白术茯苓汤对脾虚大鼠胃肠激素的影响

目的：探讨白术茯苓汤治疗脾虚证的作用机理,方法：采用苦寒泻下法复制大鼠脾虚模型,运用放免分析法（RIA）检测白术茯苓汤高,中,低剂量对脾虚大鼠血清素（GAS）,血浆素（MTL）及血管活性肠肽（VIP）含量的影响。结果：（1）脾虚大鼠GAS,MTL明显降低（P＜0．01）,VIP显著升高（P＜0．01）,（2）白术茯苓汤低剂组与自然恢复组比较GAS,MTL,VIP无明显差异（P＞0．05）;（3）中剂组与自然恢复组比较GAS上升（P＜0．05）,MTL有上升趋势（P＞0．05）,VIP显著降低（P＜0．01）;4．高剂组与自然恢复组比较GAS上升（P＜0．05）,MTL呈上升趋势（P＞0．05）,VIP降低（P＜0．05）,与中剂量组比较GAS,MTL,VIP无明显差异（P＞0．05）。结论：调节胃肠激素,可能是白术茯苓汤治疗脾虚证的机理之一。     

铜绿假单胞菌脓毒症大鼠肝组织中TLR4／SIGIRR的表达与静脉血中IL-6和IL-12水平的变化

目的探讨铜绿假单胞菌（P—seudomonasaeruginosa,PA）脓毒症肝组织中单免疫球蛋白白细胞介素-1受体相关蛋白（SingleimmunoglobinIL-1receptorrelatedprotein,SIGIRR）表达对TLR4的表达及IL-6、IL-12合成的影响。方法将60只SD级大鼠随机分为两组,对照组lO只不做处理,试验组50只再细分为5组,分别在腹腔内注射PA,构建PA脓毒症模型;对照组、试验组分别于注射PA1h、2h、4h、8h、12h后无菌取肝脏,下腔静脉无菌抽血。采用实时荧光定量PCR仪检测肝组织中TLR4、SIGIRR的mRNA相对含量;采用双抗夹心ELISA法检测大鼠血清中IL-6、IL-12浓度。结果试验组TLR4表达均大于对照组（P〈0．05）,但试验组各组间TLR4表达差异无统计学意义（P〉0．05）;1h组、2h组、4h组IL-6、IL-12水平均低于对照组（P〈0．05）,8h组、12h组IL-6、IL-12水平均高于对照组（P〈0．05）,组间差异比较具有统计学意义（P〈0．05）。结论SIGIRR的上调表达可抑制大鼠血清IL-6、IL—12的产生,但对TLR4表达无影响,提示SIGIRR对TLR4信号通路的负调节作用不是通过直接抑制TLR4表达实现的。     

化纤丸对肝纤维化大鼠模型的影响

目的探讨民间验方化纤丸对CCL。所致肝纤维化大鼠模型的保护及治疗作用。方法用40％CCL。制备大鼠纤维化模型,应用不同剂量化纤丸进行干预,分别于第4、8w末观察其肝功能指标及肝纤维化指标的变化。用大黄蛰虫丸作对照研究。结果与模型组比较,4w末高剂量治疗组大鼠CIV明显降低（P〈0．05）,高、中、低剂量治疗组大鼠LN、HA均显著降低（P〈0．01或P〈0．05）;与模型组比较,8W末低剂量治疗组大鼠PCHI显著降低（P〈0．01）,LN、HA明显降低（P〈0．05）,高、中、低剂量治疗组大鼠CIV明显降低（P〈0．05）。结论化纤丸对CCL4所致的大鼠肝纤维化有明显干预和治疗作用。     

连翘对LPS作用的巨噬细胞TLR4蛋白表达的影响

目的观察连翘对LPS诱导巨噬细胞（RAW264．7）16h后TLR4蛋白表达的影响,探讨连翘对抗内毒素作用及其可能机制。方法体外实验共分6组,分别为control组,LPS组,连翘高、中、低剂量组及多黏菌素B组;连翘高、中、低剂量组及多黏菌素B组分别加入连翘水煎液50mg／ml、25mg／ml、12．5mg／ml及多黏菌素B10ug／ml培养0．5h后,再加入10ng／ml LPS,培养16h;Western blot法测各组细胞TLR4蛋白表达变化。结果control组RAW264．7细胞只表达少量TLR4,给予LPS刺激16h,TLR4表达明显升高（P〈0．01）,连翘高、中、低剂量组预处理均可明显降低TLR4的表达（P〈0．01）,并呈剂量依赖关系;连翘高剂量组与多黏菌素B组比较无显著性差异（P〉0．05）。结论连翘预处理能抑制LPS诱导的巨噬细胞TLR4的表达可能是其抗内毒素作用的重要机制。     

铜绿假单胞菌肺部感染对小鼠 Toll 样受体 2、4 的影响

目的探讨Toll样受体（TLR）2、4mRNA在铜绿假单胞菌慢性感染小鼠肺内的动态改变及其作用。方法56只雄性Balb／c小鼠随机气道接种含有铜绿假单胞菌（PA）琼脂糖珠（感染组,34只）和无菌琼脂糖珠（对照组,22只）。于第1、3、5、7、10天处死小鼠,取肺组织细菌培养,行肺组织病理观察,ELISA法检测肺泡灌洗液（BALF）中自介素（IL）-6和IL-17的含量,采用Real—timePCR检测TLR2mRNA及TLR4mRNA表达。结果感染组在接种后第3天IL-6和IL-17水平均达高峰,分别为（154．83±12．51）ng／L和（601．05±25．53）ng／L,均显著高于对照组（40．05±2．98）ng／L和（213．75±9．25）ng／L,差异有统计学意义（P〈0．05）,且两者在接种后第10天仍处于高水平。感染组中TLR4mRNA的相对表达量第7天达高峰（4．09±0．25）,与对照组第7天（0．97±0．05）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;而TLR2mRNA在感染组和对照组各时间相比变化均不明显（P〉0．05）。结论TLR4与小鼠肺部慢性感染PA的发生发展密切相关,其机制可能与TLR4在肺的免疫损伤中起到重要作用有关。     

卡介苗、卡介苗多糖核酸对肺炎大鼠肺Toll样受体mRNA的影响

目的探讨卡介苗多糖核酸（BCG-PSN）、卡介苗（BCG）对肺炎大鼠肺TLR2、TLR4mRNA表达的影响。方法57只大鼠随机分为肺炎模型组（PM组，n=51）及健康对照组（HC组，n=6）．第4天PM组随机抽取6只（非吸入组，NI组）进行相关检查确定肺炎模型是否制作成功。然后肺炎模型组45只肺炎大鼠再随机分成生理盐水组（NS组）、卡介苗组（BCG组）、卡介苗多糖核酸组（BCG-PSN组）。每组又按吸入次数分为3次、5次、7次组。采用RT-PCR方法研究肺炎大鼠肺TLR2mRNA、TLR4mRNA的表达，以及肺炎时雾化吸入前后肺TLR2mRNA、TLR4mRNA表达。结果肺炎第4天，肺TLR2mRNA、TLR4mRNA表达与HC组相比无统计学差异。吸入BCG-PSN5次时，TLR2mRNA表达与HC组相比P〈0．05，7次时P〈0．01；与NI组及NS组相比吸入BCG-PSN7次时P〈0．05。吸入BCG3次时，TLR2mRNA表达与HC组、NI组、NS组相比，P〈0．05，吸入5次、7次时，P〉0．05。同组间吸入BCG或BCG-PSN5次，7次时TLR4mRNA表达略增强，但无统计学差异（P〉0．05）。结论BCG、BCG-PSN能使肺炎大鼠肺TLR2mRNA表达明显增强，但BCA3-PSN较BCG起效慢、作用强、持续时间长，而且也不能使肺炎大鼠肺TLR4mRNA表达增强。     

银屑病病人外周血单核细胞TLR2基因表达及血清ASO和IL-8水平变化

目的观察寻常型银屑病病人外周血单核细胞Toll样受体2（TLR2）mRNA表达及血清抗链球菌溶血素“O”（ASO）和白细胞介素-8（IL-8）水平的变化，探讨其与银屑病发病的关系。方法采用RT—PCR方法检测银屑病病人（银屑病组）外周血单核细胞TLR2 mRNA表达，采用胶乳凝集法检测血清ASO水平，采用ELISA法检测血清IL-8水平。以我院体检健康者30例作为对照（正常对照组）。结果银屑病组TLR2 mRNA表达明显高于正常对照组（t=5．541，P〈0．01）；银屑病组点滴型与斑块型TLR2 mRNA表达比较无显著性差异（t=0．318，P〉0．05）。银屑病组血清ASO水平明显高于正常对照组（x^2=8．604，P〈0．01）；且点滴型病人明显高于斑块型病人（x^2=9．780，P〈0．01）。银屑病组血清IL-8水平显著高于正常对照组（t=28．463，P〈0．01）；点滴型与斑块型病人之间比较无显著性差异（t=0．660，P〉0．05）。点滴型病人ASO阳性者TLR2 mRNA表达水平高于ASO阴性者，差异有显著性（t=2．407，P〈0．05）；银屑病病人外周血TLR2 mRNA表达与IL-8水平呈正相关（r=0．637，P〈0．01）。结论TLR2可能通过识别链球菌等入侵病原微生物启动机体免疫应答，介导细胞因子IL-8等的产生，参与银屑病皮损的发生和发展。     

益气活血复方含药血清对人脐静脉内皮细胞TLR4／NF—KB信号通路及TNF—a ICAM-1 mRNA表达的影响

目的：研究益气活血复方含药血清对脂多糖（LPS）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）Toll样受体4（TLR4）／NF—KB及肿瘤坏死因子-a（TNF—a）、细胞间黏附分子（ICAM-1）mRNA表达的影响,探讨益气活血复方含药血清防治动脉粥样硬化（AS）的机制。方法：（1）选择新西兰大耳白兔20只,随机分为4组,即正常组、中药高浓度组、中药中浓度组、中药低浓度组,每组5只。以上各组白兔分别以生理盐水和高、中、低浓度益气活血复方连续灌胃7天。末次灌胃给药2h后,心脏采血,离心后分离血清。（2）体外培养人脐静脉内皮细胞,用LPS刺激后,分别加入高、中、低浓度益气活血复方含药血清干预24h,收集细胞,用荧光定量PCR方法测定TLR4、NF—KB、TNF—a及ICAM-1mRNA的表达。结果：用LPS刺激人脐静脉内皮细胞后,引起TLR4、NF-KB、TNF-a及ICAM-1 mRNA的高表达（与空白对照组比较P〈0．01）,用益气活血复方含药血清干预以后显著抑制TLR4、NF-KB、TNF-a及ICAM-1 mRNA的高表达（与模型组比较P〈0．01或P〈0．05）。结论：益气活血复方可阻断TLR4／NF—KB信号通路的高表达,同时抑制TNF—a及ICAM-1的表达,这可能是其发挥抗动脉粥样硬化作用的机制之一。     

温热药造小鼠阴虚模型的建立及其对小鼠免疫方面的影响

目的通过检测小鼠体重增长率、脏器指数及血清中自细胞介素-2（IL-2）含量,探讨阴虚与免疫之间的关系,进一步阐释阴虚与衰老之间的相关性。方法将30只小鼠随机分为空白组、温热药高剂量组（简称高剂量组）、温热药低剂量组（简称低剂量组）,每组各10只。空白组小鼠每天灌胃给予等体积生理盐水,高、低剂量组分别给予100％与50％的温热药水煎液灌胃。结果与空白组相比,温热药高、低剂量组小鼠体重增长率、胸腺指数明显降低（P〈0.05）;温热药高剂量组小鼠痛阈明显降低（P〈0．05）;温热药高剂量组小鼠脾脏指数、血清中IL-2含量显著降低（P〈0．01）。结论给药组小鼠免疫功能下降,说明温热药造阴虚模型可行,阴虚与衰老之间存在一定的关系。     

姜黄素通过抑制TLR4信号通路下调脂多糖诱导的肺巨噬细胞分泌TNF-a、IL-6和IL-8

目的：研究姜黄素对原代培养的肺巨噬细胞表达TLR4mRNA及分泌TNF-a、IL-6和IL-8的影响。方法用脂多糖（LPS）建立体外肺巨噬细胞体外炎症损伤模型,用ELISA观察肺巨噬细胞分泌TNF-a、IL-6和IL-8和用RT-PCR、western blot观察肺巨噬细胞TLR4的表达。结果 LPS明显诱导肺巨噬细胞分泌TNF-a、IL-6和IL-8增加及TLR4的增量表达（P〈0.01）,姜黄素可抑制这种作用（P〈0.05）,且与姜黄素药物浓度有关（P〉0.05）。结论姜黄素对肺巨噬细胞的抗炎机制可能是通过抑制TLR4的表达,通过脂多糖-TLR4信号传导通路,从而减少炎性细胞因子的释放;姜黄素有可能作为一种有研究潜力的抗感染治疗的中药。     

白术茯苓汤提取分离组分对脾气虚大鼠血浆胃肠激素及肠道局部免疫功能的影响

目的:比较白术茯苓汤水煎液及其提取分离组分与组分配伍对脾气虚大鼠血浆胃肠激素及肠道局部免疫的调节作用.方法:以大黄、厚朴、枳实加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,采用RIA法检测血浆VIP、MTL、SS含量;ELISA法检测肠组织SIgA含量.结果:与空白组比较,脾气虚模型大鼠VIP、SS明显升高(P<0.05),MTL、SIgA明显降低(P<0.05);与模型组比较,各高、中剂量组对上述指标均有不同程度的改善,其中,①白术茯苓汤及多糖、络合物、白术内酯Ⅲ、组分配伍的高剂量组均能下调血浆VIP水平(P<0.05),以白术茯苓汤及组分配伍组作用最为显著(P<0.01);白术茯苓汤、组分配伍高剂量组能上调血浆MTL水平(P<0.05);白术内酯Ⅲ中剂量组、组分配伍高、中剂量组能下调血浆SS水平(P<0.05).②白术茯苓汤、各组分及组分配伍的高、中剂量组均能升高SIgA分泌水平(P<0.05),以白术茯苓汤、多糖低剂量组、组分配伍高剂量组作用最为显著(P<0.01).结论:白术茯苓汤及提取分离组分对胃肠激素及肠道局部免疫有一定的调节作用,对VIP、SIgA作用明显,对MTL、SS作用不确切;组分配伍有协同增效作用.     

重组血管活性肠肽基因质粒治疗大鼠胶原性关节炎的研究

目的：观察重组血管活性肠肽（pcDNA3．1＋／VIP）质粒治疗胶原诱导的大鼠关节炎（CIA）对血清TNF—α、IL～2、IL-4表达的影响和病理变化，探讨VIP基因治疗类风湿性关节炎的效果及可能机制。方法：以Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎作为CIA模型，重组血管活性肠肽质粒关节腔内注射治疗CIA，以双抗体夹心酶联免疫吸附法（ABC—ELISA）检测血清TNF—α、IL-2和IL-4的表达，观察病理变化和整体疗效。结果：①病理切片显示CIA模型组炎性细胞浸润明显，并存在骨和软骨破坏，VIP治疗组可显著减轻关节炎性病理改变；②细胞因子测定显示：与正常组相比，各对照组血清TNF—α、IL-2水平显著升高（P〈0．05），IL-4水平减低（P〈0．05）；与各对照组相比，各重组VIP质粒治疗组血清TNF—α和IL-2表达水平均明显降低（P〈0．05），IL-4表达则升高（P〈0．05）。结论：血管活性肠肽基因质粒关节腔内注射治疗大鼠CIA具有显著的疗效，有望成为RA的有效治疗手段。     

血吸虫卵及环丙沙星对小鼠TNBS肠炎的预防作用

目的研究腹腔注射血吸虫卵及1：2服环丙沙星对TNBS肠炎小鼠肠道炎症及Toll样受体4（Toll-like receptor4,TLR4）的影响。方法Balb／c小鼠50只随机分为正常对照组（10只）、TNBS肠炎组（20只）、血吸虫卵组（10只）及环丙沙星组（10只）。血吸虫卵组于造模前第3、14天腹腔注射冰冻灭活血吸虫卵10。个,环丙沙星组于制作肠炎模型前予小鼠口服环丙沙星50mg·kg^-1·d^-1共2周。分别评价小鼠一般情况、死亡率、肠壁炎症程度、肠壁TLR4蛋白表达、肠壁tlr4mRNA表达及血清TNF-α水平。结果血吸虫卵组小鼠死亡率较TNBS肠炎组明显降低（20％vs70％,P〈0．05）,肠壁炎症明显改善（Ameho criteria评分1．43±0．52vs4．21±0．61,P〈0．01）,肠壁TLR4表达下调（0．33±0．03vs0．76±0．05,P〈0．01）;血清TNF-α表达下调,但尚无统计学显著意义（29．62±9．71vs40．50±12．48,P〉0．05）。环丙沙星组小鼠死亡率较TNBS肠炎组亦明显降低（20%vs70％,P〈0．05）,肠壁炎症改善（Ameho criteria评分1．54±0．71vs4．21±0．61,P〈0．05）肠壁TLR4表达下调（0．40±0．03vs0．76±0．05,P〈0．01）,血清TNF-α表达下调,但尚无统计学显著意义（27．85±16．17vs40．50±12．48,P〉0．05）。结论血吸虫及环丙沙星可有效预防TNBS诱导的小鼠肠炎,其作用机制可能与调节Th1／Th2平衡及下调TLR4表达有关。     

芍药苷对高脂饲养大鼠胰岛素抵抗和脂肪组织TNFα、GLUT4表达的影响

目的观察芍药苷对高脂饲养大鼠胰岛素敏感性和血脂谱的影响,并研究其作用机制。方法将雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常组、高脂饲养组、芍药苷低剂量组和芍药苷高剂量组,除正常组喂食普通饲料外,其余各组喂食高脂饲料,芍药苷干预组另分别给予低、高剂量芍药苷腹腔注射,第6周末各组大鼠禁食12h后处死,采血测定血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、游离脂肪酸（FFA）、空腹血糖（FBG）及胰岛素（Ins）并计算胰岛素敏感指数（IsI）,剪取附睾脂肪,定量PCR方法检测附睾脂肪组织肿瘤坏死因子α（TNFα）、葡萄糖转运子4（Glut4）表达。结果芍药苷高剂量组大鼠与高脂组相比,附睾脂肪重量减少,FBG、Ins、FFA水平降低（P〈0．05）,ISI明显改善（-5．84±0．24VS-6．44±0．25,P〈0．05）,芍药苷低剂量组亦有类似趋势。高脂组大鼠脂肪组织内TNFctmRNA表达上调,Glut4mRNA表达下调,两用药干预组TNFctmRNA水平较高脂组有明显降低（P〈0．05）,芍药苷高剂量组Glut4mRNA表达显著高于高脂组（P〈0．05）。结论芍药苷能够减少高脂饲养大鼠内脏脂肪含量,抑制脂肪组织TNFotmRNA的表达、上调Glut4mRNA水平,从而降低血糖,改善胰岛素抵抗。     

双歧杆菌对轮状病毒感染肠上皮细胞IL-8和TNF-α分泌的影响

目的：探讨双歧杆菌对轮状病毒（RV）体外感染肠上皮细胞株HT29过程中IL-8,TNF—α分泌水平的影响．方法：按照不同的干扰措施将细胞分为正常细胞对照、RV感染、低剂量双歧杆菌干预、高剂量双歧杆菌干预4组．光镜下观察细胞病变,ELISA检测感染后6,24h细胞培养上清中IL-8,TNF—α的表达水平．结果：HT29细胞感染RV后6h,细胞培养上清中IL-8分泌较正常细胞对照增加（P〈0．01）,而TNF-α分泌量无显著变化（P〉0．05）;感染后24h,两者分泌量皆显著增高（P〈0．05）,细胞发生显著病变,高、低剂量双歧杆菌干预细胞均较RV感染细胞病变程度轻．干预细胞与RV感染细胞比较,6h时IL-8,TNF-α分泌量都未出现明显变化（P〉0．05）,24h时,高、低剂量干预细胞的IL-8,TNF—α分泌水平皆较RV感染细胞明显降低（P〈0．05）,两种剂量组间无显著差别（P〉0．05）．结论：RV感染诱导肠上皮细胞株HT29大量分泌致炎性细胞因子IL-8,TNF—α,双歧杆菌能够显著抑制该刺激分泌作用,减轻细胞病变程度,提示这种抑制作用可能参与双歧杆菌抗RV感染的机制．     

新疆紫草提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的：研究新疆紫草提取物AEJ-Ⅰ、AEJ-Ⅱ对小鼠免疫性肝损伤的保护作用。方法：采用卡介苗（BCG）和脂多糖（LPS）诱导免疫性肝损伤动物模型，观察AEJ-Ⅰ、AEJ-Ⅱ对小鼠肝脏系数、脾脏系数及血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肝组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）水平的影响，并观察肝脏病理组织学变化。结果：AEJ-Ⅰ高剂量组和AEJ-ⅡI高、低剂量组均可降低肝脏系数．并使肝组织MDA含量降低（P〈0．05或P〈0．01）；AEJ-Ⅰ高剂量组可降低脾脏系数，并使肝组织SOD活性升高（P〈0．05）；AEJ各剂量组均可使肝组织GSH-Px活性升高、NO含量降低（P〈0．05或P〈0．01）；AEJ-Ⅰ高剂量组可明显降低小鼠血清ALT、AST的活性（P〈0．01或P〈0．05）；AEJ-Ⅱ高、低剂量组均可明显降低小鼠血清ALT的活性（P〈0．05），AEJ-Ⅱ高剂量组可明显降低小鼠血清AST的活性（P〈0．05）。AEJ-Ⅰ、AEJ-Ⅱ均可不同程度地改善肝脏病理组织性损伤。结论：AEJ-Ⅰ和AEJ-Ⅱ对小鼠免疫性肝损伤具有保护作用。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB通路异甘草素对大鼠颅脑外伤后炎症反应及Th1/Th2失衡的影响

【摘要】 目的 探讨异甘草素（ISL)通过介导Toll样受体4（TLR4）/髓样分化因子88（MyD88）/核转录因子-κB (NF-κB)通路对大鼠颅脑外伤 （TBI)炎症反应及Th1/Th2细胞失衡的影响。方法将SPF级大鼠随机分为模型组、ISL低剂量组（20 mg·kg-1）、ISL高剂量组（40 mg·kg-1）、阳性药物组（甘油果糖氯化钠,40 mg·kg-1）,每组10只,另设对照组。HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;比较血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-4（IL-4）、γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,脑组织TLR4、My D88、NF-κB p65 mRNA及TLR4、My D88、NF-κB p65、磷酸化核转录因子-κB p65（p-NF-κB p65）蛋白表达。结果与对照组比较,模型组血清IL-1β、IL-4、TNF-α水平,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平升高,血清IFN-γ水平降低（均P＜0.05）;与模型组比较,ISL低剂量组、ISL高剂量组、阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）;与ISL低剂量组比较,ISL高剂量组、阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）;与ISL高剂量组比较,阳性药物组血清IFN-γ水平升高,IL-1β、IL-4、TNF-α水平降低,脑组织TLR4、My D88 mRNA及TLR4、My D88、p-NF-κB p65蛋白水平降低（均P＜0.05）。HE结果显示,ISL低剂量组、ISL高剂量组、阳性药物组脑组织病变较模型组出现不同程度改善,ISL高剂量组和阳性药物组改善尤为明显。结论ISL能有效改善大鼠TBI炎性反应、调节Th1/Th2细胞平衡,可能基于调控TLR4/MyD88/NF-κB通路相关mRNA和蛋白表达发挥作用。     

补肾活血方对PCOS大鼠模型卵巢中PAI-1mRNA表达的影响

目的探讨补肾活血方对大鼠PCOS模型卵巢局部纤溶酶原激活物抑制因子-1（PAI—1mRNA）表达的影响。方法选用未成年24d龄SD雌性大鼠60只,随机分为模型组、克罗米酚组、补肾活血方高剂量组、补肾活血方低剂量组、正常对照组5组。用Bogovich法建立大鼠多囊卵巢病理模型。以克罗米酚为对照。用原位杂交法观察补肾活血方对多囊卵巢大鼠局部PAI—1mRNA的影响。结果模型组卵巢局部PAI—1mRNA存在卵泡膜间质细胞显著增高,用补肾活血方高、低剂量与克罗米酚药后,卵巢局部PAI-1mRNA的表达明显降低．差异具有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01）。补肾活血方高剂量组与克罗米酚组比较,差异具有显著统计学意义（P〈0．01）;低荆量组与克罗米酚组比较差异无统计学意义（P〉0．05）,补肾活血方高、低剂量组比较,低剂量组卵泡膜间质细胞上PAI-1的基因表达增高更明显,但二者差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PAI-1mRNA可能与多囊卵巢综合征的发病机制有关。以补肾活血立法的补肾活血方能降低多囊卵巢大鼠局部PAI—1mRNA的显著增高表达．降低PAI—1mRNA卵巢局部的作用。提示补肾活血方可能通过PAI—1mRNA途径促进卵巢排卵的机制。     

归芍安宫胶囊对子宫内膜异位症大鼠细胞因子的影响

目的：研究归芍安宫胶囊（GSAGC）对子宫内膜异位症（EMS）大鼠细胞因子的影响,初步探讨GSAGC对EMS的作用机理。方法：EMS模型大鼠随机分为GSAGC高剂量组、GSAGC中剂量组、GSAGC低剂量组、达那唑组及模型组,另设假手术组为对照。四周后观察GSAGC对大鼠异位子宫内膜体积、抑制率及对大鼠异位子宫内膜形态学的变化的影响;并用放免法检测GSAGC对血清白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量的影响;用免疫组化方法检测GSAGC对异位子宫内膜血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。结果：GSAGC治疗四周后,和模型组比较,GSAGC高、中、低剂量组大鼠的异位子宫内膜体积明显缩小（P〈0．01,P〈0．05）,抑制率明显升高（P〈0．05）,并且IL-6、TNF—α的含量也较模型组有明显降低（P〈0．01,P〈0．05）,同时GSAG也明显减少了模型组大鼠异位子宫内膜VEGF的表达（P〈0．01,P〈0．05）。结论：GSAGC对大鼠EMS具有一定的治疗作用,其作用机理可能是通过减少IL-6、TNF-α等免疫因子的生成,使VEGF的生成减少,异位内膜的血管形成被阻断,抑制病灶的形成和生长。     

混合游离脂肪酸对大鼠肺微血管内皮细胞Toll样受体4表达的影响及其介导的炎症反应机制

目的研究混合游离脂肪酸（FFA）对大鼠肺微血管内皮细胞（RRPMVECs）Toll样受体4（TLR4）的激活作用及其介导的链式炎症反应机制。方法以不同浓度的FFA处理体外培养的RPMVECs,Westernblotting检测TLR4蛋白的表达。用干扰小RNA（siRNA）转染体外培养的RPMVECs（TLR4 siRNA组和杂序siRNA组）,设立阴性对照组。分别用0．1mmol／LFFA、10ng／mL脂多糖（LPS）和5ng／mL肿瘤坏死因子-α（TNF-α）处理各组细胞,以未加药细胞作为相应的空白组。Real-TimePCR检测TLR4mRNA和NF-κB抑制蛋白激酶β（IKKβ）mRNA的表达,Westernblotting检测磷酸化核因子κB抑制因子（p-IκBα）和核因子κB（NF-κB）的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中炎症因子白介素-1β（IL-1β）的表达。结果RPMVECs的TLR4蛋白相对表达量在0．1mmol／LFFA处理后显著增高（P〈0．05）,并随FFA浓度的升高而增加。在杂序siRNA和阴性对照组,TLR4mRNA的相对表达量在LPS和FFA处理后显著升高（P〈0．05）,TNF-α处理无明显变化;而在TLR4干扰组,3种处理后TLR4mRNA的表达均无显著变化。在杂序siRNA和阴性对照组,3种方式处理后RPMVECs的IKKβmRNA、p-IκBα及IL-1β的相对表达量均显著升高（P〈0．05）,而TLR4siRNA干扰抑制了其在FFA和LPS处理组的表达,但对TNF-α组无抑制作用。结论FFA通过TLR4／IKKβ／NF-κB信号通路介导RPMVECs的炎症反应。