bax的表达明显低于I/R组(P＜0.01)。NE-P组与IP组各指标均无显著差异(P＞0.05)。结论:NE-P可抑制I/R诱发的心肌细胞凋亡,Bcl-2和Bax的蛋白表达在心肌凋亡的发生中起重要作用。NE-P与IP两者对心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响的作用相近。     

N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺对肾缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关因子表达的影响

目的探讨N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(LAG)对肾缺血再灌注致心肌细胞凋亡及相关因子表达的影响。方法清洁级Wistar大鼠30只,体重250~300 g,随机分为3组(n=10):假手术组(sham组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和LAG处理组(LAG+I/R组)。Sham组仅切除右肾,游离左肾动脉,关腹。LAG+I/R组和I/R组切除右肾,夹闭左肾动脉45min再灌注以制备肾缺血再灌注模型,分别于夹闭动脉前30min给予LAG150mg/kg和等量生理盐水。三组均于再灌注6h处死大鼠,取心肌组织,HE染色观察病理组织学变化,Masson染色观察心肌细胞变化;ELISA检测血浆中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western-blot法检测Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达水平。结果 N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺能够减轻肾缺血再灌注致心肌细胞损伤,可降低MDA表达水平,升高SOD表达(P0.05),抑制心肌中Bax和Caspase-3蛋白表达(P0.05)。结论肾缺血再灌注可导致心肌细胞凋亡,造成一定的心肌损伤,LAG对肾缺血再灌注心脏损伤的保护作用可能与升高SOD和Bcl-2表达,降低MDA、Bax和Caspase-3表达相关。     

后处理对肠缺血-再灌注大鼠肺组织凋亡相关基因表达的影响

目的: 观察后处理对肠缺血-再灌注大鼠肺组织凋亡相关基因表达的影响。方法: 24只SD大鼠随机分为3组(n=8):假手术(sham)组、缺血-再灌注(I/R)组、缺血后处理(IPOST)组;应用光学显微镜观察各组大鼠肺组织病理学变化,测定肺湿/干比值(W/D)。应用RT-PCR和Western blotting方法分别检测各组大鼠肺组织Bcl-2、Bax 和caspase-3 mRNA及其蛋白表达的变化。结果: 与T/R组相比,IPOST组大鼠肺组织病理学改变明显减轻,肺W/D显著下降(P<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),而Bax和caspase-3 mRNA与蛋白表达量则明显降低(P<0.05)。结论: 缺血后处理可能通过上调Bcl-2 mRNA和蛋白表达,下调Bax mRNA和蛋白表达,减轻大鼠肠缺血-再灌注所致的急性肺损伤。     

细胞焦亡参与脑缺血再灌注损伤的初步研究

目的:探讨细胞焦亡在脑缺血再灌注后不同时点海马和皮质区的变化,从NLRP3炎症小体介导的经典焦亡途径探讨其机制,分析细胞焦亡在脑内不同部位损伤中的作用。方法:SD大鼠随机分成假手术组(sham组)与模型组(MCAO/R组),模型组又分为脑缺血再灌注6 h组(MCAO/R 6 h组)、12 h组(MCAO/R 12 h组)和24 h组(MCAO/R 24 h组)。右侧改良线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血-再灌注模型。采用神经功能评分、2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法和形态学观察评价神经细胞损伤程度;TUNEL和caspase-1免疫荧光双染检测细胞焦亡;Western blot法检测NLRP3、cleaved caspase-1、pro-caspase-1和白细胞介素1β(IL-1β)蛋白的表达。结果:脑缺血再灌注后不同时间均出现神经功能损伤,TTC染色显示随着再灌注时间的延长,脑梗死体积逐渐增大(P0.05)。海马CA1区及皮质区出现组织结构疏松,间质水肿,神经细胞排列紊乱,胞核染色加深,细胞核碎裂,细胞数量减少等细胞死亡的典型形态学特征。免疫荧光双染检测表明,脑缺血再灌注后不同时点均出现细胞焦亡现象,海马CA1区和皮质区在再灌注12 h和24 h时最明显(P0.05)。Western blot检测结果表明,NLRP3介导细胞经典焦亡通路中的NLRP3、cleaved caspase-1和pro-caspase-1、IL-1β蛋白表达在脑缺血再灌注后均不同程度上调,NLRP3蛋白在海马区再灌注12 h和24 h表达明显增高(P0.05),皮质区再灌注6 h表达明显增高(P0.05);pro-caspase-1蛋白在海马区再灌注各个时点表达均明显增高(P0.05),皮质区再灌注24 h表达明显增高(P0.05);cleaved caspase-1蛋白在海马区再灌注12 h表达明显增高(P0.05),皮质区再灌注24 h表达明显增高(P0.05); IL-1β蛋白表达在海马区再灌注24 h明显增高(P0.05),皮质区再灌注6 h表达增高(P0.05)。结论:细胞焦亡参与了脑缺血再灌注后神经细胞损伤,经典焦亡途径在海马和皮质区均发挥重要调控作用,以海马区尤为明显,提示海马区是脑缺血再灌注后细胞焦亡和炎症反应诱发的继发性神经损伤的主要部位。     

尾静脉注射脂肪间充质干细胞修复大鼠脑缺血再灌注损伤

目的探讨经尾静脉注射脂肪间充质干细胞是否对脑缺血再灌注损伤有一定的修复作用及相关机制。方法 45只SD大鼠随机均分为假手术组(sham),模型组(I/R)和治疗组(ADMSCs)。I/R和ADMSCs组大鼠采用线栓法大脑中动脉脑缺血再灌模型(MCAO)建立局灶性脑缺血再灌动物模型。缺血2h后再灌注,6ADMSCs组再灌注0和12h经尾静脉注射2.0×10个(0.5ml)脂肪间充质干细胞,I/R组注射等量的生理盐水。再灌注24h后处死大鼠并迅速取脑组织。通过TTC染色计算脑梗塞面积;TUNEL检测缺血部分脑组织中的细胞凋亡情况;Western blot检测缺血部分脑组织中i NOS和bcl-2/bax的表达水平。结果 ADMSCs组显著降低了脑梗塞体积,抑制神经细胞凋亡,减少Bax/bcl-2蛋白比,i NOS的表达水平明显下调。结论尾静脉注射ADMSCs修复脑I/R损伤可能与抑制神经细胞凋亡和i NOS表达相关。