野菊花提取物抑制呼吸道合胞病毒作用的体外实验研究

目的评价野菊花提取物体外抑制呼吸道合胞病毒的效果方法采用MTT和空斑减数实验法,以病毒唑为阳性对照,测定野菊花提取物对呼吸道合胞病毒的抑制作用,并就野菊花提取物对呼吸道合胞病毒抑制的作用机制进行了初步研究结果药物的半数有效剂量(EC50)为(60.9±2.41)μg·ml-1,MTT法测定其半数中毒浓度(CC50)为(2.03±0.08)mg·ml-1,选择指数(SI)>33,有意义,在不同时间给药,对病毒的抑制实验中发现呼吸道合胞病毒感染HEp-2细胞后2、4、6、8h给野菊花提取物均有抑制作用(P<0.01),穿入和吸附抑制实验表明其对病毒穿入过程和吸附过程同样均有明显的抑制作用(P<0.01),野菊花提取物对RSV病毒有直接的杀伤作用结论野菊花提取物在体外实验中对呼吸道合胞病毒有一定抑制作用     

抗SARS冠状病毒药物细胞筛选模型的建立及应用

目的：建立抗SARS冠状病毒(SARS-CoV)药物细胞筛选模型，应用于抗SARS-CoV药物的筛选，为SARS的防治奠定基础。方法：将一定数量的细胞接种96孔板，根据药物的作用机制采用不同的给药途径，以观察到的细胞病变(cytopathic effect，CPE)为指标，按照：Reed-Muench法，计算药物的细胞半数中毒浓度(TD50)和抑制细胞半数病变的有效浓度(IC50)。结果与结论：Vero-E6细胞接种SARS-CoV后24h即可出现CPE，且CPE明显，便于观察，可作为抗SARS病毒药物细胞筛选模型。依此模型筛选了3类87种药物，确认6种药物在Veto-E6细胞上具有抑制SARS病毒的作用。该模型的建立也为其他的抗病毒药物的筛选提供了技术平台。     

新分离呼肠病毒的空斑试验及病毒纯化

目的：建立新分离呼肠病毒（reovirus）的空斑技术，进行病毒纯化，为呼肠病毒生物学和分子生物学的研究奠定基础。方法：4株新分离呼肠病毒的早代毒种经L929细胞连续传代，当产生细胞病变后进行空斑试验，加营养琼脂培养6d后加中性红，24h内挑取空斑，扩增一次后做PCR鉴定。取呼肠病毒PCR阳性病毒进行第2次克隆纯化。结果：4株新分离呼肠病毒经L929细胞连续传2～4代，均能观察到明显的细胞病变。用10^-3和10^-4接种L929单层细胞，第6～7天均能产生空斑，空斑呈圆形，直径为0．2～1．0mm，并分别测定其空斑滴度（PFU／ml）。两次纯化后进行PCR检测，呼肠病毒基因扩增阳性、脊髓灰质炎病毒基因扩增阴性。结论：4株呼肠病毒的空斑出斑规律，通过两次克隆，获得纯化的病毒。     

SARS病毒BJ01株空斑测定方法的建立

目的建立SARS病毒空斑测定方法，为SARS病毒生物学研究提供手段。方法将不同稀释度SARS病毒BJ01株分别接种Vero细胞单层，然后加营养琼盖。按Dullbecco R的方法计算空斑滴度。结果SARS病毒BJ01株加营养琼盖后，3天即可出现空斑，形态呈圆形，直径2．5-3mm，大小均匀。结论建立的SARS病毒的空斑方法稳定，出斑规律。     

在悬液鸡胚纤维母细胞上进行委内瑞拉马脑炎病毒空斑法的研究

委内瑞拉马脑炎(VEE)病毒鸡胚细胞悬液空斑法比单层细胞空斑法在操作上能缩短24h,并能增加标本接种量,可提高检验、分离及鉴定病毒的效率。病毒变异株在悬液空斑上比在单层空斑上的滴度低,而原株则在两种方法上的滴度相近,因而悬液空斑法有可能作为病毒变异株的一种标记。本法对细胞沉渣也能利用,在虫媒病毒检验上有较大潜力。如在悬液空斑法制作前,先在底层琼脂中加入适量特异性病毒抑制物,从而使病毒空斑只能在抑制物扩散区之外出现,这种抑制区的面积与抑制物的浓度成正比。此法为VEE病毒鸡胚细胞悬液空斑抑制法,可用于检测抗血清、干扰素和抗病毒药物等的浓度,及用不同血清作鉴别诊断。此法滴定抗血清的精确度及敏感性低于悬液空斑中和法。但做法多样,能适应多种用途。     

人源H5N1亚型禽流感病毒株空斑特性和致病性研究

目的观察不同H5N1亚型禽流感病毒株空斑特性,对比研究不同空斑类型H5N1病毒致病性和复制能力差异。方法将不同稀释度的H5N1亚型禽流感病毒株分别接种于MDCK单层细胞,加盖营养琼脂,合适时间染色,观察不同H5N1亚型禽流感病毒株空斑形成特点,按照DullbeccoR的方法计算病毒PFU数;根据空斑大小进行挑选、纯化、筛选不同类型空斑病毒,测定这些病毒对Balb/c小鼠致病性差异和在MDCK细胞上复制差异。结果野生的人源H5N1禽流感病毒株在空斑形成上都存在不同程度的不均一性,空斑大小、形状差异明显:A/Vietnam/1194/2004(H5N1)以大圆形斑为主,夹杂少量小点状斑。A/Beijing/01/03(H5N1)大多数为中等大小空斑,并有少数针尖状斑。野生A/Vietnam/1194/2004经过分离纯化后,得到的两种空斑类型病毒在致病性和复制能力存在明显差异。结论野生的人源H5N1禽流感病毒株在空斑形成上都存在不同程度的不均一性,从野生病毒株中分离、纯化的大小斑病毒在致病性和复制能力上存在明显差异。     

肾综合征出血热病毒的空斑法研究(简报)

肾综合征出血热(HFRS)病毒的定量,长期来都是依靠免疫荧光法检测细胞的感染剂量来确度.空斑法在许多其他病毒的研究中证明不仅可以精确地定量病毒,而且还可以进行毒株优选、病毒特征等方面的研究.可是HPRS病毒生长周期长,细胞需维持较长时间,因此本病毒出斑困难,在国内虽有不少单位研究,但尚未见成功的报道.我们于1987年接受解放军总后勤部卫生部关于"HFRS病毒定量方法的研究"招标课题,进行了本病毒的空斑法研究.在对细胞进行挑选的基础上对出斑条件作了摸索,现已在VeroE_6细胞上成功地用国际标准毒株118/76株及自病人血中分离的H_8205株病毒制出了空斑.空斑呈圆形,界限清楚,直径0.2～3mm,6～10天空斑基本出齐,空斑粒与接种病毒的稀释度成比例.此2株病毒滴度相近皆在10~5左右,经多次试验重复,证实出斑条件稳定.特异性试验证实空斑可被HFRS病人血清中和.HFRS病毒空斑法的建立为我国不同地区流行性出血热的病毒分型、毒株的纯化研究等工作提供了一个良好     

黄芪多糖对呼吸道合胞病毒所致幼鼠肺部感染的抗病毒作用及其机制

目的 探讨黄芪多糖(APS)对人呼吸道合胞病毒(RSV)感染的抗病毒作用及其可能机制.方法 将雄性3周龄BALB/c小鼠随机分为6组:对照组,RSV组,APS低、中、高剂量组,利巴韦林组(n=10).除对照组小鼠用乙醚轻度麻醉后,滴鼻50μl生理盐水外,其余各组小鼠通过鼻腔滴注50μl RSV-long株病毒溶液[含6...     

5种虫媒病毒的细胞培养及空斑试验

目的 :选择一株对 5种虫媒病毒 :马雅罗病毒 (MAY)、西门利克病毒 (SFV)、墨累谷脑炎病毒 (MVE)、伊利乌斯病毒 (ILH)和布尼安姆韦拉病毒 (BUN)敏感的细胞用于这 5种病毒生物学性状的研究。方法 :将不同稀释度的乳鼠脑病毒悬液接种到BHK2 1 ,LLC_MK2 ,A549和C6 36传代细胞上 ,进行这 5种病毒的敏感性试验 ,选出一株对 5种病毒较敏感的细胞株 ;对敏感细胞株进行三因素三水平正交试验 ,探索细胞的最佳培养条件 ;进行 5种病毒的空斑试验。结果 :BHK2 1 细胞对 5种病毒细胞病变特征明显 ,出现时间较早 ,滴度较高 ,适用于 5种病毒的培养。在合适条件下 ,BHK2 1 细胞单层可以维持 7d以上 ,5种虫媒病毒在BHK2 1 细胞上出现了大小、形态都不相同的空斑。结论 :BHK2 1 细胞在 6 0 %DMEM培养液、30 %的 0 .5 %水解乳蛋白、10 %小牛血清、常量青、链霉素和 5 0 μg ml卡那霉素 ,保持pH 7.2条件下生长最好 ,能够满足 5种虫媒病毒生物学性状研究的需要。     

肾综合征出血热病毒空斑法的研究

本文报道从选择细胞、摸索出斑条件开始,采用 H_(8205)株、118/76株及美国草原田鼠体内分离的 PH 病毒和流行性肾病(NE)等肾综合征出血热(HFRS)相关的病毒株,在 Vero E_6细胞上建立界限清楚呈圆形的空斑,空斑直径0.2～3mm,6～10d 出齐,空斑数与接种病毒剂量成正比,两者几乎呈直线相关。空斑可被高价特异性血清所中和,已建立的空斑法适于 HFRS 病毒的定量工作。     

The role of interventional radiology in trauma

Introduction Interventional Radiology has evolved into a specialty having enormous input into the care of the traumatized patient.In all hospitals,regardless of size,the Interventional Radiologist must consider their relationships with the trauma service in order to     

Diagnóstico ecográfico del neumotórax

The ultrasonographic diagnosis of pneumothorax is based on the analysis of artifacts. It is possible to confirm or rule out pneumothorax by combining the following signs: lung sliding, the A and B lines, and the lung point. One fundamental advantage of lung ultrasonography is its easy access in any critical situation, especially in patients in the intensive care unit. For this reason, chest ultrasonography can be used as an alternative to plain-film X-rays and computed tomography in critical patients and in patients with normal plain films in whom pneumothorax is strongly suspected, as well as to evaluate the extent of the pneumothorax and monitor its evolution.     

Carbohydrate Supplementation during Exercise: Does It Help? How Much is Too Much?

KEY POINTS· Carbohydrate intake during exercise can delay the onset of fatigue and improve performance of prolonged exercise as well as exercise of shorter duration and greater intensity (e.g., continuous exercise lasting about 1h and intermittent high-intensity exercise), but the mechanisms by which performance is improved are different.     

The acutely limping child

Acute limping may be the result of multiple pathologies in children. The differential diagnosis varies based on the age of the child. Irrespective of age, the initial imaging work-up includes AP and frog leg radiographs of the pelvis and ultrasound; MRI may sometimes be helpful. In children less than 3 years, infections and trauma are most frequent. MRI is the imaging modality of choice when osteomyelitis is clinically suspected. Between the ages of 3 and 10 years, transient synovitis of the hip and Legg-Calvé-Perthes disease are main considerations but infection, inflammation and focal bony lesions are also considered. In children over 10 years, slipped capital femoral epiphysis also is considered.     

磁共振DWI和动态增强鉴别颅底脊索瘤和侵袭性垂体瘤的应用

目的 探讨磁共振扩散加权成像(DWI)和动态增强在颅底脊索瘤和侵袭性垂体瘤(IPA)鉴别诊断中的应用价值.方法 搜集经手术病理证实且影像学有鞍区破坏的颅底脊索瘤患者15例、向鼻咽部侵犯的IPA患者20例.测量二者的表观扩散系数(ADC)值,绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析动态增强曲线的类型,统计达峰时间(TTP)、增强峰值(EP)和最大对比增强率(MCER),分析各个参数在鉴别诊断中的价值.结果 颅底脊索瘤的ADC值为(1.274±0.07)×10-3mm2/s,高于IPA ADC值(0.672±0.03) ×10-3 mm2/s(P ＜0.001),ADC阈值为0.964×10-3mm2/s时,ROC曲线下面积为0.997,敏感度为93.3％,特异度为100％.颅底脊索瘤时间-信号强度曲线(TIC)Ⅰ型14例,TICⅢ型1例,此例TICⅢ型者TTP约40 s;IPA TIC Ⅰ型7例,TICⅢ型13例.颅底脊索瘤和IPA的EP、MCER差异均有统计学意义(P ＜0.001).结论 ADC值和TIC的类型及其相关参数(EP,MCER)有助于颅底脊索瘤和IPA之间的鉴别.     

Do Balance Board Training Programs Reduce the Risk of Ankle Sprains in Athletes?

Introduction Ankle sprains are the most common musculo-skeletal injury that occurs in athletes,particularly in sports that require jumping and landing on one foot such as soccer,and basketball(1-4).These injuries often result in significant time loss from participation,long-term disability,and have a major impact on health care costs and resources(5-8).     

Treatment of intrahepatic arteriovenous fistula in hepatocellular carcinoma with N-butyl-2-cyanoacrylate

Primary hepatocellular carcinoma (HCC) continues to be one of the most common malignancies with an incidence of approximately one million cases per year and a dismal prognosis; some authors have reported a median survival of 1 ～ 2 months after diagnosis. Although surgery remains the only hope for cure, few patients are candidates[1,2].     

U50,488H对正常及缺氧心肌细胞L型钙电流的作用

目的 探讨心脏阿片受体和β-受体相互作用的机制。方法 采用全细胞膜片钳技术,观察U50,488H(β-阿片受体选择性激动剂)对正常和缺氧心肌细胞L型钙电流的作用。结果 U50,488H剂量依赖性(0．1～100μmol／L)抑制正常心肌细胞的L型钙电流及异丙肾上腺素(0．1μmol／L)激动的钙电流,而细胞缺氧后,这一抑制作用减弱;U50,488H对Forskolin(10μmol／L)激动的L型钙电流无明显影响。结论 β-阿片受体对β-受体信号的负性调节作用在细胞缺氧后减弱,其作用位点可能发生于β-受体与腺苷酸环化酶环节之间。