鳙鱼骨酶解产物的抗氧化活性及相对分子质量分布

采用5种蛋白酶对汽爆预处理过的鳙鱼骨进行酶解,以水解度(DH)为指标,碱性蛋白酶和复合蛋白酶为试验用酶,制备不同DH(5%,10%和15%)的鱼骨酶解物,考察不同DH的酶解产物的抗氧化活性及相对分子质量分布。结果表明:酶解产物的抗氧化活性与其浓度呈一定的量效关系。在不同的抗氧化体系中,酶的种类和DH对酶解产物的抗氧化活性影响趋势不同。当DH为10%时,复合蛋白酶酶解产物对DPPH自由基、ABTS自由基和羟基自由基的清除率较高,其IC50值分别为2.85,0.99,4.91 mg/mL,酶解产物相对分子质量分布在500 u以下的达75.08%。而DH为15%时,碱性蛋白酶酶解产物的还原能力最强,在波长700 nm处,其吸光度值为0.75。酶解产物相对分子质量随DH的增大逐渐减小。本研究结果为制备具有抗氧化活性的鱼骨酶解物提供基础数据。     

鸡血血肽分离纯化与抗氧化性研究

以鸡血血红蛋白为原料,采用中性蛋白酶酶解,以水解度为指标确定血肽酶解制备条件,应用高效液相色谱分析血肽相对分子质量分布,通过交联葡聚糖凝胶Sephadex G-15对血肽进行分离纯化,分别测定血肽粗品、纯化后组分ABTS＋自由基、DPPH自由基、羟基自由基与O2-自由基清除率。血肽酶解条件为血红蛋白底物浓度5%、酶添加量1.5%、酶解时间5 h,浓缩冻干得到血肽粗品;血肽相对分子质量主要分布在500 Da～1 000 Da与180 Da～500 Da,分别占比23.97%、66.07%;血肽经Sephadex G-15层析主要分离出4个洗脱峰,与高效液相色谱分析结果一致;180 Da～500 Da血肽表现出更高的抗氧化性,ABTS＋自由基、DPPH自由基、OH自由基与O2-自由基清除率分别为81.28%、52.45%、23.86%与18.14%。     

油菜蜂花粉酶解物抗氧化性能的研究

对油菜蜂花粉酶解物和水提物进行了体外抗氧化实验。结果表明,花粉酶解物具有良好的抗氧化功能,在50mg/ml浓度下对超氧阴离子自由基、羟自由基和脂质过氧化的抑制率分别达到87．4%、61．2%和95．9%。比较酶解物和水提物抗氧化性能可知,酶解物清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力明显高于水提物,在50mg／ml时,对羟自由基的抑制率比水提物高约30%,清除超氧阴离子自由基的能力高约20%,而抑制脂质过氧化的能力与水提物之间无明显差异。     

油菜蜂花粉中不同分子量级分清除羟自由基的研究

本实验以油菜蜂花粉为原料,利用碱性蛋白酶对花粉蛋白进行降解,并用不同截留相对分子质量的超滤膜和纳滤膜对油菜蜂花粉酶解液进行相对分子质量分级,最后用Fenton体系测定了酶解物的不同相对分子质量级分清除羟自由基的能力。实验结果表明,酶解蜂花粉对Fenton体系产生的羟自由基的清除能力大于未酶解的水提物,经膜分离后得到的相对分子质量20010000D的级分抑制羟自由基的效果非常显著,尤其是相对分子质量5000-10000D的级分,说明油菜蜂花粉清除羟自由基的有效部位主要是在相对分子质量20010000D的级分中。实验结果显示,通过酶解和膜分离能有效地提高花粉清除羟自由基的能力。     

不同品种苦荞蛋白的复合酶解及其多肽抗氧化活性

为研究不同苦荞多肽的抗氧化活性,开发相关产品,提高苦荞的附加值。该试验通过碱提酸沉酶辅助的方法提取苦荞蛋白质,再经由胰蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶水解苦荞蛋白,利用响应面优化得到两种酶复合的最佳酶解条件为蛋白浓度5 mg/mL、酶添加量0.1%、碱性蛋白酶与胰蛋白酶质量比1∶3、酶解pH7.5、酶解温度55℃、酶解时间3 h。对复合酶解多肽产物进行抗氧化活性测定,结果表明,川荞1号和云苦3号的超氧阴离子自由基清除率较高,分别为97.23%、96.45%;而川荞1号和米荞对ABTS+自由基和DPPH自由基均表现出较高的清除能力。对ABTS+自由基清除能力分别为51.54%和54.41%;对DPPH自由基的清除能力分别为87.35%和84.91%。迪苦2号和川荞1号对羟基自由基清除率较高,分别为90.47%、91.32%。     

鳙鱼肉酶解物清除羟自由基的研究

采用优化酶法从鳙鱼肉蛋白中制备具有清除Fenton体系产生的羟自由基(·OH)活性的抗氧化肽.应用响应面分析法以酶解液对Fenton体系产生的羟自由基(·OH)的清除率为指标优化最佳酶解工艺;酶解液相对分子质量分布采用凝胶层析法测定.复合蛋白酶是水解鳙鱼肉制备具有清除羟自由基活性酶解物的适合酶,最佳酶解条件为:温度40℃、酶解时间30 min、PH=7.0、酶加量为600 U/g底物、底物:水=1:2;活性肤相对分子质量范围为519～1088.响应面分析法是优化酶解工艺可行的方法;具有清除羟自由基活性的肽是一些寡肽.     

赤魟鱼肉蛋白酶解产物的制备及抗氧化活性研究

目的:研究赤魟鱼肉酶解产物的制备工艺及抗氧化活性.方法:以DPPH清除率为指标,通过单因素和正交试验确定木瓜蛋白酶的最佳酶解条件;用葡聚糖凝胶G-25(Sephadex G-25)分离、提纯并检测各组分的抗氧化活性.结果:木瓜蛋白酶酶解赤虹鱼肉蛋白制备抗氧化肽的最佳酶解条件是:温度55℃、pH 7.0、酶解时间5h、加酶量0.6%;酶解产物的抗氧化活性大于酶解前粗蛋白的抗氧化活性;酶解产物经Sephadex G-25纯化后,得到组分F1、F2、F3,其中组分F2的抗氧化活性最高,当其质量浓度为5 mg/mL时DPPH清除率、还原力、羟自由基清除率分别为31.54%、0.274和17.91%;组分F2的相对分子质量小于307.结论:酶解并经Sephadex G-25纯化制备的赤魟鱼肉多肽具有较强的抗氧化能力.     

基于Plackett-Burman设计和响应面法优化羊肝抗氧化肽的制备工艺

以羊肝为原料,分别测定5种蛋白酶酶切羊肝所得的酶解液的羟基自由基清除率和肽得率。结果表明,风味蛋白酶羟自由基清除率（84.50%）和肽得率（22.49%）最好。在单因素试验基础上,以羟基自由基清除率为评价指标,采用响应面法优化最佳酶解条件。结果表明,羊肝抗氧化肽制备的最佳酶解条件为料液比1∶3（g∶mL）、加酶量2 400 U/g、酶解温度50 ℃、pH7.50、酶解时间2.8 h。在此优化条件下,测得实际羟自由基清除率为93.70%,与模型理论值相接近。羊肝酶解产物中总氨基酸含量为57.23 g/100 g,其中疏水性氨基酸和必需氨基酸占总氨基酸含量分别为46.47%和41.63%,表明以风味蛋白酶酶解羊肝产物具有较高的抗氧化活性和营养价值。     

黄海海燕体壁酶解物抗氧化活性研究

分别用胃蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶在各自最适条件下酶解黄海海燕体壁制得酶解物,并应用电子自旋共振波谱技术检测酶解物对DPPH和羟基自由基的抗氧化活性。结果表明,黄海海燕体壁酶解物对DPPH和羟基自由基的清除能力随浓度升高而增强;酶解物浓度在20 mg/mL时,胃蛋白酶组、中性蛋白酶组和胰蛋白酶组对DPPH自由基的清除率分别为(52.25±0.14)%,(68.30±0.37)%,(46.27±0.47)%,对羟基自由基的清除率分别为(72.61±0.17)%,(81.82±0.79)%,(56.77±0.28)%;酶解物具有较明显的抗氧化能力。     

九香虫的营养评价及酶解多肽制备工艺优化

目的：探究九香虫营养成分组成与九香虫多肽的最佳酶解工艺条件。方法：按照国标法测定脂肪、蛋白质、总糖含量和脂肪酸组成,采用标准曲线法测定总黄酮和多酚含量;以九香虫多肽得率为指标,采用响应面法优化九香虫的酶解工艺条件;采用氨基酸分析仪、高效凝胶渗透色谱法测定九香虫酶解物的氨基酸组成和相对分子质量分布;考察九香虫酶解物对DPPH自由基和ABTS⁺自由基的清除能力及总还原能力。结果：九香虫粗脂肪含量为43.40%,蛋白质含量为37.08%,总糖含量为7.64%,总黄酮含量为1.67%,总酚含量为1.90%;九香虫最佳酶解工艺为蒸煮时间5 h,酶解pH 10,酶解时间6 h,酶解温度55 ℃,该条件下多肽得率为35.74%;九香虫酶解物必需氨基酸和非必需氨基酸的比值为70.46%,九香虫酶解物相对分子质量＜1 000所占比例为88.1%;九香虫酶解物质量浓度为1.0 mg/mL时ABTS⁺自由基清除率达到88.44%。结论：在最佳酶解工艺下,九香虫多肽得率为35.74%,具有较高的营养价值和较好的抗氧化活性。     

荷叶功能成分的提取及其对自由基清除作用的研究

研究了荷叶中的功能成分黄酮类化合物和生物碱的水提取工艺条件。结果表明 :以水为溶剂来提取荷叶中的黄酮类化合物及生物碱时 ,较佳的工艺条件为 ,m (水 )∶m(荷叶 ) =30∶1,于 80～ 90℃提取 1.5h ,提取液呈酸性。同时采用电子自旋共振捕集技术 (ESR) ,研究了以荷叶在水溶剂中的提取物 (LLE)对羟基自由基 (·OH)和超氧阴离子自由基 (O-2 ·)的清除效果。结果表明 :LLE对·OH和O- 2 ·有很强的清除能力 ,2 6.94 μg/mL的LLE对次黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生O-2 ·的清除率达 65 .60 % ,LLE浓度大于 8.98mg/mL时 ,可以全部清除由Fenton反应体系产生的·OH。     

马铃薯块茎粗多酚体外抗氧化活性

对马铃薯块茎粗多酚抗氧化活性进行研究。采用乙醇、丙酮、蒸馏水3种溶剂提取马铃薯块茎中粗多酚类物质,通过粗多酚提取液对羟自由基(.OH)、超氧自由基(O2-.)、亚硝酸盐(NO2-)的清除和还原能力测定,比较3种酚提液的体外抗氧化活性,并测定其中总多酚含量。结果显示:3种粗多酚提取液总多酚含量为0.33～0.40 mg/mL;在不同抗氧化体系中,3种酚提液均具有良好的抗氧化活性,抗氧化能力的大小顺序为60%乙醇酚提液>60%丙酮酚提液>蒸馏水酚提液,抗氧化活性的大小与总多酚含量的高低呈正相关。     

牡蛎水提液的抗氧化特性

研究了低温条件下制备牡蛎水提液体外抗氧化特性,及牡蛎水提液清除二苯代苦味酰自由基(DPPH·)、Feton体系产生的羟基自由基(·OH)、邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基(O2 -·)的能力,以Fe2 +诱发脂蛋白PUFA过氧化体系研究牡蛎水提液的抗氧化活性。结果表明,牡蛎水提液具有较强的清除自由基能力,并有一定的抗脂质过氧化作用     

发菜及其提取物清除自由基的作用

采用NADH/PMS体系和H2O2/Fe2+体系测定野生、自养和混养发菜及其提取物清除超氧阴离子自由基(O2-.)和羟自由基(.OH)的能力。结果显示,在测试浓度范围内,(1)野生、自养和混养发菜的细胞粉、胞外多糖、细胞提取液、细胞提取液残余物及粗藻蓝蛋白对O2-.都具有一定的清除能力,其中细胞粉、胞外多糖、和提取液清除O2-.的作用最为显著;(2)发菜细胞粉和多糖对.OH没有显著的清除能力,细胞提取液、获得细胞提取液后剩余的细胞粉及粗藻蓝蛋白能够清除.OH。发菜不同组分清除自由基的活性使其有望作为天然抗氧化剂和功能性食品得到开发。     

苹果皮不同溶剂提取物抗氧化活性研究

研究苹果皮不同溶剂提取物的抗氧化活性。依次用蒸馏水、60%乙醇、无水乙醇、乙酸乙酯提取苹果皮中的活性物质,用Folin-Ciocalteu法测定提取物中总酚含量,并以Vc为阳性对照,通过测定对羟自由基(.OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)、亚硝酸盐(NO2-)的清除作用及总还原力,比较评价4种提取物的抗氧化活性。苹果皮60%乙醇提取物总酚含量显著高于其他提取物;在不同的抗氧化体系中,苹果皮的4种不同溶剂提取物均具有不同程度的抗氧化活性且与质量浓度呈明显的量效关系,60%乙醇提取物的抗氧化活性始终最强,其清除.OH和O2-.活性弱于Vc,而清除NO2-活性和还原能力较强且高于Vc。苹果皮抗氧化活性物质主要是60%乙醇提取物。     

动态高压微射流辅助提取对鱼鳞多糖抗氧化活性的影响

采用动态高压微射流技术辅助提取鲤鱼鱼鳞多糖,以DPPH·、·O₂-、ABTS+·、·OH清除能力和Fe3+还原能力为评价指标,研究其对鲤鱼鱼鳞多糖抗氧化活性的影响。结果表明:动态高压微射流处理可以有效降低物料的平均粒度,粒径由未经处理的499.80 nm降低到192.57 nm;进而提高鲤鱼鱼鳞多糖的得率,当处理压力为130 MPa时,多糖得率达到7.81%。随着处理压力的提高,多糖提取液对DPPH·、·O₂-、ABTS+·和·OH的清除率以及Fe3+的还原能力逐渐增强,当处理压力为110 MPa时,DPPH·、·O₂-、·OH的清除率和Fe3+的还原能力最高分别达到了86.04%、61.23%、90.59%和0.64(OD值),当处理压力为150 MPa时,对ABTS+·的清除率达到89.58%,均显著高于空白对照组(P<0.05)。动态高压微射流辅助提取可以有效提高鲤鱼鱼鳞多糖的得率和体外抗氧化能力,本研究可为动态高压微射流技术在天然活性多糖辅助提取方面的应用提供理论依据和技术支撑。     

乌饭果花色苷复合酶法提取工艺优化及其抗氧化活性

以乌饭果花色苷含量为指标,采用二次回归正交旋转组合设计优化乌饭果花色苷的复合酶法提取工艺,并分析评价其体外抗氧化活性。结果表明:乌饭果花色苷复合酶法提取的最佳工艺条件为加酶量234 U·g-1原料,纤维素酶:果胶酶配比2:1,pH4.0,料液比1:30 g·mL-1,酶解温度50 ℃,酶解时间180 min,在此条件下测得乌饭果花色苷的含量最高,为136.08 mg·100 g-1。同时,体外抗氧化活性研究表明,乌饭果花色苷对·OH、O₂-·清除能力和抗脂质过氧化能力的半抑制浓度IC₅₀分别为92.23、23.93和303.1 μg·mL-1,与同质量浓度抗坏血酸相比,其·OH、O₂-·清除能力弱于抗坏血酸,但抗脂质过氧化能力优于抗坏血酸。     

不同聚合度低聚木糖体外清除自由基活性研究

通过研究不同聚合度的粗低聚木糖(LL、ML、HL)及其中所含的木糖对羟自由基(·OH)清除活性的影响,对纯低聚木糖的平均聚合度与活性间的关系进行了评价。实验结果表明.粗低聚木糖对羟自由基(·OH)具有较好的清除活性。其中。高聚合度的粗低聚木糖(HL)对羟自由基(·OH)的清除活性最显著,IC_(50)约为14 mg/mL.而木糖对羟自由基(·OH)无清除活性,说明纯低聚木糖的平均聚合度越高,清除羟自由基(·OH)作用越显著。对木糖及不同聚合度粗低聚木糖+DPPH自由基进行紫外扫描.探讨纯低聚木糖对DPPH自由基的清除作用,结果表明,木糖及纯低聚木糖对DPPH自由基均没有清除能力。     

狭叶荨麻醇提物的体外抗氧化及抗炎活性

为了开发利用狭叶荨麻资源,本研究以狭叶荨麻为原料,对其醇提物的体外抗氧化及抗炎活性进行了研究。在单因素试验的基础上,采用响应面法对提取条件进行了优化,得到最佳提取条件为提取时间114 min、料液比1:15、乙醇浓度为64%,所得醇提物得率(10.00±0.26)%,该狭叶荨麻醇提物中活性物质含量总酚(160.77±0.01)mg/g、总黄酮(366.85±0.05)mg/g、原花青素(7.81±0.01)mg/g、皂苷(516.76±0.04)mg/g、生物碱(2.01±0.02)mg/g。在优化条件下进行了提取,分别采用抗坏血酸(Vc)、双氯芬酸钠作抗氧化、抗炎阳性对照,对所得狭叶荨麻醇提物进行总还原力、清除DPPH·、清除·OH及抑制透明质酸酶、抑制白蛋白变性活性评价。该狭叶荨麻醇提物总还原力高于Vc,且量效关系比Vc更明显(p0.001),EC50为0.04 mg/m L;清除DPPH·、清除·OH活性比Vc好,IC50分别是0.02 mg/m L、1.87 mg/m L;抑制透明质酸酶、抑制白蛋白变性活性与双氯芬酸钠相近,IC50分别是2.43 mg/m L,0.31mg/m L。     

春砂仁根和叶提取物抗氧化活性研究

以水为溶剂对春砂仁根、叶进行超声波浸提。通过测定还原能力及O2-.自由基清除率、.OH自由基清除率、DPPH.自由基清除率,比较春砂仁根、叶提取物与茶多酚的抗氧化活性。结果表明,春砂仁根、叶提取物都有一定的抗氧化性质;根、叶水提取物的还原能力最强;对O2-.自由基清除率大小顺序为:春砂仁叶提取物>茶多酚>春砂仁根提取物;对.OH自由基清除率大小顺序为:春砂仁根提取物>春砂仁叶提取物>茶多酚。