苦楝皮提取物的抗肿瘤活性研究

[目的]研究苦楝皮提取物的抗肿瘤活性。[方法]采用提取及萃取过程制备苦楝皮提取物分离化合物,选取人肝癌BEL7402、人肺癌H460和人胃癌SGC-7901等3种细胞为被试细胞,测定苦楝皮提取物对癌细胞的抑制作用。[结果]当异川楝素和苦楝皮萜酮浓度较高时(50和100μ/ml),提取物对人胃癌、人肺癌和人肝癌细胞株的抑制率都超过或者接近50%。当其余的4种化合物浓度较高(50和100)时,其对3种细胞也有比较明显的抑制生长作用。表明从苦楝皮提取出的物质有一定的细胞毒作用。[结论]苦楝皮提取物对癌细胞的生长有抑制作用。     

植物甾醇抑制SGC-7901胃癌细胞生长和诱导DNA损伤的研究

为确定和评价植物甾醇对胃癌细胞SGC-7901生长的影响,采用MTT法检测植物甾醇对SGC-7901细胞生长的抑制作用,AO/EB和DAPI染色观察细胞形态的变化,单细胞凝胶电泳检测植物甾醇对SGC-7901细胞DNA的损伤.试验结果表明,植物甾醇对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,并呈现时间-效应关系,不呈现剂量-效应关系;植物甾醇处理5d后,细胞出现皱缩、密度变小等变化;AO/EB荧光染色后,细胞核成固缩状,出现凋亡小体等凋亡细胞形态;DAPI染色后,可见细胞核边缘不整等凋亡细胞形态;单细胞凝胶电泳实验结果表明,植物甾醇混合物处理5 d的细胞出现了彗星现象.植物甾醇对SGC-7901细胞生长具有抑制作用,诱导SGC-7901细胞DNA的损伤.     

12种竹笋蛋白对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用

[目的]探讨不同种类竹笋蛋白的抗癌活性。[方法]采用植物活性蛋白提取试剂盒提取竹笋蛋白,CCK-8法检测不同浓度竹笋蛋白对胃癌细胞SGC-7901和结肠癌细胞HCT-116的增殖抑制作用,72 h后显微拍照记录细胞生长情况,并计算IC_(50)值。[结果]12种竹笋蛋白在体外均可强效抑制胃癌细胞SGC-7901和结肠癌细胞HCT-116的增殖,但抑制效果并不完全相同,在一定范围内,其抑制率与浓度呈正相关,呈现一定的剂量-效应关系。[结论]12种竹笋蛋白对肿瘤细胞,如胃癌细胞SGC-7901和结肠癌细胞HCT-116的增殖均有显著的抑制作用,为今后进一步研发竹笋源的低毒、高效的抗肿瘤药物奠定基础。     

中药防风对胃癌SGC-7901细胞生长及基因表达的研究

目的研究中药防风对胃癌SGC-7901细胞生长及基因表达的影响．方法应用集落形成实验、MTT实验及电子显微镜技术观察了防风对SGC-7901细胞生长的影响;应用免疫组织化学染色技术研究防风对SGC-7901细胞基因表达的影响．结果防风对SGC-7901细胞的生长曲线、集落形成有明显的抑制作用,其抑制作用与防风的浓度和时间呈正相关关系,其IC50值为24g／mL．防风能使SGC-7901细胞p16和p21编码基因的蛋白表达上调,PCNA,C—Met编码基因的蛋白表达下调．结论防风能抑制SGC-7901细胞生长;防风可使SGC-7901细胞的p16,p21,PCNA,C—Met表达改变．这些结果为防风在临床上的进一步应用提供了理论依据．     

九香虫血淋巴对胃癌SGC-7901细胞体外增殖的抑制作用

为探究九香虫血淋巴对胃癌细胞SGC-7901体外增殖的抑制作用,本文以体外培养人胃癌细胞SGC-7901为材料,经九香虫血淋巴处理后,采用台盼蓝染色法检测细胞死亡率,并用倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果表明:九香虫血淋巴能显著抑制胃癌细胞SGC-7901生长,且在浓度为5、10、20、30、40 mg/L时呈时间和剂量依赖性。     

SIRT1在5-FU耐药胃癌细胞中的表达及其对细胞化疗耐药的影响

目的探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)耐药胃癌细胞(SGC-7901/5-FU)中的表达情况及其对细胞化疗耐药的影响。方法通过定量RT-PCR和Western blot方法检测SIRT1 mRNA与蛋白在5-FU敏感的SGC-7901亲本细胞、SGC-7901/5-FU细胞及在SIRT1-siRNA转染后的SGC-7901/5-FU细胞中的表达;选择高干扰效率的SIRT1-siRNA转染SGC-7901/5-FU细胞,CCK8法检测5-FU对转染细胞的活性影响,流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响,Western blot法检测其对细胞p-Akt、Bax、Bcl-2和P-pg表达的影响。结果 SGC-7901/5-FU细胞中的SIRT1 mRNA与蛋白表达水平均显著高于SGC-7901亲本细胞(P0.001);SIRT1-siRNA转染SGC-7901/5-FU细胞后,SIRT1的mRNA与蛋白表达均显著降低(P0.001);5-FU作用后,SIRT1-siRNA转染组的SGC-7901/5-FU细胞增殖活性明显下降(P0.001),细胞凋亡明显增加(P0.001),且细胞中的p-Akt、Bcl-2和P-pg含量明显下降(P0.001),Bax含量明显上升(P0.001)。结论 SIRT1在5-FU耐药胃癌细胞中高表达,干扰SIRT1表达后可通过抑制细胞增殖与促进细胞凋亡来提高耐药胃癌细胞对5-FU的敏感性,这可能与细胞增殖通路相关蛋白、凋亡以及细胞多药耐药性相关蛋白变化相关。提示抑制SIRT1可作为降低胃癌多药耐药性及提高胃癌对化疗药物敏感性研究的一个新思路。     

番茄红素通过下调异柠檬酸脱氢酶1诱导胃癌细胞凋亡

目的 探究番茄红素对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法 不同剂量番茄红素处理胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803,用MTT法检测细胞增殖,Hoechst 33258染色、流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位(MMP)、活性氧(ROS),免疫印迹检测异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)、IDH2蛋白表达.结果 番茄红素呈剂量依赖性抑制SGC-7901、MGC-803细胞增殖.大于25 μmol/L番茄红素诱导SGC-7901细胞凋亡,增加ROS水平;50 μmol/L番茄红素降低MMP,下调IDH1蛋白表达(P＜0.01或0.05).结论 番茄红素可抑制胃癌细胞增殖、诱导凋亡;促凋亡机制可能是通过下调IDH1,阻断细胞ATP生成和提高细胞内ROS.     

蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响及其可能机制

通过研究蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制,为蜂王浆蛋白辅助治疗胃癌奠定实验基础。采用碱提酸沉法提取蜂王浆蛋白,并通过体外模拟消化实验得到蜂王浆蛋白体外消化产物,然后用不同质量浓度的蜂王浆蛋白体外消化物诱导体外培养的胃癌细胞SGC-7901,通过倒置显微镜观察其对胃癌细胞形态的影响,并通过集落形成实验检测诱导后胃癌细胞的集落形成能力;采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测其对胃癌细胞增殖的抑制作用,通过流式细胞术检测细胞周期及凋亡,并通过蛋白质印迹法检测其诱导后胃癌细胞中p53和PARP-1蛋白的表达情况。结果表明:蜂王浆蛋白体外消化产物使胃癌细胞形态发生皱缩,细胞密度降低,集落形成能力降低(P0.05),对胃癌细胞SGC-7901的增殖具有抑制作用。0.2 mg/mL体外消化产物经24 h和48 h培养后对胃癌细胞抑制率分别达到(57.58±3.48)%和(62.84±1.98)%(P0.05)。与空白对照组相比,蜂王浆蛋白体外消化产物对SGC-7901细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性,S期细胞减少,从而引起细胞凋亡;且经蜂王浆蛋白体外消化产物诱导后,胃癌细胞中p53蛋白表达量增加(P0.05),PARP-1蛋白表达量减少(P0.05)。说明蜂王浆蛋白体外消化产物能抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖并诱导其发生凋亡,其机制可能与p53表达上调和PARP-1表达下调有关。     

吴茱萸碱与紫杉醇协同抑制胃癌细胞SGC-7901的研究

采用MTT法检测吴茱萸碱、紫杉醇单独作用和联合作用对胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制效果;用流式细胞术评价吴茱萸碱与紫杉醇联合作用于SGC-7901细胞后对其细胞周期分布和诱导凋亡的影响。结果表明:吴茱萸碱与紫杉醇对SGC-7901细胞具有明显的协同抑制作用,且均呈现良好的量效关系;吴茱萸碱明显的降低了紫杉醇的作用浓度,并提升了紫杉醇的G1期周期阻滞和细胞凋亡效果;Western-blot结果表明,二者联合激活了Casapse 3、8、9,进而诱导细胞凋亡。     

葛仙米提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的活性研究

[目的]研究葛仙米提取物诱导肝癌细胞HepG2凋亡的活性。[方法]采用二甲基四氮唑蓝（MTT）法测定细胞存活率,形态学法观察凋亡的特征性变化,AnnexinV/PI双染及PI单染流式细胞术法检测凋亡率。[结果]经不同浓度提取物作用后,HepG2细胞的生长受到显著抑制,并呈现时间-浓度依赖关系趋势。观察细胞形态,发现有凋亡特征性变化。AnnexinV/PI双染结果显示,癌细胞早期凋亡率随提取物浓度的升高而显著增高,最高可达79.2%。PI法同样显示凋亡的发生,其凋亡峰最大比率为9.6%,显著高于对照组。[结论]葛仙米甲醇提取物能够诱导肝癌细胞HepG2的凋亡。     

Effects of Ligustrazine Combined with Cisdichlorodiamine Platinum on Anti-proliferation,Cell Cycle and Apoptosis of Human Gastric Carcinoma SGC-7901 Cell Lines

[Objective] This study aimed to investigate the combination effects of ligustrazine and cis-dichlorodiamine platinum(DDP) on anti-proliferation, cell cycle and apoptosis of SGC-7901 cell lines in vitro. [Method] SGC-7901 cells were treated with ligustrazine and DDP alone or combined for 48 h for morphology assay.Anti-proliferative effects with the same treatment for 24, 48 and 72 h were assayed by MTT method, respectively. Cell cycle distribution and apoptosis assay of treated cells were performed in flow cytometry. Zhengjun Jin's protocol was used to assay the effect of drug combination. [Result] Ligustrazine significantly increased the proliferation inhibition rate of DDP on SGC-7901 cells in combination with DDP, comparing with the effects of ligustrazine or DDP alone, and exhibited synergistic antitumor effect. The combination drug treatment induced cell cycle arrest occurred in S and G2 phase of the cell cycle and increased the apoptosis rate significantly.[Conclusion] Our results indicate that ligustrazine, as a low-toxic and natural herbal component, can significantly increase the anti-proliferative effect and apoptosis rate of antitumor drug DDP on human gastric carcinoma SGC-7901 cells.     

鹊肾树叶石油醚萃取物及其组分抗肿瘤作用研究

[目的]研究鹊肾树（Streblus asperLour.）叶石油醚萃取物及其组分的体外抗肿瘤活性。[方法]采用MTT法检测鹊肾树叶石油醚萃取物以及经硅胶柱层析分离各组分的体外抗肿瘤活性。[结果]80μg/ml鹊肾树叶石油醚萃取物对宫颈癌细胞Hela、人胃癌细胞SGC-7901、口腔上皮癌细胞KB作用48 h的抑制百分率分别达到58.6%、53.5%和75.5%。进一步分离纯化鹊肾树叶的石油醚萃取物,所得的FrⅡ组分（80μg/ml）对Hela、SGC-7901和卵巢癌细胞Ca-cell的48 h抑制率分别达到69.7%、64.6%和60.2%,FrⅢ组分对Hela、SGC-7901和Ca-cell的48 h抑制率分别达到73.1%、66.1%和52.8%。[结论]鹊肾树叶石油醚萃取物具有一定的抗肿瘤作用,经进一步分离所得的FrⅡ、FrⅢ组分对体外肿瘤细胞增殖呈明显的抑制作用。     

三叶悬钩子对3种肿瘤细胞体外生长的抑制作用

[目的]探讨三叶悬钩子对体外培养的3种肿瘤细胞的影响。[方法]以不同浓度的三叶悬钩子提取物作用于体外培养的SGC7901(人胃腺癌细胞株)、K562(人红细胞白血病细胞株)及HL60(人早幼粒白血病细胞株),然后以MTT法检测细胞的生长抑制率。[结果]三叶悬钩子氯仿提取物和石油醚提取物均能够抑制SGC7901、K562和HL60细胞的生长,抑制作用随药物浓度的增大而增强。氯仿提取物对SGC7901和K562细胞的半数抑制浓度分别为55.53和28.03μg/ml;石油醚提取物对SGC7901和K562细胞的半数抑制浓度分别为29.52和14.99μg/ml,但这2种提取物对HL60细胞的半数抑制浓度均较大。而不同浓度的氯仿提取物和石油醚提取物对3种肿瘤细胞的抑制率均小于10μg/ml的顺铂。乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物及水提取物对3种肿瘤细胞几乎无抑制作用。[结论]三叶悬钩子氯仿提取物和石油醚提取物对体外SGC7901、K562及HL60细胞的生长具有较好的抑制作用。     

柑橘皮多糖抗氧化性研究

[目的]研究柑橘皮多糖的抗氧化活性。[方法]利用水提醇沉法,提取柑橘皮多糖并进行初步纯化,采用苯酚-硫酸法测定柑橘皮多糖的提取率并采用水杨酸法研究柑橘皮多糖清除.OH的效果。[结果]柑橘皮中多糖的含量为6.32%;不同浓度的柑橘皮多糖对H2O2/Fe2+体系通过Fenton法反应产生的.OH都具有清除作用,且随浓度的增加,清除率逐渐升高,即清除率与多糖的用量存在一定的量效关系。[结论]柑橘皮多糖具有明显地抗氧化性,对.OH具有清除作用。     

Changes of NF-κB,Bax and Caspase 3 in Apoptosis Induced by Ligustrazine Combined with Cis-dichlorodiamine Platinum in Human Gastric Carcinoma SGC-7901 Cell Lines

[Objective] This study aimed to investigate the mechanism of apoptosis induced by ligustrazine(TMP) and cis-dichlorodiamine platinum(DDP) in SGC-7901 cell lines in vitro. [Methods] SGC-7901 cell lines were treated with ligustrazine and DDP alone or combined for 48 h for Western blot analysis, respectively. Western blot analysis was used to determine the expression of proteins involved in apoptosis including NF-κB p65, bax and caspase-3. [Results] The viability of SGC-7901 cells was inhibited after treated with ligustrazine and/or combined with DDP. The expression of NF-κB P65 protein decreased after treated with drugs, in which the protein decreased significantly in 1.2 mg/ml of TMP combined with 2 μg/ml of DDP group.Meanwhile, we investigated the protein expression of bax and caspase-3. The results showed that the expression of the two proteins increased following with the increasing concentration of TMP. [Conclusion] All the results indicated that ligustrazine combined with DDP could induce the apoptosis of SGC-7901 cell lines, and NF-κB maybe the possible way to induce the cell apoptosis.     

熟地黄浸提物对培养的小鼠TM4细胞的抑制作用研究

[目的]研究熟地黄浸提物对培养的小鼠TM4细胞的抑制作用。[方法]通过显微镜观察和MTT法研究不同浓度的熟地黄乙醇提取物对小鼠支持细胞系中TM4细胞的影响。[结果]浓度40μg/ml的醇提取物处理组对TM4细胞已经有较明显的抑制作用;而随着处理浓度的增大,这种抑制作用越来越强,当处理浓度达到100μg/ml时,TM4细胞的生长已经基本完全被抑制。[结论]熟地黄醇提取物对TM4细胞的生长和增殖有抑制作用,且呈剂量依赖性。     

姜黄素修饰的纳米金棒抑制胃癌细胞SGC-7901的作用

恶性肿瘤严重威胁着人类的健康。合成了姜黄素修饰的纳米金棒(Cur@Au NRs),并考察其对胃癌细胞(SGC-7901)的作用,采用MTT法测试其对5种肿瘤细胞株的体外增殖活性的影响,同时观察其对SGC-7901形态学的影响;利用实时x CELLigence细胞分析系统(RTCA)检测不同浓度Cur@Au NRs对SGC-7901增殖能力及迁移能力的影响;利用划痕愈合实验及血管形成实验检测Cur@Au NRs对细胞的迁移及血管形成的抑制作用;采用腹腔注射Cur@Au NRs后与正常小鼠内脏组织切片的对比,对其进行毒理学研究。研究结果表明,Cur@Au NRs具有良好的抗肿瘤活性,尤其对SGC-7901,且其IC50值明显低于姜黄素,并且能够抑制SGC-7901的增殖和迁移。毒理学研究表明即使在高剂量下也不具有明显的毒性。     

印楝素对小菜蛾胚胎细胞增殖和凋亡的影响

【目的】探讨印楝素对小菜蛾Plutella xyllostella胚胎细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。【方法】将体外培养的小菜蛾胚胎细胞分为印楝素处理组和未处理组,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖的抑制率,激光共聚焦镜检PI染色后的细胞死亡和DAPI染色后的凋亡小体,通过Western-blotting检测各组细胞Caspase-3的表达情况以及通路蛋白Akt的磷酸化水平。【结果】印楝素对小菜蛾胚胎细胞有明显的增殖抑制作用,且呈现浓度依赖性,24 h的IC_(50)为4.4μg·mL~(-1)。印楝素处理后的细胞经PI染色后能明显观察到死亡细胞,DAPI染色后可见凋亡小体;Caspase-3蛋白发生剪切,并且抑制Akt的磷酸化水平。【结论】印楝素对小菜蛾胚胎细胞的增殖有明显的抑制作用,并通过抑制Akt信号通路的活化,诱导细胞产生依赖于Caspase-3的Ⅰ型凋亡。     

4种石斛水提物对人宫颈癌HelaS3细胞和肝癌HepG2细胞的抑制作用

[目的]为进一步开发石斛药用资源提供基础数据。[方法]将人宫颈癌细胞HelaS3和肝癌HepG2细胞用含10%新生小牛血清的RPMI-1640培养基在37℃和5%CO2条件下培养,比较了霍山石斛、铁皮石斛、金钗石斛和马鞭石斛水提物对HelaS3和HepG2细胞的体外抑制作用。[结果]4种石斛水提物对HelaS3细胞和HepG2细胞均有不同程度的抑制作用,且在所选浓度范围内对剂量和时间有依赖性。4种石斛水提物对HelaS3细胞的IC50分别是11.63、17.71、15.11和5.89 mg/ml;对HepG2细胞的IC50分别是10.40、22.95、3.80和17.76 mg/ml。显微观察显示,处理组的活细胞多呈红色,核呈固缩状或圆珠状,有明显的染色质凝集和细胞凋亡特征。[结论]剂量效应分析表明,对HelaS3细胞而言,马鞭石斛水提物抑瘤效果较好;对HepG2细胞而言,金钗石斛水提物抑瘤效果较好。