RECK基因在子痫前期患者胎盘的表达及其与MMP-2活化的关系

目的 通过检测RECK基因在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与MMP-2活化的关系,探讨RECK基因在胎盘滋养细胞浸润机制中的作用.方法 分别采用RT-PCR、Western blot检测正常妊娠孕妇(正常妊娠组,22例)、子痫前期孕妇(其中轻度22例,重度20例)胎盘组织中RECK mRNA和蛋白的表达;采用明胶酶谱法检测3组孕妇胎盘组织中MMP-2的活化比例.结果 轻度、重度子痫前期组胎盘组织中RECK mRNA、蛋白的表达水平均明显高于正常妊娠组,且重度子痫前期组RECK mRNA、蛋白的表达水平均明显高于轻度子痫前期组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01);而轻度、重度子痫前期组MMP-2的活化比例均明显低于正常妊娠组,且重度子痫前期组MMP-2的活化比例明显低于轻度子痫前期组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01).正常妊娠组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘组织中RECK mRNA及其蛋白表达与MMP-2的活化比例均呈负相关关系(均P<0.01).结论 子痫前期孕妇胎盘组织中RECK表达异常升高,MMP-2活性受到抑制,可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程.     

p57kip2 基因在子痫前期患者胎盘表达的研究

目的 探讨p57kip2基因的核酸及蛋白水平在正常孕妇和子痫前期患者胎盘上的表达,探索p57kip2基因与子痫前期发病之间的关系.方法 运用免疫组织化学SP法对p57kip2基因在胎盘组织中的表达进行定位检测;通过逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)对37例重度子痫前期、22例轻度子痫前期及53例正常妊娠胎盘组织中的p57kip2基因的核酸水平进行检测;通过免疫印迹法对纳入对象的p57kip2蛋白表达水平进行检测.结果 免疫组化结果显示p57kip2基因选择性表达于胎盘滋养细胞的细胞核中.RT-PCR结果显示:与正常妊娠组比较,轻、重度子痫前期组p57kip2基因mRNA表达无明显变化(P＞0.05),重度子痫前期组p57kip2基因的mRNA表达水平低于轻度子痫前期组[P＜0.05,95％CI:(-0.736 9,-0.095 8)].免疫印迹结果显示:与正常妊娠组比较,轻、重度子痫前期组p57kip2蛋白表达无明显变化(P＞0.05),但重度子痫前期组p57kiP2蛋白的表达水平低于轻度子痫前期组[P＜0.05,95％CI:(-1.441 7,-0.162 4)].结论 p57kip2基因的核酸和蛋白在重度子痫前期患者胎盘中的表达水平均低于轻度子痫前期患者,提示p57kip2基因可能参与子痫前期的病理过程.     

子痫前期胎盘组织中CASR和MMP-2表达的研究

目的探讨CASR和MMP-2在子痫前期患者胎盘组织mRNA及蛋白表达水平变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用免疫组化法和RT-PCR技术分别检测子痫前期患者42例（子痫前期轻度组21例,重度组21例）及健康足月孕妇32例（对照组）胎盘组织中CASR和MMP-2的mRNA及蛋白表达水平。结果①对照组胎盘CASR的蛋白表达水平与子痫前期轻度组、重度组比较,差异均有统计学意义。②子痫前期重度组中MMP-2蛋白表达,明显低于对照组、子痫前期轻度组,差异均有统计学意义。③胎盘组织中CASR的mRNA表达水平,子痫前期重度组与对照组、子痫前期轻度组比较,差异均有统计学意义。④胎盘MMP-2的mRNA对照组表达与子痫前期轻度组、重度组比较,差异有统计学意义。⑤胎盘组织中CASR蛋白和mRNA水平与MMP-2呈负相关关系。结论子痫前期患者胎盘组织中CASR表达增加,MMP-2表达降低,可能与子痫前期的发病有关。     

肿瘤坏死因子-α在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子-αmRNA(TNF-αmRNA)在子痫前期发病机制中的作用。方法采用RT-PCR技术检测45例正常晚期妊娠妇女及56例子痫前期患者(其中轻度子痫前期21例,重度子痫前期35例)胎盘组织中TNF-αmRNA的表达水平。结果1.轻、重度子痫前期胎盘组织中TNF-αmRNA表达水平分别为:0.371±0.12、0.892±0.347均明显高于正常妊娠组0.138±0.092(均P<0.01),重度子痫前期组高于轻度子痫前期组(P<0.01)。2.子痫前期胎盘组织中TNF-αmRNA与24小时尿蛋白、血压、新生儿体重及胎盘重量均有明显相关性。结论1.子痫前期胎盘组织中TNF-αmRNA表达水平明显升高,并且与子痫前期病情发展密切相关。2.胎盘组织TNF-αmRNA与子痫前期患者胎儿发育密切相关。     

子痫前期病人胎盘组织可溶性endoglin表达及意义

目的 探讨可溶性endoglin(sEng)在子痫前期病人胎盘组织中的表达及其与子痫前期发病的关系.方法 2008年7月-2009年2月,选取在我科住院分娩的子痫前期病人67例,其中轻度31例(轻度子痫前期组),重度36例(重度子痫前期组).选取同期正常晚期妊娠妇女39例为对照组.酶联免疫吸附试验检测各组血清中sEng水平;采用RT-PCR、免疫印迹法分别检测各组胎盘组织中sEng mRNA以及蛋白表达水平.结果 轻度及重度子痫前期组血清sEng水平、胎盘组织sEng mRNA及蛋白表达水平明显高于对照组(F=133.54～779.63,q=13.26～53.88,P<0.01),且重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期组(q=8.59～16.79,P<0.01).轻度及重度子痫前期组血清sEng水平与胎盘组织sEng mRNA及蛋白表达水平呈正相关(r=0.781～0.888,P<0.01).结论 子痫前期病人胎盘组织sEng mRNA及蛋白表达上调,导致血清sEng水平升高,从而参与子痫前期的病理生理过程.     

TGFβ1，Bcl-2与妊娠期高血压疾病胎盘细胞凋亡的关系

目的:研究妊娠期高血压疾病患者胎盘组织的细胞凋亡以及TGFβ1和Bcl-2与细胞凋亡的关系,进一步探讨妊娠期高血压疾病发病机制.方法:收集妊娠期高血压疾病患者胎盘组织45例(15例妊娠期高血压,15例子痫前期轻度,15例子痫前期重度)和正常孕妇对照组45例.应用免疫组织化学染色法(SP法)检测胎盘绒毛滋养层TGFβ1和Bcl-2蛋白的表达;应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL法)检测胎盘绒毛组织中滋养层细胞凋亡情况,并测定凋亡率.结果:妊娠期高血压疾病组较对照组胎盘绒毛组织中滋养层细胞凋亡率及TGFβ1表达明显增高,而Bcl-2表达明显减低(均P＜0.01).随病情加重,妊娠期高血压组、子痫前期轻度组、子痫前期重度组细胞凋亡率及TGFβ1表达呈上升趋势,Bcl-2表达呈下降趋势(均P＜0.01).子痫前期重度组、子痫前期轻度组胎盘绒毛细胞凋亡发生率与TGFβ1呈正相关;与Bcl-2表达呈负相关(均P＜0.05).子痫前期重度组、子痫前期轻度组TGFβ1与Bcl-2表达呈负相关(均P＜0.05).结论:妊娠期高血压疾病胎盘细胞凋亡率明显增高,TGFβ1在滋养层细胞表达增高,Bcl-2在滋养层细胞表达降低,TGFβ1和Bcl-2平衡失调可能导致妊娠期高血压疾病的发生.     

明胶酶B及其组织抑制剂在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达及意义

目的:探讨明胶酶B及其组织抑制剂(TIMP-1)与子痫前期发生、发展的关系.方法:采用免疫组化方法对40例正常晚期妊娠和40例子痫前期患者胎盘滋养细胞中明胶酶B和TIMP-1的蛋白表达水平和组织学定位进行检测.结果:子痫前期胎盘组织中合体滋养细胞和细胞滋养细胞明胶酶B表达水平显著低于正常晚期妊娠组(P均＜0.01);TIMP-1表达重度子痫前期显著高于正常晚期妊娠组(P均＜0.05).结论:子痫前期存在促浸润蛋白和抑浸润蛋白表达的平衡失调,可能参与子痫前期的发病和进展.     

血管紧张素转换酶在子痫前期胎盘组织中的表达及活性变化

目的:探讨血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)在子痫前期发病机制中的作用.方法:原位杂交法检测30例子痫前期产妇(子痫前期轻度15例,重度15例)和12例正常产妇胎盘组织ACE mRNA的表达及分布;紫外分光光度法测定胎盘局部以及外周静脉血ACE活性.结果:ACE mRNA在各组产妇胎盘绒毛血管内皮细胞、滋养细胞中均可见表达.子痫前期组(3.12±0.94)明显高于对照组(1.65±0.67)(P＜0.05);子痫前期重度组和子痫前期轻度组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).子痫前期组胎盘组织及外周静脉血ACE活性明显高于对照组(P＜0.05),子痫前期重度组和子痫前期轻度组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).胎盘局部ACE活性与外周静脉血ACE活性呈正相关(r=0.781,P＜0.05).结论:胎盘局部ACE的表达及活性增高与子痫前期发病及病情发展密切相关.     

子痫前期患者血清脂联素水平和胎盘MMP-9表达情况及其关系

目的：探讨子痫前期患者血清脂联素水平和胎盘基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达情况及二者关系。方法：选择2007年8月～2012年8月入住我院及深圳市第七人民医院的90例经临床诊断为子痫前期患者作为观察组,另外选择同期收治的90例正常妊娠妇女作为对照组,测定两组血清脂联素水平,胎盘娩出之后取胎盘组织进行固定、切片,采用免疫组化法检测胎盘MMP-9的阳性表达率。结果：随着子痫病情的加重,患者血清脂联素水平逐渐下降,且轻度和重度子痫前期患者血清脂联素水平均明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;随着子痫病情的加重,患者MMP-9阳性表达率逐渐下降,且轻度和重度子痫前期患者MMP-9阳性表达率与对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0．05）;子痫前期患者血清脂联素水平与MMP-9的阳性表达率呈正相关性关系（r=0．75,P〈0．01）。结论：子痫前期患者血清脂联素水平与MMP-9阳性表达率较正常妊娠妇女出现显著降低,且随着病情的加重,上述两个指标值明显降低。     

细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Bak mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其意义

目的:探讨细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Bak mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其意义.方法:采用RT-PCR方法测定36例正常足月妊娠妇女(A组)、24例轻度子痫前期患者(B组)和17例重度子痫前期患者(C组)胎盘组织中Bcl-2、Bax、Bak mRNA表达水平.结果:(1)与B组(1.563±0.398)和A组(1.723±0.300)相比,C组Bcl-2 mRNA表达水平(0.642±0.288)明显降低(q=12.41,P＜0.05;q=15.69,P＜0.05),B组与A组之间无明显差异(q=2.6,P＞0.05).(2)与A组(0.347±0.191)相比,B、C组BaxmRNA表达水平(分别为0.745±0.260、1.335±0.308)明显升高(q=8.79,P＜0.05;q=19.54,P＜0.05),C组较B组升高更为显著(q=10.83,P＜0.05).(3)与B组(0.875±0.322)和A组(0.809±0.381)相比,C组BakmRNA表达水平(2.197±0.546)明显升高(q=14.52,P＜0.05;q=16.42,P＜0.05),B组与A组之间无明显差异(q=0.87,P＞0.05).结论:细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Bak mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的差异表达参与了子痫前期的病理生理过程.     

自发性高血压大鼠Klotho与MMP-9, TIMP-1和 PAI-1基因的表达及福辛普利和缬沙坦对其的干预作用

目的：观察自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHR）肾脏组织中Klotho、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1）和纤溶酶原激活物抑制剂-1（plasminogen activator inhibitor,PAI-1）基因的表达状况,探讨其在高血压肾间质纤维化中的作用及福辛普利和缬沙坦的肾保护作用机制。 方法：22周龄雄性SHR 20只随机分为4组（每组5只）：高血压组（SHR组）、fosinopril组［Fos组,10 mg/( kg·d)灌胃］,Valsartan组［Val组,50 mg/( kg·d)灌胃］和fosinopril+valsartan组［Fos＋Val组,fosinopril 10 mg/( kg·d)+valsartan 50 mg/( kg·d)灌胃］。22周龄雄性Wistar Kyoto大鼠（WKY组）5只作为对照组。用药物干预连续喂养8周,分别用RT-PCR和Western 印迹检测肾脏组织中Klotho,MMP-9,TIMP-1和PAI-1 mRNA和蛋白的表达水平。 结果：SHR组肾脏组织Klotho mRNA和蛋白表达较WKY组明显下调(P＜0.01),而MMP-9,TIMP-1和PAI-1mRNA和蛋白的表达较WKY组均明显上调(P＜0.01);用fosinopril和/或valsartan干预后,可上调Klotho mRNA在Fos,Fos＋Val组(P＜0.01）和Val组(P＜0.05）的表达,上调Klotho 蛋白在Val,Fos＋Val组(P＜0.01）和Fos组(P＜0.05）的表达。同时下调MMP-9,TIMP-1,PAI-1 mRNA和蛋白在Fos,Val,Fos＋Val组的表达(P＜0.01）。相关分析表明：Klotho mRNA和蛋白的表达与MMP-9,TIMP-1,PAI-1 mRNA (r值分别为-0.864,-0.725和-0.785,P＜0.01)和蛋白（r值分别为-0. 614,-0.579和-0.552,P＜0.05）的表达均呈负相关。 结论：高血压肾损害与抗衰老基因Klotho和基质降解相关基因MMP-9,TIMP-1,PAI-1关系密切;Klotho基因与MMP-9,TIMP-1和PAI-1基因的表达呈负相关。上调抗衰老基因Klotho表达的药物fosinopril 和/或valsartan可改善Klotho-MMPs/TIMPs-PAI-1的表达,这可能是其抗肾纤维化的重要机制。     

Modulation of Matrix Metalloproteinase and TIMP-1 Expression by TGF-β1 in Cultured Human RPE Cells

In order to investigate the effects of TGF-β1 on the expression of MMP-2, -9 and TIMP1 in human retinal pigment epithelial (RPE) cells, the third-sixth passage cultured RPE cells were treated with TGF-β~ at different concentrations (0.01, 0. 1, 1.0, 10 ng/mL), the expression of MMP-2, -9 and TIMP-1 mRNA was detected by semi-quantitative RT-PCR assays. MMP-2, -9 and TIMP-1 mRNA were expressed in the cultured RPE cells. The values of MMP-2/β-actin in the cells treated with 0.1, 1.0, 10 ng/mL TGF-β1 were 1.04±0.04, 1.07±0.02 and 1.11±0.03, respectively, significantly higher than in the control group (0. 96±0.03, P＜0. 05-0. 01). The expression of MMP-2 mRNA could be up-regulated by TGF-β1, in a dose-dependent manner. The expression of MMP-9 mRNA in the cultured RPE cells was slightly up-regulated by various TGF-β1 concentrations treatment. The values of TIMP-1/β-actin in the cells treated with 0.01 and 0. 1 ng/mL TGF-β1 were 0. 85±0.01 and 0.97 ± 0.02 respectively, significantly lower than in the control group (1.07±0.04, P＜0.01), indicating that the expression of TIMP-1 mRNA was down-regulated by TGF-β1 at low concentrations. But along with the increase of TGF-β1 concentrations (1.0 and 10 ng/mL), the expression of TIMP-1 mRNA was slightly up-regulated, not significantly different from that in the control group (P＞0.05). It was concluded that TGF-β1 might play an important role in the up-regulation of the expression of MMP-2 in RPE cells and result in a directional shift in the balance between MMP and TIMP. This may be facilitated for RPE cells to migrate in the pathogenesis of vitreoretinopathy.     

基质金属蛋白酶-2,9及其抑制剂在骨肉瘤中表达的意义

[目的]探讨基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)及其特异性抑制剂TIMP-2,1在骨肉瘤中的表达情况及其与骨肉瘤侵袭、转移、复发的关系。[方法]采用免疫组织化学链酶菌抗生物紊一过氧化酶(SP)法检测了62例骨肉瘤(初发性骨肉瘤51例、复发性骨肉瘤11例,确诊时即伴有肺转移者9例、不伴有肺转移者53例)和正常对照组织中MMP-9、MMP-2、TIMP-1、TIMP-2的表达,并根据阳性瘤细胞占肿瘤细胞总数的比率进行半定量量化分析和非参数检验。[结果]MMP-9、TIMP-1在骨肉瘤中的阳性表达率分别为76％、18％,与二者在正常对照组织中的阳性率相比,MMP-9表达明显升高,TIMP-1表达明显降低(P均<0.01)。MMP-2、TIMP-2在骨肉瘤中的阳性表达率分别为69％、52％,与二者在正常对照组织中的阳性率相比差异无显著性(P均>0.05)。MMP-9在肿瘤细胞的胞浆及胞膜中均有表达,且在肿瘤的侵袭边缘阳性细胞数目较多,染色强度较高。MMP-2,9及TIMP-1,2在初发性和复发性骨肉瘤之间以及在伴有肺转移和不伴有肺转移的骨肉瘤之间的表达差异无显著性。Spearman相关分析表明骨肉瘤中MMP-9与MMP-2、MMP-2与TIMP-2以及TIMP-1与TIMP-2之间的表达均显著性相关。[结论]骨肉瘤组织中MMP-9表达升高、TIMP-1表达降低,二者协同促进肿瘤细胞的生长和局部的侵袭破坏。骨肉瘤     

垂体腺瘤中MMP-2、TIMP-2、CD147 mRNA的表达及其与垂体腺瘤侵袭性的关系

目的 探讨MMP-2、TIMP-2和CD147 mRNA在垂体腺瘤中的表达及其与垂体腺瘤侵袭性的关系.方法 采用RT-PCR法对60例垂体腺瘤中MMP-2、TIMP-2和CD147的mRNA进行半定量分析.结果 影像学证实,60例垂体瘤中,30例为侵袭性垂体腺瘤,30例为非侵袭性垂体腺瘤.RT-PCR显示,侵袭性垂体腺瘤组中MMP-2及CD147 mRNA表达显著高于非侵袭性垂体腺瘤组（P＜0.01）;TIMP-2mRNA表达显著低于非侵袭性腺瘤组（P＜0.01）.Pearson相关分析显示,侵袭性垂体腺瘤组中MMP-2与CD147 mRNA的表达成正相关（r=0.69,P＜0.05）.侵袭性腺瘤组中MMP-2与TIMP-2 mRNA表达水平成负相关（r=-0.68,P＜0.05）.结论 MMP-2、CD147 mRNA高表达,及TIMP-2 mRNA低表达与垂体腺瘤的侵袭性密切相关.MMP-2、TIMP-2、CD147可以作为判定垂体腺瘤侵袭性的有效指标.     

高血压大鼠肾脏基质金属蛋白酶及组织型基质金属蛋白酶抑制剂表达与活性的变化

[目的]研究在卒中易感型自发性高血压大鼠（stroke-prone spontaneously hypertensive rat,SHR-SP）肾脏中,基质金属蛋白酶（Matrix metalloproteinases,MMPs）-2,-9以及组织型基质金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibitors of matrix metalloproteinases,TIMPs）-1,-2的表达与活性的变化.[方法]分别采用40只7周龄雄性SHR-SP大鼠及10只同周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠作为高血压组与阴性对照组.观察期间定期测量各组大鼠无创鼠尾压.6个月后,处死存活大鼠留取血液及肾脏标本,测定血清肌酐及尿素氮浓度,采用组织病理染色观察两组大鼠肾脏组织学改变,采用明胶酶谱法分析存活大鼠肾脏MMP-2和MMP-9蛋白活性,并采用逆明胶酶谱法及蛋白质印迹分析TIMP-1和TIMP-2蛋白表达和活性.[结果]（1）明胶酶谱分析显示：SHR-SP肾脏中MMP-2活性较WKY组明显增高[（3.28±1.17） vs.（1.26±0.62）; P＜ 0.01].（2）逆明胶酶谱分析显示：高血压大鼠肾脏TIMP-2的活性明显高于WKY组[（1.12±0.43） vs.（0.78±0.34）,P＜0.05].（3）蛋白质印迹结果显示：高血压组大鼠肾脏TIMP-1、TIMP-2表达较对照组高[（TIMP-1：（3.44±0.13） vs.（2.31±0.15）,TIMP-2：（6.44±0.49）vs.（4.94±0.68）,P＜0.01].[结论]SHR-SP肾脏组织中MMP-2及TIMP-2的活性增高,TIMP-1及TIMP-2的表达均明显升高.     

心房肌基质金属蛋白酶-9和组织金属蛋白酶抑制因子-1表达改变对房颤心房重构机制的研究

目的　探讨心房肌基质金属蛋白酶- 9 (MMP -9)和组织金属蛋白酶抑制因子- 1 (TIMP1)表达水平的改变与慢性房颤心房结构重构的相关关系。方法　选取进行人工瓣膜置换术的风湿性心脏病房颤24例为研究组,风湿性心脏病窦性心律12例为对照组。上述患者术前均进行经胸超声心动图检查,留取相关资料。于手术时取左心耳心肌标本,采用RT -PCR方法检测心房肌中本研究检测慢性房颤患者心房肌中MMP- 9和TIMP- 1的mRNA水平,采用免疫组织化学方法对MMP- 9和TIMP- 1蛋白质表达半定量分析。结果　与对照组比较,风心房颤组左心房内径和右心房内径均显著扩大(P<0 .05~0 .001),心肌中MMP 9mRNA表达水平较对照组升高30 .9% (P<0 .05 );TIMP 1mRNA水平较对照组下调33 .3% (P<0 .05);左心耳心肌组织中MMP 9蛋白质水平增高100% (P<0. 001),TIMP -1蛋白质水平减少36% (P<0 .01)。左心耳心肌组织MMP- 9mRNA水平与房颤持续时间、左心房内径呈显著正相关(P<0. 05~0 .001)。结论　房颤时心房肌组织MMP 9 /TIMP- 1系统相互间的作用失衡对心房壁变薄、心房扩大和几何形状改变具有重要作用,其机制是细胞外基质过度降解。     

子癎前期患者血清对人早孕细胞滋养细胞活力和浸润功能的影响

目的 探讨子癎前期患者血清对人早孕细胞滋养细胞活力和浸润功能的影响。方法采用组织块贴壁法培养人早孕期（孕6～8周）细胞滋养细胞,传代后待细胞长满至70％～80％,分别加入正常孕妇血清（正常组）和子癎前期患者血清（子癎前期组）培养24h;CCK-8法测定细胞活力;Transwell技术检测细胞滋养细胞的浸润功能;RT—PCR法检测滋养细胞MMP-2、MMP-9和PAI-1 mRNA的表达。结果子癎前期组细胞滋养细胞活力和浸润能力均低于正常组（P〈0．05和P〈0．01）。与正常组比较,子癎前期组细胞滋养细胞MMP-2和MMP-9 mRNA的表达明显下降,而PAI-1 mRNA的表达明显升高,差异均有统计学意义（P〈0．01）。正常组和子痴前期组中,MMP-2 mRNA与PAI-1 mRNA的表达均呈负相关（r=-0．985,P〈0．01;r=-0．933,P〈0．05）;MMP-9 mRNA与PAI-1 mRNA的表达无相关性。结论子癎前期患者血清可能通过调节细胞滋养细胞中MMP-2、MMP-9 和PAI-1的表达而影响细胞的浸润能力。     

过表达TPX2对人宫颈癌HeLa细胞侵袭和凋亡的影响

目的 通过TPX2过表达慢病毒载体在人宫颈癌HeLa细胞过表达TPX2基因,在体外研究TPX2对人宫颈癌HeLa细胞侵袭和凋亡的作用及其相关机制.方法 构建TPX2过表达慢病毒载体(LV11-TPX2)及阴性对照(LV11-NC),选取稳定感染过表达慢病毒载体(LV11-TPX2)的HeLa细胞作为过表达组,将稳定感染(LV11-NC)的HeLa细胞作为阴性对照组,未感染病毒的人宫颈癌HeLa细胞作为空白对照组(CON).采用Transwell基底膜侵袭实验测定各组细胞的侵袭能力,流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况,Western blot检测细胞凋亡及侵袭相关蛋白质Bcl-2、Bax、Caspase-3、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)及nm23-H1的表达.结果 成功构建TPX2过表达慢病毒载体(LV 11-TPX2),可有效过表达TPX2 mRNA及蛋白质.与对照组比较,TPX2过表达组的HeLa细胞凋亡率明显减少(P＜0.05),穿过Transwell小室基底膜细胞明显增加(P＜0.01).LV11-TPX2感染组HeLa细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2的表达明显上调(P＜0.05),Caspase-3及Bax的表达明显下调(P＜0.05);侵袭相关蛋白质nm23-H1及TIMP-1水平明显下调(P＜0.05),MMP-9水平明显上调(P＜0.05).结论 在宫颈癌细胞过表达TPX2基因后,能抑制细胞凋亡,增强其侵袭能力,可能的机制为在宫颈癌细胞过表达TPX2能诱导凋亡和侵袭相关蛋白Caspase-3、Bax、nm23-H1及TIMP-1水平下调,Bcl-2及MMP-9水平上调.