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为了有助于检测市场上乳及乳制品中的乳铁蛋白含量,本试验建立了定量测定乳及乳制品中乳铁蛋白的SDS-PAGE电泳分析法.试验采集了10种液态奶、3种乳清粉、3种干酪、4种奶粉和4种酸奶,利用SDS-PAGE法分离乳铁蛋白,并优化了分离胶的浓度、电压、上样量和染色法.SDS-PAGE法的最佳条件为:分离胶浓度12%,浓缩胶电压120V,分离胶电压200V,改良的考马斯亮蓝染色,乳铁蛋白标准品的点样浓度0.1111mg/mL.点样量12μL.乳清粉及奶粉比干酪、液态奶和酸奶中的乳铁蛋白含量高,并且,液态奶、干酪和奶粉的检出限分别为2.9、29.0和29.0mg/100g,液态奶、干酪和奶粉的定量限分别为9.7、97.0和97.0mg/100g.该条件下测定乳及乳制品中乳铁蛋白含量的RSD分别为0.01%-8.70%.说明利用本文建立的SDS-PAGE电泳法简易、快速、准确,并且可以作为定量测定乳及乳制品中乳铁蛋白的方法. 相似文献
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以直投式乳酸发酵剂为实验菌,研究乳铁蛋白及其水解产物对发酵剂各生长阶段的影响。实验条件为乳铁蛋白质量浓度范围0.5~2.5mg/mL,乳铁蛋白水解物的质量浓度范围0.05~0.3mg/mL,无氧条件下37℃培养。结果表明,37℃恒温培养,乳铁蛋白在0.5~2.0mg/mL范围内对乳酸菌生长有促进作用,最适添加质量浓度为1.0mg/mL,抑菌质量浓度为大于2.5mg/mL;乳铁蛋白水解物在0.05~0.25mg/mL范围内对乳酸菌生长有促进作用,最适添加质量浓度为0.1mg/mL,抑菌质量浓度为大于0.3mg/mL。 相似文献
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高效液相色谱法测定婴儿配方奶粉中乳铁蛋白含量. 总被引:2,自引:0,他引:2
本研究建立了一种用高效液相色谱测定婴儿配方奶粉中乳铁蛋白的方法。色谱条件:色谱柱为Hi Trap Heparin肝素琼脂糖亲和柱(0.7×2.5cm,1m L),流动相A为50mmol/L的Na2HPO4溶液(p H7.00),流动相B为50mmol/L的Na2HPO4+1.0mol/L的Na Cl溶液(p H7.00),检测波长为230nm。结果表明:乳铁蛋白的检出限为3.0mg/100g,回收率在86%~99%之间,相对标准偏差(RSD)为3.4%。用此方法检测婴儿配方奶粉中乳铁蛋白,操作简单,结果准确可靠,精密度高,重现性好。 相似文献
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本试验旨在制备高纯度和特异性的牛乳铁蛋白多克隆抗体,为鉴定并定量检测牛奶样品中及奶牛乳腺组织中合成的乳铁蛋白提供试验材料。选用4只健康新西兰大白兔,初次免疫乳铁蛋白4周后进行加强免疫,每2周加强免疫1次,待血清达到抗体效价后,对兔进行心脏采血并分离血清,利用饱和硫酸铵法和蛋白A树脂纯化抗体,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)法分别用于鉴定纯化后抗体的纯度和特异性。测定纯化后抗体效价,并绘制抗体抑制曲线。最后利用所得抗体对市售液态奶、奶牛乳腺组织匀浆液、奶粉样品中的乳铁蛋白进行定量检测。结果表明,本试验制备的兔抗牛乳铁蛋白多克隆抗体纯度较高、特异性较强,抗体浓度为11.02 mg/m L,效价达到1∶128 000;采用该抗体测定的乳腺组织样品中乳铁蛋白浓度为16.13μg/g,液态奶中接近于0μg/g,奶粉中为5.28μg/g。总之,本试验采用经过饱和硫酸铵法和蛋白A树脂2步纯化后得到了纯度较高、特异性较强的兔抗牛乳铁蛋白多克隆抗体,可以用于牛奶等产品的乳铁蛋白鉴定。 相似文献
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目的 探讨两种不同检测方法测定乳与乳制品中牛乳铁蛋白的含量及应用研究。方法 对比高效液相色谱(HPLC)法和超高效液相色谱串联质谱(UPLC- MS/MS)法测定生鲜乳、调制乳、超高温瞬时灭菌乳、含乳饮料和奶粉样品等乳及乳制品中牛乳铁蛋白的含量,并对测定结果进一步比较和分析原因。结果 两种测定方法均具有较高回收率和较优的重现性,但两者方法对实际样品的测定结果具有一定差异性。结论 HPLC法测定牛乳铁蛋白是通过肝素亲和柱纯化富集乳铁蛋白,测定的是非热变性牛乳铁蛋白的含量;而UPLC-MS/MS法测定的是热变性和非热变性牛乳铁蛋白的含量,不受热处理加工工艺的影响。实验室可针对不同检测目的选择不同方法进行定量研究。 相似文献
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通过质控样品测定、加标回收实验、精密度实验和实际样品测定,考察GB 5413.20—2013《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中胆碱的测定》中酶比色法测定特殊医学用途婴儿配方食品中胆碱的适用性。结果表明:质控样的胆碱含量理论值为171.5 mg/100 g,测定值为168.4 mg/100 g,测定结果在允许误差范围内,说明实验结果可靠;乳粉样品和质控样的加标回收率为96.1%~98.4%,相对标准偏差为1.43%,说明酶比色法准确度较高,精密度较好;24 批次市售特殊医学用途婴儿配方乳粉的胆碱含量均符合GB 5413.20—2013的要求,表明酶比色法可以用于检测特殊医学用途婴儿配方食品中的胆碱含量。 相似文献
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采用离子色谱法建立特殊医学用途配方食品中肌醇含量的检测方法。样品经盐酸酸化沉淀蛋白后,肌醇溶解于上清液,经安培检测器检测。结果表明:样品中肌醇在质量浓度0.025~40.000 mg/L范围内,峰面积与质量浓度呈线性,线性相关系数(R2)为0.999 9;检出限及定量限分别为0.125、0.5 mg/100 g;在不同的添加水平下,肌醇的平均加标回收率为83.1%~102.9%。该方法操作简便、灵敏度高、重复性好,适用于特殊医学用途配方食品中肌醇的测定。 相似文献
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建立高效液相色谱-串联质谱法测定特殊医学用途婴儿乳粉中牛磺酸含量的分析方法。乳粉样品加水振荡15 min提取牛磺酸,5%偏磷酸沉淀样品中的蛋白质;采用SAX色谱柱(2.1 mm×150 mm,3.5 μm)分离,以乙腈-0.1%甲酸水溶液体系为流动相进行洗脱,在电喷雾离子源正离子模式下电离,多反应模式监测。结果表明:牛磺酸在6.44 min出峰良好,在0.2~2.0 mg/L范围内线性良好(R2>0.999),检出限为0.3 mg/100 g,定量限为1.0 mg/100 g;牛磺酸在低、中、高3 个加标水平下的平均回收率为90.1%~102.4%,相对标准偏差为0.39%~3.30%。该方法具有灵敏度及准确度高、重复性和稳定性好等优点,适用于特殊医学用途婴儿乳粉中牛磺酸的有效检测。 相似文献
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采用气相色谱-串联质谱法,建立同时检测特殊医学用途婴幼儿配方食品中3-氯丙醇酯(3-chloropropanol esters,3-MCPDE)和缩水甘油酯(glycidol esters,GE)的间接测定方法。针对样品提取和酯交换水解2 个前处理条件进行优化,结合同位素稀释技术,提高检测方法的准确度和精密度。结果表明:该方法在0.005~2.000 μg/mL范围内线性良好(R2≥0.999),检出限为5 μg/kg,定量限为25 μg/kg(检出限和定量限均以相应的氯丙醇计);以特殊医学用途婴幼儿配方食品为基质,分别添加25、125、250 μg/kg 3-MCPDE和GE进行加标实验,回收率为88.5%~104.1%,相对标准偏差低于15%(n=6),满足欧盟标准对特殊医学用途婴幼儿配方食品中3-MCPDE和GE的限量要求。 相似文献
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建立一种高效测定特殊医学用途婴儿配方乳粉中左旋肉碱含量的方法。从标准曲线制作、样品前处理、酶制备等方面对GB 29989—2013《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》方法进行优化。结果表明:采用优化后标准曲线,酶提取转速不小于6 000 r/min,5 g(精确至0.000 1 g)混合均匀的乳粉前处理加入0.25 g α-淀粉酶,在50 ℃条件下水解30 min后制备样液的测定结果精密度高,加标回收率较高;该方法解决了特殊医学用途婴儿配方乳粉中左旋肉碱测定过程中滤液不澄清、制备液颜色较深影响吸光度测定、加标回收率较低的问题,适用于批量测定氨基酸配方、乳蛋白深度水解配方和部分水解配方特殊医学用途婴儿配方乳粉中左旋肉碱含量。 相似文献
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依据GB 5009.44—2016《食品安全国家标准 食品中氯化物的测定》,对特殊医学用途婴儿配方食品中氯的检测方法适用性展开研究。结果表明:采用GB 5009.44—2016第三法(银量法)检测特殊医学用途婴儿配方食品中乳蛋白部分水解配方、乳蛋白深度水解配方、氨基酸配方得到的样品加标回收率分别为95%~108%、98%~125%、100%~106%,相对标准偏差为12.7%~32.9%;采用GB 5009.44—2016第一法(电位滴定法)得到的检测结果低于第三法检测结果。 相似文献
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探究特殊医学用途婴儿配方食品实践中,从原料物性角度进行配方设计。通过对原、辅料的颗粒度及振实密度、休止角等物性进行研究,有助于便捷的配方设计,快速确定成分复杂和用量较大的原料量。对该配方商业化试制成品的颗粒度、振实密度、休止角和粒径分布进行分析,结果表明:不同批次成品具有相对一致的物性,表明该方法设计的配方不需进行纠偏即能满足商业化生产的需要。 相似文献
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检测牛奶中的糠氨酸含量可以评价牛奶的热处理强度。本文建立高效液相色谱法,在波长280 nm下测定牛奶中糠氨酸的含量。试验结果表明:采用外标法定量,当浓度为0.06~4.00 mg/L,吸光度与糠氨酸质量浓度线性关系良好,相关系数R2=0.999 7;糠氨酸在5 mg/L、10 mg/L、15 mg/L、30 mg/L添加水平的回收率在91.48%~91.73%之间,RSD值在0.13%~0.37% 之间;方法的检出限为1.5 mg/100 g蛋白质,测得结果与第三方机构检测结果偏差小于1.00%,适用于乳品企业对糠氨酸的日常检测。 相似文献