苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织Smad3和Smad7 表达的影响研究

【摘要】目的 探讨苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织Smad3蛋白和Smad7蛋白表达的影响,为我国中草药的开发提供参考。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组及苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组。除正常组外,其余组大鼠静脉注射阿霉素62 mg/kg造模。造模成功后,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组分别给予苦瓜总皂苷10mg/（kg·d）,20mg/（kg·d）,40mg/（kg·d）剂量灌胃。8 周后处死大鼠,收集血及肾脏组织,检测24小时蛋白尿、血尿素氮 (Bun)以及血肌酐(Cr)含量。HE染色检测其肾脏组织病理学改变,免疫组化、Western blot以及RT PCR检测肾脏组织中Smad3和Smad7的表达。结果 与正常组比较,模型组和苦瓜总皂苷治疗组24小时尿蛋白在治疗8周后明显升高(P＜0.05),而苦瓜总皂苷3个治疗组相较于模型组有明显降低(P＜0.05)。苦瓜总皂苷治疗能明显降低阿霉素肾病大鼠的Bun和Cr。HE染色结果显示,与正常组比较,模型组出现明显的肾小球硬化同时伴有明显的肾细胞损伤,苦瓜总皂苷治疗后,上述症状均有明显的改善。免疫组化、Westernblot以及RT PCR结果显示,与正常组相比,模型组Smad3明显升高(P＜0.05),Smad7明显下降(P＜0.05);苦瓜总皂苷治疗后,Smad3表达明显下降(P＜0.05),Smad7蛋白表达升高(P＜0.05)。结论苦瓜总皂苷能明显改善糖尿病肾病已经受损的肾小球以及肾小管损伤,同时降低24小时蛋白尿,调节Bun和Cr,这可能与其可以调节Smad3和Smad7蛋白表达有关。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心脏组织中MMP-9和HO-1表达影响

目的:探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心肌组织中血红素加氧酶1(Heme Oxygenase1,HO-1)和基质金属蛋白酶-9(Matrix Metallo Protein-9,MMP-9)表达的影响。方法:将60只健康雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,模型组和苦瓜总皂苷治疗组给予高脂饮食4周,腹腔一次性注射STZ 30 mg建立2型糖尿病大鼠模型,造模成功后,治疗组给予苦瓜总皂苷(20 mg/kg)灌胃治疗,其它两组给予生理盐水灌胃,分别于治疗4周和8周后处死大鼠各半,检测血糖、心功能以及心肌组织HO-1和MMP-9的表达。结果:与正常对照组相比,模型组血糖,心功能CK、CK-MB、LDH和HBDH明显升高(P0.05),治疗4周后均明显降低(P0.05),治疗8周后进一步降低。心肌组织HO-1和MMP-9免疫组化、Western以及RT-PCR可见,与正常组相比糖尿病组HO-1表达明显下降(P0.05),MMP-9明显升高(P0.05);治疗后HO-1表达明显增加(P0.05),MMP-9表达明显减少(P0.05)。结论:苦瓜总皂苷对大鼠心肌组织中MMP-9和HO-1有明显的调控作用。     

苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织中结缔组织生长因子表达影响

目的:采用经典造模法构建阿霉素肾病大鼠动物模型,观察苦瓜总皂苷对其是否有治疗作用及其可能的治疗机理。方法:50只雄性SD大鼠,随机分为5组,分别为正常组,模型组,苦瓜总皂苷低、中和高剂量组,每组10只。除正常组外,其余各组经尾静脉注射阿霉素6.2 mg/kg建立肾病大鼠模型,模型建立成功后,正常组和模型组给予1 m L·kg-1·d-1生理盐水注射,苦瓜总皂苷组给予苦瓜总皂苷10、20、40 mg·kg-1·d-1灌胃,治疗8周末处死大鼠,测定24 h蛋白尿,以及BUN和Scr,此外HE染色检测其肾脏病理学,免疫组织化学、Western blot以及RTPCR检测肾脏组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达。结果:与正常组相比,模型组和苦瓜总皂苷3个治疗组24 h尿蛋白含量明显增加(P0.05),同时BUN以及Cr也明显增加(P0.05),与模型组相比,苦瓜总皂苷3个剂量组均可以明显的减少大鼠尿蛋白(P0.05),同时降低Cr和BUN的含量(P0.05);HE染色正常组结构完整,没有任何发炎和其它病理特征,而模型组则有明显的肾小球系膜的增生,同时可见有炎性细胞浸润,而苦瓜总皂苷则可以明显的改善其症状;免疫组化、Western以及RT-PCR可见,与正常组相比,模型组肾脏组织中CTGF表达明显升高(P0.05),而给予苦瓜总皂苷则可以明显的降低其表达(P0.05),此外,苦瓜总皂苷3个剂量组有明显的剂量依赖性。结论:苦瓜总皂苷能够显著的改善阿霉素肾病大鼠肾脏损害,减少24 h尿蛋白,同时降低BUN和Cr的含量,进而达到对阿霉素肾病大鼠的保护作用,其机理可能与苦瓜总皂苷可以降低肾脏组织中CTGF的表达有关。     

金钗石斛多糖对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌组织中MMP 1和MMP 9表达的影响

【摘要】目的 探讨苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠肾脏组织Smad3蛋白和Smad7蛋白表达的影响,为我国中草药的开发提供参考。方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组及苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组。除正常组外,其余组大鼠静脉注射阿霉素62 mg/kg造模。造模成功后,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷低、中和高剂量治疗组分别给予苦瓜总皂苷10mg/（kg·d）,20mg/（kg·d）,40mg/（kg·d）剂量灌胃。8 周后处死大鼠,收集血及肾脏组织,检测24小时蛋白尿、血尿素氮 (Bun)以及血肌酐(Cr)含量。HE染色检测其肾脏组织病理学改变,免疫组化、Western blot以及RT PCR检测肾脏组织中Smad3和Smad7的表达。结果 与正常组比较,模型组和苦瓜总皂苷治疗组24小时尿蛋白在治疗8周后明显升高(P＜0.05),而苦瓜总皂苷3个治疗组相较于模型组有明显降低(P＜0.05)。苦瓜总皂苷治疗能明显降低阿霉素肾病大鼠的Bun和Cr。HE染色结果显示,与正常组比较,模型组出现明显的肾小球硬化同时伴有明显的肾细胞损伤,苦瓜总皂苷治疗后,上述症状均有明显的改善。免疫组化、Westernblot以及RT PCR结果显示,与正常组相比,模型组Smad3明显升高(P＜0.05),Smad7明显下降(P＜0.05);苦瓜总皂苷治疗后,Smad3表达明显下降(P＜0.05),Smad7蛋白表达升高(P＜0.05)。结论苦瓜总皂苷能明显改善糖尿病肾病已经受损的肾小球以及肾小管损伤,同时降低24小时蛋白尿,调节Bun和Cr,这可能与其可以调节Smad3和Smad7蛋白表达有关。 目的 探讨金钗石斛多糖对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌损伤的调节作用及其机制,为金钗石斛的开发和糖尿病心肌损伤的治疗提供参考。方法 清洁级雄性SD大鼠60只在适应性喂养两周后随机分为正常组、模型组与金钗石斛多糖低、中、高剂量治疗组及阳性药物贝那普利治疗组。采用高脂高糖饮食6个月造模,造模成功后给予相应治疗,治疗结束后处死大鼠。HE染色观察心脏病理学改变,同时检测血糖、胰岛素、心功能指标以及氧化和抗氧化能力指标,实时荧光定量PCR和Western Blot检测其心脏组织中MMP-1和MMP-9的表达。结果 全程中正常组大鼠饮食均正常,活泼好动,毛发发白,而模型组则有明显的多饮、多食和多尿症状,金钗石斛多糖对改善上述症状有明显的效果;HE染色正常组心肌排列正常,细胞大小均一,而模型组则有明显的纤维断裂,同时细胞核体积增大,与模型组相比,金钗石斛多糖中剂量组和高剂量组及贝那普利组上述心肌损伤特点均有明显减轻;与正常组相比,模型组血糖、胰岛素抵抗指数、AST、a HBDH、CTnl、SOD、GSH及T AOC明显升高,MDA和胰岛素含量明显降低,金钗石斛多糖治疗后,上述指标均有明显改善,特别是氧化和抗氧化能力指标SOD、MDA、GSH以及T AOC改善最为明显;与正常组相比,模型组MMP-1和MMP-9表达明显降低,金钗石斛多糖组和贝那普利组其表达明显升高,同时金钗石斛多糖中、高剂量组明显高于贝那普利组。结论 金钗石斛多糖可以明显改善Ⅱ型糖尿病大鼠受损的心肌细胞,同时改善心功能,其效果优于目前临床中使用的保护心肌药物贝那普利。分析其作用机理,可能与金钗石斛多糖可以提高大鼠抗氧化能力,增加心脏组织中MMP-1和MMP-9的表达有关。     

苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠P-GSK-3β 表达的影响

目的 分析苦瓜总皂苷对阿霉素肾病大鼠磷酸化糖原合成酶激酶-3β(P-GSK-3β)表达的影响.方法 50只SD大鼠随机分为空白组、模型组、苦瓜总皂苷低、中、高治疗组,造模成功后给予8周治疗后处死大鼠,观察肾脏病理学,肾功能及P-GSK-3β 的表达.结果 与空白组相比,模型组12h蛋白定量、BUN、Scr、TG和CHO增加(P<0.05),苦瓜总皂苷治疗组相较于模型组下降(P<0.05);与空白组相比,模型组TP、ALB、Bax和Bcl-2降低(P<0.05),苦瓜总皂苷治疗组相较于模型组升高(P<0.05);组织病理学检测,空白组肾脏无异常,模型组上皮细胞明显变性,苦瓜总皂苷治疗后明显改善;与空白组相比,模型组P-GSK-3β 大量表达(P<0.05),苦瓜总皂苷治疗组相较于模型组明显降低(P<0.05).结论 苦瓜总皂苷可改善阿霉素肾病大鼠肾功能,与其可降低肾脏P-GSK-3β 表达有关.     

苦瓜总皂苷对排卵障碍模型大鼠卵巢Caspase-3蛋白表达影响研究

目的:探讨苦瓜总皂苷对卵巢功能是否有有益作用及其可能的作用机制,以促进我国妇科学的发展。方法:选取雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组,模型对照组,苦瓜总皂苷低(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、中(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))和高剂量(40 mg·kg~(-1)·d~(-1))治疗组以及阳性药物逍遥丸干预组,大鼠在适应性喂养2周后,除正常对照组,其余5组给予颈背部皮下1.25 mg丙酸睾丸酮一次性注射造模,待大鼠阴道开口后,检测其阴道上皮是否有持续角化来判定排卵障碍模型大鼠是否成功。造模成功后给予相应药物治疗,正常对照组和模型对照组只给予对应量生理盐水灌胃;治疗6周后处死大鼠,收集血清和卵巢组织,测定其血清中胆红素、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA);同时免疫组化、Western以及半定量PCR观察卵巢组织Caspase-3蛋白的表达特点。结果:与正常组相比,模型组总胆红素、直接胆红素以及丙二醛明显升高(P0.05),总抗氧化能力明显下降(P0.05),苦瓜总皂苷治疗后,相较于模型组,3个治疗组以及逍遥丸干预组总胆红素、直接胆红素以及丙二醛明显下降(P0.05),其中中剂量和高剂量组和正常对照组一致;此外苦瓜总皂苷治疗后,卵巢颗粒细胞免疫组化、Western blot以及半定量PCR检测Caspase-3结果表明,模型组卵巢细胞Caspase-3表达量较多,而3个治疗组均可以明显的减少卵巢细胞Caspase-3蛋白表达,且高剂量组效果优于低剂量组,中高剂量组优于逍遥丸治疗组。结论:苦瓜总皂苷能改善排卵障碍模型大鼠卵巢的氧化损伤和细胞凋亡,推测其是通过此途径来改善卵巢功能,同时其效果优于目前临床中常用的逍遥丸。     

罗汉果皂苷对阿霉素心肌损伤大鼠氧化应激和凋亡调节作用研究

目的 :从氧化应激和凋亡途径研究罗汉果皂苷对阿霉素心肌损伤大鼠的治疗作用,以为罗汉果皂苷治疗阿霉素心肌损伤提供基础实验理论。方法 :60只清洁级雄性SD大鼠采用一次性尾静脉注射阿霉素18 mg/kg构建阿霉素心肌损伤模型,模型构建成功后按照随机数字法将其分为正常组,模型组以及罗汉果皂苷低、中和高剂量治疗组,每组12只,罗汉果皂苷治疗4周后,收集血清和心脏,检测心肌病理学、心功能、血清SOD和MDA,同时采用Western Blotting和实时荧光定量检测心肌组织中Bax、Bcl-2蛋白和mRNA的表达特点。结果 :HE染色可见正常组心肌纤维排列整齐,模型组则有明显的心肌排列紊乱,与模型组相比,罗汉果皂苷低、中和高剂量有不同程度的减轻;与正常组相比,模型组AST、LDH、CK-MB和MDA明显升高(P0.05),罗汉果皂苷3个剂量组均可以明显降低上述几个指标(P0.05);与正常组相比,模型组SOD明显降低(P0.05),罗汉果皂苷3个剂量组相较于模型组则明显升高(P0.05);与正常组相比,模型组Bax蛋白和mRNA明显升高(P0.05),Bcl-2蛋白和mRNA明显降低(P0.05),与模型组相比,罗汉果皂苷3个剂量组均可以降低Bax(P0.05),同时升高Bcl-2表达(P0.05)。结论 :罗汉果皂苷可增强阿霉素心肌损伤大鼠抗氧化能力,抑制心肌细胞凋亡,进而改善心功能。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏细胞间纤连蛋白和胶原Ⅳ蛋白表达的影响

目的：探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠细胞间纤连蛋白（ FN）和胶原Ⅳ蛋白（Ⅳ-CP）表达的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组及苦瓜总皂苷5 mg/（ kg·d）,治疗组左肾切除加1次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4、8周处死大鼠各半,测血糖、24 h尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测FN和Ⅳ-CP蛋白的表达。结果治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高（ P﹤0.05）;免疫组化、RT-PCR和Western Blot与模型组相比治疗组大鼠肾脏组织FN和Ⅳ-CP表达明显降低（ P﹤0.05）。结论苦瓜总皂苷可以通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织细胞间纤连蛋白和Ⅳ型胶原的表达,改善肾功能。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏组织中细胞因子信号传导抑制蛋白1表达影响

目的:观察苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾组织中细胞因子信号传导抑制蛋白1(Suppressor of Cytokine Signaling,SOCS1)表达的影响,探讨其对肾脏的保护作用。方法:雄性SD大鼠(48只)随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组以及苦瓜总皂苷治疗组5 mg/(kg·d)治疗,左肾切除+1次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,模型建立成功后,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4、8周处死大鼠各半,测血糖、24 h尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测肾脏组织中SOCS1的变化。结果:治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高(P0.05);治疗组与模型组相比,IL-1α、IL-6和TNF-α明显降低,差异有统计学意义(P0.05);HE染色显示正常组肾脏组织结构整齐,纹理清晰,模型组肾小球基底膜增厚同时伴有一定的系膜细胞增生,苦瓜总皂苷可以明显降低肾脏的损害;免疫组化、RT-PCR和Western Blot可见:与模型组相比治疗后,苦瓜总皂苷治疗组大鼠肾脏组织SOCS1表达明显降低(P0.05)。结论:苦瓜总皂苷可以通过抑制糖尿病肾病大鼠肾组织SOCS1的表达,进而降低炎症反应,改善肾功能,最终调节2型糖尿病肾病的症状,可能有一定的临床应用价值。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心肌脂联素受体1表达及心功能的影响

目的 探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠心功能及心肌组织中脂联素受体1 (AdipoR1)表达的影响.方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,模型建立成功后,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷(20 mg/kg.d)灌胃治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水灌胃,分别于治疗4、8周后处死大鼠各半,测定血糖、胰岛素、血脂以及心功能,HE染色检测心脏病理学,RT-PCR以及Western Blot检测心脏组织中AdipoR1 mRNA和蛋白的表达.结果 造模成功后,糖尿病组大鼠血糖、血脂(TG、TC和FFA)以及心功能指标(CK、CK-MB、LDH和HBDH)明显升高(P＜0.05),胰岛素含量明显降低(P.05),治疗4周后,除胰岛素明显升高外(P＜0.05),各生化指标均明显下降(P＜0.05),治疗8周后进一步改善;HE染色可见,糖尿病大鼠心脏有轻微的损伤,苦瓜总皂苷对其有一定的调节作用;造模成功后模型组心肌AdipoR1 mRNA水平和蛋白表达相较于正常组明显升高(P.05),苦瓜总皂苷治疗后其AdipoR1表达显著降低(P＜0.05).结论 苦瓜总皂苷可通过降低2型糖尿病大鼠心脏组织中AdipoR1的表达,调节血脂,改善心脏功能,最终保护心肌细胞.     

玉米须总皂苷对肥胖大鼠脂肪组织中UCP1和PRDM16表达的影响

目的:探讨分析玉米须总皂苷对高脂饮食喂养的肥胖大鼠棕色脂肪组织中解偶联蛋白-1(UCP1)和PR结构域蛋白16(PRDM16)表达的影响。方法:雄性健康清洁级SD大鼠共40只,在适应性喂养1周后随机分为正常对照组、模型对照组以及玉米须总皂苷低剂量和高剂量干预组,每组10只,给予高脂饮食12周后构建肥胖大鼠模型,治疗时玉米须总皂苷低和高剂量组分别给予玉米须总皂苷100、200 mg·kg-1·d-1灌胃,正常对照组和模型对照组给予1 m L·kg-1·d-1生理盐水灌胃,治疗12周后称重、处死大鼠,收集血清和棕色脂肪组织,检测血清血脂指标,HE染色检测棕色脂肪组织病理学,Real-Time PCR和Western Blot检测棕色脂肪组织中UCP1和PRDM16的m RNA和蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,模型对照组大鼠体重明显升高(P0.05),棕色脂肪组织重量和棕色脂肪组织重量/大鼠体质量明显降低(P0.05),与模型组相比,玉米须总皂苷治疗后,大鼠体质量明显降低(P0.05),棕色脂肪组织重量和棕色脂肪组织重量/大鼠体质量明显升高(P0.05);与正常对照组相比,模型对照组血清葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇和HDL-C明显升高(P0.05),LDL-C明显降低(P0.05);与模型对照组相比,玉米须总皂苷治疗后,血清葡萄糖、甘油三酯水平、总胆固醇和HDL-C降低(P0.05),LDL-C明显升高(P0.05);与正常对照组相比,模型对照组棕色脂肪细胞分布明显减少,脂肪空泡数量明显增加,而玉米须总皂苷治疗后,脂肪空泡数量明显降低;与正常对照组相比,模型对照组大鼠棕色脂肪组织中UCP1和PRDM16的m RNA和蛋白表达明显降低(P0.05),玉米须总皂苷治疗后表达明显升高(P0.05)。结论:玉米须总皂苷治疗12周可以明显降低肥胖大鼠体质量和棕色脂肪组织中的相对含量,这可能与其可以降低棕色脂肪组织中UCP1和PRDM16的表达有关。     

苦瓜总皂苷对2型糖尿病大鼠肾病组织中蛋白激酶C-α和转化生长因子β表达的影响研究

目的探讨分析苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠蛋白激酶C-α(PKC-α)及转化生长因子β(TGF-β)表达的影响,为苦瓜总皂苷开发和临床2型糖尿病肾病的治疗提供参考。方法雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组以及苦瓜总皂苷治疗组,大鼠左肾切除+链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,模型建立成功后,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4周、第8周处死大鼠各半,测血糖、24h尿蛋白定量;取肾组织做HE染色行肾组织病理观察、RT-PCR以及Western Blot检测肾组织PKC-α和TGF-β蛋白和mRNA表达。结果苦瓜总皂苷治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组比较明显减少,血糖明显升高,差异有显著性(P0.05);病理组织显示正常对照组肾小球基底膜完整,没有增生,肾脏组织结构整齐,纹理清晰,模型组肾小球基底膜增厚同时伴有一定的系膜细胞增生,苦瓜总皂苷组肾小球基底膜较完整,增生较少,炎症反应也较小;RT-PCR和Western Blot可见:与模型组比较,苦瓜总皂苷治疗组肾脏组织PKC-α和TGF-β蛋白和mRNA表达明显降低(P0.05)。结论苦瓜总皂苷可抑制糖尿病肾病大鼠肾组织PKC-α和TGF-β的表达,进而保护肾脏,可能有一定的临床应用价值。     

罗汉果皂苷对阿霉素心肌损伤大鼠心肌细胞色素P4501A1表达影响

目的:此研究成功复制了阿霉素急性心肌细胞损伤大鼠模型,观察罗汉果皂苷治疗后大鼠心功能变化特点以及心肌细胞色素P4501A1表达的特点,以为罗汉果皂苷的开发和阿霉素心肌损伤的治疗提供参考。方法:雄性清洁级SD大鼠60只随机分为5组(①正常对照组;②阿霉素组;③阿霉素+罗汉果皂苷低剂量组;④阿霉素+罗汉果皂苷中剂量组;⑤阿霉素+罗汉果皂苷高剂量组),每组12只,阿霉素一次性静脉注射18 mg/kg造模,造模成功后给予相应药物治疗,4周后处死大鼠,检测心功能、血清TnI、SOD和MDA,计算心脏/体质量百分比,HE染色检测心肌病理学,Western Bloting检测心肌细胞色素P4501A1蛋白的表达变化特点。结果:心肌切片HE染色可见,正常组大鼠纤维排列整齐,细胞核分布均匀,而模型组大鼠则出现明显心肌细胞排列紊乱,与模型组相比,罗汉果皂苷3个剂量组均可以明显改善上述症状;与正常组相比,模型组心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左室内压差(△LVP)、左心室内压力上升最大速率(+dp/dt_(max))、左心室内压力下降最大速率(-dp/dt_(max))、心脏/体质量百分比和血清TnI均明显升高(P0.05),罗汉果皂苷可以明显降低上述指标,特别是中剂量和高剂量组均呈现出明显的统计学意义(P0.05);与正常组相比,模型组血清SOD明显降低(P0.05),MDA明显升高(P0.05),罗汉果3个剂量组均可以明显升高SOD(P0.05),同时降低MDA(P0.05);与正常组相比,模型组心肌细胞中细胞色素P4501A1明显升高(P0.05),罗汉果皂苷3个剂量组均明显降低其表达(P0.05)。结论:罗汉果皂苷可以明显改善阿霉素心肌损伤大鼠心肌病理学,同时改善心功能,这可能与其可以降低细胞色素P4501A1表达,进而提高机体抗氧化能力有关。     

苦瓜总皂苷对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡因子Fas和FasL表达的影响

目的探讨苦瓜总皂苷对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡细胞Fas和FasL表达的影响。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常组、Ⅱ型糖尿病组(模型组)及苦瓜总皂苷治疗组,每组20只。高脂饮食加一次性链脲佐菌素建立Ⅱ型糖尿病大鼠模型,模型建立成功后,治疗组大鼠给予苦瓜总皂苷20mg/kg·d灌胃治疗,其余两组给予生理盐水灌胃参考,分别于治疗4周和8周后处死大鼠各半,测定血糖、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)以及心肌组织中Fas和FasL的表达特点。结果模型组血糖、LDH以及CK明显高于正常组(P<0.05);治疗组治疗4周后血糖LDH和CK明显降低,治疗8周后进一步降低(P<0.05),免疫组化、Western Blot及RT-PCR可见;模型组Fas和FasL蛋白及mRNA明显高于正常组,苦瓜总皂苷治疗4周后表达明显下降,治疗8周后进一步降低(P<0.05)。结论苦瓜总皂苷可通过抑制Ⅱ型糖尿病大鼠心肌细胞Fas和FasL的表达,进而减轻糖尿病大鼠心肌细胞凋亡,可能对糖尿病早期心脏损害有一定的延缓或治疗作用。     

柴胡皂苷对抑郁模型大鼠行为及海马Caspase-3、Caspase-9蛋白表达的影响

目的探讨柴胡皂苷对抑郁模型大鼠行为学及海马Caspase-3、Caspase-9蛋白表达的影响。方法 60只2~3月龄SD大鼠随机分为对照组、模型组、氟西汀组和柴胡皂苷组,每组15只。采用慢性轻度不可预见性应激刺激(CUMS)结合孤养方式复制大鼠抑郁模型。从造模第2天开始,氟西汀组(1.2 mg/kg)及柴胡皂苷组(25 mg/kg)进行灌胃给药,每日1次。于实验21 d,分别进行敞箱实验及糖水消耗量实验检测大鼠行为学改变;采用免疫组化法及RT-PCR法检测大鼠海马区Caspase-3、Caspase-9蛋白及基因的表达水平。结果造模21 d后,与对照组相比,模型组大鼠行为学指标明显降低(P0.05);与模型组比较,氟西汀组与柴胡皂苷组大鼠行为学指标明显改善(P0.05);免疫组化及PCR检测结果显示,海马区Caspase-3、Caspase-9蛋白及基因表达,模型组与对照组比较表达明显增强(P0.05),氟西汀组及柴胡皂苷组与模型组比较表达明显降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论柴胡皂苷可有效改善大鼠抑郁样行为,其机制可能与抑制海马区Caspase-3、Caspase-9蛋白表达有关。     

苦瓜总皂苷对IgA肾病大鼠免疫调节因子TGF-β_1表达影响

目的:研究苦瓜总皂苷对IgA肾病大鼠转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)表达的影响。方法:随机选取48只雄性SD大鼠,所有大鼠均于适应性喂养1周后随机分为空白对照组、IgA肾病组以及苦瓜总皂苷治疗组,n=16,经典造模法造模成功后,治疗组给予苦瓜总皂苷20 mg/(kg·d)治疗,IgA肾病组和空白组给予等量生理盐水灌胃1 m L/(kg·d),分别在治疗4周和8后,每组处死一半大鼠,观察血清尿素氮、血肌酐、24 h蛋白尿和血清中白介素-2(IL-2)的白介素-6(IL-6)的含量,此外HE染色分析其病理学,Western Blot和RT-PCR检测TGF-β_1和RGC-32表达。结果:IgA肾病组和治疗组所有大鼠均造模成功,主要表现为有明显肉眼或镜下血尿;此外与空白组相比,IgA肾病组和治疗组血清中BUN、24 h尿蛋白、SCr、IL-2和IL-6明显升高(P0.05),苦瓜总皂苷治疗4周后,上述指标均明显降低(P0.05),治疗8周后进一步降低;病理学检查显示空白组纹理结构清晰,而IgA肾病组有明显增生反应,苦瓜总皂苷对其有一定的改善。Western Blot和RT-PCR结果显示与空白组相比,IgA肾病组肾脏组织中TGF-β_1表达明显降低(P0.05),治疗8周后进一步降低,但其对RGC-32基本没有改善作用。结论:苦瓜总皂苷可通过降低肾脏组织中TGF-β_1的表达,进而有助于炎性因子和肾功能的改善,防止其疾病的进一步进展。     

温肾益气中药调节重症肺炎MMP-2和MMP-9表达的实验研究

目的 观察温肾益气中药对重症肺炎大鼠金属基质蛋白酶(MMP-2、MMP-9)表达的影响。 方法 将100只SPF级SD大鼠随机分为5组:对照组正常饲养,其余4组气管穿刺注入肺炎克雷伯菌制备重症肺炎模型,并分别以无菌蒸馏水及相应浓度的温肾益气饮灌胃,1次/d,共7 d。观察肺组织病理变化,并采用血常规分析仪测定支气管肺泡灌洗液白细胞和中性粒细胞计数,采用免疫蛋白印迹实验测定肺组织PI3K、AKT1、P-AKT1、MMP-2、MMP-9的蛋白表达水平。 结果 与对照组相比,其余各组明显偏高(P＜0.05),与模型组相比,中剂量组及高剂量组均有所降低(P＜0.05),低剂量组无明显变化。各组大鼠之间的PI3K和AKT1蛋白表达水平差异无统计学意义,但P-AKT1、MMP-2及MMP-9明显不同(P＜0.05);与对照组相比,其余各组明显升高(P＜0.05),与模型组相比,低剂量组、中剂量组及高剂量组均有明显降低,且各用药组之间的差异也均有统计学意义(P＜0.05)。MMP-2和MMP-9与P-AKT1表达水平呈正相关性(r=0.896、0.547,P＜0.05)。 结论 温肾益气中药能够通过PI3K/AKT通路下调MMP-2与MMP-9的表达,减轻细胞外基质降解和炎性应激反应,可能为其治疗重症肺炎的药理机制之一。      

人参皂苷对心衰大鼠Periostin蛋白及TGF-β信号通路影响

目的:探讨人参皂苷对心衰大鼠Periostin蛋白及TGF-β信号通路的作用机制。方法:选取SD大鼠100只。随机分为对照组、心衰组、人参皂苷Rb1低剂量组、人参皂苷Rb1高剂量组、西药组等5组。每组20只。手术诱导心衰模型,手术方法为缩窄腹主动脉,并给予相应药物治疗。观察大鼠一般形态及检测每组大鼠的心肌组织中periostin蛋白及TGF-β1蛋白的表达。结果:Periostin蛋白含量表达:与心衰组比较,人参皂苷Rb1高剂量组Periostin蛋白表达降低明显(P0.05),西药组和人参皂苷Rb1低剂量组Periostin蛋白表达显著降低(P0.01)。TGF-β1蛋白含量:心衰组和对照组的TGF-β1蛋白含量对比显著升高(P0.01);和心衰组对比,人参皂苷Rb1高剂量组、西药组的TGF-β1蛋白含量显著下降(P0.01)。结论:人参皂苷Rb1能够通过影响心肌组织periostin蛋白的表达,抑制TGF-β信号通路,从而改善心衰大鼠心室重构,防治心力衰竭。     

重楼皂苷I预防给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠调节PI3K/AKT信号通路的作用研究

目的 从磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路探讨重楼皂苷I预防给药对心肌缺血再灌注损伤（MI/IR）大鼠的干预机制。方法 将购买的72只SPF级SD大鼠按照随机数字法分为假手术组、模型组、阿司匹林组、重楼皂苷I低、中和高剂量组,每组12只。分组后即给予相应药物干预2周,2周后构建MI/IR模型。模型构建成功24 h后先采用动物彩色多普勒超声仪检测心脏功能,后处死大鼠收集相关组织采用HE染色观察心肌病理学、TTC法检测心肌梗死面积,试剂盒检测心功能指标[乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）和谷草转氨酶（AST）,抗氧化指标丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）],TUNNEL染色检测心肌细胞凋亡特点,Western blot检测心肌PI3K、AKT、B细胞淋巴瘤/因子2(Bcl-2)、Bcl-2 相关蛋白(Bax)蛋白表达。结果 假手术组心肌纤维排列整齐、无水肿,模型组有心肌纤维断裂,重楼皂苷I低、中、高剂量组和阿司匹林组明显改善心肌纤维断裂情况。与假手术组相比,模型组大鼠心肌梗死面积、LVEDP、LDH、CK-MB、AST和MDA明显升高（P＜0.05）,LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax、SOD和GSH明显降低（P＜0.05）;相较于模型组,阿司匹林组和重楼皂苷I低、中、高剂量组干预后,心肌梗死面积、LVEDP、LDH、CK-MB、AST和MDA明显降低（P＜0.05）,LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax、SOD和GSH则明显升高（P＜0.05）。Tunnel染色可见,假手术组几乎没有心肌细胞凋亡,而模型组呈现出明显的大量的细胞凋亡;与模型组相比,阿司匹林组和重〖JP2〗楼皂苷I低、中、高剂量组凋亡情况明显好转。此外,与假手术组相比,模型组大鼠心肌PI3K、AKT和Bcl-2蛋白表达均明显降低,Bax明显升高（均P＜0.05）;相较于模型组,重楼皂苷I低、中、高剂量组以及阿司匹林组PI3K、AKT和Bcl-2蛋白表达均明显升高,Bax蛋白表达明显降低（均P＜0.05）。结论 重楼皂苷I对心肌缺血再灌注损伤有一定的预防作用,其作用机理可能与其能够调节PI3K/AKT信号通路有关     

穿山龙总皂苷对哮喘小鼠气道重塑及MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的研究穿山龙总皂苷对哮喘小鼠气道重塑和MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响,并探讨其中作用机制。方法将60只清洁级BALB/c小鼠随机分为6组（n=10）：A组（空白组）,B组（哮喘模型组）,C组[阳性对照组（醋酸泼尼松组）],D组（低剂量组）,E组（中剂量组）,F组（高剂量组）。卵白蛋白（OVA）致敏激发小鼠制作哮喘气道重塑模型,在实验第18-55天,空白组、模型组以生理盐水灌胃,阳性对照组给醋酸泼尼松混悬液10 mg/kg,药物组分别给予穿山龙总皂苷20 mg/kg、40 mg/kg、80 mg/kg治疗。用HE染色法观察各组小鼠肺组织病理形态变化;用蛋白免疫印记法（Western Blot）测定各组MMP-9、TIMP-1蛋白表达。结果穿山龙总皂苷能够改善哮喘小鼠气道壁及上皮结构,减少黏膜下及管壁周围炎性细胞浸润;与空白对照组比较,小鼠哮喘模型组MMP-9表达明显升高（P〈0.05）,TIMP-1表达明显降低（P〈0.05）;与模型组比较,各治疗组MMP-9表达明显降低（P〈0.05）,TIMP-1表达明显升高（P〈0.05）;MMP-9在各穿山龙总皂苷组表达强于阳性对照组,TIMP-1在各穿山龙总皂苷组表达弱于阳性对照组。结论穿山龙总皂苷能够改善哮喘小鼠气道结构,并可通过抑制MMP-9、增加TIMP-1蛋白的表达从而减轻小鼠哮喘气道重塑状态。