高效液相色谱-串联质谱测定人血浆中依普利酮的浓度及其药动学

目的研究依普利酮片单次及多次给药后的人体药动学。方法 30名健康志愿者分为三组,分别服用依普利酮片50、100、200 mg,其中100 mg组为多次给药组,连续给药7 d;采集24 h内动态血标本,高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中依普利酮的浓度,并采用DAS 3.2.4软件对试验数据进行处理,计算药动学参数。结果单次口服50、100和200 mg依普利酮片的主要药动学参数ρ_(max)分别为(723.20±203.59)、(1 212.47±249.52)、(2 053.32±394.06)μg·L^(-1),t_(max)分别为(1.8±0.7)、(2.1±0.9)、(1.9±0.4)h,t_(1/2)分别为(2.6±0.4)、(3.0±0.7)、(3.4±1.3)h,AUC_(0-24h)分别为(3 621.29±1 1 17.37)、(7 492.68±2 031.58)、(13 796.25±4 594.37)μg·h·L(-1),t_(max)分别为(1.8±0.7)、(2.1±0.9)、(1.9±0.4)h,t_(1/2)分别为(2.6±0.4)、(3.0±0.7)、(3.4±1.3)h,AUC_(0-24h)分别为(3 621.29±1 1 17.37)、(7 492.68±2 031.58)、(13 796.25±4 594.37)μg·h·L^(-1),AUC_(0-∞)分别为(3 710.53±1 144.47)、(7 592.98±2 082.12)、(14 074.54±4 870.39)μg·h·L(-1),AUC_(0-∞)分别为(3 710.53±1 144.47)、(7 592.98±2 082.12)、(14 074.54±4 870.39)μg·h·L^(-1)。多次给药100 mg后的药动学参数ρ_(max)为(1 231.83±209.99)μg·L(-1)。多次给药100 mg后的药动学参数ρ_(max)为(1 231.83±209.99)μg·L^(-1),t_(max)为(1.7±0.9)h,t_(1/2)为(3.0±0.8)h,AUC_(0-24h)为(7 043.78±1 818.54)μg·h·L(-1),t_(max)为(1.7±0.9)h,t_(1/2)为(3.0±0.8)h,AUC_(0-24h)为(7 043.78±1 818.54)μg·h·L^(-1),AUC_(0-∞)为(7 131.65±1 840.84)μg·h·L(-1),AUC_(0-∞)为(7 131.65±1 840.84)μg·h·L^(-1)。结论在50(-1)。结论在50²00 mg给药剂量范围内,依普利酮片在体内呈线性动力学特征。     

头痛宁鼻腔喷雾剂在大鼠体内的药动学及脑靶向研究

目的:研究头痛宁鼻腔喷雾剂经鼻给药后在大鼠体内的药动学及脑靶向情况。方法:84只SD大鼠分为鼻腔给药组和静脉给药组,每组42只,给药剂量均为1.2 mL/kg。分别于给药后5、10、15、30、60、90、120 min于腹主动脉取血5 mL,并取脑组织(每个时间点6只)。采用高效液相色谱-串联质谱法测定各组大鼠血浆和脑组织中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的浓度,采用DAS 2.0软件计算药动学参数及脑靶向性指数。结果:鼻腔给药组大鼠血浆中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的c_(max)分别为(0.202 4±0.015 8)、(0.373 8±0.085 7)μg/mL,t_(max)均为(10.000 0±0.000 0)min,AUC_(0-∞)分别为(16.542 9±2.110 3)、(27.452 7±5.572 1)μg·h/mL;脑组织中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的c_(max)分别为(0.180 2±0.038 4)、(0.320 4±0.027 7)μg/g,t_(max)均为(10.000 0±0.000 0)min,AUC_(0-∞)分别为(17.105 3±2.432 9)、(24.541 6±3.753 4)μg·h/g。静脉给药组大鼠血浆中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的c_(max)分别为(0.300 2±0.016 1)、(0.526 7±0.044 1)μg/mL,t_(max)均为(10.000 0±0.000 0)min,AUC_(0-∞)分别为(28.010 5±4.112 8)、(60.294 1±11.290 2)μg·h/mL;脑组织中升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的c_(max)分别为(0.149 8±0.031 5)、(0.199 8±0.040 1)μg/g,t_(max)均为(15.000 0±0.000 0)min,AUC_(0-∞)分别为(22.643 4±2.883 1)、(36.721 8±14.885 6)μg·h/g。升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷脑靶向性指数分别为2.387 0、2.176 1。结论:头痛宁鼻腔喷雾剂鼻腔给药后一部分药物可经鼻腔吸收直接转运至脑,制成鼻腔喷雾剂科学合理。     

复方替米沙坦片在中国健康志愿者体内的药动学特征

目的研究健康志愿者单剂量口服复方替米沙坦片后替米沙坦与氢氯噻嗪的药动学特性。方法本试验为开放、单一中心的设计。10名男性健康志愿者单剂量口服1片复方替米沙坦(含40 mg替米沙坦与12.5 mg氢氯噻嗪),用LC-MS/MS法测定健康受试者替米沙坦与氢氯噻嗪的血药浓度,评估它们的药动学特性。结果用非房室模型计算药动学参数,替米沙坦的AUC_(0→t)为(793.73±709.22)μg·h·L~(-1),AUC_(0→∞)为(1014.82±939.61)μg.h·L~(-1),ρ_(max)为(88.14±28.16)μg·L~(-1),t_(max)为(1.40±0.61)h,t_(1/2)为(17.00±10.14)h,MRT_(0→t)为(10.23±7.16)h,MRT_(0→∞)为(20.22±13.34)h,K_e为(0.06±0.04)h~(-1),V/F为(1 139.2l±466.49)L,CL/F为(61.07±34.27)L·h~(-1);氢氯噻嗪的AUC_(0→t)为:(420.72±76.73)μg·h·L~(-1),AUC_(0→∞)为(481.68±89.47)μg·h·L~(-1),ρ_(max)为(66.67±11.05)μg·L~(-1),t_(max)为(1.80±0.54)h,t_(1/2)为(9.04±0.90)h,MRT_(0→t)为(6.65±0.54)h,MRT_(0→∞)为(10.47±1.35)h,K_e为(0.08±0.01)h~(-1),V/F为(349.35±74.52)L,CL/F为(26.89±5.73)L·h~(-1)。结论单剂量给予复方替米沙坦片后替米沙坦和氢氯噻嗪的主要药动学参数与国内外文献差异不大,而且耐受性和安全性良好,无任何不良事件发生。     

维生素K_1微乳剂在大鼠体内的药物动力学

目的建立大鼠血浆中维生素K_1的高效液相色谱测定法,并应用于经灌胃给予维生素K_1微乳剂后的维生素K_1药动学研究。方法大鼠经灌胃给予维生素K,微乳剂3.77 mg·kg^(-1),于给药后不同时间采集血样,采用无水乙醇-乙醚(体积比为1:3)提取的方法处理血浆样品。采用反相高效液相色谱法测定维生素K_1的血药浓度,色谱柱为Thermo C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为无水乙醇-水(体积比为90:10),流速为1.1 mL·min(-1),于给药后不同时间采集血样,采用无水乙醇-乙醚(体积比为1:3)提取的方法处理血浆样品。采用反相高效液相色谱法测定维生素K_1的血药浓度,色谱柱为Thermo C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为无水乙醇-水(体积比为90:10),流速为1.1 mL·min^(-1),检测波长为270 nm,柱温为35℃。结果血液中的内源性物质不干扰测定。维生素K_1的线性为48～2 400μg·L(-1),检测波长为270 nm,柱温为35℃。结果血液中的内源性物质不干扰测定。维生素K_1的线性为48～2 400μg·L^(-1),r=0.995 3,定量下限为48μg·L(-1),r=0.995 3,定量下限为48μg·L^(-1),精密度、准确度、回收率均符合生物样品测定要求。主要药物动力学参数:t_(max)=1.0 h,t_(1/2)=7.61 h,ρ_(max)=0.77 mg·L(-1),精密度、准确度、回收率均符合生物样品测定要求。主要药物动力学参数:t_(max)=1.0 h,t_(1/2)=7.61 h,ρ_(max)=0.77 mg·L^(-1),AUC_(0-t)=2.87 mg·h·L(-1),AUC_(0-t)=2.87 mg·h·L^(-1),AUC_(0-∞)=3.21 mg.h·L(-1),AUC_(0-∞)=3.21 mg.h·L^(-1)。结论该方法适用于维生素K,微乳剂在大鼠体内的药物动力学研究。     

黄连素对CYP3A的体内外作用及相关性研究

目的 通过体外研究黄连素(BBR)对人肝癌细胞株HepG_2肝药酶CYP3A4在mRNA及蛋白水平表达的影响和在大鼠体内研究BBR对大鼠肝药酶CYP3A的底物咪达唑仑(MDZ)的药物代谢动力学(药动学)的影响,初步探讨BBR对CYP3A的体内外作用以及其是否存在相关性。方法 体外实验用系列质量浓度BBR组、空白对照组分别与对数生长期人肝癌HepG2细胞孵育48 h后,提取细胞RNA和总蛋白,分别采用荧光定量PCR法(qRT-PCR)、Western Blot法检测HepG2细胞中CYP3A4 mRNA水平和蛋白水平的表达。体内实验以不同质量浓度的BBR组作为实验组,实验组与空白对照组大鼠分别连续灌胃10 d后,进行大鼠腹股沟动脉插管采血,以底物MDZ作为CYP3A的探针,采用高效液相色谱法(HPLC)测定大鼠血浆中MDZ及其代谢物1′-羟基咪达唑仑(1′-OH-MDZ)的质量浓度,以研究MDZ在大鼠体内的代谢。结果 qRT-PCR法分析结果表明,与空白对照组比较,10、20、40μg·mL^(-1)BBR均对HepG2细胞CYP3A4的mRNA表达有显著抑制作用(P<0.05);Western Blot结果表明,与空白对照组比较,0.1、0.5、2.0μg·mL(-1)BBR均对HepG2细胞CYP3A4的mRNA表达有显著抑制作用(P<0.05);Western Blot结果表明,与空白对照组比较,0.1、0.5、2.0μg·mL^(-1) BBR对HepG2细胞CYP3A4蛋白的表达有诱导作用(P<0.05),但10、40μg·mL(-1) BBR对HepG2细胞CYP3A4蛋白的表达有诱导作用(P<0.05),但10、40μg·mL^(-1)BBR对HepG2细胞CYP3A4蛋白的表达有显著抑制作用(P<0.01)。在体内,大鼠口服不同质量浓度药物后MDZ的主要药动学参数为：空白对照组、BBR 50 mg·kg(-1)BBR对HepG2细胞CYP3A4蛋白的表达有显著抑制作用(P<0.01)。在体内,大鼠口服不同质量浓度药物后MDZ的主要药动学参数为：空白对照组、BBR 50 mg·kg^(-1)组、BBR 100 mg·kg(-1)组、BBR 100 mg·kg^(-1)组、 BBR 200 mg·kg(-1)组、 BBR 200 mg·kg^(-1)组和阳性对照酮康唑75 mg·kg(-1)组和阳性对照酮康唑75 mg·kg^(-1)组的药时曲线下面积(AUC_((0～t)))分别为(1.25±0.29)、(1.69±0.31)、(2.03±0.44)、(2.12±0.66)、(2.47±0.49)μg·mL(-1)组的药时曲线下面积(AUC_((0～t)))分别为(1.25±0.29)、(1.69±0.31)、(2.03±0.44)、(2.12±0.66)、(2.47±0.49)μg·mL^(-1)·h;血药达峰质量浓度(C_(max))分别为(1.13±0.25)、(1.69±0.23)、(1.84±0.29)、(2.12±0.53)、(2.21±0.29)μg·mL(-1)·h;血药达峰质量浓度(C_(max))分别为(1.13±0.25)、(1.69±0.23)、(1.84±0.29)、(2.12±0.53)、(2.21±0.29)μg·mL^(-1)。各组1′-OH-MDZ的主要药动学参数为：AUC_((0～t))分别为(0.66±0.28)、(0.46±0.19)、(0.42±0.11)、(0.36±0.09)、(0.37±0.10)μg·mL(-1)。各组1′-OH-MDZ的主要药动学参数为：AUC_((0～t))分别为(0.66±0.28)、(0.46±0.19)、(0.42±0.11)、(0.36±0.09)、(0.37±0.10)μg·mL^(-1)·h;C_(max)分别为(0.51±0.16)、(0.44±0.13)、(0.40±0.08)、(0.32±0.07)、(0.33±0.09)μg·mL(-1)·h;C_(max)分别为(0.51±0.16)、(0.44±0.13)、(0.40±0.08)、(0.32±0.07)、(0.33±0.09)μg·mL^(-1)。结论 在体外BBR对CYP3A有双向作用,低剂量时诱导,高剂量时抑制;在大鼠体内BBR可显著抑制MDZ的代谢,该抑制作用很有可能是BBR抑制了CYP3A酶的活性,黄连素对CYP3A在体、内外作用存在一定的相关性,但并不完全一致。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的替加色罗及其药动学

目的建立人血浆中替加色罗LC-MS/MS测定法,进行人体药动学研究。方法测定24名健康受试者口服受试制剂(单剂量、多剂量)后血浆中替加色罗浓度。结果单剂量口服替加色罗(4、6、12mg)后药动学参数:t(1/2)β为(2.92±0.89)、(3.81±0.84)、(3.3±0.47)h;t_(max)为(1.06±0.28)、(1.00±0.26)、(1.00±0.18)h;ρ_(max)为(1.23±0.47)、(2.34±0.60)、(4.24±1.71)μg·L~(-1);AUC_(0→12)为(3.04±0.91)、(5.21±1.13)、(9.29±3.37)μg·h·L~(-1);MRT为(3.57±0.81)、(3.91±0.65)、(3.34±0.48)h;替加色罗多剂量(6mg,bid)药动学参数t_(max)为(0.96±0.10)h,ρss_(max)为(2.60±0.53)μg·L~(-1),pss_(min)为(0.07±0.01)μg·L~(-1),ρ_(av)为(0.51±0.11)μg·L~(-1),AUC_(0→12)为(6.13±1.3)μg·h·L~(-1)。结论本方法结果准确、灵敏,替加色罗在大部分人体内的过程符合二室开放模型,其主要药动学参数与国内外文献相近。     

国产与进口盐酸米多君片在健康人体的生物等效性

目的考察国产与进口盐酸米多君片(抗低血压药)在健康人体的生物等效性。方法24名健康男性志愿受试者随机交叉先后单剂口服国产和进口盐酸米多君片5 mg后,用高效液相色谱法测定血浆中米多君和活性代谢产物去甘氨酸米多君的浓度,以DAS1.0程序计算药代动力学参数,进行生物等效性评价。结果口服国产与进口盐酸米多君片的主要药代动力学参数,米多君:AUC_(0-1)分别为(18.46±6.14)、(16.93±4.45)μg·h·L~(-1),AUC_(0-∞)分别为(21.15±7.95)、(18.93±5.14)μg·h·L~(-1),C_(max)分别为(23.51±9.24)、(20.61±7.20)μg·L~(-1),t_(max)分别为(0.49±0.14)、(0.46±0.15)h,t_(1/2)分别为(2.14±3.28)、(2.09±1.70)h。去甘氨酸米多君:AUC_(0-t)分别为(59.70±16.91)、(54.97±13.16)μg·h·L~(-1),AUC_(0-∞)分别为(64.60±17.94)、(58.76±13.72)μg·h·L~(-1),C_(max)分别为(12.31±3.22)、(11.79±3.54)μg·L~(-1),t_(max)分别为(1.31±0.69)、(1.10±0.56)h,t_(1/2)分别为(3.95±0.83)、(3.55土1.00)h。以进口盐酸米多君片为参比,国产盐酸米多君片中的米多君和去甘氨酸米多君的相对生物利用度分别为(110.44±25.45)%、(108.24±13.82)%。结论国产与进口盐酸米多君片在健康人体具有生物等效性。     

磷酸川芎嗪胶囊的人体生物等效性研究

目的:评价两种磷酸川芎嗪胶囊的生物等效性。方法:20名健康志愿者单剂量随机交叉口服两种磷酸川芎嗪胶囊100mg,采用HPLC法测定血浆中磷酸川芎嗪浓度;用DAS 2.0生物等效性软件计算主要药物动力学参数和生物等效性。结果:受试制剂和参比制荆其主要药动学参数t_(1/2)分别为(0.82±0.37)和(0.97±0.42)h;C_(max)分别为(2.12±0.62)和(1.96±0.52)mg·L~(-1),t_(max)分别为(0.33±0.09)和(0.36±0.10)h,AUC_(0-1)分别为(1.84±0.38)和(1.75±0.39)mg·h·L~(-1),AUC_(0-∞)分别为(1.86±0.40)和(1.78±0.39)mg·h·L~(-1),经方差分析和双单侧t检验,C_(max),t_(max),AUC_(0-1),AUC_(0-∞)均无统计学差异,受试制剂的相对生物利用度为105.5%。结论:两种磷酸川芎嗪胶囊在健康人体内具有生物等效性。     

左乙拉西坦pH敏感鼻用凝胶剂在大鼠脑组织内生物利用度的研究

目的研究左乙拉西坦pH敏感鼻用凝胶剂在大鼠脑组织内的药动学及其生物利用度。方法采用HPLC-UV法测定大鼠脑组织中左乙拉西坦浓度;以1.0%左乙拉西坦溶液灌胃给药为参比,测定该药物pH敏感鼻用凝胶剂经鼻腔给药后在脑组织中的药物浓度并计算t_(max)、C_(max)、AUC_(0～t)、AUC_(0～∞)及相对生物利用度(F_r)等主要药动学参数。结果给药剂量为1.0mg·kg~(-1)的左乙拉西坦的pH敏感鼻用凝胶与10.0 mg·kg~(-1)的左乙拉西坦溶液分别经鼻腔和灌胃给药后,测得药物在脑组织中药动学参数t_(max)分别为(0.625±0.25)和(1.25±0.50)h,C max分别为(10.60±2.52)和(19.75±2.88)μg·g~(-1),AUC_(0～t)分别为(22.84±2.73)和(50.71±6.08)μg·h·g~(-1),AUC_(0～∞)分别为(24.57±2.81)和(51.54±6.09)μg·h·g~(-1)。求得左乙拉西坦的pH敏感鼻用凝胶在脑组织中的Fr为476.83%。结论左乙拉西坦的pH敏感鼻用凝胶经鼻腔给药后,药物入脑速度快,生物利用度高,有较强脑靶向性。     

利福平异烟肼片在健康志愿者体内生物等效性研究

目的:评价利福平异烟肼片在22名男性健康志愿者体内的生物等效性。方法:采用 HPLC 法测定22名健康志愿者单次、交叉口服受试制剂利福平异烟肼片与参比试剂利福平胶囊、异烟肼片后血浆中利福平、异烟肼浓度。用 DAS 软件进行药动学参数计算及生物等效性评价。结果:试验制剂和参比制剂中利福平 C_(max)分别为(13.789±4.922)μg·ml~(-1)和(14.163±3.918)μg·ml~(-1);t_(1/2)分别为(4.02±0.72)h 和(3.65±0.89)h;t_(max)分别为(1.98±1.98)h 和(1.81±0.86)h;AUC_(0-∞)分别为(90.44±22.48)μg·ml~(-1)·h 和(90.78±22.44)μg·ml~(-1)·h,相对生物利用度 F_(0-tn)%、F_(0-∞)%分别为(100.5±16.1)%、(101.0±16.1)%。试验制剂和参比制剂中异烟肼 C_(max)分别为(14.10±4.78)μg·ml~(-1)和(14.83±4.96)μg·ml~(-1);t_(1/2)分别为(2.32±0.71)h 和(2.42±0.71)h;t_(max)分别为(0.58±0.45)h 和(0.53±0.32)h;AUC_(0-∞)分别为(43.22±19.66)μg·ml~(-1)·h 和(43.03±19.02)μg·ml~(-1)·h;相对生物利用度 F_(0-tn)%、F_(0-∞)%分别为(100.51±12.49)%、(100.49±12.72)%。结论:方差分析和双单侧 t 检验证明利福平异烟肼片与其参比制剂具有生物等效性。