临床常见念珠菌对四种抗真菌药物体外敏感性研究

目的：了解临床常见致病念珠菌对4种抗真菌药物的敏感性情况，旨在为临床治疗此类菌株引起的感染提供实验依据。方法：采用美国国家临床实验室标准化委员会推荐的微量肉汤稀释法(NCCLS M27-A2)，测定从临床血液、痰液和尿液等标本中分离的226株常见念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B和氟胞嘧啶的最低抑菌浓度(MIC)。结果：226株受试菌对氟胞嘧啶100％敏感，MIC90为≤0．125-0．5μg／ml；168株白色念珠菌对氟康唑、伊曲康唑和两性霉素B的MIC90分别为32μg／ml、1μg／ml和1μg／ml，敏感率分别为90．5％(S88．1％ SDD2．4％)、92．3％(S87．5％ SDD4．8％)和91．7％；31株热带念珠菌对氟康唑、伊曲康唑和两性霉素B敏感率分别为96．8％(S93．6％ SDD3．2％)、93．5％(S83．9％ SDD9．6％)和100％；16株近平滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑和两性霉素B均敏感；11株光滑念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的敏感率分别为81．8％(S18．2％ SDD63．6％)和72．8％(S36．4％ SDD36．4％)，而对两性霉素B100％敏感。在白色念珠菌、热带念珠菌和光滑念珠菌中有3．2％～27．2％菌株对氟康唑和伊曲康唑等唑类药物耐药。结论：临床常见致病念珠菌对氟胞嘧啶和两性霉素B的敏感性最高，对唑类药物存在不同程度耐药。     

检测常见酵母菌耐药性的纸片法和微量稀释法比较

目的用纸片法和微量稀释法检测痰液标本分离酵母菌的耐药性并比较两者符合率,试找出一种适用于临床实验室的简便方法。方法采用丹麦ROSCO公司抗真菌药敏纸片法检测痰液标本分离的86株常见酵母菌对5种抗真菌药物的敏感性,同时用法国生物梅里埃公司ATBFUNGUS2念珠菌药敏板条测定4种抗真菌药物的最小抑菌浓度,对结果进行分析。结果两性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑2种方法完全符合率分别为95．3％、95．3％和88．4％,未出现一种方法敏感而另一种方法耐药的严重错误现象;对86株痰液标本分离常见酵母菌的耐药性进行分析,两性霉素B、制霉菌素和氟胞嘧啶的敏感率高,分别为95．4％、98．8％、95．3％,伊曲康唑的耐药率最高（15．1％）。结论纸片法和微量稀释法相比有很好的一致性,且抗真菌药敏纸片种类多,便于随时根据临床所需增加单个药敏结果,易于在各临床实验室开展。酵母菌唑类抗真菌药物的耐药现象日益严重,应加强酵母菌的耐药性监测。     

281株临床分离念珠菌的药敏结果分析

目的 对临床送检标本分离鉴定出的念珠菌进行细菌构成及药敏结果分析,促进临床合理使用抗真菌药物.方法 对2009年1月至2010年12月临床送检标本进行 5种常用抗真菌药(5-氟胞嘧啶、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B)的体外敏感性检测及耐药分析.结果 281株念珠菌中白色念珠菌184株,占65.5%,其次是光滑念珠菌50株(17.8%),热带念珠菌19株(6.8%).结论 该院患者念珠菌感染以白色念珠菌为主,药敏结果显示两性霉素B、5-氟胞嘧啶、伏立康唑、氟康唑、伊曲康唑敏感性高,对送检标本及时进行真菌培养和药敏试验,可及时、合理地使用抗真菌药物,减少多重耐药和深部真菌感染的发生.     

检测常见酵母菌耐药性的纸片法和微量稀释法比较

目的用纸片法和微量稀释法检测痰液标本分离酵母菌的耐药性并比较两者符合率,试找出一种适用于临床实验室的简便方法。方法采用丹麦ROSCO公司抗真菌药敏纸片法检测痰液标本分离的86株常见酵母菌对5种抗真菌药物的敏感性,同时用法国生物梅里埃公司ATB FUNGUS 2念珠菌药敏板条测定4种抗真菌药物的最小抑菌浓度,对结果进行分析。结果两性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑2种方法完全符合率分别为95.3%、95.3%和88.4%,未出现一种方法敏感而另一种方法耐药的严重错误现象;对86株痰液标本分离常见酵母菌的耐药性进行分析,两性霉素B、制霉菌素和氟胞嘧啶的敏感率高,分别为95.4%、98.8%、95.3%,伊曲康唑的耐药率最高(15.1%)。结论纸片法和微量稀释法相比有很好的一致性,且抗真菌药敏纸片种类多,便于随时根据临床所需增加单个药敏结果,易于在各临床实验室开展。酵母菌唑类抗真菌药物的耐药现象日益严重,应加强酵母菌的耐药性监测。     

评价3种方法检测酵母样真菌对氟康唑敏感性

目的评价3种抗真菌药敏试验检测酵母样真菌对氟康唑敏感性的临床应用研究。方法采用3种方法，即NC—CLS推荐的纸片扩散法、ROSCO纸片扩散法和微量肉汤稀释法（ATBFUNGUS2，法国生物梅里埃），检测107株酵母样真菌对氟康唑的敏感性。结果NCCLS推荐的纸片扩散法与丹麦ROSCO纸片扩散法、ATB FUNGUS2符合程度分别为94．4％、91．6％，均无一种方法敏感或耐药而其他2种方法为耐药或敏感的严重误差。结论ROSCO纸片扩散法和ATBFUN—GUS2对氟康唑的检测结果与NCCLS推荐的纸片扩散法相比符合率好，准确率高，监测的抗真菌药物种类多，更适合在临床中推广应用。     

临床分离念珠菌对5种常用抗真菌药物的体外敏感试验结果分析

目的了解临床分离的念珠菌对氟康唑、两性霉素B、氟胞嘧啶、伊曲康唑及酮康唑体外敏感性.方法采用Sensititre YeastOne试验板以微量稀释法测定上述5种抗真菌药物对临床分离的108株念珠菌最低抑菌浓度(MIC).结果 108株念珠菌中达到氟康唑、伊曲康唑、氟胞嘧啶耐药标准的分别有8株(7.4%)、15株(13.9%)、2株(1.9%),念珠菌属MIC值分布种间差异较大.白色念珠菌对5种药物的MIC90值最低,60株白色念珠菌中仅2株耐氟康唑,3株耐伊曲康唑,对氟胞嘧啶无耐药株;光滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、酮康唑的MIC值分布呈高值,10株光滑念珠菌中4株耐氟康唑,3株剂量依赖性敏感,7株耐伊曲康唑,且吡咯类之间有交叉耐药.其他菌株,除季也蒙念珠菌对伊曲康唑有一定的耐药(2/6)外,对5种抗真菌药物的MIC分布均较低.结论不同念珠菌对常用抗真菌药物敏感性存在差异,准确分离鉴定和药敏试验,对于指导临床合理选药有重要意义.     

评价3种体外敏感试验方法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑的敏感性

目的 评价3种实验室常用念珠菌体外药敏试验方法在测定氟康唑和伏立康唑对念珠菌的体外活性上的可靠性及实用性.方法 应用美国临床实验室标准化委员会微量肉汤稀释法(NCCLS M27-A2),NCCLS念珠菌纸片扩散法(M44-A),丹麦ROSCO纸片扩散法、法国生物梅里埃公司ATBFUNGUS3药敏试验板条法检测氟康唑和伏立康唑对85株临床分离念珠菌及2株质控菌株的体外抗菌活性.采用SPSS 13.0软件分析结果,比较3种实验室常用药敏试验方法与NCCLS M27-A2微量肉汤稀释法的相关性.结果 3种体外药敏试验方法所得结果分别与M27-A2肉汤微量稀释法进行比较,氟康唑药敏试验结果比对,NCCLS M44-A纸片扩散法一致率为83.5%,ROSCO纸片扩散法一致率为76.4%,ATB FUNGUS 3药敏试验板条法一致率为72.9%;伏立康唑药敏试验结果比对,3种药敏试验方法一致率均为85.9%.结论 在检测氟康唑和伏立康唑对常见念珠菌体外抗菌活性的3种方法所得结果与肉汤稀释法存在一定的差异.对部分菌株(尤其是剂量依赖敏感株)需要进一步应用M27-A2肉汤微量稀释法确定其MIC值.各种体外药敏试验结果与临床体内疗效还需进一步研究.     

医院分离的深部感染真菌药敏试验分析

目的通过对深部真菌感染患者体内分离的念珠菌进行体外药敏试验,探讨5-氟胞嘧啶、两性霉素B、制霉菌素、咪康唑、益康唑、伊曲康唑、氟康唑对念珠菌的体外抗菌活性,从而为临床用药提供依据。方法采用浓度梯度法测试7种抗真菌药物对荆州市中医院微生物室近两年内从临床送检标本中分离、鉴定的146株真菌药敏试验结果。结果 5-氟胞嘧啶33株敏感;两性霉素B139株敏感、7株中介;制霉菌素146株均敏感;咪康唑73株敏感;益康唑113株敏感、33株中介;伊曲康唑27株敏感、33株中介;氟康唑46株敏感、20株中介。结论 7种抗真菌药物中5-氟胞嘧啶、伊曲康唑、氟康唑敏感株显著减少,实验室应积极开展对真菌的药敏试验以指导临床正确有效地抗真菌治疗。     

临床分离念珠菌对5种常用抗真菌药物的体外敏感试验结果分析

目的　了解临床分离的念珠菌对氟康唑、两性霉素B、氟胞嘧啶、伊曲康唑及酮康唑体外敏感性。方法　采用SensititreYeastOne试验板以微量稀释法测定上述 5种抗真菌药物对临床分离的 10 8株念珠菌最低抑菌浓度 (MIC)。结果　 10 8株念珠菌中达到氟康唑、伊曲康唑、氟胞嘧啶耐药标准的分别有 8株 (7.4%)、15株(13.9%)、2株 (1.9%) ,念珠菌属MIC值分布种间差异较大。白色念珠菌对 5种药物的MIC90 值最低 ,6 0株白色念珠菌中仅 2株耐氟康唑 ,3株耐伊曲康唑 ,对氟胞嘧啶无耐药株 ;光滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑、酮康唑的MIC值分布呈高值 ,10株光滑念珠菌中 4株耐氟康唑 ,3株剂量依赖性敏感 ,7株耐伊曲康唑 ,且吡咯类之间有交叉耐药。其他菌株 ,除季也蒙念珠菌对伊曲康唑有一定的耐药 (2 /6 )外 ,对 5种抗真菌药物的MIC分布均较低。结论　不同念珠菌对常用抗真菌药物敏感性存在差异 ,准确分离鉴定和药敏试验 ,对于指导临床合理选药有重要意义。     

念珠菌感染的菌种分布及耐药性监测

目的了解本地区2004年~2005年念珠菌感染的菌种分布和耐药性情况。方法收集本地区数家医疗机构两年间临床分离的念珠菌1037株,采用科玛嘉显色培养基及梅里埃API 20C AUX方法进行念珠菌菌种的分离鉴定,药敏试验采用NCCLS推荐的M44-P方案检测念珠菌对氟康唑和沃尔康唑耐药性,对伊曲康唑、酮康唑、5-氟胞嘧啶和两性霉素B的敏感性采用ROSCOS药片法。结果1037株念珠菌中以白色念珠菌为主,检出583株(56.3%),其他依次为热带念珠菌243株(23.6%),光滑念珠菌75株(7.2%),近平滑念珠菌43株(4.2%)葡萄牙念珠菌31株(2.9%)克柔念珠菌29株(2.7%),其他念珠菌32株(3,1%)。念珠菌对伊曲康唑、酮康唑、氟康唑、5-氟胞嘧啶和两性霉素B的耐药率分别为26.5%、22.5%、10.7%、2.5%和1.0%。结论本地区念珠菌感染以白念珠菌为主,对伊曲康唑、酮康唑和氟康唑耐药性较高,对5-氟胞嘧啶和两性霉素B敏感性较高。     

住院患者下呼吸道374株念珠菌鉴定及对抗真菌药物的耐药性

目的分析患者下呼吸道念珠菌属分布及药敏特点,为指导临床用药提供理论依据。方法采用科玛嘉显色培养基对分离的374株念珠菌进行菌种鉴定,并用ATBFUNGUS 2INT进行真菌药敏试验。结果念珠菌属中白色念珠菌仍是最常见的,光滑念珠菌居第2位占14．4％;白色念珠菌对氟康唑及伊曲康唑的耐药率均较前提高;光滑念珠菌对氟康唑及伊曲康唑的敏感率较低,仅为29．6％;克柔念珠菌天生对氟康唑耐药。两性霉素B及氟胞嘧啶对念珠菌的敏感率较高分别为99．6％,98．0％。结论念珠菌属对抗真菌药物的敏感性下降,应加强念珠菌的检测和敏感性分析。     

医院常见酵母样真菌的耐药特点分析

目的了解酵母样真菌对常用抗真菌药物的耐药情况，便于指导临床合理用药。方法真菌培养采用常规方法，采用念珠菌显色培养基进行鉴定，药敏使用微量液体培养基稀释法。结果115株酵母样真菌中，白色假丝酵母菌49株，占42．6％；光滑假丝酵母菌16株，占13．9％；近平滑假丝酵母菌16株，占13．9％；热带假丝酵母菌12株，占10．4％；克柔假丝酵母菌11株，占9．6％；季也蒙假丝酵母菌8株，占6．9％。酵母样真菌对两性霉素B、5-氟胞嘧啶、制霉菌素、咪康唑、伊曲康唑、氟康唑和酮康唑的耐药率分别为3．5％、1．7％、13．0％、25．2％、23．5％、26．1％和22．6％。结论院内酵母样真菌感染以白色假丝酵母菌最为多见，氟康唑耐药性较其他药物高。应重视真菌的检测工作，根据分离株的耐药特点采用不同治疗方案。     

In vitro susceptibility of Cryptococcus neoformans isolates to five antifungal drugs using a colorimetric system and the reference microbroth method

Minimum inhibitory concentrations (MICs) of amphotericin B, 5-flucytosine, fluconazole, itraconazole and ketoconazole were determined against 42 clinical isolates of Cryptococcus neoformans var. neoformans using the Alamar YeastOne colorimetric method and the NCCLS reference microdilution method. No strains with resistance to amphotericin B, itraconazole or ketoconazole were detected with either method. Using the reference method, the MICs of fluconazole were >/= 64 mg/L, whereas using the colorimetric method all MICs were >/=16 mg/L. The MIC values of 5-flucytosine were also higher using the reference method (8-16 mg/L for 32% of isolates) compared with the colorimetric method. The percentage of agreement between the methods, using a difference of two dilutions, was 70.7% for itraconazole, 73.2% for amphotericin B, 80% for fluconazole, 88% for 5-flucytosine and 95% for ketoconazole. Overall, we conclude that for fluconazole and 5-flucytosine, in a low but not insignificant number of isolates, results with the two methods are discordant, some isolates being found sensitive with the colorimetric test, but resistant with the reference method.     

纸片法在检测念珠菌药物敏感性中的应用

目的探讨纸片法在临床念珠菌药敏检测中的应用价值。方法采用法国科玛嘉念珠菌显色培养基和生物梅里埃公司Vitec 32进行念珠菌菌种鉴定,用纸片法进行药物敏感性测定。结果临床感染念珠菌菌种分别为白色念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、克柔假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌和急落假丝酵母菌,对两性霉素B、酮康唑、氟康唑、伊曲康唑和氟胞嘧啶5种抗霉菌药,上述念珠菌的耐药率分别为:白色念珠菌:0、0、0、0、1.8%,光滑念珠菌和热带念珠菌均无耐药菌株,克柔假丝酵母菌:33.3%、33.3%、66.7%、33.3%和66.7%,近平滑假丝酵母菌无耐药菌株,皱落假丝酵母菌:100%、0、0、0、0。结论显色培养基鉴定念珠菌具有快速、准确的优点,纸片法具有操作简单、成本较低、结果可靠的优点,在临床念珠菌的鉴定和药敏试验中具有良好的应用前景。     

Protective effect of trovafloxacin, ciprofloxacin and ampicillin against Streptococcus pneumoniae in a murine sepsis model

The Etest strip is a promising tool of broad application in clinical microbiology. The method provides MIC readings and is easier to perform than broth microdilution. We carried out a study to compare the MICs of fluconazole and itraconazole obtained by the Etest with those obtained by broth microdilution, performed according to the guidelines of the NCCLS document M27-A, with 402 clinical isolates (360 Candida albicans, 17 Candida tropicalis, nine Candida krusei, nine Candida glabrata and seven Candida parapsilosis) and seven control isolates. The agreement between MICs by the two methods (at +/- 2 dilutions) was 74.5% for fluconazole and 61.4% for itraconazole. These results suggest that further development is necessary to standardize the medium and incubation conditions before introduction of the Etest as a routine method in the clinical microbiology laboratory for fluconazole and itraconazole susceptibility testing.     

氟康唑体外抗菌活性及五种体外敏感试验方法的比较

目的 对比研究五种酵母菌体外药敏试验方法在测定氟康唑对酵母菌的体外活性检测上的可靠性及实用性。方法 分别应用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）M27-A常量肉汤稀释法、微量肉汤稀释法，NCCLS及ROSCO纸片扩散法、浓度梯度法测定氟康唑对155株临床分离的酵母菌及4株质控菌株的体外活性。采用WHONET-5软件及SPSS软件对结果进行分析，比较各种药敏试验方法与M27-A常量肉汤稀释法的相关性。结果 4种体外药敏试验方法所得结果分别同M27-A常量肉汤稀释法进行比较，浓度梯度法一致率为83．9％，NCCLSM44-P纸片扩散法一致率83．1％，ROSCO纸片扩散法一致率为78．1％，微量肉汤稀释法一致率为93．5％。结论 5种酵母菌体外药敏试验方法在检测氟康唑对临床常见酵母菌的体外活性检测上存在一定的差异，本次试验结果表明，微量肉汤稀释法与NCCLSM27-A常量肉汤稀释法的一致性最佳，其方法结果准确可靠、重复件好．活用于常规下作。     

Flow cytometry antifungal susceptibility testing of pathogenic yeasts other than Candida albicans and comparison with the NCCLS broth microdilution test

Candida species other than Candida albicans frequently cause nosocomial infections in immunocompromised patients. Some of these pathogens have either variable susceptibility patterns or intrinsic resistance against common azoles. The availability of a rapid and reproducible susceptibility-testing method is likely to help in the selection of an appropriate regimen for therapy. A flow cytometry (FC) method was used in the present study for susceptibility testing of Candida glabrata, Candida guilliermondii, Candida krusei, Candida lusitaniae, Candida parapsilosis, Candida tropicalis, and Cryptococcus neoformans based on accumulation of the DNA binding dye propidium iodide (PI). The results were compared with MIC results obtained for amphotericin B and fluconazole using the NCCLS broth microdilution method (M27-A). For FC, the yeast inoculum was prepared spectrophotometrically, the drugs were diluted in either RPMI 1640 or yeast nitrogen base containing 1% dextrose, and yeast samples and drug dilutions were incubated with amphotericin B and fluconazole, respectively, for 4 to 6 h. Sodium deoxycholate and PI were added at the end of incubation, and fluorescence was measured with a FACScan flow cytometer (Becton Dickinson). The lowest drug concentration that showed a 50% increase in mean channel fluorescence compared to that of the growth control was designated the MIC. All tests were repeated once. The MICs obtained by FC for all yeast isolates except C. lusitaniae were in very good agreement (within 1 dilution) of the results of the NCCLS broth microdilution method. Paired t test values were not statistically significant (P = 0.377 for amphotericin B; P = 0.383 for fluconazole). Exceptionally, C. lusitaniae isolates showed higher MICs (2 dilutions or more) than in the corresponding NCCLS broth microdilution method for amphotericin B. Overall, FC antifungal susceptibility testing provided rapid, reproducible results that were statistically comparable to those obtained with the NCCLS method.     

改良纸片扩散法检测172株酵母菌对氟康唑的敏感性

目的 研究氟康唑对172株酵母菌的体外抗菌活性。方法 酵母菌收集自2004年4月至2004年10月从住院患者采集的标本。采用NCCLS建议的改良纸片扩散法敏感试验，并以标准菌株做质量控制。结果 白念珠菌最常见，有110株，占64．0％；光滑念珠菌31株，占18．0％；热带念珠菌20株，占11．6％；克柔念珠菌3株，占1．8％；其他8株，占4．6％。白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌对氟康唑的敏感率为92．3％～100％。结论 氟康唑对白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和克柔念珠菌有较好的抗菌活性。