羊膜移植对碱烧伤小鼠角膜基质金属蛋白酶表达的影响及其意义

目的　探讨羊膜移植对急性碱烧伤小鼠角膜基质金属蛋白酶 (MMP 2 ,MMP 9)的表达影响及其意义。方法　将 40只昆明小鼠随机分为实验组和对照组 ,采用 1mol·L- 1 氢氧化钠溶液烧伤小鼠角膜 ,建立炎症性角膜碱烧伤动物模型 ;对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术 ,对照组不行羊膜移植。然后在羊膜移植术后 2、7、14、2 1d处死动物 ,用免疫组织化学染色方法和计算机图像分析系统检测小鼠角膜烧伤后基质金属蛋白酶在角膜中的分布及其平均吸光度值。结果　在对照组 ,角膜中MMP 2、MMP 9在第 2天出现表达 ,第 7天达高峰 ,以后逐渐降低。实验组各时间点MMP 2及MMP 9表达均低于对照组。结论　羊膜移植术可抑制角膜细胞及浸润的炎症细胞产生基质金属蛋白酶 ,从而抑制和延迟碱烧伤后角膜溶解的发生和发展。     

小鼠单疱病毒角膜炎行羊膜移植MMPs及TIMPs表达的变化

目的:探讨羊膜移植对BalB/c小鼠感染单纯疱疹病毒-1(HSV-1)后基质金属蛋白酶-2,-8,-9及组织金属蛋白酶抑制剂TIMP-1,TIMP-2表达变化及其在单疱病毒角膜炎(HSK)病程中所起的作用。方法:将40只小鼠随机分为实验组和对照组,将5μl(105PFU)HSV-1感染小鼠单侧右眼角膜,建立单疱病毒角膜炎的动物模型。对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术。分别在HSV-1感染后的第2,7,14 d处死小鼠,用免疫组化方法对小鼠感染HSV-1后MMP-2、MMP-9、MMP-8、TIMP-1、TIMP-2的表达变化进行研究,探讨它们在单疱病毒性角膜炎发展过程中所起的作用。结果:在对照组,角膜中MMP-2、MMP-8、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2在第2天出现表达且表达主要位于浅表基质层及上皮下的炎性细胞中。感染后第14天可见坏死性角膜炎及角膜溃疡形成,同时角膜基质和浸润的炎性细胞中尤其溃疡处,可见MMP-2、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2表达显著增加。溃疡区域有大量MMP-8阳性染色的中性粒细胞。实验组各时间点MMP-2,-9,-8活性均低于对照组,TIMPS表达高于对照组。结论:行羊膜移植可抑制角膜细胞和浸润的炎性细胞分泌产生MMPs,促进TIMPS表达,可能对上皮性角膜炎与溃疡形成过程起重要的抑制作用。     

MMP-2,9在羊膜移植治疗小鼠单疱病毒性角膜炎中的表达

目的:观察保存人羊膜移植(AMT)对单疱病毒性角膜基质炎(HSK)中基质金属蛋白酶(MMPs)在小鼠角膜中表达的影响,从而探讨羊膜移植对MMP-2,9的调节作用及对HSK治疗的潜在作用。方法:雌性BALB/c小鼠眼角膜接种Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1,SM44毒株)以诱发单纯疱疹性角膜炎。选取右眼感染2 d后出现典型树枝状上皮病变的小鼠40只,随机分为实验组和对照组,实验组小鼠右眼角膜行AMT,对照组仅缝合睑裂不行AMT。术后第0,2,7,14天处死动物取出角膜,应用Western blot方法对结果进行分析,增强化学发光法(ECL)检测小鼠角膜中MMP-2,9的表达。结果:在对照组,角膜中MMP-2,9在第2天表达增加,第7天表达暂时减弱,第14天时达高峰。实验组羊膜移植2 d后角膜炎症反应明显消退且上皮缺损较快愈合,MMP-2,9阳性表达减弱,各时间点MMP-2,9的表达均低于对照组,其差异均有显著性意义(P<0.01)。结论:羊膜移植术可通过抑制角膜细胞及浸润的炎症细胞产生的MMP-2,9,促进快速上皮化并减轻角膜基质炎症反应,抑制角膜新生血管化和溃疡的形成。     

羊膜移植对单纯疱疹病毒性角膜基质炎中明胶酶活性表达的影响

目的:探讨羊膜移植对小鼠角膜1型单纯疱疹病毒(HSV-1)感染后发生角膜基质炎(HSK)的角膜中明胶酶(Gelatinases)的活性表达变化的影响,探讨羊膜移植对HSK的治疗作用及其机制。方法:将50只BALB/c小鼠随机分为实验组和对照组,每组各25只,105pfu/L HSV-1病毒(SM44株)感染小鼠角膜,制作HSK小鼠模型。对实验组小鼠右眼角膜行羊膜移植术,对照组角膜不行羊膜移植术。在羊膜移植术后第0,2,7,14,21天处死动物取角膜。应用明胶酶谱(Gelatin Zymography)方法和计算机图像分析系统检测小鼠角膜明胶酶的酶活性表达的变化。结果:角膜感染HSV-1后,明胶酶谱显示:实验组小鼠角膜中酶原形式的pro-MMP-9(92 kU)在AMT后第2,14,21天表达增强。活性形式的MMP-9(82 kU)在AMT后各时间点均有表达,但在第2,14及21天表达增强。pro-MMP-2(72 kU)条带在AMT后各时间点均有表达。而MMP-2活性条带(62 kU)则出现在AMT后第14天和21天。对照组小鼠角膜中明胶酶的表达变化情况跟实验组类似,但是,MMP-2活性各时间点均较实验组为强(P<0.05)。而MMP-9的活性在羊膜移植后第2天(P<0.01),第14及21天(均为P<0.05)均较实验组为强。结论:羊膜移植对HSV-1感染小鼠角膜后引起的坏死性角膜基质炎形成的角膜上皮缺损和角膜基质溃疡有明显的修复作用,这种作用的机制可能是通过抑制明胶酶的活性表达而实现的。     

调经助孕胶囊对促排卵周期小鼠子宫内膜αvβ3、MMP9及TIMP1表达的影响

目的:探讨调经助孕胶囊对促排卵周期小鼠子宫内膜整合素αvβ3、基质金属蛋白酶(MMP-9)及其抑制物(TIMP-1)表达的影响。方法:60只8～9 w龄昆明种小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、实验组各20只。给予相应药物灌胃10 d后,造模,雌雄合笼。于妊娠第5天获取子宫内膜,检测小鼠子宫内膜整合素αvβ3蛋白表达及MMP9/TIMP1 mRNA表达。结果:模型对照组小鼠着床期子宫内膜MMP9及TIMP1的表达低于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。实验组小鼠着床期子宫内膜MMP9、TIMP1及其比值均高于模型对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。模型对照组小鼠着床期子宫内膜整合素αvβ3表达明显低于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);实验组小鼠着床期子宫内膜αvβ3表达明显高于模型对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:促排卵可导致着床期子宫内膜MMP9及TIMP1mRNA表达下降,影响MMP9/TIMP1比值,整合素αvβ3蛋白表达下降,可能是促排卵影响子宫内膜容受性的机制之一。调经助孕胶囊可增加促排卵周期着床期小鼠子宫内膜整合素αvβ3蛋白表达,MMP9、TIMP1 mRNA表达,调节MMP9/TIMP1平衡。     

脑膜瘤MMPs和TIMPs的表达意义

目的 :研究基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9(matrixmetalloproteinase ,MMP 2 ,MMP 9)及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂 1和金属蛋白酶组织抑制剂 2 (tissuein hibitorofmetalloproteinase,TIMP 1,TIMP 2 )在脑膜瘤组织中的表达及其与肿瘤脑浸润 ,病理性质的关系 .方法 :用原位杂交法检测 4 5例脑膜瘤组织中MMP 2 ,MMP 9mRNA的表达 ;用免疫组化检测MMP 2 ,MMP 9,TIMP 1和TIMP 2蛋白的表达 .结果 :有脑浸润的脑膜瘤MMP 2 ,MMP 9的表达阳性率较无脑浸润的脑膜瘤明显增高 (P <0 .0 5 ) ;非典型性及恶性脑膜瘤较良性脑膜瘤高表达MMP 2 ,MMP 9(P <0 .0 5 ) ;TIMP 1,TIMP 2的表达在各肿瘤中差异无显著意义 (P >0 .0 5 ) .结论 :MMP 2 ,MMP 9,TIMP 1和TIMP 2对脑膜瘤的脑浸润有重要影响 .     

脑膜瘤MMP-2、MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达及其意义

目的 :研究基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9(matrixmetallo proteinase ,MMP 2、MMP 9)及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase ,TIMP 1)mRNA在脑膜瘤组织中的表达及其与肿瘤浸润性的关系。方法 :用原位杂交法检测 35例脑膜瘤组织中MMP 2、MMP 9、TIMP 1mRNA的表达。比较肿瘤浸润组与非浸润组的差异。结果 :脑浸润组MMP 2、MMP 9表达阳性率较无脑浸润组明显增高 (P <0 .0 5 ) ;MMP 2、MMP 9的表达与硬膜浸润、颅骨浸润无关 (P >0 .0 5 ) ;TIMP 1在各组肿瘤中均高表达 ,但与肿瘤浸润性无关 (P >0 .0 5 )。结论 :MMP 2、MMP 9和TIMP 1在脑膜瘤的脑浸润中起关键作用     

恒河猴细菌感染性子宫出血模型内膜组织基质金属蛋白酶1、9及其抑制剂的表达

目的　探讨基质金属蛋白酶 1、9在炎性子宫出血中的作用。方法　运用免疫组化链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶染色法 (SP)检测细菌感染性子宫出血恒河猴模型组子宫内膜组织中基质金属蛋白酶 1、9(MMP 1、MMP 9)及其抑制剂 (TIMP 1)的表达 ,用正常恒河猴子宫内膜作对照。结果　模型组子宫内膜组织间质、腺上皮中MMP 1、9的表达明显高于正常对照组 ,而TIMP 1的表达与正常组水平相似。结论　基质金属蛋白酶 1、9的高度表达可能与炎症导致的异常子宫出血有关。     

实验性单纯疱疹性角膜炎中基质金属蛋白酶mRNA的表达

目的 :探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒 (HSV 1)所致的角膜炎中基质金属蛋白酶 (MMPs)mRNA的表达。方法 :雌性BalB/c小鼠眼角膜接种HSV 1(KOS株 )以诱发单纯疱疹性角膜炎 (HSK)。收集正常角膜及感染后第 2 ,7,14d的感染角膜 ,应用RT PCR技术检测基质金属蛋白酶 2 ,基质金属蛋白酶 9(MMP 2 ,MMP 9)的mRNA表达。结果 :除正常角膜MMP 9mRNA为阴性表达其他各组均获得阳性目的片断。感染后第 2dMMP 2mRNA表达较正常组差异没有显著性 (P >0 .0 5 ) ,感染后第 7dMMP 9mRNA表达与第 2d的表达差异没有显著性 (P >0 .0 5 ) ,其他各组差异均有显著性意义 (P <0 .0 1)且大体上呈随感染天数增加表达增高的趋势。结论 :在实验性HSK中存在基质金属蛋白酶mRNA的表达且MMP 2 ,MMP \|9的mRNA高表达参与了角膜溃疡、角膜新生血管的形成等病变的发生。     

羊膜移植治疗急性碱烧伤TGF-β 1表达的实验研究

目的 探讨角膜碱烧伤后羊膜移植的可行性,并分析TGF-β1在碱烧伤中的作用机制.方法 45只健康家兔,以1 mol/L的氢氧化钠烧伤右眼制成眼前段碱烧伤模型.随机分为3组,每组15只.Ⅰ组行新鲜羊膜的移植术、Ⅱ组行保存羊膜的移植术、Ⅲ组未行手术作为对照.各组于术后1、2和4周分别处死动物,收集角膜标本做TGF-β1免疫组化检查.结果 ①在裂隙灯显微镜下观察:羊膜移植组新生血管范围、炎症反应、疤痕化在术后7、14和28 d明显低于对照组,新鲜组比保存组好.②碱烧伤后TGF-β1在3组角膜基质均显著表达.羊膜组在各个时间点表达低于对照组(P<0.05),新鲜组比保存组低.在同一组内各个时间点TGF-β1表达无明显差异(P>0.05).结论 羊膜移植可以明显减少碱烧伤角膜TGF-β1的表达及可以有效的减少疤痕的形成;TGF-β1的表达与疤痕增生程度成正相关性,其在疤痕的形成中可能起了重要作用;新鲜羊膜在抑制疤痕的生成方面优于保存羊膜.     

口腔鳞癌浸润前沿中基质金属蛋白酶-9及其抑制剂-1的表达

目的:检测基质金属蛋白酶9(MMP9)及其抑制剂1(TIMP1)在口腔鳞状细胞癌及浸润前沿中的表达并探讨其意义。方法:54例标本行WHO分级和IFG计分,应用免疫组化SP法检测54例口腔鳞癌组织中MMP9和TIMP1的表达。结果:MMP9和TIMP1蛋白在肿瘤细胞和间质细胞均有表达。MMP9阳性表达随浸润深度、TNM分期、WHO病理分级和IFG计分递增而递增(P<0.01),与浸润深度、TNM分期和IFG计分呈正相关(相关系数分别为rs=0.420,rs=0.460和rs=0.361,P<0.05;Spearman检验)。TIMP1随细胞分化程度增加呈递减趋势,但无统计学意义;与IFG计分有显著差异(P<0.01)。口腔癌浸润前沿肿瘤细胞表达与癌中心细胞表达有显著性差异(P<0.01)。结论:MMP9和TIMP1在口腔鳞癌的上皮及间质细胞中均有不同程度的表达;在浸润前沿癌细胞的表达明显强于中心区,表明肿瘤浸润前沿细胞侵袭性更强。     

基质金属蛋白酶-2及其抑制剂在子宫腺肌病子宫内膜-肌层界面中的表达

目的:探讨子宫内膜-肌层界面(EMI)基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制剂-2(TI MP-2)在子宫腺肌病患者的表达。方法:采用免疫组织化学SP法对68例子宫腺肌病(实验组)的子宫内膜(含部分肌层)和56例正常(对照组)的子宫内膜(含部分肌层)的组织进行标记及分析。结果:①实验组MMP-2在EMI处的表达显著高于对照组(P<0.05);实验组MMP-2在EMI处的表达显著高于远肌层(P<0.05)。②实验组TI MP-2在EMI处的表达显著低于对照组(P<0.05);实验组TI MP-2在EMI处的表达与远肌层的表达差异无显著意义(P>0.05)。结论:实验组EMI处的内膜腺体中MMP-2的高表达,TI MP-2的低表达使子宫内膜的侵蚀能力增强,可能在子宫腺肌病的发生发展中具有重要作用。     

种植体周龈沟液MMP-9及TIMP-1水平的检测

目的　探讨种植体周不同组织健康状况的龈沟液基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)及金属蛋白酶组织抑制因子 - 1(TIMP- 1)的水平。方法　筛选 39名患者的 5 1枚种植体 ,以牙龈红肿、探诊出血及牙槽骨进行性吸收为标准分健康组及炎症组 ,观察指标包括龈沟深度值 (PD)、菌斑牙石指数 (PL I)、牙龈出血指数 (GBI)及种植体周龈沟液 MMP- 9和 TIMP- 1水平。结果　炎症组和健康组的 PD值、PL I值、GBI值及 MMP- 9水平有统计学差异 (P<0 .0 0 1)。结论　 MMP- 9水平可以较好地反映种植体周围组织的健康状况     

基质金属蛋白酶-2,9及其抑制剂在骨肉瘤中表达的意义

[目的]探讨基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)及其特异性抑制剂TIMP-2,1在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系。[方法]采用免疫组织化学链酶菌抗生物紊一过氧化酶(SP)法检测了62例骨肉瘤(初发性骨肉瘤51例、复发性骨肉瘤11例,确诊时即伴有肺转移者9例、不伴有肺转移者53例)和正常对照组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达,并根据阳性瘤细胞占肿瘤细胞总数的比率进行半定量量化分析和非参数检验。[结果]MMP-9、TIMP-1在骨肉瘤中的阳性表达率分别为76％、18％,与二者在正常对照组织中的阳性率相比,MMP-9表达明显升高,TIMP-1表达明显降低(P均<0.01)。MMP-2、TIMP-2在骨肉瘤中的阳性表达率分别为69％、52％,与二者在正常对照组织中的阳性率相比差异无显著性(P均>0.05)。MMP-9在肿瘤细胞的胞浆及胞膜中均有表达,且在肿瘤的侵袭边缘阳性细胞数目较多,染色强度较高。MMP-2,9及TIMP-1,2在初发性和复发性骨肉瘤之间以及在伴有肺转移和不伴有肺转移的骨肉瘤之间的表达差异无显著性。Spearman相关分析表明骨肉瘤中MMP-9与MMP-2、MMP-2与TIMP-2以及TIMP-1与TIMP-2之间的表达均显著性相关。[结论]骨肉瘤组织中MMP-9表达升高、TIMP-1表达降低,二者协同促进肿瘤细胞的生长和局部的侵袭破坏。骨肉瘤     

MMP-9与TIMP-1在油酸制备大鼠急性肺损伤模型中的表达特点与临床意义探讨

目的检测油酸制备大鼠急性肺损伤模型血浆及肺组织基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinases9,MMP-9)及组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue matrix metalloproteinase inhibitor-1,TIMP-1)含量,分析MMP-9及TIMP-1的表达特点及临床意义。方法雄性SD大鼠24只分为3组:空白对照组(n=8)、油酸造模2h组(n=8)、油酸造模6h组(n=8)。空白对照组大鼠尾静脉注射0.9%氯化钠注射液(0.1mL/kg)6h后观察。油酸造模组大鼠尾静脉缓慢注射油酸(OA,0.1mL/kg)2h、6h后观察,以复制油酸诱导大鼠急性肺损伤模型。观察及检测指标为光镜下肺组织病理形态学变化、动脉血氧分压(PaO2)、肺湿/干质量比(W/D)、血浆和肺组织MMP-9和TIMP-1含量。结果①光镜下,与空白对照组比较,油酸造模组大鼠明显可见肺间质及肺泡水肿,肺泡腔内有浆液性渗出物及大量炎性反应细胞、红细胞渗出,部分肺间隔增厚,呈均匀红染的"透明膜"样改变;②与空白对照组比较,2h及6h时,油酸造模组PaO2明显降低(P<0.001),W/D明显升高(P<0.05);③与空白对照组比较,2h及6h时,油酸造模组血浆和肺匀浆MMP-9含量明显升高(P<0.001),TIMP-1含量明显降低(P<0.05,P<0.01或P<0.001);2h与6h比较,油酸造模组血浆和肺匀浆MMP-9及TIMP-1含量无明显变化(P>0.05);④2h及6h时,血浆MMP-9与肺匀浆MMP-9含量呈高度正相关(r=0.999,P<0.001或r=0.885,P<0.05),血浆TIMP-1与肺匀浆TIMP-1含量呈高度正相关(r=0.850,P<0.001或r=0.800,P<0.05)。结论油酸制备急性肺损伤大鼠模型血浆、肺匀浆MMP-9含量明显升高,TIMP-1含量明显降低,两者随发病时间延长无明显变化。血浆MMP-9、TIMP-1与肺匀浆MMP-9、TIMP-1含量高度正相关,检测血浆MMP-9、TIMP-1有助于急性肺损伤的病理诊断和治疗,从而为临床急性肺损伤的诊断、治疗及预后提供简单、可行、准确的检测方法和途径。     

急性百草枯中毒大鼠肺间质成纤维细胞中MMP-9表达的研究

目的观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺间质成纤维细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达变化,探讨其在PQ中毒致肺纤维化中的意义。方法SD大鼠50只,随机分为染毒组和对照组,染毒组用PQ 50 mg/kg灌胃染毒,对照组代以等剂量生理盐水灌胃,灌胃后1、3、7、14和28 d分离和提取肺间质成纤维细胞,应用免疫细胞化学和逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)观察MMP-9蛋白及其mRNA的动态变化。结果PQ灌胃后1 d,肺间质成纤维细胞MMP-9蛋白及其mRNA表达即增高,7 d达到峰值,以后逐渐下降。MMP-9蛋白及其mRNA在PQ灌胃后1、3、7 d与对照组比较升高(P<0.05),MMP-9蛋白在28 d、MMP-9 mRNA在14 d恢复到对照组水平。结论PQ灌胃后,肺间质成纤维细胞MMP-9的表达上调,损伤肺泡基底膜,启动肺纤维的发生。