苦参碱抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖的机制研究

目的:探讨苦参碱对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导的大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖的抑制作用及其机制.方法:差速贴壁法体外培养新生Wistar大鼠的心肌成纤维细胞,随机分为6组:对照组,AngⅡ组,Losartan+Ang Ⅱ组,不同浓度Mat(0.25、0.5、1.0 mmol/L)+Ang Ⅱ组.MTT法检测细胞的增殖;流式细胞仪分析细胞周期并检测CyclinD1、p21的表达;免疫荧光细胞化学染色法检测p27蛋白表达.结果:(1)AngⅡ可显著提高心肌成纤维细胞MTT-OD值,使S期细胞比率增加,G1期细胞比率下降,并降低细胞p27蛋白的表达.而对CyclinD1、p21蛋白表达无影响.AT1受体拮抗剂Losartan可完全阻断AngⅡ的作用.(2)在一定范围内(0.25～1.0 mmol/L),Mat能降低AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞MTT-OD值,使S期细胞比率下降,G1期细胞比率增加,并提高心肌成纤维细胞中p27、p21蛋白水平,且呈浓度依赖性.结论:(1)AngⅡ通过AT1受体促进CFs增殖,机制可能与降低p27蛋白的表达有关.而与CyclinD1、p21无关.(2)在一定范围内,Mat可剂量依赖性地抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞增殖,其作用与增强p27、p21的蛋白表达有关.     

葛根素对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌组织转化生长因子β1和血浆血管紧张素Ⅱ的影响

目的:研究葛根素对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和血浆血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)的影响.方法:采用ISO[5 mg/(kg·d)×14 d]皮下注射诱导大鼠心肌纤维化,给予葛根素100 mg/(kg· d)腹腔注射或卡托普利100 mg/(kg·d)灌胃,实验共8周.32只雄性SD大鼠随机分成4组:模型组8只;葛根素组8只;卡托普利组8只;葛根素+卡托普利组8只.实验末检测大鼠左室射血分数及缩短分数,计算左心室质量指数,取左室心肌组织进行VG染色,分别测算胶原容积积分,取左室游离壁心肌组织检测羟脯氨酸浓度,RT-PCR检测TGF-β1 mRNA水平和Western Blot测定TGF-β1蛋白,测定血浆Ang-Ⅱ浓度.结果:与模型组比较,葛根素和卡托普利均改善大鼠左室收缩功能(LVEF％,FS％,P＜ 0.01),减少左心室质量指数(P＜0.01)及羟脯氨酸浓度(P＜0.01),减少左室心肌组织TGF-β1(P＜ 0.05),降低血浆Ang-Ⅱ浓度(P＜0.01).以葛根素+卡托普利最显著(P＜0.01).结论:葛根素改善左心室收缩功能,抑制左室心肌组织中TGF-β1表达和降低血浆Ang-Ⅱ,葛根素与卡托普利合用作用更强.     

双氢青蒿素对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞增殖和活性的影响

目的 探讨双氢青蒿素（DHA）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞增殖和分泌活性的影响。方法 以乳鼠的心肌组织中的成纤维细胞为研究对象。实验设置为：对照组、AngⅡ组、DHA组和DHA+AngⅡ组,采用噻唑兰法检测每组细胞的增殖情况;用ELISA分析细胞孵育液中所含的Ⅰ型胶原蛋白（ColⅠ）以及纤黏连蛋白（FN）的水平;免疫印迹法分析胞质内的α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量。结果DHA组的细胞数、细胞悬浮液中ColⅠ和FN含量、细胞中α-SMA和TGF-β1蛋白含量与对照组相比均没有显著差异（P>0.05）。与对照组相比,AngⅡ组细胞（0.1272±0.0026）显著增殖（P<0.05）;细胞悬浮液中ColⅠ（0.8397±0.0371）和FN(0.7555±0.0820)含量均增加（P<0.05）;胞质内α-SMA(0.229±0.029)和TGF-β1(0.193±0.023)的量增多（P<0.05）。与AngⅡ组相比,DHA+AngⅡ组的细胞数量（0.1201±0.0021）显著下降;细胞悬浮液中ColⅠ...     

依那普利、缬沙坦对实验性大鼠肝纤维化的影响

目的通过依那普利、缬沙坦对肝纤维化大鼠转化生长因子β1(TGFβ1)/Smad3及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨两药物对肝纤维化的治疗作用。方法制备四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠模型,60 d造模成功后分别给予依那普利、缬沙坦灌胃15 d。对各组大鼠肝组织进行HE及Masson染色,Western blotting检测TGFβ1/Smad3、CTGF蛋白表达,Real-time PCR检测TGFβ1/Smad3及CTGF mRNA表达。结果依那普利、缬沙坦可明显减轻大鼠肝组织纤维化程度,TGFβ1/Smad3、CTGF蛋白(0.51±0.10、0.49±0.11 vs.0.60±0.09;0.72±0.09、0.69±0.07 vs.0.98±0.13;0.51±0.05、0.47±0.13 vs.0.61±0.05,P均<0.05)及mRNA(2.77±0.83、2.97±0.48vs.4.07±0.97;4.15±0.98、4.17±0.98 vs.6.06±0.85;5.82±1.21、5.34±1.24 vs.7.63±1.25,P均<0.05)表达较模型组降低。结论依那普利、缬沙坦对大鼠肝纤维化具有抑制作用,为探索新的治疗药物提供了实验依据。     

血浆RGS2蛋白、AngⅡ和AT1R对孕期妇女子痫前期发病与病情程度的影响

目的探究血浆G蛋白信号调节因子(G protein signal regulator,RGS2)、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)和血管紧张素Ⅱ1型受体(AngiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)对孕期妇女子痫前期(Preeclampsia,PE)发病与病情程度的影响。方法选取2015年1月-2018年1月期间我院收治的136例住院分娩PE患者为观察组,选取同期我院收治的136例住院分娩健康孕妇为对照组。比较观察组与对照组患者收缩压、舒张压、血浆RGS2、AngⅡ和AT1 R水平。观察组136例患者中38例患者为重度PE(重度组),98例为轻/中度PE(轻/中度组)。比较不同病情患者收缩压、舒张压、血浆RGS2、AngⅡ和AT1 R水平,并分析妊娠中期血浆AngⅡ和AT1 R水平对PE病情的预测价值。结果观察组患者的收缩压、舒张压、血浆RGS2、AngⅡ和AT1 R水平均高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。轻/中度组和重度组PE患者的收缩压、舒张压、血浆RGS2、AngⅡ和AT1 R水平均高于对照组,且重度组患者的收缩压、舒张压、血浆AngⅡ和AT1 R水平均高于轻/中度组,差异具有统计学意义(P0.05);轻/中度组与重度组患者的血浆RGS2水平比较差异无统计学意义(P0.05)。妊娠中期血浆AngⅡ水平对PE病情的预测的敏感度和特异性分别为80.00%和88.00%,血浆AT1 R水平的预测敏感度和特异性分别为84.00%和92.00%。Pearson相关性分析显示子痫前期患者血浆RGS2与AngⅡ和AT1 R均呈现正相关(P0.05),AngⅡ与AT1R呈现正相关(P0.05)。结论子痫前期患者血浆RGS2、AngⅡ和AT1R水平与其病情有一定相关性,妊娠中期血浆AngⅡ和AT1 R水平可有效预测PE病情进展。     

睾酮对慢性心力衰竭雄性大鼠心肌纤维化的影响

目的探讨睾酮对慢性心力衰竭雄性大鼠心脏纤维化的影响。方法将53只雄性SD大鼠分为正常对照组（A组）、睾丸切除加心力衰竭组（B组）、睾丸切除加心力衰竭加睾酮（T）替代治疗组（C组）。应用放射免疫法检测大鼠血浆T和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,免疫组化检测心肌组织转化生长因子-β1（TGF-β1）表达水平,VG染色观察大鼠心肌间质胶原纤维的变化。结果与B组比较,C组TNF-α水平明显降低[C组vs.B组：（0.86±0.27）ng/mL vs（1.28±0.26）ng/mL,P〈0.01],TGF-β1水平明显降低[C组vs.B组：（3.32±1.61）%vs（6.49±2.82）%,P〈0.01],胶原容积分数（CVF）减少[C组vs.B组：（2.13±0.72）%vs（2.84±0.79）%,P〈0.05]。结论睾酮能抑制心力衰竭雄性大鼠心肌纤维化,从而保护心功能,其作用的一个重要机制可能为睾酮拮抗TGF-β1的产生。     

白藜芦醇抑制血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠心肌成纤维细胞分化的作用和机制

目的研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对血管紧张素Ⅱ(angiotension AngⅡ)诱导的心肌成纤维细胞增殖和分化的影响,探讨其抗心肌纤维化的作用及其机制。方法将细胞分为对照组、AngⅡ模型组和Res组。分别用ELISA法检测胶原蛋白collagen I和collagenⅢ含量;采用Western blot法检测PCNA、α-SMA、TGF-β1、TGF-βRⅡ、Smad3、Smad7蛋白含量。结果与对照组相比,AngⅡ可明显诱导细胞中PCNA、α-SMA含量增多、细胞培养基中胶原蛋白collagen I、collagenⅢ含量增加、TGF-β1和TGF-βRⅡ、Smad3蛋白水平增多,降低Smad7蛋白含量;而Res可明显改善上述指标。结论Res抗心肌纤维化的作用可能与其抑制AngⅡ诱导的心肌成纤维细胞的增殖和分化,下调TGF-β1/Smads信号通路有关。     

肿瘤坏死因子α和血管紧张素Ⅱ对内皮细胞释放PAI-1的影响

目的 研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)对内皮细胞分泌组织纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的影响。方法 培养内皮细胞株(ECV304),分为:(1)TNF-α刺激组,培养基中TNF-α加至终浓度为5、10、25、50、100ng/ml;(2)Ang Ⅱ刺激组,培养基中Ang Ⅱ加至终浓度为5、10、25、50、100ng/ml,24小时后测定上清中的组织纤溶酶原激活物(t-PA)和纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)的含量。结果(1)空白对照组PAI-1含量为77.6±2.5ng/ml,TNF-α(5、10、25、50、100ng/ml)刺激组分别为80.5±0.9、89.2±6.9、81.1±1.1、86.7±5.6、100.9±11.0ng/ml,两组间差异显著(P<0.05),而两组t-PA含量无明显差异(P>0.05)。(2)空白对照组PAI-1含量为76.8±1.8ng/ml,Ang Ⅱ(50、100mnol/L)刺激组分别为79.2±0.9、80.1±1.2ng/ml,两组间差异显著(P<0.05),而两组t-PA含量无明显差异(P>0.05)。结论 TNF-α和Ang Ⅱ对内皮细胞株分泌的PAI-1有显著的升高作用,而对t-PA无显著影响。     

AngⅡ通过ATF-1通路诱导NOX1高表达

目的：探讨激活转录因子（ATF1）在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导血管平滑肌细胞（VSMCs）中NOX1基因表达增加的作用。方法：体外培养大鼠主动脉VSMCs,用荧光实时定量逆转录PCR（Real-time RT-PCR）检测NOX1基因表达的量,Western Blot检测ATF-1蛋白在AngⅡ的刺激是否引起NOX1基因的高表达并用RNA干扰（RNAi）技术转染VSMCs使ATF-1基因沉默来观察NOX1的表达。结果：AngⅡ能够诱导NOX1基因的表达增加以及增强ATF-1的磷酸化及活性,ATF1基因沉默反过来可抑制AngⅡ诱导的NOX1基因表达的增加。结论：在大鼠的VSMCs中,ATF-1是介导NOX1基因表达的一个必须的转录因子。     

苦参碱对房颤犬心房肌胶原合成及TNF-α、TGF-β1和CTGF的影响

目的：探讨苦参碱对犬心房颤动（房颤）心房肌组织中胶原合成以及肿瘤坏死因子（TNF-α）、转化生长因子（TGF-β1）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响。方法健康比格犬10只采用快速右心室起搏造房颤模型,随机分成房颤组和房颤＋苦参碱组各5只。采用天狼星红染色,计算胶原容积分数（CVF）以测定纤维化程度;采用免疫组织化学法检测右心房TNF-α、TGF-β1和CTGF的蛋白表达情况;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测TNF-α、TGF-β1和CTGF的mRNA水平表达情况。结果与房颤组相比,房颤＋苦参碱组纤维化程度降低,CVF 明显下降（P＜0.05）,TNF-α、TGF-β1和 CTGF 蛋白表达水平下降,且TNF-α和TGF-β1的mRNA表达水平显著下降（P＜0.05,P＜0.01）。结论苦参碱可能通过抑制TNF-α、TGF-β1和CTGF的表达,抑制房颤心房肌胶原合成,改善心房组织纤维化程度。     

血管紧张素Ⅱ及受体与肿瘤关系的研究进展

肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)是体内一个重要的神经体液调节系统,通过作用于心脏、肾脏、血管、肾上腺等,在调节血压、维持体液和电解质平衡等方面起着不可忽视的作用.     

曲尼司特对环孢素A慢性肾毒性大鼠肾脏TGF-β1、Ang Ⅱ及col Ⅲ的影响

目的:探讨曲尼司特(tranilast,TNL)对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠血清及肾脏血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)的影响。方法:雄性SD大鼠24只,随机分成正常对照组、模型组、TNL治疗组、安博维治疗组。采用低盐饮食加CsA 20 mg/(kg.d)灌胃的方法建立CsA慢性肾毒性肾脏模型。观察TNL对大鼠肾脏病理及肾组织Ang Ⅱ、TGF-β1、ColⅢ的影响。结果:TNL能下调CsA慢性肾毒性大鼠血清及肾组织中AngⅡ的水平及肾组织TGF-β1、ColⅢ在肾脏的表达。结论:TNL可能通过抑制AngⅡ、TGFβ1及ColⅢ的表达而发挥其抗纤维化作用。     

异丙酚对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的抑制作用及机制

目的探讨不同剂量异丙酚对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)诱导大鼠心肌成纤维细胞增殖的抑制作用和机制。方法 100只出生1~3 d的Wistar大鼠进行心肌成纤维细胞的分离与培养后,将细胞分为对照组(细胞培养基中加入1 mL含体积分数1%小牛血清的DMEM培养基)、AngⅡ组(细胞培养基中加入1 mL 1.0×10-7 mol/L AngⅡ),AngⅡ+异丙酚0.5 mmol/L组(细胞培养基中加入1 mL 1.0×10-7 mol/L AngⅡ+0.5 mmol/L异丙酚)、AngⅡ+异丙酚1.0 mmol/L组(细胞培养基中加入1 mL 1.0×10-7 mol/L AngⅡ+1.0 mmol/L异丙酚)、AngⅡ+异丙酚1.5 mmol/L组(细胞培养基中加入1 mL 1.0×10-7 mol/L AngⅡ+1.5 mmol/L异丙酚)。采用MTT法检测各组细胞生长抑制率,采用PCR法检测各组细胞α-SMA mRNA相对表达量,采用Western blot法检测各组细胞总蛋白含量。结果培养48 h,AngⅡ组细胞生长抑制率[(14.23±1.17)%]低于对照组[(23.32±2.15)%]、AngⅡ+异丙酚0.5 mmol/L组[(24.19±1.36)%]、AngⅡ+异丙酚1.0 mmol/L组[(29.25±2.30)%]及AngⅡ+异丙酚1.5 mmol/L组[(31.37±2.19)%](P<0.05),AngⅡ+异丙酚1.5 mmol/L组、AngⅡ+异丙酚1.0 mmol/L组、AngⅡ+异丙酚0.5 mmol/L组细胞生长抑制率依次降低(P<0.05);AngⅡ组心肌成纤维细胞α-SMA mRNA相对表达量(2.05±0.23)、总蛋白含量(225.06±18.66)均高于对照组(0.98±0.12、150.65±11.23)、AngⅡ+异丙酚0.5 mmol/L组(1.78±0.25、197.54±11.56)、AngⅡ+异丙酚1.0 mmol/L组(1.50±0.11、182.51±10.14)和AngⅡ+异丙酚1.5 mmol/L组(1.12±0.05、168.26±11.05)(P<0.05),AngⅡ+异丙酚0.5 mmol/L组、AngⅡ+异丙酚1.0 mmol/L组、AngⅡ+异丙酚1.5 mmol/L组及对照组心肌成纤维细胞α-SMA mRNA相对表达量及总蛋白含量依次降低(P<0.05)。结论异丙酚具有抑制AngⅡ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖的作用,且随剂量增加,抗心肌成纤维的作用逐渐增强。     

转化生长因子-β1、肿瘤坏死因子-α在老龄肺纤维化大鼠血清中表达变化的实验研究

目的:对比观察老龄大鼠和成年大鼠转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在博来霉素诱导肺纤维化模型中表达水平的变化,探索老年肺纤维化发病率升高的可能机制.方法:大鼠气管内灌注博来霉素(模型组)或生理盐水(对照组),于第7、14、21、28天分别处死5只,测定血清中TGF-β1、TNF-α的浓度;测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)的浓度;通过HE染色观察肺组织形态的变化.结果:各时间点模型组大鼠肺组织HYP含量、血清中TGF-β1、TNF-α的浓度均较对照组明显增高,差异有显著性(P＜0.05);成年和老龄模型组第7天至第28天肺组织HYP含量、血清中TGF-β1、TNF-α水平逐渐升高,但是成年模型组第21、28天与同组第14天比较差异无显著性(P＞0.05),而老龄模型组在第21天和第28天时仍明显继续升高,且与同组第14天比较差异有显著性(P＜0.05).结论:气管内灌注博来霉素后老龄大鼠HYP、TGF-β1、TNF-α的浓度长时间及高水平表达,是肺纤维化随年龄增加的分子基础,也是老年人肺纤维化发病率升高原因之一.     

奥美沙坦对肝纤维化大鼠 Ang（1-7）／Mas受体的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂（ ARB）奥美沙坦对肝纤维化大鼠肝脏血管紧张素（1-7）[Ang（1-7）]及其Mas受体的影响。方法制备四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠模型,同时应用奥美沙坦灌胃,共60 d。对各组大鼠肝组织进行HE及Masson染色,酶联免疫吸附法测定Ang（1-7）含量,免疫组织化学技术观察、Western blot 技术检测Mas 受体蛋白表达, Real-time PCR 技术检测Mas 受体mRNA水平。结果奥美沙坦可明显改善大鼠肝脏纤维化程度,增加肝组织中Ang（1-7）含量[模型组（142.90±16.16）ng/g,奥美沙坦组（193.50±19.41）ng/g,P＜0.05],增加Mas受体蛋白表达（模型组0.41±0.12,奥美沙坦组0.66±0.11,P＜0.05）及Mas mRNA水平（模型组2.08±0.64,奥美沙坦组3.67±0.68,P＜0.05）。结论奥美沙坦具有抗肝纤维化作用,其机制可能与Ang（1-7）/Mas受体表达增加有关。     

健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠血清肿瘤坏死因子α及转化生长因子β1的影响

背景：在前期实验的基础上，本实验进一步研究健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠血清肿瘤坏死因子α、转化生长因子β1含量的变化及相关性，借以深入探讨其对骨代谢的调节作用。目的：观察去卵巢骨质疏松模型鼠血清中肿瘤坏死因子α、转化生长因子β1含量变化以及相关性，分析补肾健脾中药健骨颗粒对去卵巢骨质疏松模型鼠骨代谢的具体调节机制。设计：以实验动物为观察对象，通过摸球法进行随机化分组。单位：福建中医学院骨伤系、福建中医学院中心实验室。对象：对象的样本量为6月龄SD雌性大鼠50只，体重350-400g，随机分成5组，每组10只，以切除卵巢为模型，用单纯随机化方法分成5组，并规定第1组为假手术组，即行腹部切口但不切除卵巢。第2-5组为造模组，即进行腹部切口双侧卵巢切除术造模。其中第2组为单纯模型组；第3组为生理盐水组；第4组为骨松宝组（骨松宝成份：淫羊藿、川芎、牡蛎等）；第5组为健骨颗粒组（健骨颗粒成份：煅狗骨、淫羊藿、党参等中药）。方法：假手术组只行腹部切口但不切除卵巢，将第2-5组切除卵巢造模。于术后3个月时腹腔注射麻醉药40mg／kg戊巴比妥处死假手术组和单纯模型组大鼠，经相关指标检测确定模型成立。第3-5组大鼠按照组别分别喂服生理盐水2mL／（kg&;#183;d）、骨松宝1．5g／（kg&;#183;d）和健骨颗粒2g／（kg&;#183;d），统一于术后第13周，即模型成立后给药，用药12周后在麻醉状态下统一处死。取颈动脉血检测血清中肿瘤坏死因子-α、转化生长因子-β1及雌二醇的含量，结果用z蜘表示，组间比较用t检验。主要观察指标：去卵巢后12周及喂服药物12周后各组大鼠血清肿瘤坏死因子α、转化生长因子β1、雌二醇的含量以及其相关性。结果：①去卵巢后12周，随着雌二醇水平下降，血清肿瘤坏死因子α含量明显升高，而转化生长因子β1浓度却明显降低。②当喂服健骨颗粒12周后，血清雌二醇和转化生长因子B1浓度[（54．05&;#177;15．92），（912&;#177;1．79）ng／L1回升明显，与同期生理盐水组相比[（27．24&;#177;2．99），（5．53&;#177;1．46）ng／L1差异有显著性意义（t=5．234，t=4．907，P〈0．01），而肿瘤坏死因子α含量与生理盐水组相比却出现下降f（32．44&;#177;3．42），（65．86&;#177;35．36）ng／L，t=2．975，P〈0．051。③血清肿瘤坏死因子α与雌二醇含量呈负相关（r=-0．324，P〈0，05）；血清转化生长因子β1与雌二醇含量呈高度正相关（r=0．673，P〈0．01）；血清肿瘤坏死因子α与转化生长因子β1亦呈负相关（r=-0．387，P〈0．02）。结论：健骨颗粒通过调整骨质疏松模型鼠体内雌二醇水平。制约肿瘤坏死因子α的合成、分泌及其活性，解除对转化生长因子β1的抑制作用，使破骨细胞的骨吸收活动减弱，成骨细胞的骨形成作用增强，改善骨代谢的负平衡。     

血管紧张素Ⅱ诱导急性肺损伤大鼠血管紧张素Ⅱ2型受体表达调控的研究

目的 探讨静脉注射血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管紧张素Ⅱ 1型受体(AT1R)阻断药氯沙坦对大鼠肺组织AT2R表达的影响及AT2R与急性肺损伤(ALI)的相关性.方法 24只SD大鼠被随机分为4组,每组6只正常对照组和AngⅡ组:持续皮下注射生理盐水或AngⅡ1 μg·kg-1·min-1 72 h;AngⅡ+氯沙坦组:注射AngⅡ前24 h及注射过程中给予氯沙坦10 mg·kg-1·d-1灌胃,连用4 d;氯沙坦组:仅用氯沙坦10 mg·kg-1·d-1灌胃,连用4 d.给药后活杀大鼠,分别用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测肺组织AT2R 的mRNA和蛋白表达,并行组织损伤病理评分.结果 AngⅡ组肺组织病理评分[(3.33±1.14)分]明显高于正常对照组[(0.73±0.09)分];AngⅡ+氯沙坦组评分降至(1.98±0.30)分,而氯沙坦组为(0.95±0.20)分,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).AngⅡ组AT2R mRNA表达[(47.90±9.88)%]明显低于正常对照组[(86.33±5.90)%];AngⅡ+氯沙坦组AT2R mRNA表达上调[(90.63±19.66)%],而氯沙坦组为(68.65±4.88)%,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).正常对照组肺组织AT2R蛋白表达为(78.80±41.26)%,AngⅡ组为(68.98±23.93)%,AngⅡ+氯沙坦组为(68.13±23.23)%,氯沙坦组为(70.15±17.16)%,各组间比较差异均无统计学意义.结论 AngⅡ可以诱导大鼠ALI并下调AT2R mRNA在肺组织中的表达,此时应用氯沙坦可上调AT2R mRNA表达,改善肺损伤;AT2R可能在ALI中发挥肺保护作用.     

压力负荷增加大鼠模型左室心肌血管紧张素Ⅱ-1型受体mRNA及其受体蛋白的改变

目的:观察压力负荷增加大鼠左室心肌血管紧张素Ⅱ-1型(AT1)受体mRNA及其受体蛋白的表达,探讨压力负荷增加大鼠左室重构的机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组和模型组,利用腹主动脉缩窄法制备压力负荷增加大鼠模型,造模8周后观察左室重量指数、左室心肌细胞超微结构的改变;采用RT-PCR的方法检测心肌组织AT1 mRNA表达,采用免疫组织化学染色方法观察心肌组织AT1受体蛋白的改变.结果:与假手术组比较,模型组LVMI(‰)明显增加(P<0.01),左室心肌亚细胞发生改变,左室心肌组织AT1mRNA表达水平模型组较假手术组升高(P<0.01),左室心肌组织AT1受体蛋白较假手术组上升(P<0.1).结论:压力负荷增加大鼠在造模8周已形成左室肥厚的病理生理改变,这种左室肥厚的改变可能与左室心肌AT1基因转录与翻译水平均有关.     

银杏叶提取物预防大鼠急性肝损害机制的研究

目的 观察银杏叶提取物对大鼠急性肝损害的预防作用及其机制,寻找临床适用的检测指标.方法 四氯化碳诱发大鼠急性肝损害,同时使用银杏叶提取物进行预防,使用生化检测仪检测丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸转氨酶的含量改变;使用比色法检测超氧化物歧化酶和丙二醛的含量变化;采用酶联免疫吸附测定方法 检测肿瘤坏死因子α和转化生长因子β1,的含量变化.结果 银杏叶提取物有效降低了丙氨酸氨基转移酶和天冬氨酸转氨酶的含量;并使超氧化物歧化酶的含量显著升高,与之对应丙二醛的含量显著降低;肿瘤坏死因子α和转化生长因子β1的含量明显降低.结论 银杏叶提取物可以有效预防大鼠急性肝损害,其机制是抑制了氧化应激反应和调节了细胞因子网络.上述检测指标和研究方法 适合在临床推广.     

血管紧张素Ⅱ-血管紧张素Ⅱ1型受体途径在介导大鼠肺部炎症反应中的作用

目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）-血管紧张素Ⅱ1型受体（ATR1）途径在介导大鼠肺部炎症反应和急性肺损伤中的作用。方法清洁级sD大鼠24只,随机分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ＋氯沙坦组和氯沙坦组。光镜观察肺组织病理改变并测定肺湿／干重比（W／D）。凝胶迁移率改变电泳（EMSA）测定肺组织核因子-κB（NF-κB）活性,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肿瘤坏死因子-α（TNF—α）mRNA表达水平,酶联免疫吸附法（EusA）测定血浆血管性血友病因子（vwT）的含量,比色法测定髓过氧化物酶（MPO）和丙二醛（MDA）含量。结果AngⅡ可致肺泡间隔增宽、出血及大量炎性细胞浸润等急性肺损伤病理改变,氯沙坦可缓解由AngⅡ所致的肺组织病理损伤。AngⅡ组肺W／D、NF-KB活性、TNF—α mRNA表达、MPO、MDA及vWF含量均明显高于其余3组（P〈0．05）,对照组与AngⅡ＋氯沙坦组和氯沙坦组的肺W／D、NF—κB活性、TNF-α mRNA表达、MPO、MDA及vWF含量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论AngII可激活肺部炎症反应并导致急性肺损伤,AngⅡ在肺部的促炎作用主要是通过其1型受体介导的。