雌、孕激素对大鼠成骨细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子的作用

目的 研究基质金属蛋白酶2（MMP－2）、基质金属蛋白酶抑制剂1（TIMP－1）在离体成骨细胞上的表达特点及雌、孕激素对MMP－2、TIMP－1的影响,初步探讨MMP－2、TIMP－1在骨吸收中的作用。方法 采用免疫组化方法对成骨细胞中MMP－2蛋白的表达进行检测。采用逆转录定量PCR检测雌、孕激素对成骨细胞分泌MMP－2、TIMP－1 mRNA的影响。结果 MMP－2蛋白在成骨细胞上表达阳性,雌激素对MMP－2蛋白的表达有抑制作用,成骨细胞分泌的MMP－2在雌、孕激素作用下呈剂量依赖性下降。成骨细胞分泌的TIMP－1在雌、孕激素作用下变化不显著。结论 雌、孕激素可通过对成骨细胞MMP－2的抑制作用促进骨形成、减缓骨吸收和骨基质降解。孕激素治疗绝经后骨质疏松症与雌激素同样具有重要意义。     

心肌内基质金属蛋白酶及组织基质金属蛋白酶抑制因子表达变化

目的 探讨心肌内基质金属蛋白酶及组织基质金属蛋白酶抑制因子表达变化.方法 2017年1—2月随机选取该院实验室20只SD大鼠,依据随机数字表法将其分为阿霉素组和对照组两组,每组10只,应用半定量RT-PCR法测定mRNA表达水平,运用Western blotting方法对蛋白质水平进行检测,然后对心肌组织MMP-2、MMP-9表达、TIMP-1、MAPKs活性受到阿霉素的影响进行分析.结果 心肌组织MMP-2、MMP-9mRNA在阿霉素的作用下提升,心肌组织MMP-2、MMP-9蛋白表达水平在阿霉素处理的情况下提升;心肌组织TIMP-1mRNA水平会在阿霉素的作用下提升,心肌组织TIMP-1蛋白水平在阿霉素处理的情况下提升;心肌组织p38MAPK磷酸化水平在阿霉素处理的情况下提升,而ERK、JNK MAPK MAPKs磷酸化水平并没有在阿霉素处理的情况下提升.结论 心肌内基质金属蛋白酶及组织基质金属蛋白酶抑制因子表达受到阿霉素的直接而深刻的影响,值得临床充分重视.     

Oncol2012: 甲状腺癌和血液中MMP-2，MMP-9，TIMP-1和TIMP-2水平之间的相关性

目的：探讨外周血基质金属蛋白酶-2（MMP-2）,基质金属蛋白酶9（MMP-9）,基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）抑制剂,基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）抑制剂的表达水平和甲状腺癌的相关性。方法：使用RT-PCR与ELISA法检测30例甲状腺癌患者,27例甲状腺良性疾病患者,25例健康志愿者外周血中的MMP-2,MMP-9,TIMP-2,TIMP-1 的表达水平。结果：MMP-2,MMP-9,TIMP-2,TIMP-1在甲状腺癌患者外周血中的表达水平均显着高于良性甲状腺疾病患者和健康志愿者（P <0.05）。然而,良性甲状腺疾病患者和健康志愿者之间无显着差异（P> 0.05）。两种检测方法对于甲状腺癌的准确率为83.33%。结论：测定外周血中的MMP-2,MMP-9,TIMP-2和TIMP-1表达水平对甲状腺癌的确诊是有帮助的,尤其对于术前的评估更加重要。     

MDI301调节MMP-1、MMP-2、TIMP-1和前胶原蛋白的表达

目的:检测MDI301对正常细胞和高糖细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和I、III型前胶原蛋白表达的影响。探讨MDI301对糖尿病皮肤溃疡和足溃疡的治疗潜力。方法:采用Real time PCR检测人成纤维细胞中MMP-1、MMP-2和TIMP-1 mRNA的表达水平;ELISA方法检测细胞培养基中TIMP-1蛋白表达量;Western blot检测I型和III型前胶原蛋白表达水平。结果:MDI301能降低高糖细胞中MMP-1和MMP-2 mRNA的表达(P<0.05),增加TIMP-1 mRNA和细胞培养上清中TIMP-1蛋白的表达(P<0.05);同时还能增加高糖细胞中I和III型前胶原蛋白的表达量(P<0.05)。结论:MDI301可能会对糖尿病患者体内MMP-1、MMP-2、TIMP-1和I、III型前胶原蛋白的表达有相似的作用,使其有望用于糖尿病皮肤溃疡和足溃疡的治疗。     

皮肤鳞状细胞癌组织中CD147、MMP-9及TIMP-2蛋白的表达

目的:检测皮肤鳞状细胞癌(SCC)组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)蛋白的表达.方法:采用免疫组织化学SP法检测51例SCC,17例正常皮肤组织石蜡标本中CD147,MMP-9及TIMP-2蛋白的表达.结果:SCC组织中CD147,MMP-9蛋白的阳性表达率(65%和59%)明显高于正常皮肤(12%和18%,P<0.05),TIMP-2(37%)明显低于正常皮肤(76%,P<0.05).SCC组织中CD147的阳性表达率与MMP-9的阳性表达率呈正相关(r=0.466,P<0.05),与TIMP-2的阳性表达率呈负相关(r=-0.427,P<0.05).结论:在SCC的发生过程中CD147,MMP-9和TIMP-2起一定作用.     

MMP-2 MMP-9及TIMP-1在人睾丸精原细胞瘤组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)在人睾丸精原细胞瘤组织中的表达及其与临床分期、预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测33例人睾丸精原细胞瘤和11例正常睾丸组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达,并与肿瘤的临床分期及预后进行比较。结果33例睾丸精原细胞瘤组织中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达率分别为69.7%、75.8%、57.6%,表达率随肿瘤的临床分期升高而增加。MMPs/TIMPs比值大者死亡率高。结论MMP-2、MMP-9、TIMP-1在人睾丸精原细胞瘤的浸润转移过程中起重要作用,有可能成为估计预后的指标之一。     

免疫学

060050雌、孕激素和肝素结合生长因子对Ishika-wa细胞金属蛋白酶组织抑制物-1表达的调节/刘雪梅…∥生殖医学杂志.—2005,14(6).—352~355为通过体外实验研究雌激素、孕激素、肝素结合生长因子(HB-EGF)对Ishikawa细胞中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)蛋白表达的调节及其在胚胎种植中的意义。体外培养高度分化的子宫内膜细胞癌Ishika-wa,按实验目的分别加入雌激素、孕激素、雌孕激素联合、雌孕激素与米非司酮(RU-486)联合、HB-EGF刺激48h后,用免疫细胞化学、Western blot两种方法测定各种条件下Ishikawa…     

MMPs/TIMPs在甲状腺乳头状癌细胞中的表达与作用的研究

目的:探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)患者癌细胞中基质金属蛋白酶(matrix metallo-proteinases,MMPs)和金属蛋白酶的组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)蛋白的表达水平,探讨MMPs/TIMPs与甲状腺乳头状癌发生、发展之间的相互关系。方法:应用ELISA方法检测甲状腺正常组织和乳头状癌癌细胞培养液中MMP-2、MMP-9以及TIMP-1、TIMP-2的分泌水平;采用MTS掺入试验检测在rhMMP-2或抗MMP-2中和抗体的作用下,甲状腺正常组织细胞和乳头状癌癌细胞增殖水平。结果:甲状腺乳头状癌癌细胞分泌MMP-2、MMP-9水平提高,而分泌TIMP-1、TIMP-2水平降低,MMPs与TIMPs的比值升高特别显著;MMP-2对甲状腺乳头状癌癌细胞有明显的促增殖作用,抗MMP-2单克隆抗体能明显地抑制癌细胞生长。结论:MMPs与TIMPs的比值有望作为预测甲状腺乳头状癌生长和转移的一项检测指标。     

转染CTGF基因对乳腺癌细胞MMP－2及TIMP－2表达的影响

目的: 通过研究结缔组织生长因子（CTGF）基因对人乳腺癌MCF-7细胞株基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）表达的影响,深入探讨CTGF在乳腺癌侵袭和转移中的作用机制。方法: 采用脂质体介导法,将CTGF基因瞬时转染体外培养的人MCF-7细胞,并用免疫荧光、RT-PCR和蛋白质印迹法检测其转染成功与否;再采用蛋白质印迹法检测转基因MCF-7 MMP-2及TIMP-2表达改变。结果: 与对照组相比,转染CTGF基因的MCF-7,其CTGF mRNA和蛋白表达均显著增高,MMP-2蛋白表达水平显著增高,而TIMP-2蛋白表达水平显著降低。 结论: CTGF可能通过增加乳腺癌细胞MMP-2表达及抑制TIMP-2的生成而起到促进乳腺癌侵袭和转移的作用。     

孕激素对不同类型子宫内膜增殖症组织中MMP-9及TIMP-1表达的影响

目的研究不同类型子宫内膜增生组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达与意义,及孕激素治疗对其表达的影响,为孕激素在复杂型子宫内膜增生及不典型增生中的应用提供理论依据。方法应用免疫组化SP法检测20例正常增生期子宫内膜组织、61例子宫内膜增生症组织中MMP-9、TIMP-1蛋白的表达情况;对其中18例复杂型增生及23例不典型增生患者给予孕激素治疗3个月后,再次检测其子宫内膜组织MMP-9、TIMP-1蛋白的表达情况。结果在正常增生期子宫内膜、子宫内膜单纯型增生、复杂型增生、不典型增生组织中MMP-9、TIMP-1蛋白的阳性表达率呈递增趋势;其中复杂型增生、不典型增生组MMP-9、TIMP-1蛋白的表达高于正常增生期子宫内膜及单纯型增生组(P均<0.05)。复杂型增生及不典型增生组患者给予孕激素治疗3个月后MMP-9、TIMP-1蛋白的表达明显下调,与正常增生期子宫内膜、单纯型增生组相比差异无统计学意义(P均>0.05)。MMP-9、TIMP-1蛋白表达在子宫内膜增生症中呈正相关性(r=0.428,P<0.01)。结论MMP-9、TIMP-1在不同子宫内膜组织中表达...     

基质金属蛋白酶及其抑制剂在乳腺癌中的表达及意义

目的 :探讨乳腺癌组织中基质金属蛋白酶 2 ( MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 9( MMP- 9)及金属蛋白酶 1组织抑制剂 ( TIMP- 1 )、金属蛋白酶 2组织抑制剂 ( TIMP- 2 )的表达及它们与乳腺癌生物学行为的关系。方法 :应用免疫组织化学 SP法 ,检测 49例乳腺癌、1 0例癌旁正常组织中MMP- 2、MMP- 9、TIMP- 1及 TIMP- 2的表达及分布。结果 :乳腺癌组织中 MMP- 2、MMP- 9、TIMP- 1及 TIMP- 2的表达明显高于癌旁正常组织 ,二者之间差异具有显著性 ( P<0 .0 1 ) ;乳腺癌组织中 MMP- 2、MMP- 9及 TIMP- 1主要在肿瘤细胞胞质内表达 ,而 TIMP- 2表达于瘤细胞和间质细胞胞质 ;乳腺癌组织中 MMP- 2、MMP- 9的表达与组织学分级、淋巴结转移密切相关( P<0 .0 5 ) ,能促进乳腺癌的侵袭和转移 ,而 TIMP- 1、TIMP- 2的表达与肿瘤生物学行为无相关性( P>0 .0 5 )。结论 :基质金属蛋白酶可成为判定乳腺癌生物学行为和指导临床治疗的可靠指标     

不明原因不孕妇女子宫内膜种植窗期MMP-9和TIMP-1的表达

目的 :探讨不明原因不孕妇女子宫内膜种植窗期基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)及金属蛋白酶组织抑制物- 1(TIMP- 1)的表达对胚胎着床的影响。方法 :实验组 2 9例 ,正常对照组 14例 ,采用链菌生物素蛋白 -过氧化酶连接法 ,免疫组化测定两组子宫内膜种植窗期 MMP- 9及 TIMP- 1。结果 :在全部子宫内膜标本中 ,MMP- 9均呈阳性表达 ,腺上皮细胞、腔上皮细胞和基质细胞胞浆内均可见棕黄色颗粒沉着 ,上皮细胞染色强度大于基质 ;TIMP- 1表达特点和 MMP- 9相似 ,但 MMP- 9和 TIMP- 1实验组的表达均较对照组弱 (MMP- 9:2 30 .79± 4 3.92 vs 30 7.78±4 4.2 5 ;TIMP- 1:2 33.0 5± 4 8.5 1vs 2 97.86± 35 .5 6 ,P<0 .0 5 )。血雌激素、孕激素和 MMP- 9、TIMP- 1实验组与对照组均无相关性 ,但对照组 MMP- 9、TIMP- 1与孕激素呈现负相关趋势 (r=- 0 .330 ,r=- 0 .4 0 1,但 P>0 .0 5 )。结论 :不明原因不孕妇女子宫内膜种植窗期 MMP- 9及 TIMP- 1的低表达 ,可能是影响胚胎着床导致不孕的重要因素之一。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾组织MMP-2及TIMP-2表达的影响

目的:观察基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子-2(TIMP-2)在糖尿病大鼠肾组织中的表达及银杏叶提取物(EGB)对两者表达的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(C组),糖尿病组(DM组),EGB治疗组(EGB组,8 mg.kg-1.d-1)。腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠造成糖尿病模型,EGB组用银杏叶提取物进行灌胃。8周后,用免疫组化方法检测各组大鼠肾皮质MMP-2、TIMP-2的蛋白表达。结果:糖尿病组大鼠肾小球MMP-2蛋白表达较正常对照组明显减少,TIMP-2蛋白明显升高(P<0.01);EGB组MMP-2较糖尿病组表达升高(P<0.01)、TIMP-2表达较糖尿病组减少(P<0.01)。结论:EGB可通过调节MMP-2/TIMP-2的平衡,减少细胞外基质积聚而对糖尿病大鼠起到肾脏保护作用。     

2型糖尿病大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的变化与糖尿病心肌病变关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)大鼠心脏基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)、基质金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)的变化及其在糖尿病心肌病变(Diabetic Cardiomyopathy,DC)发病中的意义。方法高脂食物喂养、小剂量链脲菌素诱导2型糖尿病大鼠模型。正糖高胰岛素嵌铗技术(EICT)检测两组大鼠胰岛素抵抗情况,葡萄糖输注速率(GIR)表示胰岛素抵抗;测定大鼠体重(BW)、心脏重量(HW)和计算HW/BW;RT-PCR测定两组大鼠MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的mRNA水平,免疫组化法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2和Ⅰ、Ⅲ胶原蛋白水平。结果糖尿病大鼠GIR明显低于正常对照组(P0.01)。糖尿病大鼠心脏:HW和HW/BW明显高于正常对照组(P0.05),Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多(P0.01),MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达增加(P0.01),MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的蛋白含量增加(MMP-2、TIMP-1:P0.05;TIMP-2:P0.01);MMP-2、MMP-9与TIMP-1蛋白水平比值及MMP-2与TIMP-2蛋白水平比值均显著降低。结论 T2DM大鼠心脏MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2增加,MMPs/TIMPs比值降低,心脏Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增多;心脏MMPs/TIMPs表达改变与心脏间质纤维化有关。     

溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜MMP-1、TIMP-1的表达

目的建立大鼠溃疡性结肠炎（UC）模型,检测UC大鼠结肠黏膜基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）的表达。方法采用硫酸葡聚糖（DSS）诱导大鼠UC模型,采用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）测定大鼠结肠黏膜MMP-1、TIMP-1在转录水平的表达;免疫组织化学染色法测定MMP-1、TIMP-1蛋白水平的表达。结果在转录水平上,UC大鼠病变结肠黏膜的MMP-1、TIMP-1的表达明显高于正常对照组（P〈0．05）,两者具有显著差异,而以MMP-1的增高程度更为明显;蛋白水平的表达与此一致。结论DSS诱导的大鼠溃疡性结肠炎与MMP-1的过度表达及TIMP—1的相对不足有关,MMP-1／TIMP-1的比例失调在UC的损伤过程中有重要作用。     

基质金属蛋白酶与Ⅳ型胶原在马方综合征并发胸主动脉瘤中表达的研究

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-2和金属蛋白酶组织抑制剂TIMP-2与Ⅳ型胶原在马方综合征（MS）并发的胸主动脉瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组化sP法和伊红-苏木素（HE）染色技术分别检测10例马方综合征并发胸主动脉瘤患者血管壁病变中MMP-2蛋白和TIMP-2蛋白及Ⅳ胶原的表达水平和病理学形态改变。结果光镜下见MS并发胸主动脉瘤壁中的弹性纤维和胶原纤维有明显黏液样变性，囊性中膜坏死区（CMN）有大量的黏蛋白沉积。平滑肌细胞有变性、坏死。免疫组化见MMP-2蛋白在MS并发胸主动脉瘤壁病变区边缘的平滑肌细胞中呈强阳性表达，而在非病变区呈弱阳性表达，其表达强度显著高于非病变区。TIMP-2蛋白在MS并发胸主动脉瘤壁病变区和非病变区的平滑肌细胞中均呈弱阳性表达，两者的表达强度无明显差异。Ⅳ型胶原在胸主动脉瘤壁的病变区呈阴性表达，而在非病变区呈阳性表达。结论基质金属蛋白酶MMP-2的过度分泌、激活，TIMP-2的活性降低与马方综合征并发胸主动脉瘤壁中的弹性纤维及胶原纤维黏液样变性密切相关。MMP-2，TIMP-2和Ⅳ型胶原在马方综合征并发的胸主动脉瘤的发生发展中起-定的作用。     

补肾活血法对肾小球系膜细胞MMP-2及TIMP-2表达的影响

摘要: 目的 观察补肾活血法组方中药对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在高糖培养的肾小球系膜细胞（GMC）中表达的影响。方法 将体外培养的GMC分为高糖组（30mmol/L）、正常糖组（5.4 mmol/L）和高糖+补肾活血组方中药组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定GMC上清液中Ⅳ型胶原的分泌;免疫细胞化学法及流式细胞仪（FCM）检测MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的蛋白表达。结果 与正常糖组比较,随着培养时间的延长,高糖组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原分泌明显增加,MMP-2、MT1-MMP表达减少,TIMP-2表达升高（p<0.01）。补肾活血法组方中药可以上调MMP-2的表达,下调TIMP-2的表达。结论 补肾活血法组方中药可以加速细胞外基质降解,减少细胞外基质积聚,从而防治肾小球硬化。     

补肾活血法对肾小球系膜细胞MMP-2、TIMP-2表达的影响

摘要: 目的 观察补肾活血法组方中药对基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、膜型基质金属蛋白酶-1（MT1-MMP）、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在高糖培养的肾小球系膜细胞（GMC）中表达的影响。方法 将体外培养的GMC分为高糖组（30mmol/L）、正常糖组（5.4 mmol/L）和高糖+补肾活血组方中药组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定GMC上清液中Ⅳ型胶原的分泌;免疫细胞化学法及流式细胞仪（FCM）检测MMP-2、MT1-MMP、TIMP-2的蛋白表达。结果 与正常糖组比较,随着培养时间的延长,高糖组细胞培养上清液中Ⅳ型胶原分泌明显增加,MMP-2、MT1-MMP表达减少,TIMP-2表达升高（p<0.01）。补肾活血法组方中药可以上调MMP-2的表达,下调TIMP-2的表达。结论 补肾活血法组方中药可以加速细胞外基质降解,减少细胞外基质积聚,从而防治肾小球硬化。     

银屑病患者微血管密度与MMP-2和TIMP-1表达研究

目的研究基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和组织基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）在银屑痛皮损组织中的表达情况及其与微血管密度（MVD）的关系。方法采用免疫组化ABC法检测银屑痛和正常皮肤组织MMP-2-,TIMP-1蛋白的表达情况，用血管内皮细胞特异性标志CD34抗体检测MVD。蛄果银屑痛患者皮损MVD明显高于对照组（P〈0．01）；患者皮损中既可表达MMP-2，又可表达TIMP-1，而在正常皮肤不表达；MMP-2表达强度随着MVD的增高而增强（P〈0．01），TIMP-1表达程度随着MVD的增高而减弱（P〈0．01）。蛄论银屑痛患者皮损组织中MMP-2、TIMP-1的表达与MVD有关。     

MMPs／TIMPs在甲状腺乳头状癌细胞中的表达与作用的研究

目的：探讨甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）患者癌细胞中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）和金属蛋白酶的组织抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs）蛋白的表达水平，探讨MMPs/TIMPs与甲状腺乳头状癌发生、发展之间的相互关系。方法：应用ELISA方法检测甲状腺正常组织和乳头状癌癌细胞培养液中MMP-2、MMP-9以及TIMP-1、TIMP-2的分泌水平：采用MTS掺人试验检测在rhMMP-2或抗MMP-2中和抗体的作用下，甲状腺正常组织细胞和乳头状癌癌细胞增殖水平。结果：甲状腺乳头状癌癌细胞分泌MMP-2、MMP-9水平提高，而分泌TIMP-1、TIMP-2水平降低，MMPs与TIMPs的比值升高特别显著；MMP-2对甲状腺乳头状癌癌细胞有明显的促增殖作用，抗MMP-2单克隆抗体能明显地抑制癌细胞生长。结论：MMPs与TIMPs的比值有望作为预测甲状腺乳头状癌生长和转移的一项检测指标。