TNF-α、IL-1β、LPS对心肌细胞影响的研究

目的 :体外用TNF -α、IL - 1β、LPS刺激心肌细胞后 ,观察心肌细胞的变化。 方法 :体外培养心肌细胞 ,用不同浓度的TNF -α、IL - 1β、LPS等刺激心肌细胞后 ,分别于 8h、2 4h、4 8h观察心肌细胞有无发生肥大反应 ,于2 4h、4 8h、72h观察心肌细胞有无凋亡。结果 :在予TNF -α、IL - 1β、LPS刺激心肌细胞后 ,与对照组相比 ,10 μg/L、15μg/L的TNF -α、2 0 μg/L、10 0 μg/L的IL - 1β和 10mg/L、15mg/L、2 0mg/L的LPS均能明显促进心肌细胞肥大 ,以刺激后 2 4h明显。同时 2 0 μg/L的TNF -α、10 0 μg/L的IL - 1β和 3× 10 4g/L的LPS可引起心肌细胞凋亡 ,以 72h为明显。结论 :TNF -α、IL - 1β、LPS可以引起心肌细胞的肥大和凋亡 ,炎症反应增高可能是心血管疾病的主要原因。     

CD40L单克隆抗体对HSP患儿PBMC及单核细胞株THP-1产生炎症因子的影响

目的　观察CD4 0配体单克隆抗体 (CD4 0LMcAb)对HSP(亨诺 许兰紫癜 )患儿PBMC及单核细胞株THP 1产生炎症因子的影响。方法　采用细胞培养、流式细胞技术及ELISA法分别检测正常对照、过敏性紫癜患儿的PBMC及单核细胞株THP 1表达膜蛋白分子CD4 0L、CD4 0的阳性率、产生炎症因子IL 1、TNF α、IL 6水平以及CD4 0LMcAb加入细胞培养体系后上述指标的变化。结果　与正常比较 ,HSP患儿的PBMC表达CD4 0L[(8.2 6± 4 .15 ) % ,对照 (0 .5 4± 0 .5 8) % ]显著增高、CD4 0表达无差异 ;PBMC培养上清中炎症因子IL 1[(10 0 0 .4± 5 74 .5 )pg ml,对照 (2 4 6 .8± 2 0 7.1)pg ml]、TNF α[(978.7± 2 0 5 .8)pg ml,对照 (45 2 .4± 2 4 8.5 )pg ml]的水平也显著高于对照 ,CD4 0LMcAb可使增高的IL 1[(16 4 .7± 12 7.9)pg ml]、TNF α[(6 74 .7± 2 6 9.2 )pg ml]降至正常水平。THP 1自发表达CD4 0 ,低浓度产生IL 1、TNF α。与正常比较 ,HSP患儿的PBMC培养上清诱导其表达CD4 0 ,产生IL 1,TNF α增高 ,CD4 0LMcAb同样具有抑制THP 1表达CD4 0、分泌IL 1、TNF α的作用。结论　CD4 0LMcAb能抑制炎症因子的产生。     

IL-6、IL-1β、TNFα对人胎大脑神经细胞体外生长的影响

目的 :研究IL 6、IL 1β、TNFα在人胎大脑神经细胞体外发育过程中的作用 ,为临床防治提供实验依据。 方法 :应用 10～ 13周龄人胎大脑神经细胞无血清原代培养模型 ,观察活细胞形态 ,MTT法测定细胞存活率。结果 :IL 6促进细胞贴壁、突起生长与伸展 ,IL 1β、TNFα对形态学影响不大。IL 6、IL 1β单独作用时 ,细胞存活率呈一过性下降 ,后又出现升高 ,但IL 6升高出现较早 ,作用较强 ,作用强度与实验浓度无关 ;TNFα( 10～ 10 0 0U/ml)作用下细胞存活率持续低于对照组 ,仅 10U/ml组体外 16d( 16DIV)时高于对照组 10 8 2 6% ;IL 1β与TNFα联合作用时仅于 16DIV时为对照组 10 9 90 % ( P <0 0 1) ,呈轻度协同效应。结论 :人胎大脑神经细胞体外发育过程中 ,IL 6、IL 1β具有神经营养作用 ,促进细胞存活 ,IL 6还可促进细胞生长、分化 ;TNFα体外主要为神经毒性作用 ;IL 1β与TNFα联合作用于培养后期可显轻度协同效应。作用机理可能与局部自分泌与旁分泌有关。     

老年急性冠状动脉综合征患者CRP与TNF-α、IL-1β相关性研究

目的 :观察老年冠心病不同类型患者中肿瘤坏死因子α(TNF -α)、白细胞介素 1β(IL - 1β)水平变化及其与C反应蛋白 (CRP)之间的关系 ,进一步探讨急性冠状动脉综合征临床识别和预测的炎症指标。方法 :采用放射免疫分析测定血清TNF -α、IL - 1β和CRP的浓度。 结果 :急性冠脉综合征患者 (ACS)TNF -α和IL- 1β水平均显著高于对照组 (p <0 0 5 ;p <0 0 1)和稳定性冠心病患者 (p <0 0 5 ;p <0 0 1)。ACS患者CRP水平(7 99± 11 9)mg L显著高于SCHD组 (2 71± 5 4 5 )mg L ,p <0 0 5和对照组 (0 99± 1 5 )mg L ,p <0 0 1。CRP水平与TNF -α呈显著正相关 (r=0 5 4 5 ,p <0 0 1) ;与IL - 1β亦呈明显正相关 (r=0 31,p <0 0 5 )。 结论 :老年冠心病患者细胞因子表达异常与炎性标志物CRP密切相关 ,提示可能与急性冠脉综合征的发生有关 ,是动脉粥样硬化斑块不稳定的标志     

冠心病患者TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-8的变化研究

目的 :对冠心病患者血清中肿瘤坏死因子 (TNF -α)、白介素 - 1β(IL - 1β)、白介素 - 6 (IL - 6 )、白介素 - 8(IL - 8)含量进行分析 ,以探讨它们在冠心病发病过程中的意义。方法 :研究对象为正常对照组 36例 ,稳定型心绞痛组 32例 ,心肌梗塞组 39例 ,采用化学发光酶分析法检测其血清TNF -α、IL - 1β、IL - 6、IL - 8水平。结果 :与正常组比较 ,冠心病患者中TNF -α、IL - 1β、IL - 6、IL - 8水平均有不同程度升高 ,尤以心肌梗塞组升高明显 ,其差别有显著临床意义。心绞痛组TNF -α(p <0 0 5 ) ,IL - 6 (p <0 0 1) ,IL - 8(p <0 0 5 )。心肌梗塞组TNF -α(p<0 0 1) ,IL - 1β(p<0 0 5 ) ,IL - 6 (p <0 0 0 1) ,IL - 8(p <0 0 0 1)。 结论 :TNF -α、IL - 1β、IL - 6、IL- 8与动脉粥样硬化和冠心病的发生有密切关系 ,这些细胞因子可通过相互诱导、相互协同共同参与冠心病的发生、发展过程     

CRRT治疗MODS患者血清对体外培养血管内皮细胞分泌TF及PAI-1的影响

目的: 研究连续性肾脏替代治疗(CRRT)过程中多器官功能障碍综合征(MODS)患者血清对体外培养血管内皮细胞分泌组织因子(TF)及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响.方法: 16例MODS患者随机分为两组, 一组给予无肝素CRRT治疗, 另一组给予普通肝素抗凝的CRRT治疗.观察患者行CRRT治疗8h过程中的变化, 在治疗0 min、 15 min、 1 h、 2 h、 8 h时分别留取血样5 mL.ELISA法检测患者血清TNF-α、 IL-1β水平.观察CRRT治疗不同时间点血清对内皮细胞分泌TF及PAI-1蛋白水平的影响, RT-PCR法检测TF及PAI-1mRNA水平的表达.结果: MODS患者血清可明显增加体外培养血管内皮细胞TF及PAI-1的分泌, 经CRRT治疗后, 患者血清对内皮细胞分泌TF及PAI-1的影响逐步减小.无肝素组内皮细胞分泌TF及PAI-1蛋白水平与相应干预血清TNFα水平均呈正相关, 相关系数分别为0.902, 0.939(P＜0.05);肝素组内皮细胞分泌TF及PAI-1水平与相应干预血清TNFα水平均无相关性(P＞0.05).结论: MODS患者血清促进内皮细胞分泌TF及PAI-1, 内皮细胞功能明显异常, 可能与炎症介质有关.CRRT治疗可清除血液中激活/损伤内皮细胞的成分, 改善患者内皮细胞功能.     

不育症患者精浆IL-2,IL-6,IL-8,TNF-α测定的临床意义

目的 :观察精浆中白细胞介素 - 2 (IL - 2 )、白细胞介素 - 6 (IL - 6 )、白细胞介素 - 8(IL - 8)、肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)等细胞因子对男性生殖的影响。方法 :应用放射免疫分析 (RIA)对 1 2 6例不育男性和 2 0例正常生育男性精浆IL - 2、IL - 6、IL - 8、TNF -α水平进行了检测。结果 :不育症组精浆IL - 2、IL - 6、IL -8、TNF -α含量均高于生育组 (p <0 0 5或 p <0 0 1 ) ;精浆中IL - 2、IL - 6、IL - 8、TNF -α含量在不育症组的WBC精液组与非WBC精液组之间均存在显著性差异 (p <0 0 5或 p <0 0 1 )。另外 ,精浆中TNF -α含量在精子活动力、活动率正常与减少之间 ,IL - 8含量在精子活动率正常与减少之间均存在显著性差异 (p <0 0 5或p <0 0 1 )。结论 :检测精浆中IL - 2、IL - 6、IL - 8、TNF -α等细胞因子的含量可以反映男性不育症患者的状态 ,帮助临床进行有价值的治疗     

血清NSE,TNF-α,LSA联检对肺癌诊断的意义

目的 :探讨神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)及脂质唾液酸 (LSA)在肺癌中的表达及其诊断价值。方法 :收集肺癌病人血清 78份 ,良性肺病患者血清 32份 ,正常对照血清 10 9份。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)和化学发光免疫分析法分别测定血清中的NSE、TNF -α及LSA。结果 :肺癌患者血清中的NSE、TNF -α、LSA分别为 19 78± 12 10ng/ml、135 6 4± 4 9 0 1pg/ml、1 0 6± 0 31mg/ml,明显高于良性肺病组 7 5 6± 3 4 1ng/ml、84 70± 2 4 89pg/ml、0 78± 0 18mg/ml及正常对照组 8 0 1± 2 81ng/ml、71 2 5± 13 5 0pg/ml、0 70± 0 13mg/ml(p <0 0 1)。对肺癌诊断的阳性率分别为 6 2 82 %、84 6 2 %、75 6 4 。联合检测阳性率达92 31%。结论 :血清NSE、TNF -α、LSA在肺癌病人中有较高的阳性率 ,联检阳性率更高 ,故NSE、TNF -α、LSA的联检是肺癌的非常有用的辅助诊断指标。 阳性标准为NSE >16 0ng/ml,TNF -α >10 0pg/ml,LSA >0 5 8mg/ml。     

儿童肾脏病患者血清白介素-2、白介素-6和胰岛素样生长因子-Ⅱ检测及其临床意义

为观察儿童肾脏病患者血清白介素 - 2 (IL - 2 )、白介素 - 6 (IL - 6 )、胰岛素样生长因子 -Ⅱ (IGF -Ⅱ )的含量 ,探讨细胞因子与肾脏病的关系 ,采用RIA法检测了不同肾脏病儿童患者血清IL - 2、IL - 6、IGF -Ⅱ的水平。结果显示 ,正常儿童血清IL - 2含量为 1 .6 0± 0 .32 μg/L、IL - 6为 37.0± 6 .0ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .30±0 .1 5μg/L。正常男女性儿童之间血清三个细胞因子含量无显著性差异 (P >0 .0 5 )。正常儿童与成年人之间三个细胞因子有显著性差异 (P <0 .0 1 )。慢性肾小球肾炎血清IL - 2含量为 1 .96± 0 .4 4 μg/L、IL - 6为 5 4 .9± 2 0 .9ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .5 2± 0 .1 5 μg/L ;急性肾炎血清IL - 2含量为 1 .92± 0 .4 7μg/L、IL - 6为 76 .3± 36 .2ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .6 2± 0 .2 2 μg/L ;紫癜性肾炎血清IL - 2含量为 1 .91± 0 .33μg/L、IL - 6为 5 5 .5± 1 5 .1ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .5 0± 0 .1 9μg/L ;肾病血清IL - 2含量为 1 .96± 0 .6 5 μg/L、IL - 6为 5 6 .2± 2 8.4ng/L、IGF -Ⅱ为 0 .5 9±0 .2 8μg/L ;不同肾脏病儿童三个细胞因子与正常人相比有显著差异 (P <0 .0 1 )。提示 :不同肾脏病儿童血清IL- 2、IL - 6、IGF -Ⅱ含量升高表明 ,这三个细胞因子均积极参与     

小鼠骨髓来源树突状细胞的分离与扩增培养

目的 :探讨树突状细胞 (DC)分离纯化及其体外扩增的方法。方法 :无菌制备C57BL/6小鼠骨髓 ;依次用红细胞裂解液去除红细胞 ,通过半粘附法去除T、B细胞 ,又在粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)和白细胞介素 4 (IL 4 )协同诱导下培育 ,DC前体分化发育成DC并扩增。在第 7天用脂多糖 (LPS)和肿瘤坏死因子 a (TNF a)刺激 4 8h ,检测细胞因子白介素 12 (IL 12 )浓度及细胞表面标志CD11c、CD80、CD86和MHCⅡ。结果 :DC细胞数增加 ,其形态在光镜下多为特征性星形 ,也有梭形和多角形 ;至培养第 9天DC细胞表面标志CD11c、CD80、CD86、MHCⅡ阳性率分别为 86 .32± 12 .14 %、76 .4 2± 8.4 5%、77.12± 9.0 5%、6 8.4 5± 6 .84 % ,IL 12浓度较未用LPS和TNF a组明显增加 (P <0 .0 1)。结论 :①结果所得细胞的形态和功能符合DC ;②用LPS和TNF a刺激可以获得成熟DC。