关木通及其炮制品马兜铃酸A 含量对比研究

目的 考察关木通药材及其炮制品中马兜铃酸A 的含量变化.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱Lichrospher-C18 柱(4.6mm ×250mm,5μm),流动相为甲醇-1%冰醋酸溶液(70:30),流速1.0mL.min-1,检测波长为250nm.柱温为35℃.结果 醋炙、碱制及盐炙3 种炮制品中马兜铃酸A 的含量均较生品有所降低,并且碱制后的炮制品降低率最高.结论 这3 种炮制方法能够降低关木通中马兜铃酸A 的含量,达到降低毒性的目的.对关木通毒性成分应予以足够的重视,可通过科学炮制降低毒性.     

不同炮制方法对关木通减毒存效作用的比较

目的:比较各种炮制方法对关木通减毒存效作用,选择最佳的关木通炮制方法。方法:以关木通生品及各炮制品中马兜铃酸A、齐墩果酸及常春藤皂苷元含量为指标,比较了5种炮制方法(醋炙、蜜炙、姜炙、碱制、盐炙)减毒存效效果。结果:生品、醋炙品、蜜炙品、姜炙品、碱制品、盐炙品中马兜铃酸A含量分别为0.27%,0.13%,0.15%,0.20%,0.14%,0.18%;齐墩果酸含量分别为0.21%,0.15%,0.20%,0.13%,0.01%,0.01%;常春藤皂苷元含量分别为0.11%,0.08%,0.09%,0.07%,0.01%,0.01%。结论:关木通最佳减毒存效炮制方法为蜜炙法。     

利用炮制技术去除关木通毒性成分的方法学研究

目的:根据马兜铃酸的化学性质,借鉴传统中药炮制经验,对去除马兜铃酸的炮制方法学进行研究。方法:以关木通为研究对象,马兜铃酸A为指标,采用正交试验等方法对关木通的碱制和醋制工艺进行优化。结果:确定了关木通的炮制工艺为以0.1mol·L^-1碳酸氢钠多次浸泡后醋制的方法。炮制过程中温度对毒性成分的去除率影响较大。不同含量的关木通在实验室小试炮制中,毒性成分去除率在90%以上,10批中试毒性成分的去除率在80%以上,使马兜铃酸A的含量降低到0.35-0.60mg·g^-1。马兜铃酸在药材中部分是盐的形式存在的。结论:该炮制新工艺能够选择性的去除关木通中的绝大部分毒性成分,达到了去毒的目的。     

关木通及其炮制品中马兜铃酸A的含量变化

目的 考察关木通药材及其炮制品中马兜铃酸A的含量变化.方法 采用高效液相色谱法(HPLC)检测.色谱条件:色谱柱为Lichrospher-C18柱(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1%冰醋酸溶液(70∶30),流速1.0 ml/min,检测波长310 nm,柱温为30℃.结果 炒焦、滑石粉炒、麸炒3种炮制品中的马兜铃酸A含量均较生品有所降低,并且滑石粉炒后的炮制品降低率最高.结论 这3种炮制方法能够降低关木通中马兜铃酸A的含量,达到了降低毒性的目的.     

HPLC法测定四川朱砂莲生品及不同炮制品中马兜铃酸A含量

目的:研究不同炮制方法对四川朱砂莲中马兜铃酸A含量的影响。方法:采用4种不同的炮炙去毒方法对朱砂莲样品进行处理后,采用HPLC法对其马兜铃酸A的含量进行检测,并与生品中所含马兜铃酸A的含量进行分析比较。色谱条件:色谱柱为Agilent-C18柱(4.6mm×150mm,3.5μm),流动相:0.1%碳酸铵溶液-乙腈(72∶28),流速:1mL·min-1,检测波长250nm,柱温为28℃。结果:除蒸制组外,经蜜炙、甘草汁炙、碱水炙处理的四川朱砂莲样品与生品比较,马兜铃酸A的含量差异显著,有统计学意义(P0.01),变化率超过80%。结论:蜜炙、甘草汁炙、碱水炙在四川朱砂莲的炮制处理中起到了很好的减毒作用。     

RP-HPLC测定五倍子3个炮制品中没食子酸和鞣花酸的含量

目的:测定生五倍子、醋五倍子和百药煎中没食子酸与鞣花酸的含量,探讨不同炮制方法对这2种成分含量的影响。方法:收集五倍子药材生品10批,分别炮制得到生品、醋制品和百药煎饮片各10批。采用反相高效液相法测定各炮制品中没食子酸和鞣花酸的含量。色谱条件:Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.1%三氟乙酸(B),梯度洗脱,流速0.8 m L·min-1,检测波长280 nm,柱温30℃。采用SPSS 17.0对测定结果进行分析,比较不同炮制品中各成分的含量差异。结果:生五倍子,醋五倍子,百药煎中没食子酸和鞣花酸平均质量分数分别为20.19,1.73;74.26,4.59;236.11,0.59 mg·g-1。结论:醋炙法和发酵法均显著增加五倍子中没食子酸的含量(P0.01),发酵法与醋炙法相比,没食子酸含量也具有显著性差异(P0.01)。醋炙法可以增加五倍子中鞣花酸含量,差异具有统计学意义(P0.05),发酵法则降低了鞣花酸的含量,差异无统计学意义。     

煎煮时间对关木通中马兜铃酸A煎出量的影响

目的 研究不同煎煮时间对关木通的水煎液中马兜铃酸A的含量的影响.方法 定性鉴别:采用薄层层析法对关木通水煎液中的马兜铃酸A进行定性鉴别:以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸∶水(20∶10∶1∶1)作为展开剂,以马兜铃酸A标准品作为对照进行薄层分析.定量分析:采用高效液相色谱法对马兜铃酸A进行含量测定.色谱条件:C18柱;流动相:甲醇∶水∶冰醋酸(72∶27∶1);检测波长:315nm;流速:1.0ml/rnin;柱温:25℃.结果 结果显示:①在可见光下,供试品溶液中在与标准品溶液相应的位置上有淡黄色斑点;在365nm紫外光下,斑点为暗斑.②在0.522～5.22μg范围内,马兜铃酸A的峰面积与浓度呈良好的线性关系.结论 不同煎煮时间下的关木通水煎液都有马兜铃酸A溶出,但是一定时间内,煎煮时间越长,马兜铃酸A煎出越多.煎煮时间不变,延长浓缩时间会使马兜铃酸A含量减少.     

关木通不同炮制品中马兜铃酸A的含量测定及其对大鼠肾功能的急性损伤试验

目的:通过研究,探讨能显著降低关木通中马兜铃酸含量,减轻其肾毒性的炮制方法与炮制机理。方法:采用传统的炮制工艺对关木通药材进行炮制,制得29种炮制品,连同生品共30种样品,通过高效液相色谱法测定了各样品中马兜铃酸A的含量;通过大鼠急性肾损伤试验,考察了代表性样品对动物肾功能的影响。结果:石灰水煮、石灰水蒸、甘草汁煮、黑豆汁煮、小苏打水煮及滑石粉炒6种样品中马兜铃酸A的含量均有显著降低(降低幅度30%以上),其他炮制品中马兜铃酸A的含量也有一定程度的降低,但降低幅度差异较大。毒理试验结果表明,与生品相比,上述6种炮制品均能显著减轻对动物肾功能的损害,减轻程度与其中的马兜铃酸A含量似有一定的相关性。结论:以关木通为代表的含马兜铃酸中药可以通过适宜的炮制方法降低其马兜铃酸的含量,减轻其对动物肾功能的损害。     

不同剂量竹叶对关木通中马兜铃酸A溶出量的影响实验研究

目的 观察不同剂量竹叶对关木通中马兜铃酸A溶出量的影响.方法 采用反相高效液相色谱法测定不同剂量竹叶配伍关木通中马兜铃酸A的溶出量.结果 关木通马兜铃酸A溶出量为0.106 mg/ml;竹叶与关木通1∶4配伍其溶出量为0.041 mg/ml.结论 中药竹叶可明显降低关木通马兜铃酸A溶出量61%;竹叶与关木通以1∶4配比对其马兜铃酸A的溶出量降低最明显.     

拆方研究当归四逆汤中马兜铃酸A含量的影响

目的:观察比较关木通及当归四逆汤各拆方组中马兜铃酸A的变化趋势,探讨中药配伍对马兜铃酸A含量的影响。方法:参照当归四逆汤原方比例将供试样品分6组:关木通组、全方组、关木通+补气补血组、关木通+散寒组、关木通+甘草组、阴性对照组(全方去关木通);采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以甲醇—水—冰乙酸(体积比74∶24∶1)为流动相,以DiamonsilTM(钻石)C18(250 mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,检测波长237 nm,测定各组中马兜铃酸A的含量。结果:与关木通组相比,当归四逆汤全方中马兜铃酸A含量最低;关木通+补血组马兜铃酸A含量也有明显降低。结论:在方剂配伍理论指导下,通过合理配伍降低关木通的毒性是可行的。     

别嘌醇、丙磺舒以及两者联用对马兜铃酸肝肾损害保护作用研究

目的：探讨别嘌醇（A）、丙磺舒（P）以及两者联用对马兜铃酸肝肾毒性的防治作用,并初步探讨其作用机制。方法：将雄性ICR小鼠随机分为5组：正常对照组（C组）、关木通模型组（M组）、别嘌醇组（A组）、丙磺舒组（P组）、剐嘌醇＋丙磺舒组（A-FP组）。C组灌胃等体积饮用水,后4组灌胃给予7g·kg-1·d-1的关木通水煎剂。给药4天后停药3天,持续4周;各给药组从第3周起在给予造模药的同时灌胃给予相应药物即A（70rag·kg·d。）、P（360rag·kg-1·d-1）、A（70mg·kg-1·d-1）＋P（360mg·kg-1·d-1）。实验结束时,测定小鼠血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平,并记录左肾、左睾系数。结果：与M组相比,各给药组均能显著降低血清Cr、BUN、ALT、AST水平,其中A＋P组各指标改善作用最为显著。结论：A和P对马兜铃酸所致肝肾损伤都具有保护作用。且两药联用的效果优于两药单独应用。     

注射用奥美拉唑钠HPLC含量测定方法研究

目的:对奥美拉唑钠的HPLC分析方法进行研究,建立注射用奥美拉唑钠含量的HPLC分析方法。方法:采用kromasil色谱柱(C184.6mm×250mm,5μ),以乙腈-磷酸盐缓冲液(pH7.3)-三乙胺(22∶78∶0.7)为流动相,流速1.0mL.min-1,紫外检测波长:302nm。结果:奥美拉唑钠在16.56～24.84mg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测限为0.1ng,最低定量限为0.4ng,日内RSD为0.31%,日间RSD为0.35%,相关杂质分离度良好。结论:该方法对奥美拉唑钠及其粉针制剂含量测定精密度良好、准确、方便、快速、专属性强,适合生产中对质量的控制和成品的检验工作。     

10种微生物对含马兜铃酸A中药材的生物减毒研究

利用微生物对含马兜铃酸A中药材进行生物转化脱毒,筛选出合适的菌种,为后期进一步研究微生物法对含马兜铃酸类中药材的"去毒存效"奠定基础。采用UPLC对12种含马兜铃酸类中药材进行检测,其中有4种中药材检测到含有马兜铃酸A,分别是关木通、青木香、马兜铃和寻骨风,另外8种则未检测到。选取了黑曲霉、米曲霉等10个菌种,以关木通、青木香、马兜铃和寻骨风药材粉末为原料,运用液体发酵技术,在一定条件下进行生物转化脱毒,观察菌种的生长情况,采用UPLC测定发酵前后药材中马兜铃酸A的含量。结果表明有1个菌种对降低关木通、青木香、马兜铃、寻骨风中的马兜铃酸A含量均有一定的效果。     

丹柴解郁片质量标准的研究

目的:建立丹柴解郁片的质量标准。方法:采用TLC法对处方中白术、牡丹皮、白芍、栀子进行定性鉴别研究;采用HPLC法测定柴胡皂苷a、d的含量,选用Dikma ODS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(44∶56)为流动相,检测波长210nm,流速1.0mL/min。结果:TLC法可鉴别出白术、牡丹皮、白芍、栀子的特征斑点,且专属性强,分离度好;柴胡皂苷a在45.28～226.4μg/mL(r=0.999 5)范围内、柴胡皂苷d在48.16～240.8μg/mL(r=0.999 3)范围内,浓度与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为96.41%(RSD=1.28%)、99.52%(RSD=0.74%)。结论:该方法简便可行,可用于丹柴解郁片的质量控制。     

RP-RPLC法测定维吾尔药材黑种草子中常春藤皂苷元的含量

目的:建立HPLC法测定维吾尔药材黑种草子中常春藤皂苷元的含量。方法:采用AileniZorbaxCl8柱（5μm,25mm×4.6mm）;以甲醇-水-冰乙酸-三乙胺（87:13:0.04:0.02）为流动相,流速:1.0mL·min^-1。检测波长210nm;柱温:30℃。结果:常春藤皂苷元的线性范围为2.00～10.00μg·mL^-1（r=0.9998）;平均回收率（n=6）为99.1%。结论:本法简便,灵敏,专属性强,重复性好,可用于黑种草子的药材的含量测定,控制内在质量。     

益母草滴丸中水苏碱的含量测定

目的：建立益母草滴丸的含量测定方法。方法：采用HPLC测定盐酸水苏碱的含量,WatersSpherisorb SCX阳离子交换树脂柱（4．6mm×250mm,5μm）;流动相：15mmol·L^-1磷酸二氢钾溶液（含有0．04％三乙胺和0．15％磷酸）;柱温：室温;检测波长：192nm。结果：盐酸水苏碱在0．0214—0．428mg·mL^-1线性关系良好（r=0．9999）,平均回收率为100．42％,RSD=1．02％。结论：建立的含量测定方法简便、准确、重复性好,可用于益母草滴丸质量控制。     

关木通及其炮制品中马兜铃酸A的含量变化

目的考察关木通药材及其炮制品中马兜铃酸A的含量变化。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Lichrospher-C18柱（4．6mm×200mm，5μm），流动相为甲醇-0．1％冰醋酸溶液（70：30），流速1．0mL／min，检测波长为310nm。柱温为30℃。结果3种炮制品中马兜铃酸A的含量均较生品有所降低，并且小苏打水煮后的炮制品降低率最高。结论这3种炮制方法能够降低关木通中马兜铃酸A的含量，达到降低毒性的目的。     

马兜铃酸类成分研究进展

马兜铃酸类成分是具有硝基菲结构母核的一类化合物,主要存在于马兜铃科马兜铃属及细辛属植物中。自上世纪90年代马兜铃酸肾毒性首次报道以来,其安全性问题一直备受关注与重视,我国自2003年起已禁用马兜铃酸含量高的关木通、广防己和青木香等药材。但是,一些马兜铃酸成分含量低的许多中药品种仍在使用,鉴于马兜铃酸类成分明确的肾毒性、致癌致突变等危害,有必要进一步加强相关产品的风险评估。因此,本文对马兜铃酸类成分信息、毒性作用、检测方法、标准收载及限度规定等研究现状进行了调研、总结与分析,为其准确定性、定量以及标准规定提供了理论基础,同时也为有关产品的风险控制与安全使用提供了科学依据,有利于更好地保障人民用药安全。     

一年蓬不同部位中焦袂康酸的含量测定

目的：建立一年蓬中焦袂康酸的HPLC含量测定方法,并对一年蓬药材不同部位中焦袂康酸含量进行测定。方法：采用Unitary C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱,以甲醇-1‰三氟乙酸水溶液（5∶95）为流动相,检测波长为270 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL·min^-1。结果：焦袂康酸的线性范围为0.25~62.0μg·mL^-1（r=0.999 3）,平均加样回收率为98.4%,RSD=1.2%（n=6）。一年蓬花、叶、茎中焦袂康酸含量分别为2.56,0.40,0.08 mg·g^-1,根中含量低于0.012 mg·g^-1。结论：该方法简便、准确、重复性好,可以作为一年蓬中焦袂康酸的含量测定方法,为合理利用一年蓬药材提供参考依据。     

反相高效液相色谱法测定香青兰中槲皮素的含量

目的：建立测定香青兰中槲皮素含量的方法。方法：色谱柱为Kromasil C18（4．6×150mm,5um）,流动相为乙腈-5％甲酸（31：69）,检测波长：280nm,流速：1.0mL·min^-1,柱温：30℃。结果：香青兰中槲皮素的线性关系良好,其线性范围为0．02mg·mL^-1～0．10mg·mL^-1（r=0．9990）。其回收率为97．2％（RSD=1．2％）。结论：所建方法准确、简便,为科学评价香青兰的质量提供了依据。