TGF-β1对人绒毛膜癌细胞上皮间质转化及其迁移能力的促进作用研究

目的 观察TGF-β1对人绒毛膜癌细胞肿瘤干性标记物CD133表达的促进作用,探讨其对上皮间质转化(EMT)相关标志物基因表达及迁移能力的影响.方法 体外培养人绒癌细胞系JEG-3,经不同浓度和不同时间TGF-β1作用后,采用Western blotting检测CD133表达情况,RT-PCR检测EMT相关标志物mRNA表达情况,并采用Transwell侵袭实验检测TGF-β1对绒癌细胞迁移能力的影响.结果 TGF-β1可促进绒癌细胞中肿瘤干性标记物CD133的表达,下调上皮细胞标志物E-cadherin mRNA的表达,上调间质细胞标志物N-cadherin mRNA的表达,并可增强绒癌细胞的迁移能力.结论 TGF-β1可增强绒癌细胞的干性特征,促进其上皮间质转化并提高其迁移能力.     

Ro60表达下调抑制肺腺癌A549细胞迁移和侵袭

目的：探究Ro60对肺腺癌A549细胞迁移和侵袭的影响。方法采用RNA干扰（ RNAi ）方法下调A549细胞中Ro60表达水平,检测其迁移和侵袭能力的改变,通过实时定量PCR和免疫印迹方法分析与肿瘤侵袭转移相关分子的表达变化。结果下调Ro60表达,A549细胞的迁移和侵袭能力均减弱,与肿瘤细胞迁移和侵袭相关的MMP9、c-Src等在mRNA水平明显降低,Src蛋白和MMP9酶原激活形式蛋白表达量下调。结论 Ro60表达下调抑制A549细胞的迁移和侵袭,并通过调控Src蛋白表达和MMP9酶原激活发挥作用。     

过表达迁移侵袭抑制蛋白基因对人巨细胞病毒转染U87细胞特性影响

目的探讨过表达迁移侵袭抑制蛋白(MIIP)基因对人巨细胞病毒(HCMV)感染的神经胶质母细胞瘤U87细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法采用过表达的MIIP基因慢病毒转染HCMV感染的U87细胞,通过Western-blot检测其转染效率,并将细胞分为为实验组(U87+HCMV/MIIP)、对照组(U87+HCMV/CMV4)和空白组(U87+HCMV)。采用CCK-8检测过表达的MIIP基因对HCMV转染的U87细胞增殖情况的作用;采用Transwell迁移实验检测对细胞迁移情况的影响;采用Transwell体外侵袭实验检测对细胞侵袭能力的影响。结果实验组细胞的MIIP蛋白表达量与对照组和空白组比较,明显上调(P<0.05);细胞的增殖能力与对照组和空白组比较,明显降低(P<0.05);细胞的侵袭力与对照组和空白组比较,明显减弱,且细胞数显著下调(P<0.05);迁移能力与对照组和空白组比较,显著降低(P<0.05)。结论 HCMV感染的U87细胞在MIIP基因过表达后增殖、侵袭及迁移能力均受抑制。     

人重组蛋白DKK1对口腔鳞癌干细胞迁移及侵袭能力作用

目的探讨DKK1通过靶基因调节Wnt/β-catenin信号通路对口腔鳞癌干细胞迁移及侵袭能力的作用。方法培养并鉴定口腔鳞癌干细胞,并将细胞分为3组,分别为空白对照组(A组),未转染siRNA;阴性对照组(B组),转染Stealth~(TM) RNAi的阴性对照;DKK1 RNAi组(C组),转染DKK1 Stealth~(TM) Select RNAi。利用实时定量PCR(RT-PCR)检测3组的转染效率及口腔鳞癌干细胞中Wnt3a、Pitx2、Oct4 mRNA的表达情况。运用划痕实验和Transwell侵袭实验检测DKK1对口腔鳞癌干细胞迁移和侵袭的影响。结果流式细胞仪检测CD44及CD133表达量分别为88.0%及92.8%,提示所培养细胞为口腔鳞癌干细胞。瞬时转染后,应用RT-PCR检测提示,C组Wnt3a、Pitx2及Oct4 mRNA表达量较A组分别下降59.8%、70.7%和66.0%(P<0.05)。细胞划痕实验结果显示,A、B、C组24 h的划痕愈合率分别为(54.32%±3.21%)、(49.46%±3.75%)和(14.13%±1.96%),组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验结果显示,A、B、C组中穿透细胞膜的细胞数目分别为(115.6±14.3)个、(131.2±19.5)个和(37.3±6.8)个,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DKK1可以通过抑制Wnt3a,从而调控Wnt/β-catenin信号通路,进而抑制口腔鳞癌的转移及侵袭。     

XAV939对卵巢癌细胞侵袭迁移的影响及Wnt/β-catenin信号的抑制作用

目的 探讨XAV939对卵巢癌细胞侵袭转移方面的影响及其对Wnt/3-catenin信号转导途径的抑制作用.方法 采用MTT法检测XAV939对卵巢癌细胞活力的抑制作用,划痕实验观察XAV939对细胞迁移能力的影响,Transwell细胞迁移实验检测XAV939对卵巢癌细胞侵袭转移的影响,Western blot方法检测wnt1、β-catenin、TCF4蛋白以及基质金属硫蛋白9 (Metallothionein matrix protein,MMP9)的表达水平.结果 XAV939作用48 h后,抑制率明显上升,尤其浓度达到8μmol/L(31％±1％,P =0.034)、16 μmol/L(51％±4％,P=0.028),且划痕和Transwell实验结果显示XAV939能抑制卵巢癌的侵袭和转移.此外,western blot结果显示,wnt1、β-catenin、TCF4、MMP9的表达水平均有所降低.结论 XAV939通过Wnt/β-catenin信号通路来抑制卵巢癌细胞的侵袭和迁移.     

辐射诱导miR-1246对宫颈癌HeLa细胞上皮间质转化作用

目的探讨辐射诱导的miR-1246对宫颈癌He La细胞上皮间质转化(EMT)的作用。方法经不同剂量~(60)钴(~(60)Co)γ射线辐射处理的宫颈癌He La细胞,采用qRT-PCR检测miR-1246的表达水平。借助miR-1246及miR-1246-inhibition慢病毒表达载体,调变miR-1246在He La细胞中的表达水平,然后应用划痕实验及Transwell侵袭实验比较He La细胞的转移和侵袭能力;Western blot实验检测细胞中EMT相关分子的表达情况。结果辐射可诱导miR-1246在宫颈癌He La细胞中表达(P<0.05)。上调miR-1246表达,He La细胞出现间质细胞的形态改变,同时,细胞迁移能力增强,侵袭能力提高。在He La细胞中miR-1246表达上调,可降低细胞中E-cadherin的表达(P<0.05),同时升高N-cadherin的表达(P<0.05)。结论辐射可诱导miR-1246在宫颈癌He La细胞中表达,miR-1246通过调控E-cadherin和N-cadherin的表达促进宫颈癌HeLa细胞发生EMT。     

冷冻消融后残存肿瘤与上皮-间质转化关系的实验研究

目的 探究不完全冷冻消融对前列腺癌RM-1细胞生物学行为的影响及其产生机制.方法 前列腺癌RM-1细胞放入-20℃冰箱中冷冻5 min,37℃水域复温,待细胞状态恢复后重复冷冻10 min、15 min.培养ld后镜下观察细胞形态.20只C57/BL小鼠构建荷瘤模型,随机分为对照组与不完全冷冻消融组.不同时间点测量肿瘤大小,14d时处死小鼠、取肺组织行HE染色,统计肿瘤肺转移枚数.Transwell法检测细胞迁移及侵袭能力变化,免疫印迹检测相关蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液转化生长因子(TGF)-β分泌量.结果 经不完全冷冻消融的RM-1细胞排列紊乱,形态发生改变,可有触角结构形成.术后3、7d不完全冷冻消融组肿瘤体积略小于对照组,但仅术后7d差异有统计学意义(P=0.019),术后10、14 d肿瘤体积基本相等.不完全冷冻消融组肿瘤肺转移枚数明显多于对照组(P＜0.001).Transwell试验显示不完全冷冻消融组细胞迁移及侵袭能力强于对照组(P＜0.05).免疫印迹检测显示,不完全冷冻消融组与对照组相比,N-cadherin、MMP-9、vimentin、表达上调,E-cadherin表达下调.ELISA检测结果显示,不完全冷冻消融组细胞上清液中TGF-β分泌增多.结论 不完全冷冻消融可使RM-1细胞迁移及侵袭能力增强,增加荷瘤小鼠肿瘤肺转移枚数,影响上皮-间质转化相关蛋白表达.     

miR-190对胶质瘤细胞生长及迁移抑制机制研究

目的探讨miR-190对胶质瘤细胞生长及迁移的抑制机制。方法通过实时荧光定量PCR法检测miR-190在人胶质细胞HEB和人胶质瘤细胞U87和U251细胞中的表达情况。细胞计数试剂盒(CCK8)实验和转移小室实验检测miR-190过表达和低表达时,U87和U251细胞的增殖和迁移能力。通过MIRDB软件预测miR-190可以靶向的蛋白质,荧光素酶报告基因实验分析miR-190对ZEB2的靶向作用。采用蛋白免疫印迹法检测miR-190过表达和低表达时,U87和U251细胞中ZEB2蛋白的变化情况。结果实时荧光定量PCR实验检测结果指出,miR-190在胶质瘤细胞系U87和U251中显著下调,明显低于正常胶质细胞HEB(P <0. 05)。miR-190表达上调时U87和U251细胞的生长受到抑制(P <0. 05)。转移小室结果显示,miR-190作用后,U87和U251细胞迁移能力下调(P <0. 05); miR-190受到抑制后,迁移细胞数量增加(P <0. 05)。MIRDB软件分析发现,miR-190与ZEB2的3'非翻译区具有结合位点。荧光素酶报告基因实验显示,miR-190能够下调ZEB2野生型的活性(P <0. 05),但是对ZEB2突变型没有作用(P> 0. 05)。蛋白免疫印迹法检测结果显示,miR-190能够显著抑制ZEB2蛋白水平的表达; miR-190表达受到抑制后,ZEB2蛋白水平上调。结论 miR-190可以通过抑制ZEB2的表达,抑制胶质瘤细胞的生长和迁移。     

DDX5基因表达下调对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭影响

目的探讨DDX5基因表达下调对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用慢病毒介导的DDX5-shRNA下调人胃癌HGC-27细胞中DDX5的表达。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹(Western blot)法验证下调效果。CCK8和平板克隆检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力的改变。结果 DDX5-shRNA可有效下调人胃癌HGC-27细胞中DDX5的mRNA和蛋白质表达。DDX5表达下调后,人胃癌HGC-27细胞的增殖受到抑制,24、48、72 h细胞增殖能力较转染了control-shRNA的细胞分别降低25.0%、33.3%和44.6%;转染了control-shRNA的细胞和转染了DDX5-shRNA的细胞克隆形成的数目分别为(162.6±10.3)个和(68.7±11.2)个,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);转染了control-shRNA的细胞和转染了DDX5-shRNA的细胞24 h迁移数目分别为(153.7±9.2)个和(78.0±6.7)个,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);转染了control-shRNA的细胞和转染了DDX5-shRNA的细胞24 h侵袭数目分别为(83.7±12.8)个和(40.2±7.6)个,两组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DDX5表达下调可明显抑制人胃癌HGC-27细胞的增殖、迁移及侵袭,其有可能成为胃癌的治疗靶点。     

METTL3对肝内胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨m6A甲基转化酶样蛋白3(METTL3)对肝内胆管癌细胞系QBC939和RBE细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,以及可能的分子机制.方法 通过嘌呤霉素筛选的方法将携带METTL3基因的重组质粒转染肝内胆管癌细胞系QBC939和RBE,得到稳定过表达METTL3的肝内胆管癌细胞系;采用小干扰RNA(siRNA)瞬时敲低肝内胆管癌细胞系中的METTL3;采用Western印迹检测肝内胆管癌细胞系中METTL3蛋白的表达水平,验证过表达和敲低METTL3的效果;采用细胞增殖实验(CCK-8法)检测METTL3对肝内胆管癌细胞系增殖能力的影响,Transwell法验证METTL3对肝内胆管癌细胞系迁移和侵袭能力;采用Western印迹检测过表达或敲低METTL3后p-ERK蛋白的表达水平,Log-rank检验比较METTL3高表达组和低表达组胆管癌患者的生存期差异.结果 过表达METTL3可显著促进QBC939和RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力,而敲低METTL3显著抑制QBC939和RBE细胞的增殖、迁移及侵袭能力.过表达METTL3促进磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)的蛋白表达水平,而敲低METTL3则抑制p-ERK的蛋白表达水平.METTL3在肝内胆管癌组织中上调表达,且其高表达与胆管癌患者的不良预后可能相关.结论 METTL3通过促进肝内胆管癌细胞系的增殖、迁移及侵袭能力而发挥癌基因的功能.     

海马头部浅沟消失对海马硬化诊断价值的探讨

目的　探讨海马头部浅沟消失对海马硬化的诊断价值。方法　对 18例经组织学检查证实的海马硬化患者的MRI检查资料和 18例年龄相匹配的对照组进行回顾性分析 ,观察海马头部浅沟的显示情况、海马头部大小和信号改变。结果　 18例海马硬化患者中 ,16例硬化侧海马头部浅沟消失 ,1例硬化侧海马头部浅沟明显变浅 ,几乎消失 ,1例硬化侧海马头部浅沟存在。硬化侧海马头部均有萎缩 ,并在T2 WI和液体衰减恢复 (FLAIR)成像呈高信号。海马头部浅沟消失对海马硬化诊断的敏感性为 88.9% ,特异性为 10 0 %。结论　海马头部浅沟消失是诊断海马硬化的一个可靠征象 ,结合患侧海马有萎缩性改变和T2 加权成像信号增高 ,可肯定诊断海马硬化。     

湿润烧伤膏治疗婴儿湿疹的临床疗效观察

目的观察、探讨湿润烧伤膏(MEBO)治疗婴儿湿疹的临床疗效。方法将84例婴儿湿疹患儿随机分为治疗组(44例)和对照组(40例),治疗组外涂湿润烧伤膏治疗,对照组外涂湿疹膏治疗,连续治疗1周后,观察两组疗效。结果治疗组有效率为97.73%,对照组有效率为82.50%;两组疗效经秩和检验,差异具有统计学意义(P0.05);随访1个月,治疗组未见复发,对照组有2例患儿复发。结论湿润烧伤膏治疗婴儿湿疹疗效好,无毒副作用,安全可靠。     

Study of age of fusion of hyoid bone

The present study was conducted to determine the age of fusion of greater cornua with the body of hyoid bone. Age of fusion of hyoid bone can help in determining the age of an individual, especially of unknown dead bodies where only skeletal remains are available. A victim of compression of neck will more likely have fracture of hyoid bone if his hyoid bone is fused. Indian authors have reported that the fusion of hyoid bone occurs after 40 years of age. Studies done by foreign workers observed that hyoid bone fused at an earlier age (30-40 years). A total of 170 excised hyoid bones from dead bodies belonging to the age group of 20-65 years were studied. Fusion occurred earlier in females as compared to males by about 5 years. The mean age of unilateral and bilateral fusion in males was 38.25 and 53.16 years, respectively. The mean age of unilateral and bilateral fusion in females was 38.00 and 48.50 years, respectively. All the hyoid bones were fused after the age of 60 years. No significant differences were found between the fusion on right and left side.     

延迟性脾破裂误漏诊原因分析

目的探讨延迟性脾破裂误漏诊原因和预防措施.方法回顾性分析总结12例延迟性脾破裂中的诊断和误漏诊的经验与教训.结果本组延迟性脾破裂的误漏诊5例(41.66%).对多发伤与脾破裂并存可能认识不足,外伤史轻微或伤员隐瞒外伤史,缺乏腹痛-缓解-突然再腹痛的典型病史,缺乏“对冲性脾破裂”力学分析和整体化诊断思路等为其误漏诊的主要原因.结论详细的外伤史和全面系统检查,重视腹以外多发伤掩盖腹内脏器伤及延迟性脾破裂可能.确立外伤-腹内脏器伤-脾破裂整体化诊断思路.不间断地辅以B超检查脾形态学变化和腹内有无积液,腹腔穿刺确定有无血腹、X线胸腹部检查观察左侧胸肋角和膈肌运动情况、必要时CT检查以尽早发现脾包膜下血肿,降低延迟性脾破裂误漏诊率.     

Analysis of the results of the international comparison of activity measurements of a solution of Fe

The results of an international comparison of activity measurements of a solution of ⁵⁵Fe organized by the BIPM in 2005 are reported and analysed. This exercise, which follows the procedures of the CIPM mutual recognition arrangement to update older comparisons, is a renewal of the comparison organized by the BIPM that took place in 1978. A EUROMET comparison was organized in 1996 specifically to compare activity measurements of a ⁵⁵Fe solution by means of liquid-scintillation techniques. Results of these three comparisons are presented and discussed in this paper.

The radionuclide solution was provided by the NPL, which also distributed the samples to the participants. The activity of the ampoules was measured by 16 laboratories using 12 methods producing 25 results. Some general considerations on uncertainty assessments pertaining to the different techniques used are drawn. The outcome of four different estimators is compared from which the presence of at least one outlier can be confirmed. Further measurements should be made to try to reduce the discrepancy between the results. To date the outcome of the present comparison does not show an improvement to that of the 1996 comparison.     

The value of information of duration of pregnancy in establishment of paternity

Summary In order to get an idea of the value of the information on the duration of pregnancy in establishment of paternity, 511 records from 17 lower courts in Sweden were studied.It was found that when a blood group investigation has been performed, only a small number of cases remain where the paternity claim should be rejected by a court of law for the reason that the period of pregnancy has been extremely long or short.It was shown that only very extreme probability values (percentages) should give reason for rejection of paternity claims if a larger risk of error is to be avoided. The risk is somewhat smaller with long pregnancies than with short ones.The results of this study emphasize the difficulties involved in probability assessment in paternity suits.This report was presented at the Seventh International Medical-Legal Seminar, Stockholm 1971.     

消妇炎胶囊辅料的合理性实验研究

目的确定消妇炎胶囊的辅料及用量。方法以浸膏粉的吸湿率和流动性为考察指标,对加入淀粉、糊精及微晶纤维素3种不同辅料后制得的颗粒进行考察,优选出最佳辅料后,再对最佳辅料的不同用量进行考察。结果加入辅料后,颗粒的抗吸湿能力和流动性都明显改善,其中加入淀粉后,分别在6、12、24、48、60 h测得的吸湿率为2.01%、4.03%、5.98%、6.66%、7.31%,休止角为34.61°,均小于糊精与微晶纤维素,表明加入淀粉颗粒质量最好;每80 g浸膏粉中分别加入30、45、60 g淀粉,综合判定45 g较好。结论每80 g浸膏粉加入淀粉45 g为辅料用量参数,制得颗粒的抗吸湿能力和流动性均好,可节约成本。     

超声对观察椎动脉椎骨段走行的诊断意义

目的探讨超声对观察椎动脉椎骨段走行的诊断价值。方法对162例患者(走行异常者经血管造影或MR I等其他检查证实)的双侧椎动脉走行的二维和彩色血流信号等声像图信息进行回顾性分析,对椎动脉椎骨段走行异常作出诊断及分型。结果(1)超声通过二维或彩色多普勒的血流信号可显示椎骨段椎动脉有无、穿入位置和走行形态。(2)超声根据椎骨段椎动脉的有无、穿入位置和在椎骨段中的走行形态可将椎动脉椎骨段走行异常分为缺如0.6%(2/324),走行变异2.7%(9/324),走行弯曲5.5%(18/324)三大类。结论超声能清晰显示椎动脉椎骨段的有无、穿入位置及走行形态,能对椎动脉椎骨段的走行异常作出分型诊断,在形态学上为临床明确椎动脉的病因提供帮助。     

武警某院急诊科抗菌药物处方分析

 目的 了解武警某院急诊科抗菌药物的使用情况。方法 提取急诊科2015年下半年的处方,遴选出使用抗菌药物(除去眼膏、外用膏药及中成药)的处方。对抗菌药物处方进行分类统计及分析, 包括使用抗菌药物的种类及比例、使用居前6位的抗菌药物、抗菌药物的联合使用情况等。结果 在2015年下半年急诊处方中有抗菌药物处方3872张,占处方总数的22.3%。使用抗菌药物构成比中,喹诺酮类药物使用频率最高,占42.9%。使用居第一位的药物是左氧氟沙星,占39.8%。单联处方77.86%,二联处方22.14%,无三联处方。结论 2015年下半年我院急诊科抗菌药物使用符合卫生部抗菌药物使用规定,但有些方面还需要进一步改进。     

多发性肋骨骨折两种处置方式的比较

目的 探讨多发性肋骨骨折治疗的有效方法.方法 按纳入及排除标准筛选34例常规外固定病例（常规组）及31例行肋骨内固定术病例（内固定组）,比较两组的住院时间、疼痛持续时间、呼吸情况,以及肺部感染发生率.结果 两组患者一般资料及合并肺挫伤和胸水情况比较差异无统计学意义;内固定组住院时间、疼痛持续时间、呼吸频率恢复时间、SaO2恢复时间和肺部感染与常规组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.常规组肺部感染发生率为26.5％（9/34）,内固定组肺部感染发生率为3.2％ （1/31）,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 肋骨内固定术优于常规外固定法.