显示平滑肌和胶原纤维的双色染色法

我室在动脉粥样硬化发病机理研究中,要求突出构成动脉壁中平滑肌和胶原纤维二种成分。但国内,外在显示胶原纤维或显示平滑肌的特殊染色中,一直没有特异性的染色法,多为复合染色,而且以显示其它成分为主。往往顾此失彼,不易得到清晰,染色鲜艳,突出平滑肌和胶原纤维成分。为了科研工作的需要,经反复试验,创造出了显示平滑肌和胶原纤维的双色染色法。一、试剂配制 1.丽春红3R(Poncean 3R)液:0.5gm丽春红3R和0.5gm磷钨酸(Phoshotungstic acid)     

高碘酸-醛品红-饱和苦味酸淡绿染色法在显示弹性纤维中的应用

<正>弹性纤维属于弹性纤维系统的一种纤维,弹性纤维系统是由耐酸纤维、前弹性纤维和弹性纤维三种纤维构成^[1]。在疏松结缔组织内,弹性纤维交织成网存在于结缔组织中,在HE染色下,弹性纤维和胶原纤维均呈淡红色,而弹性纤维较胶原纤维细,两者不易区分,组织内弹性纤维量少时两者更难鉴别^[1]。在临床病理工作中,常采用特殊染色鉴别,而弹性纤维常用的染色法有Gomori醛品红法、维多利亚蓝法、间苯二酚碱性品红法、地衣红法等^[2-3]。     

不同年龄大鼠大脑中动脉弹性纤维的变化

目的：观察不同年龄大鼠大脑中动脉弹性纤维的变化。方法：运用光镜，电镜和图像分析仪对不同年龄的大鼠大脑中动脉弹性纤维作了系统研究。结果：随着年龄增加，内弹性膜折叠的幅度和数量均减小，弹性纤维含量显著减少（P＜0．01），胶原纤维与弹性纤维的比值显著增加（P＜0．01），24月龄以上组内弹性膜变薄，不均质，内皮细胞和平滑肌细胞向内弹性膜穿过，内弹性膜内出现脂质，并有分层，断裂现象，结论：弹性纤维的变化皮细胞和平滑肌细胞向内弹性膜穿过，内弹性膜内出现脂质，并有分层，断裂现象。结论：弹性纤维的变化可能与年后易发生脑血管疾病有关。     

PPA-O显示人体子宫组织中弹性和胶厚纤维的组合染色法

在进行人体正常和肿瘤子宫组织的形态学研究中，选用丽春红S（poncean S）、苦味酸（picric acid）和地衣红（orccin）进行组合染色，简称PPA-O法。经反复实验后，能够同时分别显示组织中弹性纤维、胶原纤维和平滑肌的分布及变化情况，得到了较好的染色效果，现将方法介绍如下。     

改良VG染色法

改良ＶＧ染色法关键词ＶＧ染色，胶原纤维，肌肉中国图书分类号Ｒ４４６郭瑞华，于仲嘉对四肢显微外科试验及手术标本，经常需要观察确定肌肉、胶原纤维量变化情况。在实际工作中，我们对传统的染色法进行了改良，摸索出一种较简易、节约、效果满意的一种染色法。１材料和...     

胶原纤维的天狼猩红染色法与Vangieson染色法的比较

胶原纤维是结缔组织的一个主要组成成分 ,也是临床上许多器官病理变化的特征之一。因此胶原纤维的染色有助于医学生更好地了解、巩固和掌握人体正常结构 ,同时对临床上判断器官的病理变化具有极其广泛的用途。传统的胶原纤维染色法多为Ｖａｎｇｉｅｓｏｎ染色法 ,该染色法只易使疏松结缔组织的胶原纤维上色 ,且色彩呈品红色 ,不够鲜艳 ,无法将胶原纤维的偏振光性质显示出来 ,而天狼猩红对胶原纤维染色效果较好 ,它既有Ｖａｎｇｉｅｓｏｎ染色法的优点 ,又弥补了其不足。1　材料与方法1 1　酸性品红 (上海试剂三厂 )、天狼猩红 (ＵＫ进口分装…     

人与猪肝门静脉显微结构成分的比较

目的：比较人与猪肝门静脉壁结构成分的异同，为猪一人异种肝移植提供理论依据。方法：取正常成人与不同月龄猪肝门静脉，常规石蜡包埋、切片，分染弹性纤维、胶原纤维和平滑肌，光镜观察，计算机图像分析系统测量各结构成分的相对含量。结果：随月龄的增长猪肝门静脉胶原纤维的含量逐渐升高，弹性纤维的含量相对稳定，平滑肌的含量在3月龄时最高，C厄值逐渐升高。与人相比，猪肝门静脉壁中胶原纤维和弹性纤维的含量较低，而平滑肌的含量则较高，5、6月龄时的C/E值与人相近。结论：人与猪肝门静脉壁各结构成分的含量存在差异，但从C僵值看，5、6月龄猪肝门静脉的力学特性与人相匹配，较适合用于移植。     

PPA-O显示人体子宫组织中弹性和胶原纤维的组合染色法

在进行人体正常和肿瘤子宫组织的形态学研究中,选用丽春红S(ponceau S)、苦味酸(picric acid)和地衣红(orcein)进行组合染色,简称PPA-O法.经反复实验后,能够同时分别显示组织中弹性纤维、胶原纤维和平滑肌的分布及变化情况,得到了较好的染色效果,现将方法介绍如下.     

门静脉高压症猪肺血管的结构重建及临床意义

目的:探讨门静脉高压症猪肺血管形态结构重建的特点。方法:采用健康2月龄湖北白猪14头,随机分为正常对照组和实验组,用四氯化碳建立门静脉高压症模型。取肺动脉和肺静脉,横断切片。用Pilloridine和Cy3-IgG分别染胶原纤维和平滑肌,弹性纤维自发荧光。在激光共聚焦显微镜下观察,用计算机图像分析系统测量各结构成分的相对含量。结果:与正常对照组相比,门静脉高压猪肺血管壁中胶原纤维、平滑肌的相对含量及胶原纤维与弹性纤维的比值(C/E)均增大,弹性纤维则减少。结论:门静脉高压时,猪肺血管的形态结构可发生重建,表现为胶原纤维增加,弹性纤维减少,导致C/E值的改变。肝肺联合移植时,移植材料间的结构成分的差异也应引起关注。     

正常人胆管壁组织构筑的研究

对5例正常人胆道系统的组织构筑及平滑肌、弹性纤维、胶原纤维的分布进行了面积计量研究.从胆总管胰后段至左右肝管汇合部,平滑肌的面积分数从13.56±0.65%降至3.34±0.32%,弹性纤维的含量以肝总管和左右肝管汇合部为高,与胆总管胰后段和十二指肠上段比较,差别有显著性.胶原纤维的含量在肝外胆管各段之间和肝内胆管各段之间无显著差异,但肝内胆管与肝外胆管之间的差异显著.肝内与肝外胆管壁的组织构筑存在一定的差异,说明它们的生理功能有所不同.     

血管平滑肌定量分析染色法的改进

以往显示血管切片标本上各种成份时,多采用三色染色法同时显示各种成份。这种切片在用图像分析系统或显微分光光度计对血管各种成份的含量作定量分析时,各染料颜色灰度相近或叠加都影响测量数据的准确性。血管各主要成份中,弹性及胶原纤维都较易做到单独染色显示,唯独染平滑肌时,常混染其它成份。选用何种染色法能单独显示血管平滑肌,文献中报道较少。一般技术书上推荐用酸性茜素兰法,但此法不能排除细胞核混染问题。Heather等[1]用多种染料分别对人及动物的肌组织进行染色,并用720型分光光度计作定量分析,认为用亮猩红(BrilliantScarlet)…     

猪肝门静脉壁组织结构增龄性变化的定量分析

目的　探讨猪肝门静脉壁结构成分的增龄性变化 ,为猪 -人异种肝移植提供理论依据。方法　取正常不同月龄猪肝门静脉 ,HE染色 ,Weigert、Anilineblue及桔黄G分染弹性纤维、胶原纤维和平滑肌 ,光镜观察 ,计算机图像分析系统测量各结构成分的相对含量。结果　猪肝门静脉随月龄的增长胶原纤维的含量逐渐升高 ,弹性纤维的含量相对稳定 ,平滑肌的含量在 3月龄时最高 ,胶原纤维与弹性纤维含量的比值 (C/E)逐渐升高。结论　猪肝门静脉壁各结构成分的相对含量随增龄发生变化 ,在实施猪 -人异种肝移植时应选择与人肝门静脉壁结构成分含量相近的月龄猪作为供体。     

张力吻合动脉早期的结构成份与顺应性变化

目的：研究动脉张力吻合后2周内结构成份及顺应性变化规律。方法：在体测定狗股动脉张力吻合后不同时相点吻合口段的压力与直径相应的数据，计算出动脉的顺应性进行拟合后，建立顺应性与平均血压的关系。观测后的动脉常规切片，分别对弹性纤维、胶原纤维和平滑肌行特殊染色，测量各结构成份相对含量。结果：随术后时间延长，张力吻合动脉吻合口段的顺应性较吻合前逐渐降低，术后14d降低最显著。术后1d和5d弹性纤维变化无显著性差异。术后1～14d胶原纤维呈增加趋势，胶原纤维与弹性纤维含量的比值术后逐日增高。结论：动脉张力吻合后近期吻合口段的可扩张能力较正常动脉有明显减弱，其变化与结构成份改变相关。     

主动脉平滑肌细胞在三维培养中产生弹性纤维的研究

目的 研究主动脉平滑肌细胞(ASMC)在仿真皮替代物的三维培养中是否能产生弹性纤维。方法 取1周龄SD大鼠胸主动脉，进行原代和传代培养，以α肌动蛋白免疫细胞化学染色鉴定平滑肌细胞。然后，将ASMC与胶原、甲壳素及糖胺多糖组合形成的凝胶混合，进行三维培养；培养1周和2周后，用Gomori醛复红染色和弹性蛋白免疫细胞化学染色，检测ASMC胶原凝胶。结果传代细胞经α肌动蛋白免疫细胞化学染色鉴定，98％以上为ASMC。培养1周和2周的ASMC胶原凝胶中，均显示有弹性纤维存在。结论 ASMC在仿真皮替代物的三维培养中能够产生弹性蛋白，并形成弹性纤维。     

胎儿静脉壁组织结构增龄性变化的定量分析

目的：探讨胎儿脐带静脉随胎龄变化的形态学改变，为临床挑选适当的血管代用品提供科学的理论依据。方法：33例新鲜脐带，常规石蜡包埋、切片、HE染组织结构，Weigert,Aniline Blue及桔黄G分染弹性纤维，胶原纤维和平滑肌，光镜观察及计算机图像分析。结果：随胎龄随长，脐静脉管径、中膜厚度、中膜弹性纤维含量逐渐增多；平滑肌含量及细胞核的数密度和面密度在37－40周最大（P＜0．05），胶原纤维则最小，因而此时段顺应性最好。结论：脐静脉管壁中各成分的含量随胎龄变化呈不等比增长，37－40周时血管顺应性最好。建议选用此时段胎龄的脐静脉作为移植材料。     

入颅动脉弹性成分变化的形态学观察和顺应性的应用研究

本研究用组织学方法和图像分析系统研究了颈内动脉、大脑中动脉和推动脉、基底动脉两个系统中弹性纤维和胶原纤维含量的变化，从颅外至颅内两个系统中弹性纤维和胶原纤维含量均有下降。根据压力－容积变化关系，结果表明大脑中动脉的顺应性明显低于颈内动脉。本研究结果支持了高血压性脑出血与脑动脉壁薄弱有关的观点。     

肝门静脉高压症猪肝门静脉的结构重建

目的:建立猪肝门静脉高压症模型,探讨肝门静脉高压症时肝门静脉的结构重建.方法:猪以四氯化碳、苯巴比妥、乙醇配合高脂、低蛋白、低胆碱饮食进行混合饲养.通过脾静脉插管测压,取门静脉常规石蜡包埋、切片,用H-E 染色法、Weigert法、Aniline blue法、Organge G法分别染组织结构、弹性纤维、胶原纤维和平滑肌,用计算机图像分析系统定量分析肝门静脉的几何形态及显微成分.结果:实验组肝门静脉压为(4.17±1.03)kPa,而正常组为(1.51±0.79)kPa,实验组门静脉的内膜与中膜增厚,管壁增厚,管径增粗,平滑肌、胶原纤维的百分含量增加,平滑肌细胞核的数密度和面密度也在增加,C/E值增加.结论:肝门静脉高压症时,与血液动力学改变相适应,肝门静脉的几何形态与显微结构成分均发生了改变.     

切断大鼠交感神经对动脉粥样硬化形成的影响

将雄性Ｗｉｓｔｒ大鼠１２只分成实验组和对照组，实验组行手术切断左侧颈交感干，两天后与对照组同时腹腔注射维生素Ｄ６０万单位／ｋｇ体重，存活２０天后取双侧颈总动脉作石蜡切片，ＨＥ染色，光镜下观察，结果发现：实验组颈总动脉壁明显增厚，相当于正常血管壁的３－５倍，弹性纤维结构不清，甚至消失，内膜一层水肿并有胶原纤维增生，中膜有大量平滑肌细胞增生，其细胞核排列紊乱。     

大动脉弹性膜复合染色法

大动脉是循环系统的重要组成部分,是组织学实验课学生应观察和掌握的主要实验内容.以往都是用单纯H-E染色或特殊染色如Gomori醛复红染色法、Weigert来复红法、Taenger-Unna俄尔辛等方法显示弹性纤维,但都有一定的局限性.     

巨噬细胞在血管重塑过程中的作用

目的:探讨体内巨噬细胞对平滑肌细胞增殖与迁移的影响。方法:采用兔后肢股动脉—静脉短路诱导侧枝血管生长模型。一周后将动物处死,应用Ki67(细胞增殖标记物)免疫荧光组织化学技术和弹性纤维组织化学染色技术,在连续切片上检测髂外动脉在重塑过程中巨噬细胞数目和平滑肌细胞增殖及弹性纤维的降解。结果:在重塑血管外膜发现大量巨噬细胞,中膜也有大量巨噬细胞的存在,平滑肌细胞排列紊乱;有大量的平滑肌细胞增殖。在正常血管横断面上中膜有大量环形排列的弹性纤维存在,重塑的血管巨噬细胞聚集和平滑肌细胞增殖的部位弹性纤维发生明显降解。结论:血管重塑过程中,侵入血管壁的巨噬细胞可能通过分泌生长因子和细胞基质降解酶促进细胞外基质的降解,刺激平滑肌细胞增殖与移动,参与血管重塑的调节。