甘肃东乡族丙型肝炎患者的HCV基因分型研究

目的了解甘肃地区东乡族丙型肝炎患者的HCV基因分型特征。方法对HCV患者样本用实时荧光定量PCR进行病毒载量的确定。对病毒载量大于10^3的样本用多重PCR进行HCV的基因分型。结果通过对甘肃地区东乡族丙型肝炎患者的样本进行基因分型,发现该民族丙型肝炎病毒感染主要为1b型（55．1％）为主,2a（20．6％）次之,再次为1c型（13．7％）和2c型（3．4％）,但未检测到3a型。结论东乡族基因分型有其显著特征,C型基因型以1c为主,国内其他地区少有报道,为临床针对不同基因型HCV感染者的治疗提供了依据。     

慢性丙型肝炎患者血清基因型与HCV RNA的相关性研究

目的 研究丙型肝炎患者HCV基因型的分布,探讨基因型在性别上的分布以及基因型与HCV RNA病毒载量的相关性.方法 收集2010年5-12月来自40家医院的206例丙型肝炎患者的血清标本,采用瑞士罗氏公司生产的定量PCR试剂(罗氏试剂)对进行HCV RNA检测,应用雅培公司生产的Abbott RealTime HCV GenotypeⅡ试剂(雅培试剂)对206例丙型肝炎患者的血清标本进行基因分型,分析基因型在性别上的分布以及HCV基因型与HCV RNA病毒载量的相关性.结果 206份HCV RNA阳性血清标本中HCV1型(未具体分1a和1b型)占3.4%(7/206)、1a型占1.0%(2/206)、1b型占59.7%(123/206)、2型占15.5%(32/206)、3型占13.1%(27/206)、6型占2.9%(6/206)、1/6混合型占2.4%(5/206)、2/4混合型占0.5%(1/206),未分型占1.5%(3/206).132例基因1型和65例非基因1型(2型、3型和6型)患者HCV基因型在性别上的分布差异无统计学意义(x2=0.000,P＞0.05).188例患者不同基因型之间血清HCV RNA病毒载量差异有统计学意义(F=3.371,P＜0.05).将197例HCV单基因型患者按地区分为东、南、西、北、中5组,基因型1型与非基因1型在地区分布上差异无统计学意义(x2=5.840,P＞0.05).结论 丙型肝炎病毒感染以1b型为主,其次为基因2型.基因型在性别上的分布没有差异.基因1b型HCV RNA病毒载量高于基因3型,基因2型HCV RNA病毒载量高于基因3型,基因6型HCV RNA病毒载量高于基因3型.     

某地区丙型病毒性肝炎患者HCV基因分型研究

目的 了解该地区丙型病毒性肝炎(以下简称丙型肝炎)患者丙型肝炎病毒(HCV)基因分型情况.方法 分别以ELISA和重组免疫印迹试进行血清标本抗HCV抗体筛查和确认,对抗HCV抗体阳性标本用实时荧光定量PCR进行病毒载量检测.对病毒载量大于103 copy/mL的标本用多重PCR进行HCV基因分型.结果 125例抗HCV抗体阳性标本中,HCV基因型主要为1b、2a、3a、1c、2c的检出率分别为58.4%、21.6%、3.2%、4.0%和8.0%.结论 该地区HCV感染主要以1b型为主,其次是2a和3a型,检出其他地区少见的1c和2c型,说明该地区丙型肝炎流行的基因型呈多样性.     

山东烟台地区丙型病毒性肝炎患者的基因分型及临床意义

目的：探讨山东烟台地区丙型肝炎病毒常见的HCV基因型、HCV RNA含量,HCV不同基因型与转氨酶相关性及干扰素治疗的应答关系。方法：筛选HCV-Ab及HCV RNA阳性患者作为研究对象,采用特异性PCR引物对HCVRNA5’UTR区和／或NS5B区进行扩增,PCR产物进行序列分析,通过与GenBank中参考序列的比对,对样本予以分型。同时,对其使用干扰素治疗前后分别测定HCV RNA含量、谷丙转氨酶、谷草转氨酶。结果：70份HCV—RNA阳性标本有42例可明确分型,可分型率为60．0％;检出1b、2a、3a、6a五种基因亚型,分别为30（71．4％）、10（23．8％）、1（2．4％）、1（2．4％）例。1b亚型是烟台地区HCV携带者的优势流行基因亚型,2a型携带者的ALT、AST均值明显高于1h型,使用干扰素治疗HCV RNA含量明显降低,但转氨酶高的2a患者在丙肝病毒含量降低的同时转氨酶也明显降低,而转氨酶升高不明显的1b患者经干扰素治疗后其转氨酶也无明显变化。结论：山东烟台地区HCV常见基因型为1b、2a、3a、6a,以1b亚型为主。HCV基因型别与转氨酶指标相关,丙肝病毒含量与干扰素治疗相关。     

基于丙型肝炎病毒NS5B基因序列分析的基因分型

目的：建立基于丙型肝炎病毒(HCV)NS5B基因序列分析的基因分型方法，对上海地区慢性丙型肝炎进行基因分型。方法：用HCVRNA实时荧光定量检测试剂盒对慢性丙型肝炎患血清标本的HCV RNA水平进行定量分析。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和套式-PCR扩增HCV RNA阳性的41份标本的部分HCV NSSB区基因，PCR产物经回收、纯化后直接进行测序分析。从GenBank中下载25份不同基因型的HCV原型序列，用NSSB区222bp的基因片段构建系统进化树，对临床标本相应的HCVNS5B区序列进行分析。结果：基于HCVNS5B基因序列的系统进化树分析，可成功地对本组41份标本进行基因分型。分型结果显示，1b型占85．4％(35／41)，2a型占12．20％(5／41)，3a型占2．44％(1／41)。结论：基于HCVNSSB区基因序列的系统进化树分析是一种可靠和方便的HCV基因分型方法。上海地区的HCV基因型以1b型为主。     

引物特异性HCV基因分型检测方法的建立及应用

[目的]建立引物特异性HCVRNA基因分型的方法，并应用于临床诊断。[方法]采用型特异性引物建立单管逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和双管引物特异性套式聚合酶链反应（NEST-PCR）检测技术，1b和3a一管内扩增，1a、2a和2b一管内扩增，分别对147例HCV抗体阳性的标本，设计HCV的C区特异性引物，采用Trizol浓缩RNA进行双管巢式PCR分型。[结果]统计结果表明我国丙型肝炎流行主要以1b（Ⅱ）和2a（Ⅲ）2种基因型为主，但有部分1a、2b、3a的HCV感染者检出，其中1a为1．36％（2／147），1b为65．99％（97／147），2a为6．12％（9／147），3a为1．36％（2／147），1b／2a型混合占22．45％（33／147），1a／2b混合型为0．68％（1／147），未分出型或其它型者分别为2．04％（3／147）。[结论]本文建立的方法具有良好的特异性和敏感性，可同时区分5种HCV基因型，我国北方地区发现有1a和3a基因型感染病例。     

中国HCV5''-非编码区复合酶切分型及其3b基因型序列分析

目的研究中国丙型肝炎病毒(HCV)不同基因型感染分布情况,并对3b序列进行分析。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术扩增HCV5’NCR 1a、1b、2a、2b、3a、3b、4a、6a不同基因型的cDNA及187份HCV RNA阳性样品中cDNA。A应用BHH(BsrBⅠ、HaeⅡ、HinfⅠ)复合内切酶消化5‘-NCR cDNA,B应用BstUⅠ消化,C应用HaeⅢ消化,电泳检测片段大小。结果187例HCV RNA阳性患者A B C分型结果表明,1b型感染率占67．38％,2a型12．30％,1b/2a型为5．88％,3b型5．35％,2b型3．21％,2a/2b、1b/2b型各为2．14％,1a型1．07,6a型0．54％。3份3b基因型5’-NCR A-T克隆测序结果表明,3株3b型之间同源性为99．54％～100％。其中chiKQ50与G1514395 3a株为96．28％与G1676877 3b株同源性为98．6％,与1a型为93．49％,与1b型为94．88％,与2a型为91．63％,与2b型为89．30％,与4a型为95．35％,与6a型为93．4％,结论研究结果表明该项分型技术既保证了RT-PCR检测灵敏度,又具有良好的分型效果。提示：该分型方法不仅适合中国HCV基因型检测,对亚洲及欧洲和非洲HCV分型研究也具有一定的参考价值。     

甘肃地区藏族丙型肝炎患者的HCV基因分型研究

目的 了解甘肃地区藏族丙型肝炎患者的HCV基因分型特征.方法 对HCV感染的患者样本用实时荧光定量PCR进行病毒载量的确定.对病毒载量大于103 copy/mL的样本用多重PCR进行HCV基因分型.结果 通过对甘肃地区藏族HCV感染者的样本进行基因分型,发现该民族HCV感染以1b型(56.6%)为主,HCV感染2a型(23.3%)次之,再次为2c型(10.0%)和1c型(3.3%),未检测到3a型.结论 甘肃藏族HCV感染以1b型为主,该研究为临床针对不同基因型HCV感染者的治疗提供了依据.     

甘肃省陇南地区不同基因型 HCV 分布特征研究

目的：了解甘肃省陇南地区不同基因型丙型肝炎病毒（HCV ）的分布特征。方法选择2013年7月至2014年2月于本院就诊的HCV感染确诊患者53例。采用酶联免疫吸附法进行 HCV抗体检测,以重组免疫印迹法进行结果确认。采用实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测血清病毒载量。采用多重 PCR对病毒载量大于103 copy/μL的标本进行 HCV基因分型检测。结果共检出1b基因型40例,占75．5％,检出2a基因型9例,占17．0％,检出3a基因型4例,占7．5％,各基因型检出率比较差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论甘肃省陇南地区HCV感染患者以1b型HCV感染为主,其次为2a、3a型。     

福建省慢性丙型肝炎患者丙型肝炎病毒基因分型的分析

目的观察福建省慢性丙型肝炎患者基因型分布特点以及与患者性别、年龄、丙型肝炎病毒（HCV） RNA 之间的关系。方法应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和 SANGER 测序法对155例慢性丙型肝炎患者的HCV 进行基因分型。结果在155例标本中,HCV 基因1型占55．48％,基因2型占18．71％,基因3型13．51％,基因6型12．26％,未见基因4、5型;男女慢性 HCV 感染均以1型为主要基因型,在其他基因型中,男性3型、6型多于2型,女性则以2型为主,差异有统计学意义（P ＜0．05）;基因2型平均年龄为（49岁）,3型平均年龄为（35岁）,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论福建地区 HCV 基因型以1b 型为主,其次是2a 型,未见基因4、5型;基因2型的感染者平均年龄较基因3型大。     

Routine HCV PCR screening of blood donations to identify early HCV infection in blood donors lacking antibodies to HCV

BACKGROUND: Detection of early hepatitis C infection of blood donors is still a major problem for blood transfusion. Common anti-HCV screening assays show differences in sensitivity and specificity. The often mild symptoms of acute hepatitis C also cause difficulties in the identification of early HCV infection. The feasibility and efficacy of routine screening of blood donations for HCV RNA were investigated. STUDY DESIGN AND METHODS: Blood donations (n = 251,737) were screened for HCV RNA over 4 years. RNA extraction, amplification, and detection were done by two commercial HCV PCR kits (HCV Cobas Amplicor and HCV Cobas Amplicor 2.0, Roche Diagnostics). Screening was done by pool testing with a maximum pool size of 40 serum samples. RESULTS: Three donations out of 251,737 were HCV RNA positive and anti-HCV negative. ALT levels of these donations were 271, 32, and 10 U per L. The HCV infection of a fourth HCV RNA-positive donor could not be identified by routine, second-generation HCV EIA (Abbott Diagnostika). In this case, two previous donations were also HCV RNA positive, and three second-generation test systems (Abbott) could not detect anti-HCV, whereas third-generation anti-HCV screening assays detected antibody with different sensitivity. The first HCV RNA-positive donation was identified only by the HCV ELISA 3.0 (Ortho Diagnostic Systems). The results of confirmatory assays like RIBA HCV 3.0 (Ortho) and Matrix (Abbott) indicate a restricted immune response to NS3 only. CONCLUSION: HCV RNA detection by PCR can be carried out routinely in blood donor screening without significant delay of release of the components. The residual risk of transmission can be reduced by identification of early infection, which can lead to an improved safety of blood components. RNA screening can also be advantageous in cases of incomplete or lack of antibody response to HCV.     

Impact of HCV protease-inhibitor-based triple therapy for chronic HCV genotype 1 infection

Boceprevir and telaprevir are the first HCV protease inhibitors to be approved for the treatment of chronic hepatitis C genotype 1 infection. These drugs must be used in combination with pegylated interferon plus ribavirin (P/R) to maximize efficacy and prevent the emergence of resistance-associated variants (RAVs). In randomized, placebo-controlled international studies in treatment-naive and previously treated HCV patients, treatment with either boceprevir- or telaprevir-based triple therapy regimens significantly increased sustained virological response rates compared with placebo plus P/R. Protease inhibitors have the potential, not only to significantly increase cure rates among patients with genotype 1 infection, but also to reduce the duration of treatment for patients who have an extended rapid virological response. Boceprevir is associated with an increased incidence of anaemia and dysgeusia and telaprevir is associated with an increased incidence of rash and anaemia. The emergence of RAVs was associated with an increased risk of virological failure in clinical studies. Although these new drugs bring significant promise, it remains unclear if all genotype 1 patients will need triple therapy. Here, we review some of the complexities uncovered and controversies highlighted by the introduction of HCV protease inhibitors.     

HCV proteins suppress translation

Viruses influence host cell protein synthesis in various ways. There are many reports that viral infections inhibit host cell translation, in a process called 'translational shutoff'. In most cases, viral translational shutoff gives an advantage to virus survival because host cell translation is suppressed and the translational machinery is used to translate viral RNA instead. However, there are few reports on the effects of hepatitis C virus (HCV) infection on protein synthesis, because of the lack of a reproducible tissue culture system for HCV. We found that HCV also have the effect of translational inhibition. This novel function may help HCV survival.