Ⅰ型细胞间粘附分子与肝癌侵袭转移的关系

目的：研究肝癌组织中细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的表达与肝癌侵袭转移的关系。方法：应用流式细胞仪检测技术检测了27例人肝癌组织中I型细胞间粘附分子-1的表达,并与正常肝细胞中细胞间粘附分子-1的表达比较,进一步探讨肝癌细胞产生的I型细胞间粘附分子在肝细胞癌侵袭和转移过程中的作用。结果：27例肝癌组织中有24例ICAM-1表达明显增强,其含量明显高于正常组织（P＜0.01),与肿瘤大小、包膜的完整成正相关（P＜0.01),有转移组肝癌组织中ICAM-1的表达明显高于无转移组。结论：ICAM-1与肝癌的侵袭和转移有关,有可能作为预测肝癌转移、复发及预后的指标。     

肾癌患者外周血中碳酸酐酶9 mRNA表达的临床意义

目的：探讨肾细胞癌患者外周血中碳酸酐酶9（MN）mRNA表达的临床意义。方法：应用RT－PCR技术，对30例肾细胞癌患者及30例非肾细胞癌患者外周血中肾癌细胞标志物MN mRNA进行检测。结果：非肾癌组外周血中均不表达MN mRNA。肾癌患者外周血MN mRNA阳性表达13例（43％），其中肾癌转移8例，局限性肾癌5例；肾透明细胞癌12例，混合型癌1例。外周血MN mRNA表达与肾癌的临床分期无相关性（P＞0．05）；而肾透明细胞癌阳性率（12／22）明显高于其他组织类型（P＜0．05）。结论：RT－PCR技术可较敏感地检测到血液中肾癌细胞，有助于早期诊断肾癌微小转移。MN可被视为透明细胞癌特异的相关蛋白。     

BRMS1mRNA在膀胱移行细胞癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨膀胱移行细胞癌组织中乳腺癌转移抑制基因（breast cancer metastasis suppressor1,BRMSl）mRNA表达水平与膀胱移行细胞癌的发生和转移的关系。方法：以β-actin为内参照,用荧光RT—PCR方法分别检测正常膀胱、未转移膀胱癌、转移膀胱癌三组标本组织中BRMSlmRNA的表达。结果：未转移膀胱癌和转移性膀胱癌BRMslmRNA表达水平显著低于正常膀胱组织（P〈0．01）,转移膀胱细胞癌BRMSlmRNA水表达平显著低于未转移膀胱细胞癌（P〈0．01）。结论：BRMSlmRNA在膀胱癌组织中的表达水平与膀胱癌的发生和淋巴结转移呈负相关;BRMSlmRNA表达的下降可能促进了膀胱癌的转移。     

粘附分子CD44v6和E—cadherin的表达与甲状腺乳头状癌侵袭转移的关系

目的 探讨粘附分子CD44v6和E－cadherin表达与甲状腺乳头状瘤（PTC）侵袭转移的关系。 方法 应用S－P免疫组织化学方法检测58例甲状腺乳头状癌组织中CD44v6和E－cadherin的表达。结果 甲状腺乳头状癌组织中CD44v6和E－cadherin表达阳性率分别为72．4％和41．4％;CD44v6表达阳性率与PTC的侵袭和转移呈正相关（P＜0．05）,而E-cadherin表达阳性率与PTC的侵袭和转移呈负相关（P＜0．01）,且两种粘附分子在PTC中的阳性表达呈负相关性（P＜0．05）。结论 粘附分子表达与PTC侵袭和转移密切相关,检测CD44v6和E－cadherin的表达可作为判断甲状腺乳头状癌预后的参考指标。     

膀胱移行细胞癌临床病理指标与外周血CK-20基因表达的相关研究

目的 探讨外周血角蛋白20（CK－20）基因表达在膀胱移行细胞癌微转移情况及其临床意义。方法 以逆转录多聚酶链反应（RT－PCR）检测91例膀胱癌不同临床分期及病理分级CK－20mRNA外周血表达情况。结果 91例膀胱癌外周血CK－20基因表达阳性47例(51.6%），外周血肿瘤细胞微转移与膀胱癌患者的临床分期密切相关（P＜0.05），而与病理分级无明显相关（P＞0.05），随访中未发现淋巴结转移的T1－2期患者，术后8个月2例复发且均为CK－20RNA表达阳性。结论 RT－PCR方法检测CK－20mRNA在外周血表达是判断膀胱癌微转移的重要标志，对准确分期及治疗有重要意义。     

中期因子mRNA在原发性肝癌中的表达及其意义

目的：探讨中期因子（MK）mRNA在原发性肝细胞癌（HCC）中的表达及其意义。方法：收集33例人肝细胞癌组织、配对癌旁肝组织及10例肝良性肿瘤组织、5例正常肝组织、采用TRIzol一步抽提法提取总RNA，应用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）检测MKmRNA的表达。结果：28例肝细胞癌可见MKmRNA表达，阳性率为84．8％，而配对的癌旁组织中仅见3例表达，正常肝脏和肝脏良性肿瘤细胞无1例阳性。统计学分析表明，肝细胞癌肝细胞癌MKmRNA表达率与其他各组的差异有非常显著性（P＜0．01），但肝细胞癌MKmRNA表达与其组织学类型、病理分级、瘤体大小、包膜状况及其甲胎蛋白（AFP）值之间差异无显著性（P＞0．05）。结论：肝细胞癌在mRNA水平上表达MK增加，检测MK表达情况可作为HCC的辅助诊断指标之一，对术后制定进一步治疗方案也有参考价值。     

肝细胞癌组织中CT9基因mRNA表达的初步研究

目的 探讨肿瘤-睾丸抗原9（CT9）基因mRNA在肝细胞癌中的表达情况。方法 用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法对45例肝细胞癌患者癌组织和相应癌旁组织中CT9基因mRNA的表达情况进行检测，并对其中3例RT—PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果 45例肝细胞癌患者中，23例表达CT9mRNA，表达阳性率为51．1％，相应的癌旁组织中则均为阴性；3例DNA测序结果表明RT—PCR产物确为CT9 cDNA。CT9 mRNA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无相关性（P〉0．05）。结论 CT9 mRNA在肝细胞癌中呈高比例、特异性表达，可望成为肝细胞癌免疫治疗的理想靶位。     

肿瘤-睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌中的表达

目的：检测肿瘤－睾丸抗原SSX1基因mRNA在肝细胞肝癌（HCC）中的表达情况。方法：用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）对47例HCC患者的癌组织和相应癌旁组织以及15例肝硬化和15例正常肝组织的SSX1基因mRNA表达情况进行检测，随机选择4例RT－PCR扩增产物的目的片段进行DNA序列测定。结果：47例HCC患者中，39例表达SSX1 mRNA，阳性率为83％，相应的癌旁组织中有3例为弱阳性，其中2例患者获得了离癌灶更远处的活检组织，对其进行RT－PCR检测，结果显示阴性；所测的15例肝化和15例正常肝组织均未检测到SSX1的表达。4例DNA测序结果表明RT－PCR产物确为SSX1 cDNA。SSX1的表达与年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清甲胎蛋白（AFP）水平、乙型肝炎病毒（HBV）和丙型肝炎病毒（HCV）感染无显著相关性（P＞0．05）。结论：SSX1在HCC中呈高比例、高特异表达，可望成为HCC免疫治疗的理想靶位。     

肝细胞癌与乙肝病毒基因整合和p16基因表达的相关性研究

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）DNA整合与p16的关系及其在肝细胞癌发生发展中的作用。方法：聚合酶链式反应（PCR）检测35例肝癌、癌旁组织及31例肝硬化组织中HBV DNA及其整合情况，以Southern blot证实；逆转录－聚合酶链式（RT－PCR）检测组织中p16 mRNA。结果：有HBV DNA整合的肝癌、癌旁及肝硬化组织中X基因整合分别为100．0％、81．8％及68．4％，三者差异有显著性（P＜0．05）；p16 mRNA的表达缺失率分别为51．4％、31．4％、22．6％，三者差异有显著性（P＜0．05）。结论：HBV DNA整合与p16基因表达改变有相关性，两 者在肝癌的发生发展中发挥重要作用。     

Sirtl在肝癌及癌旁组织中的表达差异研究

目的：研究肝癌组织与癌旁组织的基因表达谱差异。方法：应用包含44000条人类全长基因的寡聚核苷酸芯片检测肝癌组织与癌旁组织的基因表达谱，并比较两者之间存在明显上、下调的表达差异基因，随后用RT—PCR和Western blot方法进行验证分析。结果：基因芯片筛选出存在差异表达的基因，其中沉默信息调节因子1（Sirtl）在肝癌组织与癌旁组织中的表达差异明显，在肝癌组织中明显升高，经RT—PCR和Western blot证实与基因芯片结果一致。结论：Sirtl基因的表达可能与肝癌的发生发展密切相关。     

细胞黏附分子与胃癌发生及转移关系的实验研究

目的探讨细胞黏附分子在胃癌发生和转移中的作用.方法运用cDNA基因芯片和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测25例胃癌标本神经细胞黏附分子(NCAM)、细胞间黏附分子(ICAM)、血管细胞黏附分子(VCAM)的表达.结果 NCAM、ICAM及VCAM基因在25例胃癌患者中表达显著增高(Cy5/Cy3＞2.0),胃癌转移组明显高于无转移组(P＜0.05)和正常对照组(P＜0.05),RT-PCR与基因芯片检测结果相同.结论基因芯片能够为胃癌的相关基因分析提供特异和可靠的数据,胃癌的发生和转移可能与胃组织中NCAM、ICAM、VCAM基因表达升高有关.     

VCAM－1与胃癌关系分析

目的：研究胃癌瘤体中血管细胞粘附分子（VCAM－1）的表达对胃癌的生长，转移的影响及与病理参数之间的关系。方法：对41例胃癌瘤体，瘤旁(2cm)及正常胃组织标本，8例良性胃溃疡，10例正常人标本进行了VCAM－1免疫组化染色，图像分析，分析VCAM－1的表达情况。结果：41例胃癌瘤体中有31例VCAM－1阳性表达，瘤旁组织2cm有5例阳性表达，正常组织5cm有4例阳性表达（P＜0．001）。胃良性溃疡8例标本中有2例阳性表达，正常对照10例中有2例阳性表达。胃癌组与溃疡组及正常组VCAM－1的阳性表达差异显（P＝0．0006），溃疡组与正常组之间无显性差异（P＝0．75）。有淋巴结转移的28例中，VCAM－1阳性表达26例，淋巴结转移阴性的11例中有5例VCAM－1阳性表达（P＝0．007）。VCAM－1的表达率及表达强度与胃癌的，分级及浸润深度相关，而与肿瘤的部位，大小无关。结论：VCAM－1表达与胃癌的发生有相关性，VCAM－1可能与胃癌的转移有关。     

粘附分子表达在脓毒症小鼠肺损伤中的作用

目的 探讨肺微血管内皮细胞粘附分子表达在脓毒症小鼠肺损伤中的作用。方法 盲肠结扎穿孔（ＣＬＰ）制造小鼠脓毒症模型,分别在致伤后３、１２ｈ分离肺微血管内皮细胞,用逆转录－聚合酶链（ＲＴ－ＰＣＲ）方法定量检测Ｅ－选择素、细胞间粘附分子（ＩＣＡＭ）－１和血管细胞粘附分子（ＶＣＡＭ）－１的基因表达,同时测定肺组织中髓过氧化物酶（ＭＰＯ）活性的改变。结果 ＣＬＰ后３ｈ肺微血管内皮细胞Ｅ－选择素、ＩＣＡＭ－１     

腹主动脉瘤中细胞黏附分子差异表达的研究

目的研究腹主动脉瘤 (AAA)中细胞黏附分子的差异表达与AAA发病的关系。方法利用基因芯片技术筛查AAA和正常腹主动脉中差异表达的细胞黏附分子基因 ,再利用分子生物学方法在基因、蛋白质水平检测。结果AAA中有 3种细胞黏附分子存在差异表达 ,它们是VCAM 1,PECAM 1,TSP ,上调比率分别达到 5 7,3 6及 5 7 4倍。结论AAA中有细胞黏附分子的表达差异 ,差异表达基因可能在AAA的发病过程中起作用     

cDNA微阵列和抑制消减杂交技术筛选胃癌下调功能基因组的研究

目的 筛选胃癌下调基因组，发现新的胃癌下调基因。方法 采用cDNA微阵列技术，检测5例胃癌与相对应正常胃粘膜间mRNA表达差异基因，筛选胃癌下调基因组。采用抑制消减杂交技术，建立5人份正常胃粘膜mRNA抑制消减杂交胃癌mRNA的差异表达文库，用聚合酶链反应及差异表达克隆菌转膜反向杂交判定其消减效率。随机挑选阳性克隆测序，寻找胃癌下调新基因，并经逆转录-聚合酶链反应证实。结果 筛选到60个胃癌下调基因，其中包括抑癌基因，凋亡相关基因，DNA复制、转录、翻译相关基因，细胞周期相关基因，细胞迁移相关基因等。克隆到两个胃癌下调的新基因片段。结论 得到60个胃癌下调基因，它们共同作用与胃癌的发生、发展、转移密切相关。成功建立了用于筛选胃癌下调新基因的抑制消减杂交cDNA文库，发现了两个新的胃癌下调基因片段．     

GRIM-19在肝细胞癌组织中的低表达及对其侵袭能力的影响

目的：检测GRIM-19在肝细咆癌（HCC）中的表达,分析其与HCC生物学行为的关系,并探讨GRIM-19对HCC侵袭能力的影响。方法：应用实时定量PCR技术检测83例HCC及其相对应的癌旁组织和8例正常肝组织中GRIM-19mRNA的表达,分析其与HCC临床病理因素之间的关系。用Westernblot法检测低侵袭力细胞株HL-7702、MHCC-97L和高侵袭力细胞株MHCC-97H、Huh-7中GRIM-19蛋白的表达。应用细胞转染技术将GRIM-19shRNA转入HL-7702和Huh-7,从而构建HL-7702和Huh-7的GRIM-19kd细胞系,并用Westernblot法检测转染效果。应用Transwell细胞迁移实验研究GRIM-19对HCC侵袭能力的影响。结果：实时定量PCR结果显示,83例HCC组织中有52例（62．65％）GRIM-19的表达低于相对应的癌旁组织（P〈O．01）,其表达水平也低于8例正常肝组织（P〈005）。GRIM-19的表达与HCC的TNM临床分期（P=O．011）、微血管浸润（P=O．047）和包膜浸润（P=O．013）密切相关。Westernblot显示HL-7702、MHCC-97L、MHCC-97H、Huh-7细胞系表达GRIM-19蛋白,且低侵袭力细胞株HL-7702、MHCC-97L中GRIM-19表达高于高侵袭力细胞株MHCC-97H、Huh-7。细胞侵袭实验显示GRIM-19低表达促进了HCC的侵袭能力。结论：GRIM-19在HCC的侵袭中起重要作用,可能为检测HCC的侵袭潜能提供新的研究思路。     

Correlation of neural cell adhesion molecules with perineural spread of squamous cell carcinoma of the head and neck.

Perineural spread (PNS) is a poor prognostic factor associated with increased risk of local recurrence and nodal metastasis and reduced survival of patients with squamous cell carcinoma of the head and neck (SCCHN). There is some evidence to indicate that neural cell adhesion molecules (NCAMs) may play a role in PNS of a variety of tumor types. We performed this study to investigate whether NCAM expression can be used as a predictor of PNS in SCCHN. The surgical specimens of 66 patients with SCCHN were evaluated with monoclonal IgG antibody immunoperoxidase staining for NCAM. Of the 41 specimens with PNS, 38 (93%) showed evidence of NCAM expression. In contrast, only 9 specimens (36%) without PNS expressed NCAMs. The difference in NCAM expression between the study and control groups was statistically significant (P < 0.01).     

原发性肝癌组织生长激素受体mRNA的表达

目的探讨原发性肝癌组织与正常肝组织的生长激素受体(GHR)mRNA的表达情况。方法通过半定量的逆转录鄄多聚酶链式反应(RT鄄PCR)方法检测GHRmRNA在32例原发性肝癌组织与6例正常肝组织中的表达。结果癌组织GHRmRNA的表达率为90.6%(29/32),正常肝组织GHRmRNA的表达率为100%;半定量RT鄄PCR结果表明:GHRmRNA在正常肝组织、原发性肝癌组织的表达二者之间无显著性差异(P>0.05)。结论正常肝组织、原发性肝癌组织的GHR在蛋白表达水平上差异的原因与二者在mRNA水平上的表达量无明显相关性。