长链非编码RNA MEG3在肿瘤中的研究

母源性印记基因3(MEG3)是一种肿瘤抑制基因,其转录产物不编码蛋白,属长链非编码RNA.在人类多种肿瘤组织及细胞株中存在MEG3基因表达缺失,DNA甲基化程度升高等机制与之密切相关.研究表明,MEG3基因及其转录产物能够抑制肿瘤细胞增殖,并促进肿瘤细胞凋亡,其抑癌机制与肿瘤抑制基因p53的作用密不可分.     

lncRNA MEG3在肿瘤发生发展中的功能作用与机制研究进展

人母系表达基因(maternally expressed gene 3,MEG3)属于长链非编码RNA（long-chain non coding RNA,lncRNA）,在人类许多正常组织中均有表达。目前MEG3在多种人类癌症组织为低表达,且其基因启动子呈现高甲基化状态,进而影响肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡等方面,是肿瘤发生发展的抑制因子。lncRNA MEG3对肿瘤的分子调控作用,揭示其有望成为治疗的新靶点。本文综述了MEG3在各肿瘤中的功能作用与机制,讨论了MEG3在各肿瘤中的意义及存在的问题。但MEG3在肿瘤中的具体作用机制仍未阐明,需做进一步研究。     

长链非编码RNA MEG3抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的研究

目的:探讨长链非编码RNA MEG3在临床胃癌组织及细胞中的表达情况,以及过表达MEG3对人胃癌细胞增殖能力的影响。方法:采用实时定量PCR检测人胃癌组织及细胞系中MEG3的表达,并结合病理资料分析胃癌组织MEG3表达与临床病理特征之间的关系。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和克隆形成实验检测过表达MEG3前后胃癌细胞增殖的变化。结果:相对于正常胃组织及细胞,在胃癌组织和细胞中MEG3的表达水平明显下调。胃癌组织中MEG3表达与组织学分级、肿瘤浸润深度和TNM分期相关,但与年龄、性别及区域淋巴结转移无关。在SGC-7901细胞中转染MEG3过表达质粒后能显著上调MEG3的表达水平。过表达MEG3能明显抑制胃癌细胞的增殖能力。结论:MEG3对胃癌细胞增殖的调控至关重要,过表达MEG3能明显抑制胃癌细胞的增殖能力。提示MEG3的表达下调可能在胃癌的发生、发展中起重要作用。     

长链非编码 RNA MEG3在非小细胞肺癌中的表达与功能

目的：探讨长链非编码 RNA MEG3在非小细胞肺癌中的表达情况及其分子机制。方法：采用 qRT -PCR 方法检测肺癌组织中 MEG3的相对表达量,分析其与临床病理资料的相关性。将 MEG3转染到肺癌A549细胞后,应用 qRT - PCR 检测 A549细胞中 MEG3的表达;MTT 检测细胞转染后肿瘤细胞增殖的变化;并用 Western blot 检测转染后细胞中凋亡相关蛋白（BCL -2和 BCL - XL）表达。结果：肺癌组织中 MEG3的相对表达水平显著低于正常肺组织（P <0.05）。各肺癌细胞株中 MEG3的表达水平均低于肺上皮细胞株（P <0.05）。MEG3的表达水平与肿瘤大小、临床分期以及淋巴结转移之间有显著相关性（P <0.05）。MEG3转染A549细胞48h 和72h 后,A549细胞的增殖率明显低于空白对照组和阴性对照组（P <0.05）。其 BCL - XL 蛋白表达水平相较于空白对照组和阴性对照组表达明显下调（P <0.05）。结论：MEG3在 NSCLC 肿瘤组织中表达下调,可能部分通过下调 BCL - XL 的表达而抑制肺癌细胞的增殖。     

lncRNA 的生物标记作用及 MEG3在肿瘤中的研究进展

长链非编码 RNA（lncRNA）是 RNA 分子学的一个新类型,由于转录长度超过200个核苷酸缺乏蛋白编码潜能而得名。一些 lncRNA 在特殊类型的癌症中具有高度特异的表达使其成为潜在的诊断工具,另一些 lncRNA 与肿瘤生长和患者生存期不同的病理生理特点有相关性,使其成为指示预后的生物标记物。众多 lncRNA 之一的母系表达基因3（MEG3）是一种印记基因,包含12个亚型基因,编码与肿瘤发生相关的lncRNA。MEG3通过调节 p53和促血管再生等发挥作用,提示 MEG3及其亚型可作为一个新型的 lncRNA 肿瘤抑制因子。近年来,有关 lncRNA 与肿瘤的相关性已成为研究的热点,本文就 lncRNA 生物标记作用和MEG3及其亚型与肿瘤疾病的研究进展作一综述。     

长链非编码RNA MEG3对肝癌细胞增殖及自噬能力的影响

目的:探讨长链非编码RNA MEG3对肝癌细胞增殖及自噬能力的影响。方法:实时定量PCR检测60例肝癌组织标本以及相应癌旁组织中MEG3的表达水平，并检测MEG3在肝癌细胞系中的表达情况。通过质粒转染方法构建MEG3过表达的肝癌细胞Huh7和HepG2，采用CCK-8法检测肝癌细胞增殖情况；Western blot检测自噬相关蛋白（LC3Ⅱ/Ⅰ、p62）表达变化；利用免疫荧光检测LC3变化情况。结果:MEG3在肝癌组织中表达低于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)。肝癌细胞中过表达MEG3后，其细胞增殖能力显著降低（P<0.05）；并且过表达MEG3后能减少LC3-I向LC3-Ⅱ的转化，而p62表达升高（P<0.05）；免疫荧光可见明显LC3荧光斑点减少。结论:在肝癌组织中MEG3表达低于癌旁组织；在体外细胞实验中发现，MEG3能够抑制肝癌细胞增殖和自噬水平，有望成为肝癌治疗的潜在靶点。     

长链非编码RNA MEG3 在胃癌中的表达及其与预后的关系

目的:研究长链非编码RNA （long non-coding RNA ,lncRNA）母系表达基因3（maternally expressed gene3,MEG3）在胃癌组织中的表达及其与预后的关系,并进一步探讨MEG3 与凋亡相关蛋白P 53、鼠双微基因2（murine double minute 2,MDM2）的相关性。方法:收集2012年9 月至2013年6 月青岛大学附属青岛市市立医院55例行手术治疗的胃癌切除标本（包括癌组织及对应的远端正常组织）,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测胃癌组织中MEG3 的表达,并分析其与临床病理参数的关系;应用免疫蛋白印迹法（Western blot）检测胃癌中P 53、MDM2 蛋白的表达水平,并分析其与MEG3 的相关性。结果:lncRNAMEG 3 在胃癌组织的相对表达水平（7.98± 0.19）低于所对应的正常组织（9.47± 0.18,P < 0.05）;在胃癌组织（r =-0.627,P < 0.001）及远端正常组织（r =-0.807 ,P < 0.001）中,P 53与MDM2 的表达呈负相关;P 53与MEG3 的表达呈正相关（r = 0.591,P < 0.05）,MDM2 与MEG3 的表达呈负相关（r =-0.346,P < 0.05）;MEG3 高表达者较低表达者中位生存期明显延长。结论:MEG3 在胃癌发生发展过程中起抑癌基因的作用;MEG3 与P 53、MDM2 在胃癌发生发展的生物学机制上有重要联系;检测MEG3 的表达水平对胃癌预后有潜在价值。      

长链非编码RNA MEG3靶向Rac1抑制宫颈癌细胞增殖、迁移的实验研究

目的 检测长链非编码RNA MEG3在宫颈癌细胞中的表达，检测MEG3表达对HeLa细胞增殖、迁移的影响及可能分子机制。方法 采用荧光定量PCR（QPCR）检测正常宫颈上皮细胞HcerEpic和宫颈癌细胞系C-33A、C4-1、Caski、SiHa和HeLa中MEG3的表达； MEG3过表达质粒（MEG3）、阴性对照质粒（NC组）、MEG3+Rac1过表达质粒（MEG3+Rac1组）分别转染HeLa细胞，MTT法检测细胞增殖情况， Transwell实验检测细胞迁移能力，Western blotting检测PCNA、E-cadenin、N-cadenin、Vimentin、Rac1 蛋白表达。结果 QPCR结果显示，C-33A、C4-1、Caski、SiHa和HeLa细胞中MEG3表达水平分别为0.37±0.044、0.65±0.075、0.41±0.071、0.71±0.053和0.42±0.081，均低于HcerEpic细胞的1.02±0.064，差异具有统计学意义（P＜0.05）。MTT法结果显示MEG3组HeLa细胞增殖活力显著低于NC组； MEG3组的迁移细胞数为385±14，显著低于NC组的594±16（P＜0.05）；与NC组比较，MEG3组PCNA、N-cadenin和Vimentin表达下调，E-cadenin表达上调。与MEG3组比较，MEG3+Rac1组显著上调Rac1蛋白表达，上调HeLa细胞增殖活力，增加迁移细胞数。结论 LncRNA MEG3可能通过靶向Rac1信号通路抑制宫颈癌细胞增殖、迁移。     

LncRNA MEG3靶向miR-181a-5p调控宫颈癌细胞放射敏感性

目的 研究LncRNA MEG3对宫颈癌细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法 运用qRT-PCR法检测放射抗性和放射敏感性宫颈癌细胞中LncRNA MEG3的表达;将过表达对照组(转染pcDNA 3.1)、过表达LncRNA MEG3组(转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3)、抑制miR-NC组(转染anti-miR-NC)、抑制miR-181a-5p组(转染anti-miR-181a-5p)、过表达LncRNA MEG3+过表达miR-NC组(共转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3和anti-miR-NC)、过表达LncRNA MEG3+过表达miR-181a-5p组(共转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3和anti-miR-181a-5p),均用脂质体法转染至SiHa细胞;克隆形成实验检测细胞的存活分数;流式细胞术检测细胞的凋亡率;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性;Western blot检测细胞中PTEN、p-Akt、Akt的蛋白表达。结果 与放射敏感组相比,放射抗性宫颈癌组织中LncRNA MEG3的表达明显降低(P<0.05),其表达量与宫颈癌细胞的放射敏感性呈正相关;过表达LncRNA MEG3、抑制miR-181a-5p均可显著增强宫颈癌细胞SiHa放射敏感性,促进凋亡(P<0.05);野生型LncRNA MEG3细胞的荧光活性受miR-181a-5p的抑制。过表达miR-181a-5p逆转了LncRNA MEG3对宫颈癌细胞放射增敏和促凋亡作用及对PTEN/Akt信号通路的调控。结论 长链非编码RNA LncRNA MEG3可增强宫颈癌细胞放射敏感性,其机制可能与靶向miR-181a-5p调控PTEN/Akt 信号通路有关,可为提高宫颈癌的预后提供新方向。     

lncRNA MEG3作为miR-21的ceRNA在恶性肿瘤中的作用

长非编码RNA(lncRNA)-母系表达基因3(MEG3)和微小RNA-21(miR-21)是抑癌和致癌因子。竞争性内源RNA(ceRNA)假说为研究RNA之间的相互作用提供了新的策略。MEG3可作为miR-21的ceRNA在乳腺癌、宫颈癌、胃癌、肺癌、白血病等恶性肿瘤的发生、发展、增殖、转移以及药物耐药、预后中发挥重要作用。     

Long noncoding RNA MEG3 is downregulated in cervical cancer and affects cell proliferation and apoptosis by regulating miR-21

Recent research has found that long noncoding RNAs (lncRNAs) were involved in various human cancers. However, the role of these lncRNAs in cervical cancer remains unexplored. Therefore, we aimed to investigate the biological function of maternally expressed gene 3 (MEG3), a cancer-related lncRNA, and its underlying mechanism in cervical cancer. In this study, MEG3 expression of 108 patients’ cervical cancer tissues and adjacent normal tissues was detected by quantitative real-time PCR analysis (qRT-PCR), and the functional effect of MEG3 was determined in vitro assays. We observed that MEG3 was downregulated in cervical cancer tissues, compared to the adjacent normal tissues, and was negatively related with FIGO stages, tumor size, lymphatic metastasis, HR-HPV infection and the expression of homo sapiens microRNA-21 (miR-21). Furthermore, we focused on the function and molecular mechanism of MEG3, finding that overexpression of MEG3 reduced the level of miR-21-5p expression, causing inhibition of proliferation and increased apoptosis in cervical cancer cells. In summary, our findings indicate that MEG3 function as a tumor suppressor by regulating miR-21-5p, resulting in the inhibition of tumor growth in cervical cancer. As a result, this study improves our understanding of the function of MEG3 in cervical cancer and will help to provide new potential target sites for cervical cancer treatment.     

长链非编码RNA在膀胱癌中的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)起初被认为是基因组转录的“噪音”或“转录垃圾”。随着研究的深入和测序技术的发展,越来越多的lncRNA被发现,虽然lncRNA不编码蛋白质,但可在多层面、通过多途径调控基因表达,从而影响疾病的发生、发展,尤其与肿瘤的发生、发展密不可分。膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,其高发病率和高复发率一直是泌尿外科医生和膀胱癌患者的困扰,且病因尚不十分明确。lncRNA与膀胱癌的关系也逐渐受到关注,本文以几个lncRNA（H19,UCA1/UCA1a,MALAT-1,HOTAIR,ncRAN,MEG3）为代表,阐述了lncRNA与膀胱癌的发生、发展与复发的密切关系,并预测通过lncRNA诊断和治疗膀胱癌的临床前景。     

Potential role for magnetoencephalography in distinguishing low- and high-grade gliomas: a preliminary study with histopathological confirmation

Gliomas are the most common form of tumor in the CNS and are exceptionally heterogeneous. Accurately characterizing gliomas, in terms of grade and type, is essential for predicting the rate of tumor progression. Histopathological grading and analysis based on biopsied tissue remains the gold standard, but non- and semi-invasive neuroimaging also plays a key role. Neuroimaging has been used to guide and optimize biopsies for several decades, but more recently molecular imaging and variants of MRI have shown promise in independently predicting glioma grade. Here we evaluated whether magnetoencephalographic (MEG) measurements of population-level physiology within the glioma space were predictive of the inherent grade of the tissue, based on definitive histopathological analyses. High-density MEG data were recorded from 11 patients who were undergoing functional mapping in preparation for resective surgery. The primary results indicated that glioma grade was positively correlated with the local amplitude of activity within the glioma space in the theta (4-7 Hz), alpha (8-14 Hz), and beta bands (14-30 Hz). Additionally, activity within the glioma was significantly elevated relative to the nonaffected homologue area in the same frequency bands. These results indicate that pathological levels of synchronization exist within the tumor space and that MEG may be a viable tool for noninvasively differentiating gliomas by their grade. Although these results should be considered preliminary and are only correlative in nature, these data suggest that MEG can potentially detect neurophysiological signatures or markers that predict the inherent grade of a glial tumor.     

MEG3 imprinted gene contribution in tumorigenesis

Maternally expressed gene 3 (MEG3) is a maternally expressed imprinted gene representing a large noncoding RNA in which microRNAs (miRNAs) and small nucleolar RNAs are also hosted. It is capable of interacting with cyclic AMP, p53, murine double minute 2 (MDM2) and growth differentiation factor 15 (GDF15) playing a role in cell proliferation control. MEG3 expression is under epigenetic control, and aberrant CpG methylation has been observed in several types of cancer. Moreover, gene copy number loss has been reported as additional mechanism associated with tumorigenesis. MEG3 deletion seems to upregulate the paternally expressed genes and on the other hand downregulate the expression of downstream maternally expressed genes and tumor suppressor miRNAs, although there are conflicting data on the topic. MEG3 could represent a tumor suppressor gene located in chromosome 14q32 and its association with tumorigenesis is growing every day.