硒对甲醛致A549细胞激活蛋白-1和核转录因子-κB表达的影响

为探讨硒对甲醛致A549细胞激活蛋白-1(AP-1)和核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响,以A549细胞株为实验对象,设对照组、0.1 mmol/L甲醛组、1.25 mg/L硒+0.1 mmol/L甲醛组、2.5 mg/L硒+0.1 mmol/L甲醛组、5.0 mg/L硒+0.1 mmol/L甲醛组、10.0 mg/L硒+0.1 mmol/L甲醛组分别进行染毒,采用蛋白免疫印记法检测核蛋白中AP-1、NF-κB的表达。结果显示,对照组A549细胞生长活跃,1.25、2.5、5.0、10.0 mg/L硒+0.1 mmol/L甲醛组染毒12、24、48 h后细胞生长受到抑制,且抑制率随硒浓度和染毒时间的增加而升高;0.1 mmol/L甲醛可使A549细胞核蛋白中AP-1和NF-κB的表达增加,而2.5、5.0、10.0 mg/L硒+0.1 mmol/L甲醛组可抑制AP-1和NF-κB的过度表达,与单纯甲醛染毒组比较,差异有统计学意义(P0.05)。提示硒在一定浓度下能够拮抗甲醛致A549细胞AP-1和NF-κB的表达。     

姜黄素对甲醛致A549细胞氧化损伤拮抗作用

目的探讨姜黄素对甲醛致细胞氧化损伤的拮抗效应。方法采用A549细胞株作为实验材料,实验设对照组、0.1 mmol/L甲醛染毒组,姜黄素组(0.1 mmol/L甲醛+2.5～20.0 mg/L姜黄素),检测A549细胞中一氧化氮合酶(NOS),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果甲醛染毒组A549细胞SOD、NOS和GSH-Px活性分别为(21.79±1.13)、(1.88±0.16)与(27.83±0.2)U/mgprot,与对照组比较,SOD、NOS和GSH-Px活性明显下降(P<0.05),MDA含量[(3.87±0.153.87)nmol/mgprot]明显升高(P<0.05)。与甲醛染毒组比较,各姜黄素组GSH-Px活性上升、MDA含量下降(P<0.05),与对照组比较,40 mg/L姜黄素组GSH-Px活性、MDA含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论姜黄素可提高A549细胞抗氧化酶活性,并存在剂量效应关系。     

甲醛致A549细胞DNA-蛋白质交联及其修复效应

目的 探讨甲醛诱导DNA-蛋白质交联作用及其修复效应.方法 于37℃条件下,以不同浓度的液态甲醛(0、50、100、200、400、800、1 600 μmol/L)对培养人类肺肿瘤(A549)细胞(对数生长期)染毒1 h后,检测A549细胞的DPC系数.于37℃下对100 μmol/L液态甲醛染毒1 h的A549细胞的DPC修复0、6、12、18、24 h,设1个空白对照组,并检测A549细胞的DPC系数.采用KCI-SDS沉淀法检测DPC系数.结果 与溶剂对照组(0 μmol/L)比较,100、200、400、800、1 600μmol/L甲醛染毒组A549细胞的DPC系数均较高,差异有统计学意义(P＜0.05).50 μmol/L甲醛染毒组A549细胞的DPC系数与溶剂对照组相比虽有升高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).经过100 μmol/L的液态甲醛给A549细胞染毒后,0 h修复组DPC系数高于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).液态甲醛诱导A549细胞产生的DPC经过6、12和18 h修复后,DPC系数与0 h修复组相比虽有下降趋势,但差异均无统计学意义(P＞0.05);经过24 h修复后,DPC系数低于0 h修复组,差异均有统计学意义(P＜0.05),但与空白对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 较高浓度的甲醛可以明显诱导DPC形成,甲醛所致的DPC可以得到修复.     

甲醛致雄性大鼠脑和睾丸细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的探讨气态甲醛致雄性大鼠脑细胞和睾丸细胞DNA-蛋白质交联（DNA-protein crosslinks，DPC）作用。方法将24只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组，每组6只，分别为0.5、1.0、3.0mg／m。气态甲醛染毒组和阴性对照组。连续动态吸入染毒72h后，应用KCl-SDS沉淀法检测大鼠脑和睾丸组织DNA-蛋白质交联的含量。结果与阴性对照组比较，0.5mg／m^2气态甲醛染毒组大鼠脑和睾丸组织的DPC系数差异无统计学意义（P〉0.05），随着甲醛浓度的增加，DPC系数逐渐升高。与阴性对照组比较，1.0、3.0mg／m^3气态甲醛染毒组大鼠脑和睾丸组织DPC系数升高，差异有统计学意义（P〈0.01）结论低浓度（0.5mg／m^3）的气态甲醛不能引起大鼠脑和睾丸组织产生DPC效应，而较高浓度（1.0、3.0mg／m^3）的气态甲醛可明显诱导其产生DPC效应，造成严重的DNA损伤。     

Joint Toxicity of Sodium Sulfite and Formaldehyde on the Expression of p53 Protein of HL-7702 Cells

目的 研究亚硫酸钠与甲醛联合染毒对人正常二倍体肝细胞株(HL-7702细胞)的毒性作用及对肝细胞内抑癌基因p53蛋白表达的影响.方法 分别加入终浓度为0(阴性对照),0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠,0.02、0.1、0.5、2.5、12.5 mmol/L甲醛以及0.1 mmol/L甲醛+0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠进行染毒24 h,采用MTT试验检测肝细胞的活性.分别加入终浓度为0(阴性对照)、0.039、0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠,0.02、0.1、0.5、2.5、12.5mmol/L甲醛,10 mmol/L甲醛+0.039、0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠以及0.1 mmol/L甲醛+0.039、0.156、0.625、2.5mmol/L亚硫酸钠进行染毒24h,采用蛋白杂交法(Western blot)检测肝细胞内p53蛋白的表达水平.结果 与阴性对照组比较,2.5 mmol/L亚硫酸钠及0.1～12.5 mmol/L甲醛单独染毒肝细胞的活性均明显降低(P＜0.05),且肝细胞活性均随着染毒浓度的升高而下降;0.1 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞的活性均高于0.1 mmol/L甲醛单独染毒组(P＜0.05),且0.1 mmol/L甲醛+2.5 mmol/L亚硫酸钠联合染毒组肝细胞活性也明显高于2.5 mmol/L亚硫酸钠单独染毒组(P＜0.05).各浓度亚硫酸钠单独染毒对肝细胞内p53表达水平无明显影响,而0.5～12.5 mmol/L甲醛单独染毒可引起肝细胞内p53表达水平明显下降(P＜0.05);10 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞内p53蛋白表达水平均低于阴性对照组和10 mmol/L甲醛单独染毒组及相同剂量亚硫酸钠单独染毒组(P＜0.05);而0.1 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞内p53蛋白的表达水平与阴性对照组比较,均无明显变化.结论 亚硫酸钠和甲醛联合染毒对肝细胞活性的抑制作用有所减弱.较高浓度(10mmol/L)甲醛可抑制肝细胞内p53蛋白的表达水平,亚硫酸钠可加强这种抑制作用.     

甲醛致V79细胞DNA-蛋白质交联作用及其修复

目的探讨甲醛诱导DNA-蛋白质交联作用及其修复效应。方法采用培养V79细胞株作为实验材料,以不同浓度的液态甲醛(0、50、100、200、400、800、1 600μmol/L)对细胞染毒1 h后检测DPC率,并根据实验结果选取200μmol/L对培养细胞株进行修复实验(修复0、6、12、18、24 h)。采用KCl-SDS沉淀法检测DPC率。结果较高浓度的液态甲醛(≥200μmol/L)可以产生明显的DPC效应(P<0.05);由200μmol/L浓度的液态甲醛诱导V79细胞产生明显的DPC(P<0.05),经过修复可以恢复到空白对照水平(P>0.05)。结论较高浓度的甲醛可以明显诱导DPC形成,甲醛所致的DNA-蛋白质交联可以得到修复。 更多还原     

甲醛致大鼠离体骨髓细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的检测经不同浓度甲醛染毒后所致大鼠骨髓细胞的DNA-蛋白质交联程度。方法采用KCl-SDS沉淀法检测液态甲醛所致DNA-蛋白质交联（DPC）效应。结果低浓度的甲醛（10μmol／L和50μmol／L）能引起DNA-蛋白质的交联；较高浓度的甲醛（250μmol／L和1250μmol／L）可以产生明显的DNA-蛋白质交联作用（P〈0．01）。结论甲醛可造成骨髓细胞DNA-蛋白质交联，而DPC可以对细胞产生严重的遗传毒性，这可能是甲醛导致白血病的分子机制之一。     

亚硫酸钠和甲醛联合染毒对人正常二倍体肝细胞活力及p53蛋白表达的影响

目的研究亚硫酸钠与甲醛联合染毒对人正常二倍体肝细胞株(HL-7702细胞)的毒性作用及对肝细胞内抑癌基因p53蛋白表达的影响。方法分别加入终浓度为0(阴性对照),0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠,0.02、0.1、0.5、2.5、12.5 mmol/L甲醛以及0.1 mmol/L甲醛+0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠进行染毒24 h,采用MTT试验检测肝细胞的活性。分别加入终浓度为0(阴性对照)、0.039、0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠,0.02、0.1、0.5、2.5、12.5mmol/L甲醛,10 mmol/L甲醛+0.039、0.156、0.625、2.5 mmol/L亚硫酸钠以及0.1 mmol/L甲醛+0.039、0.156、0.625、2.5mmol/L亚硫酸钠进行染毒24 h,采用蛋白杂交法(Western blot)检测肝细胞内p53蛋白的表达水平。结果与阴性对照组比较,2.5 mmol/L亚硫酸钠及0.1～12.5 mmol/L甲醛单独染毒肝细胞的活性均明显降低(P<0.05),且肝细胞活性均随着染毒浓度的升高而下降;0.1 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞的活性均高于0.1 mmol/L甲醛单独染毒组(P<0.05),且0.1 mmol/L甲醛+2.5 mmol/L亚硫酸钠联合染毒组肝细胞活性也明显高于2.5 mmol/L亚硫酸钠单独染毒组(P<0.05)。各浓度亚硫酸钠单独染毒对肝细胞内p53表达水平无明显影响,而0.5～12.5 mmol/L甲醛单独染毒可引起肝细胞内p53表达水平明显下降(P<0.05);10 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞内p53蛋白表达水平均低于阴性对照组和10 mmol/L甲醛单独染毒组及相同剂量亚硫酸钠单独染毒组(P<0.05);而0.1 mmol/L甲醛+不同浓度亚硫酸钠联合染毒肝细胞内p53蛋白的表达水平与阴性对照组比较,均无明显变化。结论亚硫酸钠和甲醛联合染毒对肝细胞活性的抑制作用有所减弱。较高浓度(10 mmol/L)甲醛可抑制肝细胞内p53蛋白的表达水平,亚硫酸钠可加强这种抑制作用。     

甲醛和苯联合吸入染毒小鼠肝脏DNA-蛋白交联和氧化损伤的研究

研究甲醛和苯联合吸入染毒致小鼠肝脏DNA-蛋白交联(DNA-protein crosslinks,DPC)和氧化损伤作用,探讨其遗传毒性.60只健康清洁级昆明种纯系雄性小鼠,随机分为对照组(清洁空气),甲醛低(1 mg/m~3)、中(3 mg/m~3)、高(5mg/m~3)剂量组,苯低(500mg/m~3)、中(1500mg/m~3)、高(2500 mg/m~3)剂量组,联合低(0.5mg/m~3甲醛+250mg/m~3苯)、中(1.5mg/m~3甲醛+750 mg/m~3苯)、高(2.5 mg/m~3甲醛+1 250 mg/m~3苯)剂量组,每组6只.采用静式吸入染毒,每天2 h,连续14 d.染毒结束次日处死小鼠,测定肝脏组织中DPC含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)含量.与阴性对照组相比,甲醛、苯单独染毒中、高剂量组及联合染毒各剂量组DPC系数均升高(P＜0.05),甲醛、苯单独及联合染毒各剂量组SOD活力均降低(P＜0.05)、MDA含量均升高(P＜0.05);与单独染毒组相比,联合染毒中、高剂量组DPC系数明显升高(P＜0.05),联合染毒各剂量组SOD活力明显降低(P＜0.05)、MDA含量明显升高(P＜0.05).甲醛和苯联合吸入染毒对小鼠肝脏遗传毒性作用大于甲醛、苯单独染毒时的作用,提示二者同时存在对小鼠肝脏的遗传毒性具有协同作用.     

甲醛致肥大细胞DNA损伤与诱发哮喘作用关系的初步研究

目的研究甲醛致P815细胞DNA的断裂作用和致DNA-蛋白质的交联作用(DNA-protein cross-links,DPC)。方法以P815细胞为材料,温箱孵育染毒1h后,采用单细胞凝胶电泳法和KCl-SDS沉淀法检测液态甲醛染毒后细胞中DNA的断裂效应及DNA-蛋白质交联物的含量。结果单细胞凝胶电泳法的结果显示甲醛在低浓度(5μM,25μM)时可以引起DNA链的断裂(P<0.001),在较高浓度(125μM,625μM)时可以引起明显的交联作用(P<0.01),而KCl-SDS沉淀法的结果则表明,低浓度的液态甲醛(5μM,25μM)不能引起DNA-蛋白质的交联(P>0.05),较高浓度(125μM,625μM)可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用(125μM,P<0.01;625μM,P<0.01)。结论高浓度甲醛可以导致肥大细胞DPC,也可诱导哮喘;肥大细胞的DPC是否与诱导哮喘作用有关,值得深入研究。