酸水解HPLC测定桑叶中槲皮素及山柰酚含量

目的建立桑叶中水解黄酮苷元(槲皮素、山柰酚)的含量测定方法,并考察湖州地区不同品种、不同采摘时间、不同种植基地桑叶中上述成分的含量差异。方法粉碎的桑叶样品经甲醇-盐酸混合溶液提取水解后,用反相高效液相色谱法,以ZorbaxSBC18为分离柱,甲醇-0.2%磷酸(55∶45)为流动相,流速1.0mL·min-1,检测波长370nm。结果经方法学验证,本方法各项指标均符合中药成分含量测定要求;不同品种、不同种植基地、不同采集时间桑叶中上述2种成分含量均有较大变化;同一基地、同一品种,冬桑叶中上述2成分的含量明显高于其他季节采集的桑叶。结论水解后经HPLC测定桑叶中槲皮素、山柰酚含量方法可用于桑叶药材质量控制。桑叶中水解槲皮素及山柰酚含量受多种因素影响。     

酸水解提取HPLC法测定不同来源莲须中槲皮素和山柰酚的含量

目的:研究莲须的酸水解提取条件及其水解苷元槲皮素和山柰酚的HPLC含量测定方法,并分析不同来源莲须中上述成分的含量差异。方法:莲须样品经体积分数为25%的盐酸-甲醇溶液(1∶4)水解提取后,采用高效液相色谱法测定其水解液中槲皮素和山柰酚的含量。色谱柱为Thermo Scientific Syncronis C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.012 5%磷酸溶液(60∶40),等度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长370 nm,柱温30℃。结果:方法学考察结果表明,槲皮素和山柰酚进样量分别在0.013 99~0.279 8μg(r=0.999 9)和0.028 70~0.574 2μg(r=0.999 9)范围内与其对应的峰面积线性关系良好;它们的低、中、高3个加入水平的平均回收率(n=3)分别为102.4%(RSD=1.9%)和100.1%(RSD=1.7%)、101.2%(RSD=0.87%)和96.0%(RSD=0.18%)、101.8%(RSD=1.7%)和95.5%(RSD=1.6%)。15批不同来源的莲须样品中槲皮素和山柰酚含量差异较大,分别为0.07~0.76 mg·g-1和0.24~2.40 mg·g-1。其中1号样品(福建福州1)中槲皮素和山柰酚的含量最高,而14号样品(福建永春)中槲皮素和山柰酚的含量最低。结论:酸水解提取HPLC法可用于莲须药材中槲皮素和山柰酚含量的测定;15批不同来源莲须的含量测定结果为进一步修订莲须的质量标准提供了实验依据。     

RP-HPLC测定桑叶、桑枝和桑花中槲皮素和山奈酚的含量

目的:建立 HPLC 法测定桑叶及桑枝、桑花中的槲皮素和山奈酚含量。方法:先用甲醇-25%盐酸(4:1)混合液水解桑叶、桑枝及桑花中的黄酮类成分成槲皮素和山奈酚,并采用 HPLE 法测定槲皮素和山奈酚含量。色谱柱 Shim-ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(70:30);流速为1 mL·min~(-1);检测波长为368 nm。结果:槲皮素和山奈酚的线性范围分别为0.025～0.15μg(r=0.9999),0.05～0.3μg(r=0.9998),平均回收率分别为96.2%及95.3%。5月份桑叶中槲皮素和山奈酚含量较高,桑花中山奈酚含量较高,8月桑叶中槲皮素和山奈酚含量较低。结论:此法简单、重现性好,可用于桑叶、桑枝及桑花中槲皮素和山奈酚含量的测定。     

HPLC同时测定雪松不同部位中4个黄酮类化合物的含量

目的 建立同时测定雪松不同部位4个黄酮类化合物(杨梅素、槲皮素、山柰酚和异鼠李素)含量的高效液相色谱法。方法 雪松样品用60%甲醇回流提取,提取液加10%盐酸水解。采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长360 nm,柱温30 ℃。结果 雪松不同部位中杨梅素、槲皮素和异鼠李素浓度都在0.5~10 μg·mL^-1、山柰酚浓度在1~24 μg·mL^-1内呈良好线性关系(r≥0.999 6),加样回收率(n=6)分别为98.9%,100.1%,99.5%和101.7%。雪松各部位中4个黄酮类化合物的含量存在明显差异,其中松针中槲皮素和山柰酚的含量最高分别达0.285 mg·g^-1和1.493 mg·g^-1,小枝中杨梅素和异鼠李素的含量最高分别达0.365 mg·g^-1和0.476 mg·g^-1;雪松不同部位中4个黄酮类化合物含量之和依次为松针>小枝>花序>木质>树皮。结论 该方法简单、快速、高效,可用于雪松不同部位中4个黄酮类化合物的含量测定。     

HPLC比较不同产地生药八角莲中鬼臼类成分含量

目的 比较不同产地的八角莲中鬼臼毒素和4’-去甲鬼臼毒素含量。方法 采用RP-HPLC,色谱柱C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.1 mol·L^-1K₂HPO₄(50∶50),流速1.0 mL·min^-1,检测波长207 nm,柱温25 ℃。结果 鬼臼毒素的线性范围20~400 ng,r=0.999 9,回收率100.4%,RSD=1.2%;4’-去甲鬼臼毒素的线性范围2~20 ng,r=0.999 8,回收率101.6%,RSD=2.5%。结论 该方法准确、可靠、简便,不同地域的生药八角莲中鬼臼类成分含量差异明显。     

响应面法优化乌药叶中槲皮素、山奈酚提取工艺

摘 要 目的：确定乌药叶中槲皮素、山奈酚最佳提取工艺。方法: 在单因素试验的基础上,采用Box Behnken中心组合试验设计和响应面（RSM）分析法,以槲皮素、山奈酚之和为响应值绘制响应面图和等高线图,优选盐酸浓度、水解温度和水解时间的最佳参数。结果: 水解温度对乌药叶槲皮素、山奈酚提取率影响显著;最佳工艺条件为盐酸浓度4.1%,水解温度83℃,水解时间45 min,在此工艺条件下槲皮素含量6.97 mg·g^-1、山奈酚含量2.82 mg·g^-1。对5个产地乌药叶进行提取分析,结果其中台州天台乌药叶槲皮素、山柰酚总量和最高。结论: 利用Box Behnken响应面设计法得到了乌药叶槲皮素、山奈酚优化工艺,该工艺方便可行。     

UPLC测定桑叶中的槲皮素和山柰酚

目的 采用超高效液相色谱法测定桑叶提取物中槲皮素和山柰酚的含量.方法 采用Agilent Ecilipse C18色谱柱(50 mm× 2.1 mm,1.8-Micron),以乙腈-水(含0.1％甲酸)(35∶65)为流动相,流速为0.4 mL· min-1,柱温为25℃,检测波长370 nm,以外标法定量,进样量2.0 μL.结果 槲皮素和山柰酚0.01 ～1.50 mg·mL-1与峰面积的线性关系良好,平均回收率分别为100.11％、101.92％,RSD分别为0.10％、0.16％.结论 该测定方法快速,准确,可用于桑叶提取物中槲皮素和山柰酚的含量测定.     

反相高效液相色谱法测定蒺藜类3种水解黄酮苷元的含量

目的：研究蒺藜、中亚滨藜黄酮类成分的含量情况。方法：采用反相高效液相色谱法,以槲皮素、山柰酚、异鼠李素为对照品,测定蒺藜、中亚滨藜果实等２１个样品中上述３种水解黄酮苷元的含量。色谱柱Ｈｙｐｅｒｓｉｌ－ＯＤＳ,流动相为甲醇－０４％磷酸（３７∶６３）,流速１ｍＬ·ｍｉｎ－１,检测波长３６０ｎｍ。２种浓度槲皮素加样回收率分别为９４０９％、９８３２％,ＲＳＤ分别为１０％、１５％,ｎ＝３。结果：蒺藜中以槲皮素为母核的黄酮类成分含量最高,中亚滨藜中以异鼠李素为母核的含量最高;各个不同部位以叶中黄酮类成分的含量最高,茎次之,果实更次之;不同采集时间蒺藜地上部分黄酮类成分的含量以６月份采集的样品最高。结论：蒺藜中黄酮类成分以６月份采集的地上部分含量最高,且通过比较,主要黄酮类成分的含量是主要皂苷类成分含量的１５倍左右,应对蒺藜中黄酮类成分加以研究利用。中亚滨藜含有较大量以异鼠李素为母核的黄酮类成分,亦值得进行研究开发。     

卧龙沙棘果实中多酚类成分的含量测定

目的 测定卧龙沙棘果实中多酚类成分的含量.方法 采用比色法测定总酚和总黄酮的含量;采用UPLC法测定槲皮素、山柰酚和异鼠李素的含量.结果 5批沙棘果实中总酚、总黄酮、槲皮素、山柰酚、异鼠李素的含量分别为29.80 ～38.80、17.60 ～27.40、0.38 ～2.01、0.17 ～2.00、0.49 ～4.53 mg·g-1.结论 卧龙沙棘果实中多酚类成分的含量较高,值得进一步研究与开发.     

侧柏叶炮制机制初探

摘 要 目的： 建立高效液相色谱法,以杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮为指标对侧柏叶和炮制品进行HPLC含量测定,对比侧柏叶炮制前后成分的变化。方法: 采用烘法、炒法、炒法进行炮制。含测条件,色谱柱为Welch Ultimate LP C18(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水梯度洗脱,检测波长为330 nm,流速为1 ml·min^-1,柱温为35℃;进样量为20 μl。结果: 杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的标准曲线呈良好的线性关系(r≥0.999 0)平均回收率为97.6%～101.1%,RSD≤1.14%(n=6)。侧柏叶中杨梅苷、槲皮苷、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮经炮制后含量均降低,而杨梅素、槲皮素、山柰酚的含量相对升高。结论: 所建立的HPLC法简便易行,可用于侧柏叶和炮制品的含量测定。含测结果表明,炮制过程存在成分转化过程。     

一测多评法测定槐花中3种黄酮类成分的含量

目的建立一测多评法(QAMS)用于测定槐花中芦丁,山柰酚?3?O?芸香糖苷及槲皮素 3种黄酮类成分的含量。方法芦丁作为内标物,计算芦丁与槲皮素和山柰酚 ?3?O?芸香糖苷的相对校正因子,分别采用 QAMS和外标法测定 40批槐花药材中以芦丁,山柰酚 ?3?O?芸香糖苷和槲皮素的含量,比较两种测定方法之间的差异。结果 QAMS与外标法所测得的槐花中芦丁、山柰酚 ?3?O?芸香糖苷和槲皮素的含量分别为(9.98±1.39)%、(10.08±1.38)%,差异无统计学意义(t＝0.324,P＝0.747)。结论 QAMS准确可行,可用于槐花中 3种黄酮类成分测定。     

贫血丸(Ⅱ号)的质量标准研究

目的 采用薄层色谱法鉴别黄芪、当归、何首乌,HPLC测定贫血丸(Ⅱ号)中橙皮苷的含量。方法 采用Inertex C₁₈为色谱柱;流动相为甲醇-水-冰乙酸(35∶65∶1);检测波长为283 nm;柱温为室温;流速为1.0 mL·min^-1。结果 参照中国药典2005年版一部陈皮项下含量限度计算,药品每克含陈皮以橙皮苷(C₂₈H₃₄O₁₅)计,不得少于0.4 mg。结论 采用薄层色谱法和HPLC可以达到控制药品质量。     

高效液相色谱法测定复方银茶方银杏黄酮苷含量

目的用高效液相色谱 紫外检测器法（HPLC UV）测定复方银茶方中银杏黄酮苷的含量。方法复方银茶样品经酸水解回流提取,采用Diamonsil C18 （4.6 mm×250 mm,5 μm）色谱柱,以甲醇 0.4%磷酸溶液（52：48）为流动相,以紫外检测器在370 nm波长下检测。结果复方银茶样品经酸水解得到槲皮素、山奈酚、异鼠李素3种苷元,槲皮素、山奈酚、异鼠李素分别在8.34～83.40 μg•mL 1,5.91～59.10 μg•mL 1,2.425～24.250 μg•mL 1范围内线性关系良好;槲皮素、山奈酚和异鼠李素的平均回收率分别为93.16%,94.25%,95.85%。结论该方法简便、准确、分离效能高,可用于复方银茶方中黄酮苷成分的含量测定。     

高效液相色谱法测定牛黄解毒滴丸中大黄素和大黄酚含量

目的 采用高效液相色谱法测定牛黄解毒滴丸中大黄素和大黄酚含量. 方法色谱柱:Kromasil C₁₈柱(4.6 mm×150 mm,5 μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液(85:15);流速:1 mL•min^-1;紫外检测波长:254 nm;柱温:30 ℃. 结果 大黄素在2.36～37.72 μg•mL^-1范围内线性关系良好,平均回收率分别为99.56%,RSD=1.1%(n＝9);大黄酚在6.41～102.60 μg•mL-1范围内线性关系良好,平均回收率99.89%,RSD=1.8%(n＝9). 结论 该方法简便,准确,可作为牛黄解毒滴丸质量控制的方法.     

HPLC同时测定疗筋涂膜剂中5种大黄成分的含量

目的 建立高效液相色谱法同时测定疗筋涂膜剂中5种成分的含量。方法 采用Hypersil ODS-C₁₈柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm) , 甲醇-0.05％磷酸(85∶15)为流动相,流速：0.8 mL·min^-1,柱温：34 ℃,检测波长：254 nm。结果 芦荟大黄素在9.11～145.76 μg·mL^-1（r=0.999 4）,大黄酸在5.63～90.08 μg·mL^-1（r=0.999 3）,大黄素在5.44～87.04 μg·mL^-1（r=0.999 9）,大黄酚在6.13～98.08 μg·mL^-1(r=0.999 9),大黄素甲醚在2.72～43.52 μg·mL^-1 (r=0.999 8)线性良好;平均回收率分别为97.64%、98.14%、99.52%、99.36%、98.43%;RSD分别为1.29%、1.81%、1.40%、0.59%、1.58%。结论 该方法简便、可靠、准确,可用于疗筋涂膜剂的质量控制。     

HPLC测定复方氨酚烷胺颗粒中人工牛黄的含量

目的 建立复方氨酚烷胺颗粒中人工牛黄含量测定的高相液相色谱法。方法 采用HPLC对人工牛黄中胆红素进行定量测定,采用SHIMADZU C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-氯仿-1%磷酸溶液(80∶14∶6),检测波长为449 nm,流速为1.0 mL·min^-1。结果 胆红素在2.50～17.5 μg·mL^-1内呈良好的线性关系(r =0.999 7),平均回收率为100.4%,RSD为1.3%(n=9),重复性试验RSD为0.15%(n=9)。结论 所建立的方法可准确、快速地进行定量检测,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC测定大鼠海马中谷氨酸、γ-氨基丁酸的含量

目的 建立了邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生高效液相荧光色谱法检测大鼠海马中谷氨酸(GLU)、γ-氨基丁酸(GABA)含量的方法。方法 采用Alltima C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为50 mmol·L^-1乙酸钠(pH 6.8)、甲醇、四氢呋喃梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1。激发波长(λ_Ex)338 nm,发射波长(λ_Em)425 nm。结果 GLU、GABA线性范围分别为1.03~20.6 μg·mL^-1(r=0.999 2)和1.13~22.6 μg·mL^-1(r=0.999 7);当信噪比为3时,GLU和GABA的检出限分别为5.27×10^-4μg·mL^-1和7.35×10^-4 μg·mL^-1;测得精密度RSD分别为3.4%和3.5%;加样回收率分别为90%~96%,85%~91%。结论 本方法简便、准确、灵敏,特异性强,重复性好,适用于海马中GLU和GABA的含量测定。     

桂花不同溶剂提取物对氧自由基清除作用的ESR研究

目的 研究桂花不同提取物对氧自由基的清除作用。方法 利用不同极性溶剂(水、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇)浸提桂花粉后得到不同极性的提取物。通过电子自旋共振(ESR)和自旋捕集技术,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH)及核黄素光照条件下产生超氧阴离子O₂^-自由基体系,检测桂花中各组分清除DPPH自由基及O₂^-的能力。结果 以维生素C为对照,桂花水提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及维生素C清除DPPH自由基能力IC₅₀分别为59.63,53.93,28.33,38.89,40.93 μg·mL^-1;各提取物及维生素C对超氧阴离子O₂^-自由基清除能力IC50分别为63.37,55.47,30.20,48.36,41.52 μg·mL^-1。其中各提取物的乙酸乙酯提取物的DPPH及O₂^-清除率最大。结论 通过比较各组分对DPPH自由基及超氧阴离子自由基的清除能力,了解桂花中抗氧化成分在各相中的分布情况,并据此进行有目的的分离桂花中的抗氧化成分。     

HPLC测定维生素E乳膏中维生素 E的含量

目的 建立测定维生素E乳膏中维生素E含量的方法。方法 采用ODS-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),甲醇为流动相,流速1 mL·min^-1,检测波长：285 nm。结果 维生素E在浓度0.100 4~1.004 mg·mL^-1内与峰面积具有良好的线性关系,平均回收率为99.09%,RSD=0.66%。结论 本法简便、快速、准确。     

HPLC测定人血浆中霉酚酸及其代谢物浓度

目的 建立反相高效液相色谱法,同时测定人血浆中霉酚酸(mycophenolic acid, MPA)、酚化葡萄糖醛麦考酚酸(phenol glucuronide metabolite, MPAG)、酰基化MPAG(acyl-MPAG, AcMPAG)的浓度。方法 用蛋白沉淀法对样品进行处理。固定相为Zorbax Eclipse XDB C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,5 mm),流动相：甲醇: 20 mmol×L^-1 NaH₂PO₄(用20%磷酸调至pH 3.0)为55∶45,流速：1.2 mL×min^-1,检测波长：304 nm,柱温：45 ℃。结果 MPA、MPAG、AcMPAG浓度在0.2~50 mg×mL^-1(r=0.999 7)、2.8~531 mg×mL^-1(r=0.999 9)、0.3~24 mg×mL^-1( r=0.999 4)内呈良好的线性关系。MPA及其代谢物的绝对回收率均大于80%,MPA、MPAG、AcMPAG的相对回收率分别为94.0%~101.4%,98.4%~101.9%和96.1%~104.2%。日内及日间RSD远低于15%。结论 采用反相高效液相色谱法测定人血浆中MPA、MPAG、AcMPAG的浓度和进行药物代谢动力学研究,方法灵敏度高、重复性强