C-myc基因扩增、p16基因变异和乙型肝炎病毒DNA整合与肝细胞癌的相关性研究

目的 探讨C－myc基因扩增、p16基因变异和乙型肝炎病毒（HBV）DNA整合与肝细胞癌（HCC）的相关性。方法 应用差异聚合酶链反应（d-PCR)分析C－myc基因扩增,用聚合酶链反应（PCR）和单链构象多态（SSCP）分析p16基因变异,用PCR法检测整合型HBV－DNA。结论 （1）HCC组外周血、癌和癌旁肝组织中C－myc基因扩增阳性率分别为48％（14／29）、45％（13／29）和52％（15／29）,3者间差异无显著意义（x^2＝0．0008,P＞0．05,自由度ν＝2）,但明显高于肝硬化（LC）组外周血和LC组织阳性率[0(0/12)和8％（1／12）,P均小于0．05]。（2）29例癌组织中有3例p16基因纯合性缺失,未发现点突变。（3）正常肝、肝硬化和肝癌组织中整合型HBV－DNA阳性率分别为14／5（2／14）、67％（8／12）和97％（28／29）,3者间差异有显著意义（x^2＝29．4345,P＜0．01）。结论（1）HCC的发生与C－myc基因扩增密切相关;（2）HCC中p16基因的纯合性缺失发生频率为10％;（3）HBV－DNA整合与HCC的发生密切相关;（4）对外周血的检测能反映肝细胞（C－myc基因扩增和HBV－DNA整合情况。     

Twist基因在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的探讨转录因子Twist在人肝细胞肝癌、癌旁和肝硬化组织中的表达及其意义。方法利用免疫组化方法检测26例肝细胞肝癌标本（癌和癌旁组织）和10例肝硬化标本中Twist的表达情况;利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Western蛋白印迹方法检测其中10例标本中的Twist mRNA和其蛋白的表达情况,分析其临床病理意义。结果免疫组化显示：Twist蛋白在肝癌、癌旁和肝硬化组织中的阳性率分别为84．6％、19．2％和20．0％,Twist在肝癌组织中的表达明显强于癌旁或肝硬化组织（P〈0．05）;大多数癌旁和肝硬化组织无Twist表达,癌旁与肝硬化组织相比阳性率无差别（P〈0．05）。与癌旁组织相比,Twist mRNA和其蛋白在肝癌组织中表达明显上调（P〈0．05）。结论Twist在肝细胞肝癌组织中的过高表达与肝癌的发生发展相关。     

肿瘤-睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌中的表达

目的：检测肿瘤－睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌（HCC）中的表达情况。方法：用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）对47例HCC患者的癌组织和相应癌旁组织以及15例肝硬化和15例正常肝组织的SSX1基因mRNA表达情况进行检测，随机选择4例RT－PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果：47例HCC患者中，39例表达SSX1 mRNA，阳性率为83％，相应的癌旁组织中有3例为弱阳性，其中2例患者获得了离癌灶更远处的活检组织，对其进行RT－PCR检测，结果显示阴性；所测的15例肝化和15例正常肝组织均未检测到SSX1的表达。4例DNA测序结果表明RT－PCR产物确为SSX1 cDNA。SSX1的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清甲胎蛋白（AFP）水平、乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染无显著相关性（P＞0．05）。结论：SSX1在HCC中呈高比例、高特异表达，可望成为HCC免疫治疗的理想靶位。     

原发性肝细胞癌中乙型肝炎病毒基因整合状态研究

目的：探讨原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC)与肝硬化（liver cirrhosis,LC)组织中乙型肝炎病毒（HBV）基因各片段的整合情况。方法：采用PCR与Southern杂交技术检测HCC与LC各35例肝组织标本DNA中是否存在HBV基因的整合。结果：HCC组中HBV DNA阳性率为94％（33/35), 其中X片段阳性率为92％（32／35）；HBV DNA整合率为69％（24／35），其中X片段整合率为69％（24／35），LC组中HBV DNA阳性率为94％（33／35），其中X片段阳性率为84％（29／35）；HBV DNA整合率为60％（21／35），其中X片段整合率为40％（14／35）。两组在X片段整合率上存在统计学差异（P＜0．05）。结论：HBV基因的整合在肝硬化与肝癌中是一个普遍的现象。HBV基因的整合是癌变的早期事件。HBV基因中的X片段的整合与HCC关系密切。     

肾癌生物学行为与p16基因改变及蛋白表达的关系

目的：探讨p16基因改变在肾细胞癌发生发展中的作用及临床意义。方法：采用聚合酶链反应（PCR）加单链构象多态性分析（SSCP）、多重对照聚合酶链反应（multiplex-PCR)、双重对照PCR反应及链霉菌亲和物素蛋白－生物素酶标免疫组织化学（S－P法）检测42例肾细胞癌组织、18例远离肿瘤的正常肾脏及10例正常肾脏组织中p16基因异常及p16蛋白的表达情况。结果：p16基因改变在肾癌（30．95％）及正常肾脏组织（3．51％）差异有非常显著性（P＜0．01），其蛋白表达在肾癌（57．14％）及正常肾脏组织（89．29％）差异亦有显著性（P＜0．005），p16基因改变及蛋白表达与肾细胞癌组织学类型无关，p16蛋白表达与病理分级、临床分期相关。结论：p16基因失活在肾癌的发生发展中起着重要作用，其作用是通过不同的失活机制引起的p16蛋白表达缺如或功能丧失而实现；p16基因及蛋白的检测可作为肾癌的辅助诊断、判断恶性程度参考指标。     

RhoC基因在原发性肝癌中的表达及其意义

目的：探讨原发性肝癌组织及癌旁肝组织中RhoC mRNA的表达及其意义。方法：采用RT－PCR技术分析30例原发性肝癌病人的肝癌组织及癌旁肝组织中RhoC mRNA的表达。结果：肝癌组织中RhoC mRNA光密度相对值明显高于癌旁肝组织（P＜0．01）；有肝内转移灶者其癌组织中RhoC mRNA光密度相对值明显高于无肝内转移灶者（P＜0．05）。结论：RhoC mRNA的表达与原发性肝癌的转移程度可能有关，可望作为估计原发性肝癌转移的参考指标。     

p16、p21蛋白和增殖细胞核抗原在胃癌中的表达及其相互关系

目的 探讨p16、p21蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）在胃癌发生、发展中的作用及临床意义。方法 应用免疫组织化学法,以46例胃癌及癌旁组织中p16 、p21蛋白和PCNA进行检查。结果 胃癌组织中p16、p21蛋白和PCNA的阳性率分别为21．05％、28．26％、73．91％,与癌旁组织中的阳性率为58．705、65．21％、23．91％差异有显著性（P＜0．05）。在胃癌的不同病理参数（淋巴结转移,分化程度,浸润深度及TNM分期）中,p16,PCNA和p21蛋白表达则分别在全部4个,前2个,前2个参数中存在着明显差异（P＜0．05）。p16、p21蛋白和PCNA在肿瘤的部位、大小、患者性别及年龄间差异无显著性（P＞0．05）。p16原癌基因蛋白质与PCNA,p21与PCNA阳性表达存在明显差异（P＜0．05）,而p21表达与p16表达之间则差异无显著性（P＜0．05）。结论 p16、p21蛋白和PCNA是胃癌发生、发展过程中的重要因素,且与胃癌临床病理参数密切相关。     

Hes1在肝细胞癌中的表达及意义

目的：检测Hes1基因在人肝细胞癌、癌旁、肝硬化和正常肝组织中的表达情况,分析其与乙肝病毒（HBV）的关系和临床意义,探讨Hes1通路在HBV致癌过程中发挥的作用。方法通过免疫组化技术检测60例人肝细胞癌标本（癌、癌旁组织）,20例肝硬化组织和20例正常肝组织标本中Hes1蛋白的表达情况;同时利用蛋白质印迹技术（Western-Blot）技术对组化结果进行验证（分别检测10例标本）。比较Hes1在四种组织中的表达差异,分析其与HBV的相关性和与分化程度的关系。结果免疫组化显示,Hes1蛋白在肝癌组织中呈强阳性表达,癌旁和肝硬化组织中呈中度阳性表达,而正常肝组织中呈阴性表达;Hes1在肝癌、癌旁、肝硬化和正常肝组织中的阳性率分别为65．12％、40．23％、32．23％和15．00％,差异有统计学意义（P＜0．05）。Hes1在癌旁和肝硬化组织中表达无差别（P＞0．05）。在HBsAg阳性和HBsAg阴性肝组织中,前者的阳性率显著高于后者（P＜0．05）,Hes1的表达与HBV呈显著正相关（r＝0．787,P＝0．001）。低分化肝细胞癌中Hes1的表达明显强于高分化肝细胞癌（P＜0．05）。结论 Hes1在肝癌组织中表达升高与肝癌的发生发展有关,Hes1在HBV相关性肝癌的发病机制中可能起重要作用,Hes1高表达可能意味着预后较差。     

肝细胞癌组织中CT9基因mRNA表达的初步研究

目的 探讨肿瘤-睾丸抗原9（CT9）基因mRNA在肝细胞癌中的表达情况。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法对45例肝细胞癌患者癌组织和相应癌旁组织中CT9基因mRNA的表达情况进行检测，并对其中3例RT—PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果 45例肝细胞癌患者中，23例表达CT9mRNA，表达阳性率为51．1％，相应的癌旁组织中则均为阴性；3例DNA测序结果表明RT—PCR产物确为CT9 cDNA。CT9 mRNA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无相关性（P〉0．05）。结论 CT9 mRNA在肝细胞癌中呈高比例、特异性表达，可望成为肝细胞癌免疫治疗的理想靶位。     

乳腺癌组织中血管内皮生长因子mRNA的表达和微血管计数与淋巴结转移的关系

目的：探讨乳腺癌组织中血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达，微血管密度（MVD）与淋巴结转移的关系。方法：采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）和免疫组织化学链霉卵白素－过氧化物酶（SP）法技术，对47例乳腺癌组织VEGF mRNA、VEGF蛋白的表达及微血管密度进行研究。结果：乳腺癌组织VEGF mRNA的表达高于癌旁组织（55．30％：17．02％）。VEGF mRNA的表达与淋巴结转移呈正相关趋势。VEGF表达和MVD与乳腺癌淋巴结转移密切相关（P＜0．05）。癌组织MVD值明显高于癌旁组织MVD值。结论：VEGF与乳腺癌血管生成密切相关，VEGF和MVD表达增高对乳腺癌淋巴结转移有促进作用。     

Multispecies comparison of the casein gene loci and evolution of casein gene family

Caseins, the major milk proteins, are present in a genomic cluster spanning 250–350 kb. The divergence at the coding level between human, rodent, and cattle sequences is rather extensive for most of the genes in this region. Nevertheless, comparative analysis of genomic sequences harboring the casein gene cluster region of these species (with equal evolutionary distances 79–88 Myr) shows that the organization and orientation of the genes is highly conserved. The conserved gene structure indicates that the molecular diversity of the casein genes is achieved through variable use of exons in different species and high evolutionary divergence. Comparative analysis also revealed the presence within two species of uncharacterized casein family members and ruled out the previously held notion that another gene family, located in this region, is primate-specific. Several other new genes as well as conserved noncoding sequences with potential regulatory functions were identified. All genes identified in this region are, or are predicted to be, secreted proteins involved in mineral homeostasis, nutrition, and/or host defense, and are mostly expressed in the mammary and/or salivary glands. These observations suggest a possible common ancestry for the genes in this region.     

Polymorphisms in the vitamin D receptor gene and the androgen receptor gene and the risk of benign prostatic hyperplasia

OBJECTIVE: Little is known about risk factors for the development of benign prostatic hyperplasia (BPH). Recently, associations were observed between prostate cancer (CaP) risk and polymorphisms in the vitamin D receptor (VDR) gene and the androgen receptor (AR) gene. Since both receptors are relevant for prostate growth, the VDR and AR are also expected to be involved in the development of BPH. The objective of this study is to establish the relationship between the risk of BPH and a polymorphism in the number of CAG repeats in the AR gene and a TaqI restriction enzyme polymorphism in the VDR gene. METHODS: For this study, 98 patients who had been treated for BPH-related complaints and 61 convenience controls (predominantly bladder cancer patients) were recruited from the outpatient clinic. DNA was isolated from peripheral blood, and genotyping was performed with PCR-based methods. Means as well as odds ratios (ORs) with 95% confidence intervals (CI) were calculated using SPSS software. RESULTS: The mean number of CAG repeats in the AR gene in patients and controls was found to be similar: 21.8 (SD = 2.8) and 21.9 (SD = 2.9), respectively. In the subgroup of patients with a prostate volume of at least 50 cm(3), the mean number of repeats was 21.5 (SD = 2.6). The OR for BPH for individuals with homozygous presence of the VDR TaqI restriction fragment length polymorphism (RFLP) (tt) versus individuals with homozygous absence (TT) or heterozygotes (Tt) was found to be 1.0 (95% CI 0.4-2.4). For individuals with a prostate volume of at least 50 cm(3), the OR was 1.2 (95% CI 0.5-3. 2). CONCLUSION: Unlike earlier observations in prostate cancer, we did not find an association between the CAG repeat polymorphism in the AR gene and the TaqI RFLP polymorphism in the VDR gene and the risk of BPH.     

EGF和EGFr基因在临床供皮区创面愈合中表达的研究

目的:观测临床创面愈合中表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)基因和表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor,EGFr)基因的表达,探讨EGF和EGFr基因表达变化在创面修复中的作用。方法:应用原位杂交方法对临床患者断层供皮区创面愈合中EGF、EGFr基因表达变化进行了动态观察,并进行半定量分析。结果:临床创面愈合过程中,EGF、EGFr基因表达有明显规律性的变化,伤后4天,创面内EGF基因表达较弱,EGFr基因表达很强;伤后10天,创面内EGF基因表达明显增强,分布范围增大,而EGFr基因表达较伤后4天减弱,分布范围减小;伤后16天,创面内EGF、EGFr基因表达强度均较伤后10d明显减弱,EGF表达强度接近伤后4天的水平,而EGFr基因表达已基本呈阴性。结论:EGF、EGFr基因表达变化与创面修复的过程有明显相关,EGF、EGFr基因表达变化参与了创面修复过程,合理调控其表达变化有助于创面修复。     

Calcitonin gene products and the skeleton

Calcitonin is the most important hypocalcaemic peptide. Its action is brought about through inhibition of bone resorption. CGRP exerts the same effect on the skeleton albeit in much higher concentrations probably through interaction with calcitonin receptors on osteoclasts. PAS-57 stimulates the incorporation of thymidine into osteoblasts. A possible stimulation of bone formation needs to be verified in vivo.     

小睑裂综合征的基因定位和突变研究进展

小睑裂综合征又称睑裂狭小、倒转型内眦赘皮和上睑下垂综合征（blepharophimosis epicanthus in—versus and ptosis，BPES），1875年，Galeyowski首先报告本病，1912年，Komoto有详细描述。1981年，Bengin等将其正式命名为Komoto氏综合征。为常染色体显性遗传性疾病，与正常人相比，睑裂水平径及垂直径明显变小，临床特点主要表现为睑裂小、     

尤文肉瘤基因免疫治疗的研究

目的检测尤文肉瘤融合基因EWSFLI1和人粒单核细胞集落刺激因子(hGMCSF)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对尤文肉瘤细胞株A673的杀伤作用。方法利用hGMCSF腺病毒(AdhGMCSF),在1000U/mlIL4作用下,从外周血单个核细胞(PBMC)诱生树突细胞(DC)并对其表型进行流氏细胞仪(FCM)分析,通过同种混合淋巴细胞反应以检测其免疫刺激活性。在lipofectamine的介导下,将含有尤文肉瘤融合基因EWSFLI1的真核表达质粒pCA13/EWSFLI1转染DC,通过RTPCR检测EWSFLI1的表达,并通过乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测其对A673细胞的杀伤作用。结果应用AdhGMCSF从PBMC成功诱生出CD83、CD80、CD86及HLADR高表达,CD14低表达的DC,其对同种淋巴细胞有很强的免疫刺激活性。pCA13/EWSFLI1转染DC后,RTPCR检测DC中有EWSFLI1mRNA的表达。杀伤试验结果表明,AdhGMCSF诱生、EWSFLI1修饰的DC,体外诱导抗原特异的CTL,效靶比为20∶1时对A673细胞杀伤率为(29.9500±0.0117)%,高于对照组(P<0.01)。结论AdhGMCSF能够成功地从PBMC中诱生出有功能的DC。真核表达质粒pCA13/EWSFLI1在lipofectamine的介导下转染AdhGMCSF诱生的DC,能在DC中有效地表达。此EWSFLI1基因修饰的、AdhGMCSF诱生的DC体外致敏自体T淋巴细胞,生成抗原特异CTL,对尤文肉瘤细胞A673有一定的杀伤作用     

Calcitonin and the peptides from the calcitonin gene

The alpha-calcitonin gene encodes a small family of peptides: calcitonin, katacalcin, and calcitonin gene-related peptide (CGRP). Calcitonin and katacalcin are produced from one precursor and CGRP from another. Calcitonin and katacalcin come mainly from the thyroid, while CGRP is present in both the thyroid and the central nervous system. Calcitonin is concerned with skeletal integrity, while the function of katacalcin, if any, is unknown. The secretion of calcitonin is, in part, estrogen dependent, and it appears likely that a postmenopausal decline in calcitonin secretion is a factor in the development of postmenopausal osteoporosis. It is possible that calcitonin may prove useful in the prevention and perhaps the treatment of this condition. CGRP, conversely, is one of the most potent vasodilators known and probably plays an important physiologic role in the control of vessel tone and blood flow. CGRP may also have a role as neurotransmitter or neuromodulator.