阿齐霉素对细胞内弓形虫疗效的实验研究

作者运用ＭＴＴ比色法检测弓形虫侵入的猴肾细胞在阿齐霉素作用下的增殖情况。为阻断孕妇感染弓形虫宫内垂直感染胎儿制定预防治疗措施时提供科学的实验依据。材料与方法一、弓形虫与细胞　弓形虫悬液 10 7/ｍｌ(由省农科院畜牧兽医研究所提供 ) ,0 1ｍｌ/只腹腔注射接种 18± 2 ｇ昆明种雌性小鼠 ,第 4天断颈取腹水 ,10 0 0转 /分离心 5分钟 ,使腹腔细胞沉淀 ,取上清液 ,30 0 0转 /分离心 2 0分钟 ,取沉淀 ,将弓形虫数调整至 10 7/ｍｌ,猴肾细胞 (由省农科院畜牧兽医研究所提供 )铺满培养瓶底面后 ,用 0 2 5%胰蛋白酶消化 1分钟后 ,倒去…     

189份尿液离心前后尿沉渣镜检与尿液分析仪测定结果比较

我们对 189份尿液进行了离心前后的分析 ,并对离心后尿沉渣镜检结果与尿液分析仪所测结果相互关系进行了对比分析 ,结果如下。1　材料与方法1.1　仪器 :日本产 MA— 4 2 10型尿液分析仪及长春市康维科技有限公司生产的试带。1.2　标本 :病房每日送检的晨尿标本 ,2 h测定完毕。1.3　方法 :吸取混匀尿 10 m L ,进行检测。测试完毕 ,立即以 2 0 0 0 r/ m in离心 5 min。然后取上层尿液测试。严格按仪器说明书进行 ,随后弃去上清液 ,取沉渣涂片镜检。细胞取 10个高倍视野的平均值 ,管型取 10个低倍视野的平均值。我们把红细胞 <1个 / HP,白细…     

一种从病人粪便中提取甲型肝炎病毒的技术

第三代检测甲型肝炎病毒(HAV)抗体试验需要特异性强的抗原。鉴于HAV在体外培养较为困难,作者建立了一种二步蔗糖离心法从病人粪便中提取HAV抗原的技术。该HAV抗原用于酶免疫试验(EIA)测定HAV抗体(IgM和IgG),具有很好的免疫化学活性,可以稀释40～150倍后使用。第一步取病人的HAV阳性粪便,制成20%的抽提物,以2500转/分,20℃离心1小时。取沉渣再次抽提可以提高HAV产量。将上清通过40%蔗糖溶液离心(7500转/分,3小     

由诺卡氏菌产生的一种新的16元内酯类抗生素tubelactomicinA:分类、产生菌、分离及生物学特征

tubelactomicin A是从放线菌的培养液中分离获得的一种新的 16元内酯类抗生素 ,产生菌的代号为MK70 3- 10 2 F1。放线菌 MK70 3- 10 2 F1在硝化蔗糖琼脂和天门冬氨酰胺琼脂培养基上 2 7℃培养 6～ 10 d,用电子显微镜观察菌丝体的形态。用薄层色谱法分析细胞壁的化学组成。初步确定菌株 MK70 3- 10 2 F1属于诺卡氏菌属 ,进一步的分类研究仍在进行之中。经过种子摇瓶培养 (2 7℃ ,180 rap/ min,6 d)和生产摇瓶培养 (30℃ ,180 rap/ min,3d) ,发酵液离心后 ,用Diaion HP2 0吸收 ,乙酸乙脂提取 ,硅胶和 SephadexLH- 2 0柱色谱层析 ,离心…     

ELISA法幽门螺旋菌抗体检测的临床应用

近年来我院应用间接ELISA 法检测胃肠疾病患者血清中抗幽门螺旋菌(简称HP)抗体ImG 并与胃粘膜涂片找HP 作了比较,兹报道如下。材料与方法100例胃肠疾病患者做胃镜时钳取胃粘膜组织,直接涂片革兰氏染色,油镜下寻找HP。同时抽取静脉血1毫升,用间接ELISA 法测抗HP 抗体IgG。两组作对照观察。抗HP 抗体IgG 检测:用间接ELISA 法,以数株HP 的超声粉碎物作为抗体(由上海消化疾病研究所提供),待测病例血清为一抗,酶标羊抗人IgG 为二抗。ELISA 中的各反应物浓度用棋盘滴定法测定。用20ug/毫升的抗原包     

抗霍乱弧菌0:1 群-和型-特异性脂多糖抗原的单克隆抗体

本文报道产生抗霍乱弧菌O:1群脂多糖(LPS)O抗原决定簇单克隆抗体的杂交细胞系的建立及其所产生抗体的某些免疫学活性。采用稻叶型霍乱弧菌35、569B株和小川型34株,培养后分别经酚-水法提取LPS,高速离心纯化后,免疫6～10周龄BALB/c雌性小鼠4～9周,各取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/O-Ag14株融合并克隆化,在体内、     

正交试验优选黄芩苷血药浓度测定中大鼠血浆的处理条件

目的:优选黄芩苷血药浓度测定中大鼠血浆的处理条件。方法:采集大鼠空白血浆,加入黄芩苷,采用高效液相色谱法测定黄芩苷血药浓度。以黄芩苷萃取回收率为指标,以磷酸量、甲醇量、超声萃取时间、两次离心转速、两次离心时间为因素,通过L1(837)正交试验对含黄芩苷大鼠血浆处理条件进行优选并验证。结果:最优提取条件为加入磷酸50μl、甲醇2ml,涡旋混合2min,超声萃取10 min,以离心半径为4 cm、3 000 r/min离心10 min,取上清液氮气流下吹干,取200μl流动相复溶,涡旋混合1 min,以离心半径为3 cm、14 000 r/min离心5 min。验证试验得出平均萃取回收率为91.8%,RSD为2.6%。结论:本试验优化了含黄芩苷血浆的处理条件,阐明了各因素水平对黄芩苷萃取回收率的影响,优选的处理条件稳定可行。     

从感染组织培养液制备肾综合征出血热病毒抗原作血凝抑制试验

本文报道作者从感染的组织培养液中制备HA抗原,并用丙酮提取和超声处理法提高HFRS HA灭活抗原滴度,研究了其在HI试验中的应用。作者将HFRS相关病毒B-1株感染VeroE6细胞,取1～2周的培养液(F)低速离心,除去细胞碎片。上清液经25000转/分离心后,沉淀物(P-2)用pH9牛白蛋白-硼酸盐溶液(BABS)制成悬液,再用丙酮和丙酮-乙醚抽提得A或AE,最后用超声处理3或10分钟制成AS-3’或AS-10’。用鹅红细胞测定不同抗原的HA滴度,结果发现感染组织培养液F的滴度只有1:16,4℃过夜后滴度<1:2;P-2滴度上升为1:1024,电镜观察到其中皆为     

氟维司群注射液前处理及细菌内毒素检查方法研究

目的 建立氟维司群注射液细菌内毒素的检查方法。方法 取样品0.5 mL,加细菌内毒素检查用水（BET用水）5 mL,2 000 r/min振荡5 min后,3 000 r/min离心5 min,取水相,用BET用水稀释至所需倍数系列溶液。按2020年版《中国药典（四部）》通则1143细菌内毒素检查法,分别采用凝胶法、动态显色法、动态浊度法检测样品中的内毒素,考察水萃取液（水相溶液）的干扰及内毒素回收比。结果 水相溶液稀释至2倍及以上时对鲎试剂均无干扰;外加20 EU/mL内毒素时回收比均在50%～200%范围内。结论 氟维司群注射液经水萃取后,采用凝胶法、动态显色法、动态浊度法进行细菌内毒素检查均可行。     

石墨炉原子吸收法测定血浆顺铂含量

目的建立测定血浆中顺铂含量的方法。方法将血浆在1 000 r·min 1离心10 min后，取上清液，采用石墨炉原子吸收分光光度法测定顺铂的含量。结果人血浆中顺铂的回收率为94.7%～103.70%。结论该方法为一种可信度较高、操作性较强的血浆顺铂的测定方法。     

结核菌L型的检测在结核病诊断中的作用

结核菌L型(TB-L)是结核菌细胞壁缺陷的变异型,常规方法不能检出,常导致临床漏诊和误诊。作者对73例痰直接涂片阴性者,加做结核菌细菌型(LB-B)、结核菌L型(YB-L)培养,结果报告如下。1 材料与方法1.1 选例标准 我院肺科门诊及住院病人,临床诊断为肺结核,且3次痰检抗酸菌阴性。1.2 实验方法 痰取清晨深咳的肺部第1口痰,直接涂片抗酸染色、镜检,3次痰直接涂片阴性者,加做TB-B培养和TB-KL培养(1份痰加4份1mol/L NaOH,消化15 min后用1 mol/L HCl中和,3 000 r/min离心,30 min后取沉淀物培养),培养物 10～14 d可取沉淀物作涂片,抗酸染色,每张涂片检测作阴性报告者需油镜下查1000个视野。对生长丰盛者加做耐热触酶试验,初步排除非结核分枝杆菌。2 结果     

用含A蛋白葡萄球菌(NO.1800株)作为放射免疫分离剂的实验研究初步报告

金黄色葡萄球菌含A蛋白(SpA)已广泛用于免疫学等方面的研究。在放射免疫测定技术中,分离剂是关键环节之一,目前作为分离抗原—抗体复合物(B),与游离抗原(F)的方法很多,近年有人报导用含A蛋白CowonⅠ株,及779株金黄色葡萄球菌为放射免疫测定中的分离剂。我们应用自选的含A蛋白丰富的NO.1800株金黄色葡萄球菌作为放射免疫测定中的分离剂,现将初步结果报导如下。材料与方法一、材料: 1、含A蛋白金黄色葡萄球菌(NO.1800株)分离剂的制备:见文献报道。使用前将10％(V/V)SpA稳定液,搅匀,经离心(3000转/分,15分钟),在试管上标明液高,     

白细胞滤除对血浆成分的影响

<正>为探讨滤除白细胞后制备的血浆质量,观察白细胞滤器对某些血液成分的影响,对滤除白细胞前后血浆中多种血液成分进行了检测,并对结果进行比较,结果如下。1材料与方法1.1标本来源:采集后的血液立即按标准操作规程要求滤除白细胞。过滤前的全血和滤后的少白细胞全血充分混匀,无菌操作分别留取血样10mL,2 000r/min,离心10     

大豆芽中胺氧化酶的精制及其性质

大豆 Glycine max置湿草垫上,在<20°阴暗处发芽6d。自来水清洗后取200g加四倍量的双蒸馏水混匀。包在棉布内将水挤出,残渣再用二倍水洗压。将所得的水提液合并,用饱和柠檬酸溶液调pH至4.0。在2500×g下离心15min,收集沉淀物,继用含有1 mol/L NaCl,pH为7.8的0.1mol/L Na_2HP0_4-柠檬酸缓冲液,0℃下提取。提取液再在3000×g下离心15min,将残渣弃去。上清液冷却至0℃,再加-15℃的丙酮一份,离心,将所得的     

血浆凝血酶原时间测定影响因素探讨

血浆凝血酶原(PT)是外源性凝血系统的过筛试验,是临床口服抗凝药物治疗剂量控制的重要指标。但试验影响因素颇多,实验结果缺乏准确性。本文就不同影响因素进行探讨。1 材料与方法1.1 仪器 BIOCHEMBC-PLUS(德国TECO公司)。1.2 试剂 与仪器配套的所有试剂均为德国TECO公司提供。0.109mol/L、0.129mol/L枸橼酸钠;0.54mol/L EDTA-K2;0.1mol/L草酸钠。1.3 方法 采血均用一次性塑料针筒,抗凝剂与血之比为1:9,混匀后以2000转/min离心10min,吸取上层血浆备用,每次测定按照仪器操作手册说明进行。     

血清幽门螺杆菌抗原检测方法比较

目的 :对血清幽门螺杆菌抗原检测的两种方法进行对比分析。方法 :取 42例患者胃粘膜组织块 ,应用尿素酶(HPUT)试剂盒进行检测 ,操作步骤按产品说明书进行。另外 ,采用夹心ELISA法做对比检测 ,简要过程是以抗HP特异性抗体包被固相支持物 ,依次加入封闭蛋白 (覆盖非结合点 ) ,试样及酶标记的HP抗体 ,TMB显色 ,以肉眼观察定性结果。每批试剂均设阳性及阴性对照。包被及酶标记抗HP抗体的效价为 1∶5 12 0 0。结果 :42例中 ,HPUT的阳性检出率为 2 8.5 7% ,夹心ELISA法检出血清HP抗原的阳性率为 30 .95 %。两法的符合率达 90 % ,两者无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :夹心ELISA方法简单 ,无痛苦 ,适合于大规模的筛查。夹心ELISA法检测血清HP抗原与用HPUT检测胃内尿素酶的符合率高 ,且配对进行 χ2 检验表明 ,两法间无显著性差异 ,提示应用夹心ELISA检测血清HP抗原 ,有可能替代HPUT诊断HP现症感染 ,但仍需扩大观察的例数 ,进一步考验这一方法的特异性、敏感性及稳定性     

反相HPLC法测定脑血管硬化病人血浆Vit.E浓度

脑血管硬化是危害老年人健康最常见的疾病之一。近年来研究揭示Vit．E与动脉硬化的发生发展有密切的关系[1]，因此了解脑血管硬化病人体内Vit．E营养状况，有利于今后从营养学角度上对疾病进行防治。1．材料和方法：1．1病例选择：收集经临床病史、眼底镜和脑血流图检查诊断为脑血管硬化，有临床症状而前来就诊的病人。1．2检测方法：高效液格色谱法’11．2．且步骤：呆病人静脉血，用肝素抗凝，分离出血浆，取血浆10oPI加入无水乙醇200yi·振荡lmin，加入lml环乙烷，振荡用秒，直立放置smin，2000转／min离心10min，取上层坏已烷于另一…     

冰冻红细胞的制备与应用分析

目的研究并探讨冰冻红细胞的制备方法及应用价值。方法对100份悬浮红细胞(2016年6月~2017年1月本站采集2~6d内的RH(D)阴性红细胞16U)标本在不同条件下进行制备,制备方法为甘油化、去甘油化,分别在不同放置时间、不同离心速度下将其制备成冰冻红细胞,比较加甘油后不同放置时间的甘油残留量、去甘油化过程中不同离心速度的各项冰冻红细胞参数。结果加甘油后不同放置时间下,放置30min的标本甘油残留量明显低于放置15min的标本(P0.05);不同离心速度下,去甘油化后冰冻解冻红细胞的各项参数均符合国家质检标准,离心速度2600转/min的标本其甘油残留量、体外溶血率、游离血红蛋白均明显低于离心速度3300转/min的标本(P0.05),且其红细胞回收率明显高于离心速度3300转/min的标本(P0.05)。结论对红细胞标本进行甘油化、去甘油化制备,可获得优质冰冻红细胞,有利于保证输血的安全性,缓解血液供需矛盾。     

肿瘤治疗性多肽疫苗——重组人纽表位肽12质控方法的研究

目的建立重组人纽表位肽12质控方法和检定规程。方法采用FVB/N转neu基因小鼠,以ELISA法检测给药后小鼠的抗体阳转百分率评价其生物学活性,用胃蛋白酶酶切分析肽图,用SEC-HPLC法测定抗原含量。结果与结论建立了重组人纽表位肽12的生物学活性、肽图分析、抗原含量测定等质控方法及检定规程,并已用于重组人纽表位肽12产品的检定。     

体外溶血评价方法中最佳离心转速和离心时间的考察

目的 确定最佳的离心转速和离心时间,保证体外溶血评价结果的准确性.方法 选择不同离心转速(750、1 000、1 250、1 500、1 750和2 000 r·min-1),每个离心转速分别考察不同离心时间(5、10、15和20 min).各组离心后于545 nm下测定吸光值并进行红细胞计数.结果 离心转速为1 500 r·min-1,离心时间为15 min时,红细胞达到最大下沉且对红细胞的损伤最小.结论 离心转速为1 500 r·min-1,离心时间为15 min可作为体外溶血评价方法中的最佳离心转速和离心时间.