益气活血解毒方对球囊损伤后大鼠颈动脉早期血管重构和炎性因子的影响

目的:观察益气活血解毒方对血管损伤后血管重构指标及炎性因子的干预作用。方法:采用球囊导管损伤大鼠左侧颈总动脉模型,动物随机分为假手术组、模型组、他汀组和益气活血解毒组。用药后7天行HE染色,观察血管壁各层面积和管腔内径,放免法检测血清单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、C反应蛋白(CRP)以及转化生长因子-β(TGF-β)的浓度。结果:与假手术组比,模型组内膜轻度增生(P<0.01),外膜明显增厚,面积变大(P<0.05),MCP-1、CRP、TGF-β含量显著升高(P<0.01);与模型组比,益气活血解毒方明显减少内膜面积(P<0.05),降低CRP、TGF-β的含量(P<0.01);阿托伐他汀显著降低TGF-β的含量(P<0.05)。结论:球囊损伤大鼠颈总动脉早期,外膜增生明显,内膜有轻度增生,但管腔内径无显著变化,血管重构主要表现为正性重构,并伴随MCP-1、CRP、TGF-β含量的显著上升。益气活血解毒方抑制新生内膜生成,可能与降低CRP、TGF-β的含量有关。     

益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预

观察益气活血方对球囊损伤大鼠颈动脉狭窄的干预作用,初步探讨其作用机理。方法:SD大鼠48只,用2.0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈动脉球囊损伤模型,中药各组自手术前一天灌胃给药。每组动物于相应时相点麻醉心脏放血处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和Masson染色。然后输入HMIAS-2000型全自动彩色图像分析系统,观察动脉球囊损伤后相关指标的变化,统计分析益气活血方对其的影响。结果:益气活血方各组大鼠术后28天内膜增生面积、内膜增生平均厚度、残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比差别有极其显著的意义(P<0.01);益气活血方各组大鼠术后28天胶原增生情况与模型组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:益气活血方可显著防止或减轻球囊扩张大鼠颈总动脉所致的管腔狭窄,而且大剂量益气活血方作用更明显。     

益气活血方及其拆方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预

目的:观察益气活血方及其拆方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预,初步探讨其作用机理。方法:SD大鼠60只,随机分成5组,用2.0F球囊导管自右股动脉插管建立大鼠左颈总动脉球囊损伤模型,治疗结束,每组动物于相应时相点(5d、28d)处死后,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色和Masson染色。然后将染色图片输入HMIAS-2000型全自动彩色图象分析系统,观察动脉球囊损伤后相关指标的变化,统计分析益气活血方及其拆方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的影响。结果:益气活血方及其拆方各组大鼠术后28天损伤血管内膜增生面积、内膜增生平均厚度、残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比差别有极其显著的意义(P<0.01);益气活血方及其拆方各组大鼠术后28天胶原增生情况与模型组相比差异有显著性(P<0.05);结论:益气活血方及其拆方可显著防止或减轻球囊扩张大鼠颈总动脉所致的管腔狭窄,并且,以益气活血方组和黄芪组疗效较好。     

益气活血解毒化痰方对实验性肝纤维化大鼠的胶原合成及TGF-β1的影响

目的:观察益气活血解毒化痰方对二甲基亚硝胺(DMN)诱导的大鼠肝纤维化的胶原合成及转化生长因子β1(TGF-β1)的影响.方法:DMN诱导大鼠肝纤维化,预防及治疗性灌服益气活血解毒化痰方,以重组人干扰素α2b肌肉注射对照.90天后消化法测肝组织匀浆羟脯氨酸(Hyp)含量;放射免疫分析法测定层黏连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)含量;同时苦味酸-天狼星红染色,偏振光镜下观察胶原纤维增生程度;原位杂交法观察TGFβ1mRNA的表达.结果:与模型组相比,预防性给药能明显减少肝纤维化大鼠LN含量(P＜0.05),明显降低纤维化计分(P＜0.05),明显降低TGF-β1 mRNA阳性染色的面积百分比(P＜0.05);治疗性给药明显降低Ⅳ-C、HA含量(P＜0.05);预防及治疗给药均明显降低肝组织Hyp含量(P＜0.05),改善胶原纤维增生程度,抑制TGF-β1 mRNA的表达.结论:预防性及治疗性服用益气活血解毒化痰方均能抑制DMN诱导的大鼠胶原增生及TGFβ1 mRNA的表达,而预防性给药效果更为明显.     

黄柏提取物小檗碱对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生及炎性因子的影响

目的探讨黄柏提取物小檗碱对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生及炎性因子的影响。方法采用体质量350~400 g雄性Wistar大鼠制备颈动脉球囊损伤模型,将40只成模大鼠随机分为模型组和小檗碱组各20只,其中小檗碱组给予小檗碱2.5 mg/kg腹腔注射,每天1次,连续14 d。另取20只雄性Wistar大鼠仅行颈部切开作为假手术组。实验结束后处死各组大鼠并取左侧颈动脉,经石蜡包埋后进行HE染色,观察病理形态并比较各组血管内膜面积、中膜面积及内膜与中膜面积的比值(I/M),采用酶联免疫吸附法检测各组血清炎症因子[单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、C反应蛋白(CRP)、转化生长因子-β(TGF-β)和前列腺素E2(PGE2)]水平,同时采用实时定量PCR法检测左侧颈动脉标本中炎症反应限速酶环氧化酶-2(COX-2)mRNA和磷脂酶A2mRNA水平。结果假手术组血管无内膜增生,且光滑完整;模型组出现严重血管内膜增生,且发生严重管腔狭窄;小檗碱组血管内膜增生受抑制,管腔狭窄获显著缓解。模型组新生血管内膜面积、I/M及血清MCP-1、CRP、TGF-β、PGE2水平和左侧颈动脉COX-2 mRNA和磷脂酶A2mRNA水平均明显高于假手术组(P均0.05);小檗碱组上述指标均明显低于模型组(P均0.05),但除CRP与假手术组比较差异无统计学意义外(P0.05),其余指标水平均明显高于假手术组(P均0.05)。结论黄柏提取物小檗碱可抑制大鼠颈动脉球囊损伤后血管内膜增生及炎性反应,可能与其抑制炎症反应限速酶的表达水平有关。     

赤芍防止高脂喂养兔颈总动脉球囊损伤术后血管狭窄的实验研究

目的 观察赤芍提取物对高脂喂养兔颈总动脉球囊损伤术后血管狭窄有无防止作用。方法 采用Clowes方法建立兔颈总动脉球囊损伤模型,并给予赤芍提取物。免疫组化染色测定兔颈动脉新生内膜成分、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及巨噬细胞表达;血管特殊染色观察Ⅰ型胶原增生;图像分析系统测定新生内膜面积。结果赤芍提取物可减少PCNA阳性细胞数,抑制Ⅰ型胶原增生,减轻新生内膜形成。结论 赤芍对高脂喂养所致动脉粥样硬化兔颈总动脉球囊损伤术后再狭窄血管有显著防治作用。     

解毒消痰方抑制S180肉瘤VEGF TNF-α TGF-β1表达的实验研究

目的：探讨解毒消痰方对S180荷瘤鼠VEGF、TNF-α TGF-β1的影响。方法：建立小鼠S180皮下移植瘤模型。解毒消痰方灌胃3周后处死，测定抑瘤率，采用免疫组化法检测小鼠肿瘤组织VEGF、TNF-α TGF-β1的表达情况。结果：解毒消痰方抑瘤率为53％，VEGF、TNF-α TGF-β1表达水平低于空白对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：解毒消痰方抑制S180肉瘤生长，机理可能与抑制VEGF、TNF-α TGF-β1等炎症因子、生长因子有关。     

益气活血方对高脂大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生的影响

目的观察益气活血方对高脂大鼠颈总动脉球囊损伤后血管内膜增生的抑制作用。方法将90只雄性SD大鼠随机分为模型组、阿司匹林组及益气活血方大、中、小剂量组。大鼠给予高脂饲料喂养30 d,造成高脂血症;然后经右股动脉穿刺球囊扩张损伤大鼠左颈总动脉,造成颈总动脉管腔的狭窄。手术前1 d开始给药,每组动物于术后5、14、28 d处死,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色。结果术后5 d血管狭窄不明显,术后14 d和28 d血管内膜明显增厚,管腔狭窄,模型组尤为明显。益气活血方干预后,大剂量组内膜增生平均厚度,残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比,P〈0.01,其余各用药组与模型组相比,P〈0.05,结论益气活血方可显著抑制高脂大鼠颈总动脉球囊扩张后所致的血管内膜增生,益气活血方大剂量作用更明显。     

补肾通督方对强直性脊柱炎血清TNF-α及TGF-β1水平的影响

目的 探讨肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF α）、转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGF β1）与强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）发病的关系及补肾通督方对AS患者血清TNF-α、TGF-β1的影响。方法 采用酶联免疫法（ELISA）对治疗Ⅰ组（30例，采用柳氮磺吡啶治疗）和治疗Ⅱ组（35例，采用补肾通督方治疗）患者治疗前及治疗24周后的TNF-α、TGF-β1水平进行测定，并设立30名健康体检人员作为正常组。同时测定两组AS患者治疗前后的血沉（ESR）、C-反应蛋白（CRP）。结果 治疗前两组患者血清TNF-α水平增高，血清TGF- β1水平降低，与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.01），血清TNF-α水平与ESR、CRP呈正相关（r=0.296, r=0.249；P＜0.05）。血清TGF-β1水平与ESR、CRP无统计学意义相关性（r=－0.222, r=－0.203；P＞0.05）。Ⅱ组治疗后，AS患者血清TNF-α水平明显降低，血清TGF-β1水平提高，且ESR、CRP显著降低（P＜0.01）。结论 补肾通督方可调整AS患者血清TNF-α、TGF-β1水平，从而抑制免疫炎症反应，达到治疗AS的作用。     

益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/smad信号通路及结缔组织生长因子的影响

目的:观察益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/smad信号通路及结缔组织生长因子(connectivetissue growth factor,CTGF)的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠30只诱导建立单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,益气活血方大、中、小剂量组和西药组,另取健康雄性Wistar大鼠6只设为假手术组。3周后处死大鼠,称取体质量;取血清检测肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(bloodurea nitrogen,BUN)水平;取肾脏组织采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法检测各组转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、smad2、smad7、CTGF mRNA和蛋白表达水平;苏木精-伊红染色和Masson染色检测各组肾间质纤维化指数。结果:模型组大鼠血清Cr和BUN值较假手术组偏高;与模型组比较,大剂量益气活血方可以降低Cr和BUN值,但差异无统计学意义。苏木精-伊红染色和Masson染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少,胶原成分显著增加。益气活血方大剂量组、中剂量组和西药福辛普利钠组大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况较模型组明显减轻,胶原成分明显减少。与假手术组比较,模型组大鼠肾脏组织中TGF-β、smad2和CTGFmRNA以及蛋白表达水平明显升高(P0.05),smad7的表达水平则明显降低(P0.05)。与模型组比较,益气活血方大剂量组和中剂量组大鼠TGF-β、smad2、CTGF mRNA和蛋白表达明显下降(P0.01,P0.05),smad7表达明显升高(P0.01,P0.05)。结论:UUO大鼠肾组织中CTGF mRNA的表达可能通过TGF-β/smad信号通道进行调节;益气活血方可以通过下调TGF-β、smad2和上调smad7的表达来抑制CTGF表达,进而遏制肾纤维化的进展。