hTR-siRNA腺病毒对裸鼠人宫颈癌移植瘤的治疗作用

目的 探讨人端粒酶RNA(hTR)-siRNA腺病毒对裸鼠人宫颈癌移植瘤的治疗作用及其机制.方法 将HeLa细胞注射到裸鼠的右腋皮下建立肿瘤模型,27 d后将荷瘤裸鼠随机分为4组,采用瘤体内多点注射方式,分别向各组荷瘤鼠注射0.1 mL的DMEM、Ad-NT-siRNA(1013 pfu/L)、Ad-hTR-siRNA (1013 pfu/L)或顺铂(1.20 g/L), 以后每隔3 d注射1次, 连续15 d.观察注射腺病毒后移植瘤的体积变化、毒副作用.治疗结束后间隔7 d处死动物,剥离出肿瘤组织称重.切取瘤组织做TUNEL染色测定组织的凋亡指数.结果 将HeLa细胞移植到裸鼠皮下,成瘤率为100%.与Ad-NT-siRNA处理组相比,Ad-hTR-siRNA处理组的裸鼠移植瘤的体积和质量分别降低45.48%和34.68%,TUNEL分析显示凋亡细胞量约11.8%;但是Ad-hTR-siRNA的抗肿瘤作用不及顺铂.结论 hTR-siRNA腺病毒能够明显抑制裸鼠人宫颈癌移植瘤的生长,其抗肿瘤机制与诱导肿瘤细胞凋亡、坏死有关.     

地塞米松对宫颈癌移植瘤生长及凋亡的影响

目的 探讨不同时间使用地塞米松对宫颈癌HeLa细胞移植瘤生长及凋亡的影响.方法 BALB/c裸鼠皮下接种HeLa细胞,于成瘤后测量肿瘤直径,不同时间(第6天和第16天)开始经腹腔内注射相同剂量地塞米松(15 mg·kg-1·d-1),连用10 d,对肿瘤进行透射电镜观察及原位细胞凋亡检测(Terminal deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTP Nick End Labeling,TUNEL)凋亡小体数目.结果 不同时间使用地塞米松体内注射均抑制宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长,诱导肿瘤细胞凋亡;不同时间药物注射肿瘤的体积大小有差异(P＜0.01);早期注射抑瘤率高(94.36%),电镜下凋亡小体明显,TUNEL检测凋亡小体数目较多;晚期注射抑瘤率低(53.57%),只有早期凋亡表现,TUNEL检测凋亡小体数目较少,组间比较有显著性差异(P＜0.01).结论 不同时间地塞米松体内注射均能抑制肿瘤生长,诱导凋亡发生,并存在时间依从性.     

X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究

目的 研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周.每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异.原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD).结果 与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P<0.05或P<0.01),而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P<0.01).结论 腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关.     

地塞米松对宫颈癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 探讨超生理剂量的地塞米松对官颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 5～6周龄雌性BALB/c裸鼠皮下接种传代培养的HeLa肿瘤细胞,肿瘤长大后(接种后16 d)每天腹腔内注射超生理剂量的地塞米松(62.5 mg·kg-1·d-1),连续10 d,测量肿瘤直径,计算肿瘤体积及抑瘤率;对肿瘤进行透射电镜观察、原位细胞凋亡检测(TUNEL)、血管内皮生长因子(VEGF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)检测.结果 超生理剂量的地塞米松体内注射能抑制官颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长,诱导肿瘤细胞凋亡;与对照组相比,治疗组肿瘤体积变小[(1.472±0.082)cm3vs(0.383±0.038)cm3,P<0.01],抑瘤率为73.99%,凋亡小体数目增多[(413±87)个vs(160±101)个,P<0.01)],VEGF灰度值降低[(172.833±12.978)vs(177.067±6.875),P<0.01],TNF-α灰度值无差异[(172.833±12.978)vs(177.067±6.875),P>0.05].结论 超生理剂量的地塞米松体内用药能显著抑制肿瘤生长,与诱导凋亡及抑制VEGF有关,而与TNF-α无关.     

RNA干扰介导的Cdx2沉默对人胃癌细胞MGC-803裸鼠移植瘤生长的影响

目的 建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,探讨Cdx2基因RNA干扰(RNAi)的重组慢病毒载体(pLL-Cdx2-siRNA)对人胃癌细胞MGC-803裸鼠移植瘤Cdx2基因表达和肿瘤生长的影响.方法 建立人胃癌细胞MGC-803裸鼠移植瘤模型,随机分为实验组(pLL-Cdx2-siRNA组),空载体组(pLL3.7组)和生理盐水组.隔天向各组动物肿瘤内分别注射Cdx2基因沉默的重组慢病毒载体pLL-Cdx2-siRNA、空载体pLL3.7或生理盐水0.2 mL,共6次,测量各组肿瘤体积的大小;11d后处死裸鼠,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测移植瘤中Cdx2基因的表达,脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术检测肿瘤细胞的凋亡.结果与生理盐水组和空载体组相比,实验组的肿瘤生长速度明显减慢(P＜0.05),肿瘤细胞Cdx2 mRNA和蛋白表达明显下降(P＜0.05);实验组肿瘤细胞的凋亡指数(16.7±5.6)％明显高于空载体组( 10.5±4.1)％和生理盐水组(11.2±4.3)％(P＜0.05).结论慢病毒载体pLL-Cdx2-siRNA瘤内注射可抑制人胃癌细胞MGC-803裸鼠移植瘤的生长.     

TRAIL抑制人喉鳞癌裸鼠动物模型的实验研究

目的 研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对喉鳞癌裸鼠动物模型的抑制作用,探讨其可能的作用机制.方法 建立人喉鳞癌裸鼠移植瘤模型,应用TRAIL进行瘤内注射治疗,观察肿瘤生长情况,瘤体积变化,观察裸鼠的生存及死亡发生情况.并且通过光镜及透射电镜观察肿瘤微观结构发生的改变.结果 体内注射TRAIL 100 ng/(mL·d),裸鼠肿瘤生长受到明显抑制,与对照组瘤体积相比差异具有统计学意义(P<0.01).光镜,电镜可以观察到实验组肿瘤发生坏死和凋亡改变.结论 TRAIL对喉鳞癌裸鼠动物模型的生长及发展存在着抑制作用.其作用可能是通过诱导肿瘤细胞凋亡来实现的.     

地龙蛋白组分Ⅲ对鼻咽癌裸鼠移植瘤微血管密度的影响

目的 通过观察地龙蛋白组分Ⅲ对鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤微血管密度和MMP9的影响,探讨其抗鼻咽癌转移的可能机制.方法 两组裸鼠接种HNE1细胞至肿瘤体积达0.01 mx0.01 mx0.01 m后,分别腹腔注射地龙蛋白组分Ⅲ和生理盐水,20 d后处死裸鼠,测量鼻咽癌裸鼠移植瘤生长体积及质量,显微镜下计数瘤旁血管密度,免疫组化S-P法检测金属基质蛋白酶9表达.结果 地龙组用药后较对照组裸鼠移植瘤生长体积及质量明显降低(P<0.05),瘤旁血管密度明显残少(P<0.05),金属基质蛋白酶9表达明显减弱(P<0.05).结论 地龙蛋白组分Ⅲ可能通过抑制金属基质蛋白酶9表达,抑制瘤旁微血管生长,从而抑制鼻咽癌转移.     

As2O3对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B皮下移植瘤抗肿瘤作用

目的 检测不同浓度As2O3对人子宫内膜癌HEC-1-B细胞裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及对瘤细胞内磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)表达的影响,进一步探讨As2O3的抗肿瘤机制.方法 建立人子宫内膜癌HEC-1-B细胞皮下移植瘤模型,随机分为实验组,即As2O3低剂量(1.0 mg/kg)、中剂量(2.5 mg/kg)、高剂量(5.0 mg/kg)剂量组,生理盐水(NS)组及顺铂组(5 mg/kg),腹腔内注射给药,连续8 d.观察用药前后裸鼠体质量改变.剥取瘤组织,计算药物的抑瘤率.检测用药后裸鼠的肝肾功能及血常规.透射电镜观察细胞变化,流式细胞仪检测细胞凋亡周期和细胞凋亡率,免疫组化法检测p-ERK的表达.结果 不同浓度As2O3和顺铂均有不同程度抑制肿瘤细胞生长、促进肿瘤细胞凋亡的作用,其中As2O3低剂量组的抑瘤率为34.3%,p-ERK的表达率为37.5%,该组在亚G1期出现典型的凋亡峰,且As2O3低剂量组与NS组比较,凋亡率、瘤质量差异均有显著意义(F=27.20、33.92,q=9.19、13.34,P<0.05).As2O3低剂量组与顺铂组相比,无明显血液及肝肾毒性.结论 低剂量As2O3组能明显抑制肿瘤细胞HEC-1-B生长,且毒副作用轻,可能与阻滞细胞周期,抑制p-ERK表达有关.     

食道通结方对食管癌裸鼠移植瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的:通过体内实验观察食道通结方对食管癌裸鼠移植瘤增殖、凋亡相关蛋白表达的影响,进一步明确该方治疗食管癌的作用机制。方法:裸鼠皮下接种食管癌TE-1瘤株,造模成功后随机分为模型组、中药组、顺铂组、中药+顺铂组,各组分别予0.9%Na Cl溶液、中药食道通结方、顺铂、中药食道通结方+顺铂干预,共28 d。观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况,检测肿瘤细胞增殖指数、凋亡指数的变化以及移植瘤细胞内增殖、凋亡相关蛋白Stat3、P53、Bcl-2、Bax、Caspase3表达情况。结果:与模型组比较,各药物组的平均移植瘤体积及瘤重均明显降低(P0.01),其中中药+顺铂组显著低于中药组及顺铂组(P0.01)。各药物组的皮下移植瘤细胞增殖指数均显著降低(P0.01),其中顺铂组明显低于中药组(P0.01),而中药+顺铂组降低更显著(P0.01);各药物组的皮下移植瘤细胞凋亡指数均明显升高(P0.01),其中中药+顺铂组显著高于中药组及顺铂组(P0.01)。各药物组的肿瘤组织中Stat3、Bcl-2表达均明显下降,P53、Bax、Caspase3表达均显著增加,其中中药+顺铂组变化更为明显。结论:食道通结方具有抑制食管癌细胞株TE-1皮下移植瘤细胞增殖、促进其凋亡的作用,并能增强顺铂抑制肿瘤细胞生长的作用,其可能与下调食管癌细胞株TE-1中Stat3、Bcl-2的表达,上调P53、Bax、Caspase3的表达相关。     

TWEAK/Fn14在人结肠癌细胞SW480中的表达及对移植瘤血管发生的影响

目的 观察肿瘤坏死因子样凋亡微弱诱导剂(TWEAK)与其受体成纤维细胞生长因子诱导早期反应蛋白14(Fn14)在结肠癌细胞SW480中的表达及其对裸鼠移植瘤生长的影响.方法 结肠癌细胞系SW480脂质体法稳定转染TWEAK反义寡核苷酸(ASODN)、错义寡核苷酸(SCODN)分别培养;采用四唑盐比色试验(MTT)法检测肿瘤细胞增殖情况,RT-PCR法检测TWEAK及Fn14 mRNA的表达情况,细胞免疫荧光法检测细胞中的TWEAK及Fn14蛋白的表达;分别将空白对照组、LF对照组、ASODN组、SCODN组肿瘤细胞注射裸鼠皮下,观测各组裸鼠移植瘤体积、相对肿瘤增殖率,TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡指数;免疫印迹法检测肿瘤组织血管生长因子(VEGF)C、D的表达.结果 空白对照组、LF对照组、SCODN组之间结肠癌肿瘤细胞的增殖情况及裸鼠移植瘤体积、肿瘤相对增殖率及肿瘤凋亡指数差异无统计学意义(P>0.05);与上述3组相比,ASODN组肿瘤细胞增殖受到明显抑制(P<0.05),TWEAK与其受体Fn14 mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05),裸鼠移植瘤体积、相对肿瘤增殖率明显降低(P<0.05),肿瘤凋亡指数无明显变化(P>0.05),而VEGF-C、D蛋白表达量显著降低.结论 抑制TWEAK表达可能通过抑制VEGF的表达抑制结肠癌细胞及移植瘤增殖.