广西菲牛蛭药材的高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的:采用高效毛细管电泳法建立广西菲牛蛭药材的指纹图谱。方法:石英毛细管柱(75μm×56 cm)作为分离通道,以25 mmol.L-1Na2HPO4-120 mmol.L-1Tris-16 mmol.L-1SDS(1 mol.L-1NaOH调pH 12.0)为缓冲液,运行电压17kV,柱温25℃,检测波长254 nm,进样参数3.4 kPa×6 s,运行时间27 min。结果:建立了广西菲牛蛭药材的高效毛细管电泳指纹图谱,确定了共有峰为13个,10批药材指纹图谱与对照指纹图谱相似度均大于0.98。结论:该方法具有良好的精密度、稳定性和重复性,为有效控制该药材质量提供了新方法。     

通心络胶囊的毛细管电泳指纹图谱测定

目的 探求更为快捷、准确的通心络胶囊评价方法.方法 采用高效毛细管电泳法对10批通心络胶囊进行分析.条件为石英毛细管 (75 μm×50 cm ),电解缓冲液为20 mmol/L,硼酸盐溶液(pH 8.5),电压为15 kV,检测波长254 nm.结果 10批通心络胶囊相似度良好,建立了通心络胶囊标准指纹图谱.结论 高效毛细管电泳具有良好的重现性和准确度,可作为通心络胶囊快速准确的质量控制方法.     

ICP-MS法测定菲牛蛭中的5种重金属及有害元素

目的:建立菲牛蛭中铜、砷、镉、汞、铅5种重金属及有害元素的测定方法。方法:试样经微波消解后,采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS),以内标法测定。结果:5种待测元素在测定范围内线性关系良好(r≥0.9999),仪器检出限均低于0.003 mg/kg,平均回收率为90.1%~98.6%,RSD为2.7%~7.3%(n=9)。结论:该法灵敏、准确、高效,可用于菲牛蛭中5种重金属及有害元素的测定。     

利用丝素固定化凝血酶分离纯化菲牛蛭中的水蛭素

目的:利用制备的丝素固定化凝血酶分离纯化菲牛蛭中的水蛭素。方法:以抗凝血酶活力(ATU)回收率为指标进行牛蛭素的固定化凝血酶萃取,通过正交实验优化萃取及反萃取条件。最后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)鉴定实验样品的纯度。结果:菲牛蛭素A萃取的最佳条件为:水蛭素初始浓度9 ATU/mL,温度30℃,pH4.30,时间45 min;反萃取温度30℃,pH 7.4,时间30 min,ATU回收率55.73%。菲牛蛭素B萃取的最佳条件为:水蛭素初始浓度9 ATU/mL,温度30℃,p H 5.2,时间45 min;反萃取温度30℃,pH 7.2,时间30 min,ATU回收率23.96%。菲牛蛭素A、B实验样品PAGE图均只有1条带。结论:该文利用制备的丝素固定化凝血酶可以有效的应用于菲牛蛭素的分离纯化。     

中药水蛭品种考证及资源可持续利用发展探讨

该文通过系统地本草文献梳理与研究指出,传统中医使用的水蛭是生于水中,个头较小且能吸食人及牛马血的水蛭.具有这些特性的水蛭的品种有日本医蛭Hirudo nipponia Whitman、丽医蛭H.pulchra Song、南京牛蛭Poecilobdella nanjingensis sp.Nov.、菲牛蛭P.manillensis (Lesson)以及湖北牛蛭P.hubeiensis Yang 5个品种,与2010年版《中国药典》水蛭项下所规定的动物品种来源不完全一致.建议《中国药典》修改并补充水蛭的品种来源,保留原有日本医蛭H.nipponica Whitman,增补菲牛蛭P.manillensis (Lesson),暂时保留宽体金线蛭Whitmania pigra Whitman、尖细金线蛭W.acranulata Whitman,并进一步加强丽医蛭H.pulchra Song、南京牛蛭P.nanjingensis sp.Nov.以及湖北牛蛭P.hubeiensis Yang的化学成分和药理作用以及资源分布的研究,以待作为药用品种补充.     

菲牛蛭成分与急性毒性试验研究

目的:分析菲牛蛭中的氨基酸成分、有害物质含量与急性毒性,为评价菲牛蛭药材质量提供科学依据。方法:应用日立835-50型氨基酸自动分析仪、原子吸收分光光度法、CGC-ECD和CGC-NPD气相色谱法测定了菲牛蛭中含有的氨基酸成分、有害物质含量,并进行了菲牛蛭的初步急性毒性试验研究。结果:比较分析了宽体金线蛭、日本医蛭、欧洲医蛭、菲牛蛭四种水蛭的氨基酸含量结果,其差别不显著;菲牛蛭中重金属含量和有机氯以及有机磷农药残留量符合国家有关要求;菲牛蛭急性毒性试验结果表明其LD50大于10 g/kg,未见明显毒副作用。结论:菲牛蛭含有较高的氨基酸含量,而重金属和有机氯、有机磷农药残留量则较低,急性毒性试验LD50>10 g/kg,可考虑作为一种新药用资源而加以研究     

菲牛蛭规范化养殖标准操作规程(SOP)

目的:制定菲牛蛭规范化养殖标准操作规程(S0P)。方法:分别对菲牛蛭的养殖基地环境、养殖技术、病害防治、留种、采收加工、产品质量标准及监测等项目进行研究。结果:平均亩产菲牛蛭活体420.88 kg,平均每1 kg菲牛蛭鲜品含天然水蛭素43万AT-U,产品各项卫生及质量指标均符合国家有关的规定。结论:此S0P适用于广西地区的菲牛蛭养殖。     

菲牛蛭提取物对顺铂治疗S180荷瘤鼠减毒作用的研究

目的:研究菲牛蛭提取物联合顺铂治疗S180荷瘤鼠效果及其减毒作用。方法:建立S180荷瘤鼠模型10天后,将40只BALB/c小鼠按肿瘤体积随机分为阴性对照组、顺铂组、菲牛蛭提取物组、菲牛蛭提取物+顺铂组。分组后开始给药,连续给药7天,第8天处死各组小鼠,取血清检测肝肾功能指标;取肾脏进行组织病理学检查;剥离肿瘤称重计算抑瘤率。结果:菲牛蛭提取物与顺铂联合使用具有抑制肿瘤生长的作用(P0.05)。与顺铂组比较,联合用药后菲牛蛭提取物可使S180荷瘤鼠的ALT、AST、TBIL、BUN、CREA含量降低(P0.05)。结论:菲牛蛭提取物与顺铂联合使用治疗S180荷瘤鼠具有相加作用,同时菲牛蛭提取物可减轻顺铂引起的肝肾毒性。     

菲牛蛭冻干粉去腥方法的研究

目的:探索菲牛蛭冻干粉去腥工艺。方法:以抗凝血酶活性和感官评价为指标,筛选菲牛蛭冻干粉的最佳去腥工艺。结果:以7%的环糊精溶液,料液比1∶5,50℃水浴1 h除腥效果最佳。此方法处理后的菲牛蛭冻干粉抗凝血酶活性为631.7 U/g,感官评价分数为4.3分。结论:环糊精包埋对菲牛蛭冻干粉具有最佳除腥效果,同时最大程度的保存了其抗凝血酶活性,采用环糊精包埋法除去菲牛蛭冻干粉腥味切实可行。     

温度、密度、喂食周期对菲牛蛭育苗影响的研究

研究了温度,密度,喂食周期对菲牛蛭幼苗的生长规律。分别设置7个温度(18,22,26,30,34,38℃和自然温度),5个密度(75,125,200,275,350条/L)和6个喂食周期(2,4,6,8,12,16 d),经30 d的养殖后考察各处理的存活率,增长率,特定增长率等生长指标。特定生长率与温度之间存在二次曲线相关,其回归方程式为y=-0.066x2+3.543 1x-38.09(R2=0.837 9),当水温为26.84℃,菲牛蛭幼苗的特定增长率为最大9.461 4,菲牛蛭幼苗最适生长水温在26~30℃。水温为38℃时,菲牛蛭幼苗全部死亡;特定增长率与密度之间存在显著直线回归关系,其回归方程式为y=-0.005 7x+9.197 3(R2=0.998 3);特定增长率与喂食周期之间存在显著直线回归关系,其回归方程式为y=-0.468 2x+10.574(R2=0.998 8)。