螺旋藻酸性多糖的电泳方法研究

利用琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺梯度胶电泳及等电聚焦电泳对从螺旋藻中分离出的酸性多糖进行了研究。结果表明，螺旋藻酸性多糖的琼脂糖凝胶电泳呈单一斑点，与其他几种硫酸化多糖相比，迁移率有较大差异；利用聚丙烯酰胺梯度胶电泳可按分子质量大小将其分成3个组分，该结果与高效液相检测结果比较，两者基本吻合；螺旋藻酸性多糖的等电聚焦电泳呈单一条带，分布范围在pH值6．67～7．72。     

硫酸化香菇多糖的琼脂糖电泳鉴别

目的用琼脂糖凝胶电泳鉴别香菇多糖及硫酸化香菇多糖。方法利用肝素、低分子肝素、香菇多糖、硫酸化香菇多糖之间电荷密度及相对分子质量的差异 ,在巴比妥缓冲液中进行琼脂糖凝胶电泳。结果根据电泳迁移率的不同 ,可明显区分香菇多糖及其硫酸化衍生物。结论该法重现性好 ,操作简单 ,可用于香菇多糖及硫酸化香菇多糖的鉴别。     

螺旋藻中性多糖硫酸化及性质研究

采用氯磺酸-吡啶法对螺旋藻中性多糖进行硫酸化修饰；玫瑰酸钠法测定修饰前后的多糖SO4^2-含量分别为0．17％、20．0％；取代度Ds=0．429；利用琼脂糖凝胶电泳对多糖硫酸酯修饰物进行研究。结果表明多糖硫酸酯修饰物的琼脂糖凝胶电泳呈一均一斑点．与其他几种硫酸化多糖相比迁移率有较大差异；红外光谱法确定硫酸酯键在1270～1200cm^-1．1000～800cm^-1处存在强的特征吸收峰；HPLC显示出一个主要的单峰，说明此制备方法可行。     

当归多糖铁的定性鉴别及其铁含量的初步研究

目的:对当归多糖铁的定性鉴别反应和高价铁的含量等理化性质进行初步研究.方法:以高价铁盐的鉴别反应为依据,通过与氢氧化铁进行比较确定当归多糖铁的定性鉴别反应;采用置换碘量法测定当归多糖铁中铁的含量.结果:当归多糖铁显示高价铁盐的鉴别反应;铁含量10%～40%.其水溶性与铁含量有关.结论:当归多糖铁可采用高价铁盐的鉴别反应进行定性鉴别,铁含量在20%～25%的范围内有较好的水溶性.     

硫酸多糖电泳方法的研究

目的研究几种海洋硫酸多糖的电泳行为。方法采用醋酸纤维膜电泳法和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法 ,染色剂选用爱茜蓝。结果几种海洋硫酸多糖的醋酸纤维膜电泳均呈单一斑点 ,与标准肝素相比 ,几种海洋硫酸多糖的迁移值不同 ;在建立的PAGE电泳条件下肝素获得了很好的分离 ,几种海洋硫酸多糖的PAGE电泳区带均呈连续分布 ,并利用电泳图象扫描软件进行了相对分子量分布分析。结论醋酸纤维膜电泳法可用于海洋硫酸多糖的定性鉴别 ,PAGE法可用于海洋硫酸多糖相对分子量分布的测定     

等电点除蛋白的pH值对螺旋藻酸性多糖硫酸基团含量的影响

考察等电点除蛋白对螺旋藻酸性多糖的硫酸根含量的影响。采用热碱水提取，乙醇沉淀，CPC络合得螺旋藻酸性多糖。硫酸苯酚法测定糖含量，聚丙烯酰胺凝胶电泳和氯化钡明胶法检查硫酸根，200～400nm紫外扫描及水解氨基酸检测蛋白。结果表明，不同酸化条件对螺旋藻酸性多糖的硫酸根含量有明显的影响，以pH值4．0去除蛋白效果最佳，硫酸根保留相对较多。     

益多螺旋藻片的制备及质量控制

目的:探讨益多螺旋藻片的制备工艺及质量控制标准.方法:采用喷雾制粒法、加入泡腾崩解剂的工艺制备益多螺旋藻片,采用显微鉴别及薄层色谱法鉴别螺旋藻,采用测定总氮(N)含量来控制制剂的内在质量.结果:定性、定量方法简便、准确,专属性强,重现性好.结论:本制备工艺合理,质量控制方法准确,可用于本品的质量控制.     

海带硫酸多糖的自由基降解

文章采用自由基法降解海带硫酸多糖,然后通过琼脂糖凝胶电泳来分析降解时不同维生素C浓度、降解的连续性、各种不同海带硫酸多糖,以及海藻酸、透明质酸、硫酸软骨素在自由基降解时的特点。实验发现海带硫酸多糖可以连续被自由基有效的降解,并且该方法可适用于各种多糖,这有可能为海带硫酸多糖的大规模降解提供一种很好的方法。     

杏鲍菇子实体多糖的提取和纯化工艺研究

杏鲍菇是一种珍贵食用菌,杏鲍菇多糖具有多种生物活性,本文对杏鲍菇子实体中多糖的最佳提取条件进行了筛选,同时,应用sevage法除蛋白,乙醇沉淀,离心,真空干燥,得到多糖粗品。再用DEAE-纤维素层析法进行多糖的分离和纯化,最后采用紫外光谱扫描、琼脂糖凝胶电泳和高效液相色谱进行分析检测,最后获得单一多糖组分。     

海带硫酸多糖的降解、分离纯化及理化性质分析

文章采用自由基方法降解海带硫酸多糖，然后通过琼脂糖凝胶电泳、凝胶色谱等方法进行分离纯化；分别利用硫酸酚法和明胶比浊法，测定糖的含量和硫酸根的含量；MN-纤维素膜层析和气相色谱测定单糖组成；利用超滤和凝胶过滤测定降解多糖的分子质量等。海带硫酸多糖可以被自由基有效地降解，降解之后海带硫酸多糖的多糖含量、硫酸根含量及单糖组成基本没有变化，分子质量可被降解到10000-15000左右。     

β-Trichosanthin: a new abortifacient protein from the Chinese drug,Wangua, Trichosanthes cucumeroides

β-Trichosanthin was a new abortifacient protein purified from the Chinese drug, Wangua, root tubers of Trichosanthes cucumeroides (Cucurbitaceae). The purification procedure involved acetone fractionation, ammonium sulfate precipitation, ion-exchange chromatography on CM-Sepharose and preparative agarose electrophoresis. Homogeneity of β-trichosanthin was demonstrated in immunoelectrophoresis, agarose electrophoresis and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. It had a molecular weight of 28 000 and no cysteine in its molecule. It differed from trichosanthin, a known abortifacient protein isolated from a related Chinese drug, Tianhuafen, root tubers of Trichosanthes kirilowii (Cucurbitaceae), in molecular weight, carbohydrate content, charge and amino acid composition. β-Trichosanthin was, however, immunochemically identical to trichosanthin and was about twice as potent as trichosanthin in inducing mid-term abortion in mice.     

Damage of Trypanosoma cruzi deoxyribonucleic acid by nitroheterocyclic drugs

Kinetoplast DNA (kDNA) from Trypanosoma cruzi epimastigotes pretreated with the trypanocidal drugs nifurtimox (10 or 100 microM) or benznidazole (38 or 380 microM) showed an increased number of strand-breaks, as revealed by (a) trapping of alkali-denatured kDNA by nitrocellulose filters and (b) electrophoresis in an alkaline 2% agarose gel. Similar damage was observed in nuclear DNA (nDNA), as detected by centrifugation in an alkaline-sucrose gradient. DNA damage was reversible since reincubation in fresh medium for 24 hr restored filtration and electrophoretic and sedimentation patterns to normal.     

Nick translation studies on DNA strand breaks in pBR322 plasmid induced by different chromium species

Single strand breaks are DNA defects caused by various chemicals. DNA strand breaks induced in vitro by chromium(VI) during the reduction of this chromium species with glutathione or hydrogen peroxide were examined. Using DNA agarose gel electrophoresis and a nick translation assay, strand breaks were detected only when chromium(VI) was reduced by hydrogen peroxide. The reduction of chromium(VI) by an excess of glutathione led to no alteration in the DNA agarose gel electrophoresis pattern of the double-stranded plasmid pBR322 DNA and in the nick translation assay, indicating that no strand breaks had occurred under these conditions. No strand breaks could be detected during the reduction by hydrogen peroxide after the addition of superoxide dismutase. This indicates that hydroxyl radicals from peroxochromium complexes may be a relevant reactive species involved in chromate genotoxicity.     

山楂中谷甾醇抑制肿瘤细胞的研究

目的从山楂中提取及鉴定谷甾醇,并研究其对3种肿瘤细胞和人体正常肝脏细胞的作用。方法取对数生长期的细胞进行MTT法细胞增殖实验及DNA凝胶电泳实验,观察谷甾醇对不同细胞的作用。结果MTT法细胞增殖实验显示一定剂量的谷甾醇对体外培养的HepS、S180、EAC细胞有显著的抑制作用(P<0.01),抑制率总体上与时间和浓度呈正相关;对L02细胞无明显的抑制作用(P>0.05);电泳结果显示经谷甾醇作用的HepS细胞DNA出现梯带。结论谷甾醇可能是通过促进肿瘤细胞凋亡来抑制其增殖。     

糖尿病肾病患者尿蛋白电泳测定及临床意义

目的:探讨糖尿病肾病患者进行尿蛋白电泳测定的临床意义.方法:采用全自动琼脂糖凝胶电泳分析仪对20例正常对照组及60例糖尿病患者进行尿蛋白电泳分析.结果:60例糖尿病患者,24例尿蛋白定性阴性中有17例没有检出尿蛋白,1例肾小管性蛋白尿,6例为生理性蛋白尿.36例尿蛋白定性阳性患者中生理性蛋白尿7例,4例肾小管性蛋白尿,15例肾小球性蛋白尿,10例混合性蛋白尿.结论:对糖尿病患者进行尿蛋白电泳测定,对糖尿病患者早期肾损伤诊断、判断肾损伤程度和部位有重要意义.     

引物标记技术的应用与葡萄球菌多重耐药基因检测法的建立

目的 基于多重基因遗传信息表达分析系统(GeXP)技术平台,应用CY5(荧光染料)标记的特异引物代替通用引物,建立一种高通量的葡萄球菌多重耐药基因检测法。方法 设计细菌16S rDNA、耐甲氧西林相关基因(mecA、MecA LGA251)与耐大环内酯类相关基因(ermA、ermB、ermC、sat4、msrA、ereA、ereB、mefA/E)的引物,经“PCR+琼脂糖电泳”筛查2014年1月—2016年12月中山大学附属第八医院129株耐甲氧西林或者耐红霉素葡萄球菌基因,同时优化PCR。用CY5标记上游引物5'端,制作GeXP多重PCR引物。应用多重PCR扩增多重耐药基因核酸,产物经琼脂糖电泳与GeXP毛细管电泳,分析电泳图优化PCR。应用优化后的GeXP多重PCR扩增43株葡萄球菌,验证应用效果。结果 129株葡萄球菌筛出7种基因(16S rDNA、mecA、ermA、ermB、ermC、sat4和msrA)。16S rDNA、mecA、ermA、ermB、ermC和msrA引物特异性好,但不同核酸的sat4基因能扩增出两种不同大小片段。建立的GeXP多重PCR能同时检出所有靶基因。43株葡萄球菌的检测结果与表型检测(VITEKⅡ Compact System)相符;与“PCR+琼脂糖电泳”相比：sat4符合率为97.67%(42/43),无统计学差异(P＞0.05);msrA符合率为95.35%(41/43),无统计学差异(P＞0.05);ermA、mecA、16S rDNA、ermB和ermC符合率均为100%(43/43)。结论 采用CY5标记特异引物应用于GeXP系统检测葡萄球菌多重耐药基因的方法可行,其特异性与敏感性高,若采用更多引物,其检测通量可进一步提高。