介绍一种神经组织的快速展片方法

组织制片需很多环节才能完成 ,在大量制片时 ,其中的任何一个环节速度过慢都会影响到整个制片的进程。而神经组织因其含有大量的类脂 ,具有嫌水性 ,它的温水展片速度很慢 ,尤其是经甲醛或多聚甲醛固定的组织 ,由于经酒精脱水后组织收缩严重 ,在 3 5～ 40℃的温水中平均需要约 5～ 7min才能展平。为了加快速度 ,我们曾经用提高水温的方法 ,但水温超过 40℃后 ,组织蜡片很快分散 ,组织展平的速度虽然加快了 ,但由于组织间隙的存在 ,组织也会随蜡片的分散而分离。为了解决这一难题 ,我们经过多次实验 ,终于找到了一种行之有效的方法 ,现介绍如…     

自制半薄切片调温烤片装置介绍

半薄切片(厚切片)有助于超薄切片的定位,以及光镜与电镜观察的密切结合,是应用电镜技术进行生物医学研究的手段之一。半薄切片制片过程中,在载玻片上展片与贴片及切片染色,是该技术的重要步骤。按传统的方法,展片时用酒精灯火焰加热,温度不易控制,且成批制片费时。贴片则是在玻片上涂蛋白甘油,长期保存易生霉,或置50～70℃烤箱中数小时,因空气导热慢,耗时较多,而染色通过火焰加热,易沸腾造成过染或沉淀。因此,我室用自动恒温电熨斗试制了一种半薄切片调温烤片装置(易制作、成     

三种快速冰冻切片法制片质量探讨

快速冰冻切片主要是为了临床医生在手术中明确诊断,以便选择适宜的手术方案。切片质量的好坏直接关系到病理诊断的准确性和及时性。本文搜集用三种快速冰冻切片法制片371例,比较三种不同的操作方法对冰冻切片质量的影响,探讨最佳的制片方法。l材料与方法标本来源：搜集我院1994年1月一1998年8月送检的术中冰冻切片标本371例。仪器设备：日本产“樱花”牌恒冷冻切片机。操作方法：川C02冻凝法：将新鲜组织放在冷冻头上,加包理剂,置于Co钢瓶冷冻台上,打开开关,将组织冻凝,约2ndn,立即放入恒温冷冻切片机内,-20℃,切片,用电吹风吹…     

酮体生成和利用定量实验方法的建立

以丁酸钠为作用物,利用组织切片培养法,建立了定量测定酮体生成和利用的实验方法。实验的最适条件是:大鼠饥饿48小时;气温10～20℃,以15℃为宜;丁酸钠浓度0.75mol/L;37℃恒温振荡培养时间4小时。依此,可定量测定肝脏生成或其它组织利用的酮体量。     

病理HE切片制片中的技术改进

病理ＨＥ切片技术是临床病理检验和病理学教学中不可缺少的一个组成部分 ,切片的好坏将会直接影响到诊断结果和教学效果[1] 。为了使切片质量不断提高 ,笔者在平时的制片中通过反复推敲 ,对一些环节如烤片和透明过程等加以改进 ,取得较为满意的效果 ,现介绍如下。1　材料和方法将取材组织经常规 10 %甲醛溶液固定 ,流水冲洗 ,酒精依次脱水 ,二甲苯溶液透明和石蜡浸蜡 ,最后进入包埋切片[2 ] 。将切取的石蜡片 (3μｍ～ 4 μｍ)平摊于 4 5℃左右的恒温水箱中 ,及时捞片 ,置于晾干架上 ,以 2 2 0Ｖ ,4 50Ｗ电吹风对组织切片热吹风 3～ 4ｍｉｎ…     

恒温摇摆式水浴箱制备冷沉淀的优势

目的 研究恒温摇摆式水浴箱制备冷沉淀的优势及影响因素.方法 随机取24袋新鲜冰冻血浆(200±20)mL,随机分为第1组和第2组,每组12袋,分别用恒温摇摆式回收率.结果 第1组冷沉淀FⅧ的回收率为(47.63±4.06)%,第2组冷沉淀FⅧ的回收率为(64.17±5.96)%,前者平均用时2.5h,而后者平均用时仅为1.0h.结论 使用恒温摇摆式水浴箱(CT-4T6C型)制备冷沉淀其优势在于能够有效控制虹吸法制备冷沉淀的关键控制点,即精确控制水浴温度和融化速度.     

手术中的冰冻切片技术

手术中冰冻切片病理诊断对决定手术方案起着关键的作用,而冰冻切片的质量对做出准确的病理诊断极为重要。我科用恒温冷冻切片机做冰冻切片1万余例,现将不同组织的冰冻切片方法体会总结如下。     

恒温水浴加热染色法检测结核分枝杆菌效果分析

目的 探讨恒温水浴加热抗酸染色法能否改进结核分枝杆菌染色效果.方法 采用自制恒温水浴箱对含有卡介苗的模拟痰标本涂片进行加热染色,调节加热温度和时间,通过显微镜观察比较染色效果差别.结果 70℃恒温水浴染色10min,结核杆菌菌体形态清晰,色泽明亮,染色效果良好.结论 改良后的恒温水浴加热抗酸染色法,能够精确控制染色温度和时间,染色效果良好,同时还能减少环境污染,值得推广.     

不同方法提取石蜡包埋组织DNA的比较分析

目的:比较福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)中3种提取DNA的方法对DNA质量和回收率的影响,探讨一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法. 方法:选取新疆医科大学第一附属医院2004～2007年手术切除的10%甲醛固定石蜡包埋甲状腺癌组织标本,分别以试剂盒法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿法、改良TES水浴脱蜡-试剂盒法提取其DNA,然后进行电泳分析. 结果:改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得样本DNA的OD260/OD280比值为(1.82±0.15),改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法为(1.86±0.17),两者比较无明显差异(P>0.05);分别与试剂盒法(1.75±0.14)相比,差异有统计学意义(P<0.01).改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯DNA法、改良TES水浴脱蜡-酚氯仿提纯DNA法所得 DNA产量和质量均高于试剂盒法. 结论:改良TES水浴脱蜡-试剂盒提纯法简单快捷,是较理想的石蜡包埋组织DNA提纯方法.     

提高冰冻切片质量的简易方法

<正>冰冻切片快速、方便、用途广泛,但技术难度远较石蜡切片大,尤其是质量难以控制:我们经过多年实践,摸索出了一套外检急诊保质简易方法,现介绍如下。 1.方法 冰冻:将厚0.2～0.4mm新鲜组织放入预先滴上合成胶水(金雀牌,启东北新光卫胶水厂生产)作包埋剂的冰冻头上,放入恒温式冰冻切片机内,冰冻致组织和包埋剂发白后即可切片。 切片:切片时手摇轮用力要均匀,防卷板与切片刀锋之间的距离调节适当,这是获得平整切片的关键。附贴切片动作要轻巧而快,贴后立即用95％酒精固定30秒钟。     

脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法效果比较

目的探讨脑组织切片免疫组化技术中漂片法与贴片法的效果。方法建立大鼠大脑中动脉缺血模型,脑组织冰冻切片,采用兔抗BDNF(1∶500)抗体,同时运用漂片法和贴片法进行免疫组化ABC法染色。结果漂片法阳性神经元数目和灰度值与贴片法比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论脑组织切片免疫组化技术采用漂片法效果更为可靠。     

冰冻切片制作方法改进探讨

目的:探讨制片效果比较理想的冰冻切片制作方法,以提高冰冻切片的质量.方法:择取新鲜活体组织,取材后直接冻结,经恒温式冰冻切片机切片,冰冻固定液固定,HE染色.剩余组织做石蜡切片对照.结果:质量较好,染色鲜艳,镜下组织结构细胞形态清晰,细胞核浆对比分明.结论:此方法简便快速,制片质量满意,可提高病理诊断的准确性.     

三种氢氧化钙糊剂对根周pH值影响的比较

氢氧化钙糊剂对诱导根尖封闭有独特效果 ,调制氢氧化钙糊剂的介质有蒸馏水、生理盐水和丙二醇 ,有关这 3种糊剂对根周ｐＨ值的影响未见报道。我们将 3种糊剂分别封入离体牙根管中 ,定量测定了根管外ｐＨ值的变化。将因正畸而拔除的 40颗下颌第一双尖牙随机分为 4组 ,常规根管预备后 ,分别放入有 1 0ｍｌ生理盐水的密闭小瓶中 ,37℃恒温水浴中放置 2 4ｈ ,常规方法ｐＨＳ 2型酸度计测定ｐＨ值。将 3种糊剂分别充填入根管中 ,对照组无糊剂 ,均用夏用蜡封闭根管口和根尖孔 ,放回小瓶中 ,置于 37℃恒温水浴。分别在 1、3、7、2 1、30ｄ测各组ｐ…     

介绍一种改进组织脱水法

在一些基层医院病理科技术室硬件配备往往不足,这给制片工作带来一定难度和困难,尤其在寒冷季节当室温低于10℃时,没有空调及组织脱水机或当脱水机故障时组织块脱水往往较难脱好,这样就影响制片质量。笔者经过实践采用把组织块脱水缸放在摊片机的摊片水槽内进行加温水浴脱水。 1 器材准备 摊片机一台 2 具体方法与效果 按常规切取组织块在10％甲醛液中固定过夜,次日上午将组织块水洗后置75％乙醇缸中加盖放入恒温50℃摊片机槽内30分钟,再置于95％乙醇(两道)各1小时,再投入无水乙醇中1小时,无水乙醇     

红外线避孕罩—对兔睾生精作用的影响

可调自控恒温(43℃)红外线避孕罩在家兔使用后,组织切片观察此法对睾丸内生精过程有抑制作用.推测可试用于男性避孕.     

提高石蜡制片质量的几点体会

病理诊断中,制片质量的好坏,直接影响诊断的准确率。病理诊断的完成要经过肉眼检查、取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等复杂的人工和机器操作程序,哪个环节做不好,都会影响制片质量。实际工作中制片质量不稳定的情况时有发生,为提高病理切片质量,现将各环节操作体会介绍如下。　组织固定在制作组织切片的过程中,首先要将组织充分固定后才能进行制片(冰冻切片除外),尤其是对石蜡切片,这是不可少的重要步骤。此过程应注意以下几个方面:(1)组织固定必须新鲜　活检组织除需作冰冻切片外,均需立即投入固定剂,否则时间…     

石蜡包埋宫颈组织中三种DNA提取方法的比较

目的:通过比较了三种不同的DNA提取方法对DNA质量的影响,旨在寻找一种高效、简便、实用的石蜡组织中DNA提取方法.方法:取10%甲醛固定石蜡包埋的宫颈组织标本(宫颈癌及宫颈上皮内瘤变标本),分别以二甲苯脱蜡及酚氯仿法提纯DNA(方法1)、,IES水浴脱蜡及酚氯仿提纯DNA(方法2)、IES水浴脱蜡及试剂盒提纯DNA(方法3),然后进行电泳和聚合酶链反应扩增分析.结果:TES;水浴脱蜡及酚氯仿法提纯DNA所得样本·DNA的0D260/0D280比值为1.85±0.22,TES水浴脱蜡及试剂盒提纯DNA法为1.81±0.12,两者比较无显著差异(P>0.05);桓分别和二甲苯脱蜡及酚氯仿提纯DNA法相比较有显著差异(P>0.01).DNA电泳和PGR扩增结果示IES水浴脱蜡及酚氯仿提纯DNA、TES水浴脱蜡及试剂盒提纯DNA所得DNA质量均高于二甲苯脱蜡酚氯仿提纯DNA法.结论:TES水浴脱蜡及试剂盒提纯DNA法简便快捷,是理想的石蜡包埋组织DNA提纯方法.     

一种快速的石蜡制片法及染色工艺

植物组织细胞研究是中草药研究的一个重要方面,它必须依赖切片技术的发展。石蜡切片法是最常用的切片方法,由于没有合适的仪器设备,多年来中草药组织块都是在常温下,溶剂浓度采用从低到高梯度递升的脱水透明方法,时间长效率低。我通过多次试验摸索,中草药组织块在溶剂加温(50℃)的条件下,可加速对组织细胞的渗透。溶剂浓度采用坡度递升的脱水透明方法。一般只需原先脱水时间的十分之一。改进的番红、固绿染色工艺流程,可以减少步骤。具体实验报导如下: 一、快速制蜡块的方法 1.脱水透明的主要仪器设备:恒温水浴锅、酸式滴定管或恒流泵、隔水式恒温培养箱。 2.组织块脱水透明的操作及溶剂浓度的计算:不同的材料或虽然是同一种材料,由于大小厚度不同,脱水透明的时间是不同的。一般将嫩材料切成     

悬浮红细胞复温后输注的输血反应调查

目的:观察悬浮红细胞复温后输注的输血反应发生率.方法:追踪调查悬浮红细胞1 266袋,分为复温组;未复温组.复温组是将悬浮红细胞在37℃恒温水浴5 min,输注后观察输血反应发生率.结果:输血反应主要表现为发热及皮疹.输血反应发生率:复温组3.0%;未复温组6.6%,复温组输血反应发生率明显低于未复温组.结论:悬浮红细胞在37℃恒温水浴5 min,复温后输注可有效地降低输血反应发生率.     

静态法与动态法测定药物水中溶解度的探讨

目的比较采用静态法与动态法对药物水中平衡溶解度测定结果的影响。方法静态法：超声1 h、25℃水浴恒温24 h,25℃气浴振荡24 h,25℃水浴恒温放置7 d及16 d;动态法：超声1 h、25℃气浴振荡24 h,25℃气浴振荡24 h,25℃水浴搅拌24 h,分别测定布洛芬、盐酸小檗碱、葛根素、对乙酰氨基酚在水中的溶解度。结果 25℃条件下采用静态法及动态法测得药物在水中的平衡溶解度如下：布洛芬为0.067～0.078 mg/mL（RSD11.94%～22.18%）和0.063～0.078 mg/mL（RSD3.2%～7.8%）;盐酸小檗碱为7.072～8.230 mg/mL（RSD3.4%～14.5%）和7.654～9.771 mg/mL（RSD2.2%～5.0%）,葛根素为7.305～9.479 mg/mL（RSD7.5%～14.5%）和6.057～8.046 mg/mL（RSD2.5%～6.8%）;对乙酰氨基酚为8.708～9.771 mg/mL（RSD3.2%～13.6%）和8.965～10.932 mg/mL（RSD1.5%～6.6%）。结论 4种药物在水中的平衡溶解度以动态法重现性较好,其中采用水浴搅拌24 h测得的结果重现性最好,最低RSD值为1.5%;而采用超声与恒温气浴振荡结合法,除溶解度特别小的药物造成误差较大外,基本能满足大部分药物溶解度测定的要求（RSD〈2.5%）,而且,相对于水浴搅拌,该法处理样品量大,可广泛应用。