氯霉素单克隆抗体制备以及化学发光检测试剂盒的研制

通过用钯炭催化氯霉素,通入氢气,制备出氯霉素半抗原,通过动物免疫、细胞融合,获得杂交瘤细胞株,再由杂交瘤细胞株分泌得到抗氯霉素单克隆抗体,从而制备出能够检测鱼肉和虾肉样本中氯霉素药物的化学发光试剂盒。试剂盒对鱼肉的检测限为0.047μg/kg,对虾肉的检测限为0.045μg/kg,对鱼肉的回收率为83.5%～109.3%,批内、批间相对标准偏差(RSD)范围均10%。氯霉素单克隆抗体与棕榈氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素、氟苯尼考胺的交叉反应率均1%。试剂盒能够在4℃保存1年。     

氯霉素ELISA可视化微阵列芯片检测试剂盒评价研究

为了了解氯霉素ELISA可视化微阵列芯片检测试剂盒的有效性和可靠性,从灵敏度、特异性、准确度、可重复性、检出限、耐变性、批间变异等方面进行了评价,结果表明该试剂盒在测试范围内线性回归良好,相关系数R2可达0.9943,与结构相似的甲砜霉素、氟甲砜霉素的交叉反应率均小于1%,批间变异系数小于20%,牛奶中的平均回收率为108.5%,检出限为0.067μg/L,该试剂盒有较好的准确性、特异性与重复性,耐变性与批间变异均在可接受范围内,可用于牛奶样品中氯霉素的残留检测。     

动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定

本文采用QuE-UPLC/MS/MS法测定猪肉、草鱼、牛奶、蜂蜜等动物源性食品中氯霉素、甲砜霉素的残留量。该方法使用乙腈作为提取溶剂,样品经搅匀、涡旋、振荡、离心、净化处理后上机分析。本方法的优点体现在样品前处理方法简易、省时,能够同时检测氯霉素和甲砜霉素两种目标组分,在节省了检测时间的同时降低了基质效应;氯霉素和甲砜霉素的回收率均可达到85%以上,确保了实验结果的准确性和重现性;氯霉素和甲砜霉素的检出限均为0.1μg/kg,优于《可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定液相色谱-串联质谱法》(GB/T 20756-2006)的检测方法。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定猪肉中氯霉素类兽药残留量

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法同时测定猪肉中氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考3种氯霉素类兽药残留量的分析方法。方法 样品用氨化乙酸乙酯超声提取, 提取液蒸干后用水复溶, 采用电喷雾离子化, 负离子扫描和多反映监测模式(multi reaction monitor, MRM)检测, 以保留时间和特征离子对定性, 外标法定量。结果 氯霉素和氟苯尼考在0.05~1.50 ng/mL, 甲砜霉素在0.25~7.50 ng/mL的范围内呈现良好的线性关系, 相关系数(r)均大于0.99; 方法检出限为0.1~0.5 μg/kg; 3种氯霉素类药物添加水平为0.1~5.0 μg/kg时, 平均回收率为90.8%~108.2%, 相对标准偏差为2.4%~9.8% (n=6)。结论 本方法样品前处理简单, 准确性、精密度和灵敏度均较好, 适用于猪肉中氯霉素类药物残留检测。     

气相色谱-串联质谱法同时测定肉制品中氯霉素、甲砜霉素残留

建立了肉制品中氯霉素、甲砜霉素的气相色谱串联质谱检测方法。样品经均质后,用乙酸乙酯提取,正己烷脱脂,弗罗里硅土小柱净化,衍生后用气相色谱串联质谱法检测,内标法定量。优化了二级质谱条件,包括离子对及碰撞电压。该方法检出限为氯霉素(CAP)0.02μg/kg,甲砜霉素(TAP)0.1μg/kg,加标回收率均在86%~97%之间,相对标准偏差(RSD)在3.8%~12.3%之间,在0.1~20 ng/mL范围内都呈现出良好线性关系。     

高效液相色谱-串联质谱法测定动物肌肉组织中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量

采用液相色谱- 串联质谱(LC-MS/MS)法测定动物肌肉组织中氯霉素,甲砜霉素和氟苯尼考三种药物的残留量。添加氘代氯霉素(d5- 氯霉素)作为内标,碱化乙酸乙酯提取,正己烷去除脂肪,省去固相萃取步骤直接上机定量。选择电喷雾离子源(ESI),负离子扫描多反应监测(MRM)模式,并优化了质谱参数,使仪器的灵敏度达到最高。氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的检出限均达到0.01 μ g/kg。空白样品中添加氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考水平为0.02～1 μ g/kg 时,三种药品的线性相关系数均大于0.9990。氯霉素平均回收率为92.8%～97.0%,甲砜霉素平均回收率为93.5%～96.6%,氟苯尼考平均回收率为91.2%～95.9%。     

液质联用检测水产品中氯霉素、氟苯尼考和甲砜氯霉素的残留量

建立了采用液相色谱-质谱同位素稀释法同时测定水产品中氯霉素、氟苯尼考、甲砜氯霉素三种残留药物的方法.样品采用碱化乙酸乙酯提取,同位素内标法定量.氯霉素、氟苯尼考、甲砜氯霉素三种药物的定量限(LOQ)分别为0.05 ng/mL、0.5 ng/mL、0.7 ng/mL;药物质量浓度分别在0.05～1.2 ng/g、0.5～20.0 ng/g和0.7～28.0 ng/g内,与相应的峰面积比值呈良好的线性关系,并且在鱼肉中氯霉素、氟苯尼考、甲砜氯霉素回收率分别为92.2%～125.5%、78.6%～102.7%和79.4%～121.0%,在虾肉中分别为98.5%～128.4%、73.5%～109.6%和87.7%～122.8%.该法具有简单、快速、简化样品前处理步骤等优点.     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中4种酰胺醇类抗生素残留

目的 建立了一种超高效液相色谱-串联质谱同时测定水产品中酰胺醇类抗生素氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考及代谢物氟苯尼考胺的方法。方法 水产品样品经乙腈提取,正己烷除脂后,在Capcell Pak ADME (100×2.1 mm, 2.7 μm, 1.7 ?m)色谱柱上分离,于多反应监测模式,以氯霉素-D5和氟苯尼考胺-D3为内标进行定量测定。结果 氯霉素在0.5～25 ng/mL范围内线性关系良好（r>0.999）,甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺在5～250 ng/mL范围内线性关系良好（r>0.998）。方法检测限为0.1~1.0 μg/kg,定量限为0.2~2.0 μg/kg。当氯霉素添加水平为0.2、1和10 μg/kg时,回收率为82.5%～104%,相对标准偏差在2.2%~11.8%之间;当甲砜霉素、氟苯尼考和氟苯尼考胺添加水平为2、10和100 μg/kg时,回收率为80.9%～102%,相对标准偏差在0.8%~8.4%之间。结论 该方法快速简单,准确,成本低,适用于水产品中酰胺醇类抗生素及代谢物残留的检测。     

应用酶联免疫法检测鱼肉、蜂蜜中氯霉素的残留量

检测鱼、蜂蜜中氯霉素残留,以评价试剂盒性能为目的。用间接竞争酶联免疫分析法(ELISA法)对鱼肉、蜂蜜中的氯霉素残留量进行了测定。结果表明,标准曲线的R2为0.9943,线性方程y=-0.3668x+0.4353,IC50为0.71μg/L,线性范围为0.05～4.05 ng/mL。鱼肉和蜂蜜中的检测限分别为0.126μg/kg和0.081μg/kg。鱼肉和蜂蜜的添加回收率分别大于88.1%和85.5%,批内变异系数分别小于15.8%、13.6%,批间变异系数小于15.5%、12.3%。与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应率为152.63%,与其他药物的交叉反应率均小于0.01%。该法测定氯霉素灵敏准确,重复性好,特异性高,适合用于检测鱼肉、蜂蜜中的氯霉素残留。     

Captiva EMR-Lipid固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱法同时测定猪肉中氯霉素类药物残留量

目的 建立Captiva EMR-Lipid固相萃取结合高效液相色谱-串联质谱法同时测定猪肉中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的分析方法。方法 采用乙腈提取样品, 经Captiva EMR-Lipid固相萃取柱净化, 以甲醇-水为流动相, CNW Athena C18-WP色谱柱(100 mm×2.1 mm, 3 μm)进行分离, 采用电喷雾负离子扫描和多反应监测模式, 内标法定量。结果 氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考在0.5~20.0 ng/mL范围内呈现良好的线性关系(r＞0.9975), 方法的检出限为0.10~0.14 ?g/kg, 定量限为0.25~0.47 ?g/kg, 平均回收率为97.50%~117.00%, 相对标准偏差为5.55%~8.93%。结论 该方法简单快速、稳定可靠, 适用于猪肉中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考的同时测定。