抗乙型肝炎病毒核心抗原抗体免疫球蛋白M诊断试剂区分急慢性乙型肝炎患者方法的初步探讨

目的调整抗乙型肝炎(乙肝)病毒核心抗原抗体免疫球蛋白M(Immunoglobulin M Antibody to Hepatitis B Virus Core Antigen,Anti-HBc-Ig M)诊断试剂临界值,使该指标能够区分急性乙肝(Acute Hepatitis B,AHB)和慢性乙肝(Chronic Hepatitis B,CHB)急性期患者。方法选择A公司国产和美国雅培(Abbott)公司Anti-HBc-Ig M检测试剂,平行检测2658份疑似AHB患者血清标本。利用R语言程序软件(R Programming Software,R)的VGAM程序包,通过最大似然法求得各自的分布参数和估计的阳性率,采用最大似然法、最大准确率法和固定特异度法,以及试剂说明书提供方法求得两种检测试剂的临界值、估计阳性率、灵敏度及特异度指标进行比较。结果采用最大似然法确定临界值,临界值调整前后A公司试剂阳性率为51.58%、12.23%,雅培试剂为28.37%、10.27%。两种试剂受试者工作特征曲线(Receiver Operating Characteristics Curve,ROC)的曲线下面积(Area Under Curve,AUC)均接近于1,都有较高的灵敏度和特异度。最大似然法、最大准确率法和固定特异度法与试剂说明书参考值比较,前三种方法得到的阳性率较为接近,灵敏度、特异度较高,试剂说明书参考值法,灵敏度均较低,假阳性率过高。结论本研究中调整Anti-HBc-Ig M检测试剂临界值的方法,可以使Anti-HBc-Ig M区分AHB和CHB急性期患者的能力更可靠。     

五种国产酶免疫测定法乙型肝炎病毒表面抗原检测试剂的评价

目的为全国人群乙型病毒性肝炎（乙肝）血清流行病学调查,筛选适宜的乙肝病毒表面抗原（Hepatitis B Virus Surface Antigen,HBsAg）检测试剂。方法选择符合国家质量标准,且在全国销量最大的五种（A、B、C、D、E）酶免疫测定法HBsAg检测试剂,平行检测由63份阳性和90份阴性品组成的参比系统各5次,将每个检测的s/n值做log（s/n＋1）转换,计算并比较各试剂的可靠性指标组内相关系数（Intraclass Correlation Coefficient,ICC）、变异系数（Coefficient of Variability,CV）和真实性指标受试者工作特征（Receiver Operating Characteristic,ROC）曲线下面积（Area Under Curve,AUC）、部分（partial）ROC AUC（pAUC）、固定特异度下灵敏度[Sensitivity at a Fixed Specificity,Se（FPR=e）]等。结果五种试剂ICC、CV从优到劣的排位顺序均为E、C、D、B、A,且差异有统计学意义（Bootstrap法,P〈0.05）;五种试剂的AUC均在0.965～0.987,pAUC最大的试剂E、B明显高于最小的试剂A、D（Bootstrap法,P〈0.05）;Se（FPR=e）最高的试剂E明显高于试剂C（Bootstrap法,P〈0.05）。结论五种试剂均有较强的诊断能力,其中试剂E为最佳。     

国产甲型肝炎病毒总抗体检测试剂的评价

目的比较国内常用抗甲型肝炎(甲肝)病毒总抗体(Total Antibody to Hepatitis A Virus,Anti-HAV)酶免疫测定(Enzyme Immunoassay,EIA)试剂的性能,为甲肝血清流行病学调查试剂的选择提供参考。方法以雅培(Abbott)HAVAb2.0试剂的检测结果作为金标准,确定参比系统的总Anti-HAV含量。用A、B两种国产总Anti-HAVEIA试剂,平行检测参比系统8遍,记录CO/S值并作ln(CO/S+0.1)转换,通过广义线性化估计方程(Generalized Estimating Equation,GEE)模型估计各次测试样本的阳性概率,计算比较两种试剂的可靠性指标和真实性指标:组内相关系数(Intraclass Correlation Coefficient,ICC)、变异系数(Coefficient of Variability,CV)和全部受试者工作特征(Receive Operation Characteristic,ROC)曲线下面积和部分ROC曲线下面积,以及固定特异度下的灵敏度[Sensitivityata Particular False-Positive-Rate(1-Specificity),Se(FPR=e)],对比阐明两者之优劣。结果 A试剂的ICC和CV分别为0.9971和5.7840%,B试剂的为0.9952和6.2931%(Bootstrap法,P<0.05);A试剂的ROC曲线下面积(Areaunder Curve,AUC)和部分(Partial)ROC曲线(特异度为0.9～1)下面积(pAUC)分别为0.9557和0.0717,B试制的为0.9404和0.0663(Bootstrap法,P<0.05);在特异度为0.920～0.970时,间隔0.005计算的Se(FPR=e),在特异度为0.945、0.950、0.955、0.960几个观察点时,A试剂的灵敏度>B试剂(Bootstrap法,P<0.05);而在特异度为其他观察点时,对应灵敏度的差异尚无统计学意义(Bootstrap法,P>0.05)。结论 A、B两种试剂均表现出良好的诊断能力,虽然某些指标的差异有统计学意义,但差异有无实际意义,值得进一步探讨。在实际应用时,可根据具体情况进行选择。     

尿标本中乙型肝炎病毒抗原抗体的测定

尿标本中乙型肝炎病毒抗原抗体的测定郭凤鸣，杨永学，张欣松，杜英，孔一慧，刘江莹（８１１５６部队医院防疫所）检测血清中ＨＢｓＡｇ、抗－ＤＨＢＳ、ＨＢｅ一Ａｇ、抗一ＨＢｅ、抗一ＨＢｃＩｇＧ、抗一ＨＢｃＩｇＭ（以下简称乙肝六项）已做为诊断乙型肝炎的常规方法...     

乙型肝炎病毒前S1S2抗原、抗体的检测及临床意义

为探讨乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ１Ｓ２抗原、抗体与其它ＨＢＶ标志物以及单纯转氨酶（ＡＬＴ）增高的关系,取９６份乙肝患者血清,９６份慢性肝炎ＬＡＴ增高患者血清,彩用ＥＬＩＳＡ法检测前Ｓ１Ｓ２抗原、抗体。前Ｓ１Ｓ２抗原与ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｓＡｇ呈正相关,符合率８３３％、７８６％、５６２％,是ＨＢＶ感染的标志。前Ｓ１Ｓ２抗体与ＨＢＶＤＮＡ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｓＡｇ呈负相关,与ＨＢｓＡｂ呈正相关,符合率为７５％,是ＨＢＶ清除的标志。在ＡＬＴ增高慢性肝炎中前Ｓ１Ｓ２抗原、抗体检出率４２％、３１％,提示前Ｓ１Ｓ２抗原、抗体系统是ＨＢＶ的重要标志物,可做为“二对半”的补充实验。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测对缩短抗体检测窗口期作用的研究

目的探讨HCV Core Ag缩短Ab检测窗口期的作用。方法通过询问病史筛选存在丙肝危险因素人群35例,通过cAg、Ab检测结果研究缩短窗口期情况。结果 HCV cAg早期辅助临床诊断丙肝比Ab检测(2011年前)方法缩短约36.5天,Ab检测(2011年后)方法缩短约33.7天。结论 HCV Core Ag实验可有效缩短窗口期,为临床提供可信结果。     

乙型肝炎病毒前S2抗原抗体的表达及其与HBV血清标志物的关系

目的 进一步探讨乙型肝炎病毒前S2抗原抗体的临床意义及其与HBV血清标志物的关系.方法 用ELISA法与荧光PCR法检测HBV前S2抗原抗体、HBVM及HBVDNA含量.结果 HBeAg（＋）与HBeAg（-）组HBV前S2抗原阳性率分别为80.9%和31.9%,差异有非常显著性;HBsAg（＋）与HBsAg（-）组HBV前S2抗体阳性率分别为18.8%和65.6%,差异有非常显著性;S2抗原与HBVDNA的复制和含量关系密切;S2抗原在急慢性乙肝中的阴转率差异有非常显著性.结论 HBV前S2抗原与HBeAg及HBVDNA可同时作为HBV存在和复制的标志,前S2抗体可作为HBV被清除和病情好转的指标之一,前S2抗原持续阳性则与乙肝慢性化关系密切.     

乙型肝炎病毒核心抗体单项阳性及健康的成年人乙肝疫苗免疫效果配对比较研究

目的：探讨单项乙型肝炎（乙肝）病毒核心抗体（抗-HBc）阳性成年人接种乙肝疫苗（HepB）的免疫效果。方法筛选出HBsAg、抗-HBs阴性及抗-HBc阳性,既往无HepB免疫史的18～49岁者组成抗-HBc单项阳性组（单阳组）,并按1∶1匹配原则选择对照组。依照“0-1-6”免疫程序对单阳组和对照组接种HepB,对两组无应答者再次按该免疫程序接种HepB,比较两组人群抗-HBs阳转率及其滴度。结果两组人群共调查228对。对照组和单阳组初次免疫抗体阳转率分别为91.23%和91.67%,差异无统计学意义（χ2＝0.00,P＞0.05）。对照组无应答率、低应答率、正常应答率和高应答率分别为8.77%、11.84%、31.14%和48.25%,单阳组分别为8.33%、30.70%、35.96%和25.00%,对照组低应答率低于单阳组（χ2＝22.28,P＜0.01）,高应答率高于单阳组（χ2＝24.43,P＜0.01）。初次免疫后对照组抗-HBs几何平均浓度（534.07 mIU/ml）高于单阳组（183.99 mIU/ml）,差异有统计学意义（u＝4.42,P＜0.01）;再次免疫1针后,对照组应答率（82.35%）高于单阳组（41.18%）（P＜0.05）,再免疫3针后两组应答率分别达到90.00%和82.35%（P＝1.00）。结论抗-HBc单阳者HepB初次免疫可获得较好的免疫应答,但低于一般人群;初次免疫无应答的抗-HBc单阳者3剂次再免疫可获得较高阳转率。     

丙型肝炎病毒抗体阴性献血人群中丙型肝炎病毒核心抗原检测的研究

目的观察丙型肝炎病毒(HCV)抗体阴性献血人群HCV核心抗原的流行情况,初步评估经HCV抗体检测后输血传播HCV的潜在风险. 方法 抗HCV抗体和HCV核心抗原检测采用ELISA试剂盒,丙氨酸氨基转移酶检测采用速率法,HCV RNA检测采用实时荧光PCR检测试剂盒. 结果在抗HCV检测阴性的1 758份无偿献血者标本中,HCV核心抗原检测有3份阳性,阳性率为0.17%;HCV核心抗原阳性的3份样本HCV RNA检测为阴性. 结论结果提示抗HCV检测后,经血液传播HCV的潜在风险已经很低.     

新生儿血清乙型肝炎病毒表面抗体与e抗原同时阳性的分析

乙型肝炎病毒是血液传播性疾病,主要经血、母婴及性接触传播.现将一例母婴传播HBV,致使新生儿出现HBV标志物的特殊模式,即乙型肝炎病毒表面抗体与e抗原同时阳性,报道如下. 1资料与方法 1.1一般资料孕妇,26岁系乙型肝炎患者,乙型肝炎病毒标志物的模式是大三阳,HBV-DNA呈阳性,含量为4.75×106拷贝/ml. 1.2方法与仪器 乙型肝炎五项标志物采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法,所有操作步骤均严格按操作规程操作.     

胶体金法与酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体的比较

目的结合临床实践经验,开展胶体金法与酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体的比较研究。方法选取本站美沙酮维持治疗中心接受药物治疗的吸毒患者611例为研究对象,采用试验研究方法,常规采集吸毒人员的静脉血,离心取血清备用。采用英科新创(厦门)科技有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(胶体金法)和北京万泰生物药业股份有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法),对上述研究对象进行检查,探讨两种方法的有效性。采用χ2检验,取P<0.05为差别有统计学意义。结果本次研究结果显示,两种方法的检验阳性率差别无统计学意义(χ2=1.21,P>0.05)。提示两种方法均可用于临床检验,其有效性值得肯定。结论胶体金法具有操作简便、时间短、观察直观、不需特殊设备、经济可靠等特点,且可单份测定,尤其在急诊及临床应用中具有较强的优势,已在生物医学领域,尤其是医学检验得到广泛应用,可作为筛查丙型肝炎病毒抗体的重要手段,对丙型肝炎的早期发现以及预防控制有重要参考价值和意义。     

检测百日咳抗毒素免疫球蛋白G的酶联免疫吸附试验试剂盒的稳定性评价

目的对目前国内市场上销售的国产和进口的、针对百日咳毒素（Pertussis Toxin,PT）免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）G的酶联免疫吸附试验（Enzyme—linked Immunosorbent Assay,ELISA）试剂盒,即抗-PTIgGELISA检测试剂盒进行稳定性评价,为中国百曰咳监测中抗-PTIgG检测试剂盒的选择提供部分参考。方法选用8份不同浓度的抗-PT IgG血清,对1种国产试剂盒（A）和2种进口试剂盒（B-1、B-2）分别进行批内稳定性、批间稳定性、日间稳定性三方面评价。结果A、B-1、B-2三个试剂盒对不同浓度代表血清检测的批内变异系数（Coefficient of Variability,CV）均值,分别为5．44％、14．35％、19．5％;批间cv均值分别为16．15％、12．48％、29．66％。A、B-1、B-2三个试剂盒日间检测CV均值分别为13．10％、8．68％、26．31％。结论在各自试剂盒检测范围内,国产试剂盒A批内检测CV值最小,稳定性最高,试剂盒B-2批内稳定性较差。试剂盒A与B-1检测的批间稳定性基本满足质量控制范围（7／8,7／8）,日间稳定性较好。不同的试剂盒采用了不同的测量单位和判断标准,如ELISA单位／毫升（Unitper Milliliter,EU／m1）和国际单位（International Unit,IU）／ml等。在抗-FvFIgG监测中应统-判定标准。     

胶体金法与酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体的比较

目的结合临床实践经验,开展胶体金法与酶联免疫法检测丙型肝炎病毒抗体的比较研究。方法选取本站美沙酮维持治疗中心接受药物治疗的吸毒患者611例为研究对象,采用试验研究方法,常规采集吸毒人员的静脉血,离心取血清备用。采用英科新创（厦门）科技有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（胶体金法）和北京万泰生物药业股份有限公司生产的丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）,对上述研究对象进行检查,探讨两种方法的有效性。采用χ2检验,取P〈0.05为差别有统计学意义。结果本次研究结果显示,两种方法的检验阳性率差别无统计学意义（χ2=1.21,P〉0.05）。提示两种方法均可用于临床检验,其有效性值得肯定。结论胶体金法具有操作简便、时间短、观察直观、不需特殊设备、经济可靠等特点,且可单份测定,尤其在急诊及临床应用中具有较强的优势,已在生物医学领域,尤其是医学检验得到广泛应用,可作为筛查丙型肝炎病毒抗体的重要手段,对丙型肝炎的早期发现以及预防控制有重要参考价值和意义。     

乙肝病毒核心抗原人源单链可变区抗体的筛选

目的　筛选、鉴定乙型肝炎病毒 (HBV)核心抗原 (HBcAg)蛋白的人源单链可变区抗体 (ScFv)的编码基因 ,为细胞内表达小分子单链抗体的研究及抗HBV的基因治疗研究奠定基础。方法　采用噬菌体表面展示技术 ,以HBcAg蛋白为固相抗原 ,从噬菌体单链可变区抗体半合成库中经过 5轮“吸附 -洗脱 -扩增”筛选过程 ,获得抗原结合活性较强的HBcAg人源单链可变区抗体阳性克隆 ,并对其进行免疫检测及序列测定。结果　筛选得到的ScFv片段编码基因为 771nt,编码的产物由 2 5 7个氨基酸残基组成 ,具有典型的轻链和重链可变区结构特点以及与HBcAg结合的特异性。结论　利用噬菌体抗体库技术成功地获得了HBcAg人源单链可变区抗体的编码基因 ,并获得了可溶性单链抗体的表达。     

五种国产乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒的评价

[目的]评价5种乙肝病毒表面抗原(HBsAg)诊断试剂盒,筛选高质量的诊断试剂,确保血样HBsAg检测结果准确无误。[方法]5种HBsAg试剂盒均采用ELISA方法,对购买的国家参考品和收集的180份临床血浆标本进行检测,分别与参考品标准和本单位经北京万泰和上海科华双试剂检测一致的结果比较。[结果]5种试剂对灵敏度和精密度参考品的检测均符合要求;检测23份参考品结果的总符合率为96.52%,阳性符合率为100.00%,阴性符合率为96.00%;检测180份临床标本,总符合率为98.56%,阳性符合率为99.00%,阴性符合率为98.67%;检测阳性临床标本的δ值为-6.55(C)~-37.61(E);检测阴性临床标本的δ值为0.92(A)~1.65(E)。[结论]5种试剂在灵敏度、特异性、符合性、准确性方面存在差异,综合评价C试剂质量最符合要求。     

慢性乙型肝炎病例乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸载量和乙型肝炎病毒e抗原状态与丙氨酸氨基转移酶的相关性研究

目的研究慢性乙型肝炎（乙肝）病例（Chronic Hepatitis B Patient,CHBP）乙肝病毒（Hepatitis B Virus,HBV）复制、乙肝病毒e抗原（HBV e Antigen,HBeAg）状态与丙氨酸氨基转移酶（Alanine Aminotransferase,ALT）检测值之间的相关关系。方法对31个省（自治区、直辖市）发现的确诊CHBP采血,检测肝功能和HBV感染血清学标志物[乙肝病毒表面抗原（HBV Surface Antigen,HBsAg）、HBeAg]及乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV Deoxyribonucleic Acid,DNA）载量。ALT指标在采血24h内由当地医疗机构检测。HBsAg、HBeAg及HBV DNA载量检测由中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所统一完成。HBsAg、HBeAg使用美国雅培（Abbott）试剂光化学发光微粒子免疫分析法（Chemiluminesent Microparticle Immunoassay,CMIA）检测。HBV DNA载量使用实时聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）工具包（中国复星医药有限公司）检测。结果 〈20岁、20~40岁和〉40岁CHBP中,高病毒载量[HBV DNA〉105拷贝/毫升（Copies/ml）]者比例分别为70.21%、40.37%和28.75%（χ2=29.38,P〈0.001）。在HBV DNA低（〈103Copies/ml）、中（103~105Copies/ml）、高（〉105Copies/ml）载量组内,HBeAg阳性率分别为2.36%、9.40%和82.24%,两两差异均有统计学意义（χ2=5.57,P=0.02;χ2=177.78,P〈0.001;χ2=140.31,P〈0.001）。多因素分析结果显示,影响CHBP ALT的独立因素有年龄、性别和HBV DNA载量。相对于0~19岁CHBP,20~39岁CHBP ALT升高比值比（Odds Rate,OR）=3.27[95%可信区间（Confidence Interval,CI）：1.32~8.01],〉40岁CHBP ALT升高OR=3.92（95%CI：1.54~9.98）。相对于女性,男性CHBP ALT升高OR=2.93（95%CI：1.64~5.24）。中病毒载量和低病毒载量对CHBP ALT的影响差异无统计学意义（χ2=0.20,P=0.66）,但高病毒载量组ALT升高的OR=3.01（95%CI：1.33~6.80）。结论 HBeAg阳性CHBP体内HBV复制活跃,HBV DNA高病毒载量是CHBP ALT升高的危险因素。     

新疆维吾尔自治区8月龄～15岁人群乙型肝炎病毒表面抗原及抗体监测分析

目的了解新疆维吾尔自治区8月龄~15岁人群乙型肝炎(乙肝)病毒表面抗原(HBsAg)及抗体(抗-HBs)阳性率,评价卫生部/全球疫苗免疫联盟/儿童免疫基金(GAVI)项目实施效果。方法采用二级抽样的方法,从全疆67个县共抽取8月龄~15岁人群4 633名。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中的HBsAg及抗-HBs。结果新疆维吾尔自治区8月龄~15岁人群HBsAg阳性率2.29%[95%可信区间CI为1.9%~2.8%],单抗-HBs阳性率45.65%(95%CI为44.2%~47.1%)。不同民族人群HBsAg和抗-HBs阳性率差异均有非常显著的统计学意义(χ2=69.146,χ2=755.694,P均<0.01)。GAVI项目干预后,8月龄~2岁儿童HBsAg阳性率从项目前的2.74%降到项目后的为0.82%,下降了70.1%;单抗-HBs从项目实施前的41.75%提高到项目实施后的64.72%,上升了55.0%。结论GAVI项目启动后取得显著效果。为保证GAVI项目的顺利开展,应提高第1针乙肝疫苗及时接种率和大力开展少数民族语言文字接种乙肝疫苗宣传工作。     

乙型肝炎免疫球蛋白和乙型肝炎疫苗联合应用效果评价的系统综述和Meta分析

目的了解感染乙型肝炎（乙肝）病毒（Hepatitis B Virus,HBV）母亲的新生儿,接种10微克乙肝疫苗（Hepatitis B Vaccine, HepB）加乙肝免疫球蛋白（Hepatitis B Immunoglobulin,HBIG）后,其抗乙肝病毒表面抗原抗体（Antibody to HBV Surface Antigen,Anti—HBs）的阳转率。方法系统检索中国知识基础设施工程、万方、维普和医学文献检索系统（Pubmed）中公开发表的期刊,利用广义倒方差模型对各文献的Anti—HBs阳转率合并。结果共检索文献392篇,最终保留8篇。合并后Anti—HBs阳转率为90．42％（95％可信区间：85．44％～95．69％）,,为93．58％（P〈0．0001）。结论HBIG和HepB联合应用Meta分析的Anti．HBs阳转率可信度较高。     

麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验试剂的比较和评价

目的对目前中国市场上已有的两种麻疹IgG抗体定量检测酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked Immunosorbent Assay,ELISA）试剂（德国Virion／Serion试剂和德国IBL试剂）进行比较和评价,筛选适用于2006年全国人群麻疹血清流行病学调查的试剂。方法以蚀斑减少中和试验（Plague Reduction Neutralization Test,PRNT）的检测结果为“金标准”,分别用两种ELISA试剂检测52份麻疹IgG抗体组合血清,然后对试剂的定性和定量能力进行全面分析和评价。结果两种ELISA试剂均能正确的将13份PRNT结果为阴性的血清判定为阴性,特异度均为100％。两种试剂中,Virion／Serion试剂的敏感度为94．9％,与PRNT结果的相关性Kappa值为0．902,相关系数为0．878（P〈0．01）;IBL试剂敏感性为58．8％,与PRNT结果的相关性Kappa值为0．441,相关性系数为0．850（P〈0．01）。结论Virion／Serion试剂的特异性、敏感性较好,有单孔IgG抗体定量能力,价格适中,适于在自动化工作平台工作站中开展大规模血清样本的检测。