microRNA与癌症发生相关性研究的现状

microRNAs简称miRNAs，是一类长约22核苷酸（nt）的非编码的单链RNA分子，由约70nt的前体miRNA（pre-miRNA）经Dicer酶剪切而来。miRNA参与生命过程中一系列的重要进程，包括发育、造血、器官形成、凋亡和细胞增殖，甚至是癌症发生。目前人类基因组中已确认的miRNA约500个，其中至少有200多种miR—NA序列与癌症发生有关。如miRNAs主要通过3种机制参与癌症发生：1）靶分子识别。以碱基互补的形式识别并结合靶分子，使其表达上升或下降，促进癌症的形成。miR-15a和miR-16—1特异性识别Bcl-2，直接与Bcl-2的3′UTR结合，使Bcl-2表达增加，抑制细胞凋亡或程序性细胞死亡通路，导致慢性淋巴性白血病等肿瘤发生。乳突状甲状腺癌患者组织中，与miR-221、miR-222结合的Kit的3′UTR端结合区域关键部位出现单核苷酸多态性（3169G→A），与miR-146a和miR-146b结合的外显子结合区域的关键部位出现单核苷酸多态性（2607G→C），从而导致Kit转录下降和Kit蛋白水平低下，促进乳突状甲状腺癌的形成。2）miRNAs突变或含有miRNAs染色体片断缺失。含有miR15、miR-16基因片断缺失或者miR-15a和miR-16—1发生突变，与人慢性淋巴性白血病进展和预后有关，miR-17—92基因簇刺激肺癌细胞生长。3）癌基因或抑癌基因。肺癌组织中let-7 miRNA调控RAS癌基因的表达，成胶质细胞瘤中miR-21以微癌基因形式发挥作用，乳腺癌中miR-10b、miR-125b、miR-145和miR-21及miR-155分别以抑癌基因和癌基因的形式发挥作用。     

microRNA与癌症发生相关性研究的现状

microRNAs简称miRNAs,是一类长约22核苷酸(nt)的非编码的单链RNA分子,由约70 nt的前体miRNA(pre-miRNA)经Dicer酶剪切而来.miRNA参与生命过程中一系列的重要进程,包括发育、造血、器官形成、凋亡和细胞增殖,甚至是癌症发生.目前人类基因组中已确认的miRNA约500个,其中至少有200多种miRNA序列与癌症发生有关.如miRNAs主要通过3种机制参与癌症发生:1)靶分子识别.以碱基互补的形式识别并结合靶分子,使其表达上升或下降,促进癌症的形成.miR-15a和miR-16-1特异性识别Bcl-2,直接与Bcl-2的3'UTR结合,使Bcl-2表达增加,抑制细胞凋亡或程序性细胞死亡通路,导致慢性淋巴性白血病等肿瘤发生.乳突状甲状腺癌患者组织中,与miR-221、miR-222结合的Kit的3'UTR端结合区域关键部位出现单核苷酸多态性(3169G→A),与miR-146a和miR-146b结合的外显子结合区域的关键部位出现单核苷酸多态性(2607G→C),从而导致Kit转录下降和Kit蛋白水平低下,促进乳突状甲状腺癌的形成.2)miRNAs突变或含有miRNAs染色体片断缺失.含有miR-15、miR-16基因片断缺失或者miR-15a和miR-16-1发生突变,与人慢性淋巴性白血病进展和预后有关,miR-17-92基因簇刺激肺癌细胞生长.3)癌基因或抑癌基因.肺癌组织中let-7 miRNA调控RAS癌基因的表达,成胶质细胞瘤中miR-21以微癌基因形式发挥作用,乳腺癌中miR-10b、miR-125b、miR-145和miR-21及miR-155分别以抑癌基因和癌基因的形式发挥作用.     

大肠癌相关miRNA研究进展

大肠癌是消化系统的常见恶性肿瘤,其发病率近年来在我国不断上升。大量研究证实,miRNA作为一类保守非编码RNA,可能与大肠癌的发生、侵袭以及转移等关系密切。大肠癌中miRNA表达谱差异较大,目前研究比较多的 miRNAs如miRNA-145、miRNA-489、miRNA-34a等均有抑制肿瘤细胞生长增殖的作用,它们在癌细胞中表达下降,通过不同的信号途径实现对靶基因表达的调控参与大肠癌的发生。提示对于大肠癌相关 miRNA作用机制的研究将可能为大肠癌诊断治疗提供新策略和思路。     

Function of miR-27a in malignantly transformed human bronchial epithelial cells induced by SV40 small T antigen

目的:检测猿猴病毒40 (simian virus 40,SV40)小T抗原(small T antigen,ST)诱导人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cell,HBE)恶性转化中miRNAs的表达谱,寻找与细胞转化相关的miRNAs.方法:选择HBE、HBER和HBERST细胞株,提取总RNA,利用miRNA芯片和实时荧光定量PCR技术检测和验证永生化HBE、HBER和HBERST细胞中差异表达的miRNAs.通过细胞生长曲线检测、细胞周期分析、细胞克隆形成试验等确证与SV40 ST诱导HBE细胞恶性转化相关的miRNAs.结果:在HBE、HBER和HBERST细胞856个miRNA的表达谱中筛选出6个与SV40 ST诱导细胞转化相关的miRNA,2个表达上调(miR-20a和miR-27a),4个表达下调(let-7d,let-7f,miR-1246和miR-3746).抑制miR-27a能减缓HBERST细胞的增殖速度(P＜0.01),延长细胞在G0～G1期的停留时间(P＜0.01)和降低HBERST细胞在软琼脂上形成克隆的数目(P＜0.01).结论:miR-27a的异常表达参与了SV40ST秀导的HBE细胞恶性转化.     

miR-27a在猿猴病毒小T抗原诱导支气管上皮细胞恶性转化中的作用

目的:检测猿猴病毒40(simian virus 40,SV40)小T抗原(small T antigen,ST)诱导人支气管上皮细胞(human bronchialepithelial cell,HBE)恶性转化中miRNAs的表达谱,寻找与细胞转化相关的miRNAs。方法:选择HBE、HBER和HBERST细胞株,提取总RNA,利用miRNA芯片和实时荧光定量PCR技术检测和验证永生化HBE、HBER和HBERST细胞中差异表达的miRNAs。通过细胞生长曲线检测、细胞周期分析、细胞克隆形成试验等确证与SV40 ST诱导HBE细胞恶性转化相关的miRNAs。结果:在HBE、HBER和HBERST细胞856个miRNA的表达谱中筛选出6个与SV40 ST诱导细胞转化相关的miRNA,2个表达上调(miR-20a和miR-27a).4个表达下调(let-7d,let-7f,miR-1246和miR-3746)。抑制miR-27a能减缓HBERST细胞的增殖速度(P0.01),延长细胞在G0～G1期的停留时间(P0.01)和降低HBERST细胞在软琼脂上形成克隆的数目(P0.01)。结论:miR-27a的异常表达参与了SV40ST诱导的HBE细胞恶性转化。     

人肝细胞肝癌和癌旁正常组织microRNA表达差异的分析

目的比较肝细胞肝癌和癌旁正常组织microRNA的表达差异,为研究肝癌的发病机理提供理论依据。方法用microRNA 微阵列芯片技术研究肝细胞肝癌细胞474种miRNAs表达谱,对比癌旁正常组织筛选差异表达miRNAs。结果获得213个差异表达（P<0.01）的miRNAs分子数据,与配对癌旁正常组织相比,其中上调表达的有116个,如miR-181,miR-21,let-7e等;下调表达的有97个,如miR-199,miR-451,miR-122等。结论miRNA可能成为肝癌的诊断工具,并对研究肝癌的致病机理提供新的理论依据。     

卵巢上皮恶性肿瘤侵袭转移相关miRNA的筛选与鉴定

目的 探索与卵巢上皮恶性肿瘤侵袭转移可能相关的miRNA.方法 采用miRNA芯片,筛选SKOV-3ip和SKOV-3细胞差异表达miRNA.利用生物信息学软件TargetScan、MicroCosm、PicTar和GO,预测差异表达miRNA的靶基因及其功能.采用实时逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)技术,验证与卵巢癌侵袭转移可能相关的5种miRNA(let-7a、let-7e、let-7f、miR-22和miR-886-5p)在SKOV-3ip和SKOV-3细胞的表达.同时,检测这5种miRNA在另外一组侵袭转移能力不同的卵巢癌细胞株HO8910和HO-8910PM中的表达,并进行统计学分析.结果 基因芯片筛选显示,42种miRNA在SKOV-3ip和SKOV-3细胞株表达差异明显.进一步分析显示,let-7a、let-7e、let-7f、miR-22和miR-886-5p等5种miRNA可能与卵巢癌的侵袭转移密切相关.real-time RT-PCR结果证实,let-7f和miR-22在两组侵袭转移能力不同的卵巢癌细胞(SKOV-3和SKOV-3ip细胞、HO-8910和HO-8910PM细胞)表达差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 let-7f和miR-22在侵袭转移能力强的卵巢癌细胞中低表达,可能具有抑癌基因的作用.     

MicroRNA在六种不同器官肿瘤细胞系中的差异表达

[目的]利用生物芯片技术分析microRNA（miRNA）在六种不同器官肿瘤细胞系中mi-croRNA（miRNA）的表达差异。[方法]将210个（206个miRNA,4个阳性对照）与已知人类和小鼠miRNA互补的序列作为探针,点于玻片上制备寡核苷酸芯片。提取肿瘤细胞（HeLa、MCF-7、A549、HT-29、ES-2、K562）的miRNA,用荧光染料Cy3标记,并与制备好的芯片杂交。用Sca-nArrayTMExpress1.0扫描仪扫描荧光信号,采用ScanArray3.0和Cluster3.0软件分析处理扫描结果。并用Northernblot和RT-PCR方法对芯片检测结果进行验证。[结果]芯片检测到在六种不同器官肿瘤细胞系中,发现115种miRNA存在差异,91种miRNA没有明显差异。其中,miR-21在六种肿瘤细胞表达水平均较高,miR-125b表达水平均较低,let-7在六种细胞系中表达水平较低。miR-17-5p和miR-20a呈集簇表达,在卵巢肿瘤ES-2细胞系中的表达水平高于其它细胞,乳腺肿瘤细胞系MCF-7和宫颈癌细胞系HeLa的miRNA的表达谱聚为一类。[结论]应用生物芯片技术检测细胞中miRNA的表达差异谱是可行的,miRNA可能参与肿瘤的发生发展。     

Wnt/β-catenin信号通路激活诱导食管癌Eca-109细胞miRNA表达谱的研究

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路对食管鳞癌Eca-109细胞系miRNA表达的影响,为靶向该通路相关miRNA治疗提供实验依据。方法:食管癌Eca-109细胞分别以培养基终浓度10ng/ml、20ng/mlWNT3a处理48小时,细胞免疫荧光、Western-blot、RT-PCR检测β-catenin表达水平;芯片检测WNT3a处理组和对照组miRNA表达谱;qRT-PCR验证miRNAs表达水平。结果:WNT3a可上调食管癌细胞β-cate-nin mRNA和蛋白水平,增加其细胞核内分布;芯片检测经qRT-PCR验证,WNT3a处理后食管癌Eca-109细胞相对于未处理组miR表达改变,其中miR-21(3.87倍,P=0.002)、miR-638(2.90倍,P=0.016)显著升高;miR-107(0.18倍,P=0.003)、miR-99b(0.33倍,P=0.019)明显降低,差异均具有统计学意义。结论:Wnt/β-catenin信号通路激活影响食管癌Eca-109细胞miRNAs表达,提示Wnt/β-catenin信号通路的功能也可能通过调控相关miRNA表达参与实现。     

胃癌转移相关miRNA的差异表达谱及miR-218的生物学分析

目的 探讨胃癌转移相关微小RNA（miRNA）的差异表达情况并进行miR-218的生物学分析。方法 采用实时荧光定量PCR（qPCR）及miRNA芯片法检测低转移潜能的胃癌细胞亚系（SGC7901-NM、MKN28-NM）与高转移潜能的胃癌细胞亚系（SGC7901-M、MKN28-M）间miRNA的差异表达。提取不同转移潜能胃癌细胞系和10例胃癌冰冻组织及相应的转移淋巴结中的总RNA,利用qPCR检测miR-218在不同细胞及组织中的表达情况。结果 对不同转移潜能的胃癌细胞亚系进行芯片检测发现,与SGC7901-NM细胞比较,SGC7901-M 细胞有47个分子表达下调,15个分子表达上调。与MKN28-NM细胞比较,MKN28-M细胞有41个分子表达下调,83个分子表达上调。在SGC7901-M及MKN28-M细胞中,34个分子表达均出现下降,11个分子表达均出现上升。对不同转移潜能的胃癌细胞亚系以及人永生化正常胃黏膜细胞系GES进行检测可以发现,4种不同转移潜能的胃癌细胞亚系中miR-218的表达均低于正常胃黏膜细胞系GES,差异有统计学意义（P＜0.05）,且在高转移潜能胃癌细胞亚系中miR-218的表达均低于低转移潜能胃癌细胞系,差异有统计学意义（P＜0.05）。胃癌转移淋巴结中miR-218的表达水平为0.23±0.02,低于胃癌原发灶的1.09±0.05,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 胃癌转移相关miRNA会出现差异表达情况,高转移潜能胃癌细胞中的miR-218表达水平上调可能与胃癌转移存在一定关系。     

Metastasis-related miRNAs,active players in breast cancer invasion,and metastasis

Breast cancer is the most common malignancy with the highest incidence among women in the world. Metastasis is the major reason for breast cancer-related deaths. The precise molecular circuitry that governs the metastasis process has not been completely understood. Discoveries of microRNAs (miRNAs) open a new avenue for cancer metastasis research. It has become clear that alterations of miRNA expression contribute to cancer pathogenesis. miRNAs control a wide array of physiological and pathological processes, including development, differentiation, cellular proliferation, programmed cell death, oncogenesis, and metastasis by modulating the expression of their cognate target genes through cleaving mRNA molecules or inhibiting their translation. Some miRNAs are associated with the invasive and metastatic phenotype of breast cancer cell lines or identified in metastatic tumor tissues and lymph nodes. Some miRNAs serve as metastasis suppressors and their expression is frequently downregulated or lost in both breast cancer cell lines and metastatic foci. Some miRNAs are considered to play key roles in the phenotype formation of breast cancer stem cells. This review will focus on recent discoveries related to the miRNAs involved in the metastasis of breast cancer and discuss the implications for the diagnosis, prognosis, and therapeutic strategies of breast cancer.     

肺癌相关miRNAs研究进展

肺癌的发生发展为复杂的多基因事件,microRNAs（miRNAs）参与其中并发挥重要作用。miR-NAs为一系列长约19-25nt的内源性非编码微小RNA,可抑制靶基因转录或蛋白翻译从而沉默靶基因的表达。部分miRNAs在肺癌组织中表达上调,并证明可负性调节抑癌基因。亦有部分miRNAs在肺癌组织中表达下调,被认为是抑癌基因且其中一部分也已得到证实,在临床潜在应用方面,目前研究证实miR-101可发挥放疗增敏效应,而miR-134、miR-379与miR-495或有助于指导肺癌化疗用药的选择。通过回顾最新文献,本文对肺癌高度相关的miRNAs及其靶基因进行了总结,并在生物学效应、潜在靶基因、基因诊断、治疗、预测预后等方面进行探讨。     

循环miRNAs在肺癌诊断和治疗中的研究进展

肺癌是全世界男性和女性癌症死亡的第一原因。尽管近些年对癌症信号通路的了解和在新的治疗方法开发上有了新进展,但是肺癌的不良预后和高复发率依然存在。循环miRNAs在许多实体瘤（如肺癌）中,可作为稳定表达的非侵入性诊断标志物。一些miRNAs异常可能与肿瘤细胞常规化疗的耐药性有关,影响着肿瘤细胞的药物敏感性。这些miRNAs的调控,通过使用miRNAs类似物,可以调节关键基因网络和信号通路,通过抑制肿瘤细胞增殖来提高抗癌治疗的疗效,增加药物敏感性。因此,miRNAs疗法提供了新的抗肿瘤方法:更有效的个性化治疗、提高药物疗效、预测不同抗癌药物的反应。本综述的目的是为肺癌循环miRNA提供一个作为潜在诊断生物标志物、大规模临床筛选诊断的可行性评估以及miRNAS抗癌耐药机制对肺癌的治疗的概述。最后,miRNA分析的局限性和潜在性需要今后进一步探索。     

MicroRNAs在肿瘤相关成纤维细胞促进肿瘤发展进程中的作用

肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）是肿瘤微环境（TME）中最主要的细胞组分之一,在肿瘤发生、进展中发挥重要作用。微小RNA（miRNAs）参与CAFs的转化与代谢重编程,并可调控CAFs 的干性及其介导的肿瘤细胞增殖、侵袭和化疗耐药等机制,在CAFs 的形成和CAFs 对肿瘤的促进作用中发挥重要功能;而CAFs 释放的miRNAs 可作为肿瘤的诊断、预后及用药选择的参考指标。因此探索miRNAs 在肿瘤细胞与CAFs 相互作用中的功能,揭示其作用机制,对于理解肿瘤的发生和发展具有重要意义;同时也可为新的肿瘤治疗策略提供研究方向。本文将对miRNAs在CAFs的形成及CAFs对肿瘤细胞调控中的作用加以介绍     

Extracellular Vesicles As miRNA Nano-Shuttles: Dual Role in Tumor Progression

Tumor-derived extracellular vesicles (EVs) have a pleiotropic role in cancer, interacting with target cells of the tumor microenvironment, such as fibroblasts, immune and endothelial cells. EVs can modulate tumor progression, angiogenic switch, metastasis, and immune escape. These vesicles are nano-shuttles containing a wide spectrum of miRNAs that contribute to tumor progression. MiRNAs contained in extracellular vesicles (EV-miRNAs) are disseminated in the extracellular space and are able to influence the expression of target genes with either tumor suppressor or oncogenic functions, depending on both parental and target cells. Metastatic cancer cells can balance their oncogenic potential by expressing miRNAs with oncogenic function, whilst exporting miRNAs with tumor suppressor roles out of the cells. Importantly, treatment of cancer cells with specific natural and chemical compounds could induce the elimination of miRNAs with oncogenic function, thereby reducing their aggressiveness. In this review, we discuss the mechanisms by which EV-miRNAs, acting as miRNAs with oncogenic or tumor suppressor functions, could contribute to cancer progression.     

MicroRNAs in endometrial cancer

MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding ribonucleic acids (RNAs) of approximately 22 bp that induce RNA interference with a complementary messenger RNA (mRNA) and act in silencing of mRNA. miRNAs are strongly associated with cancer development and those involved in carcinogenesis are classified into oncogenic miRNAs and tumor suppressor miRNAs (tumor suppressor miRs). Specific miRNAs are expressed in various tissues and changes in regulation of gene expression are thought to cause carcinogenesis. Thus, tissue-specific miRNAs may be biomarkers for cancer diagnosis and prognosis. Approaches to application of miRNAs as cancer therapy are also ongoing, based on the involvement of miRNAs in carcinogenesis. In endometrial cancer, miRNAs are associated with regulation of gene expression, epigenetic dysfunction and carcinogenesis. Thus, miRNAs are likely to have key roles in diagnosis, prognostic prediction, and therapy in endometrial cancer.     

血清中微小RNA作为肿瘤标记物的研究进展

血清中的微小RNA(miRNA)相对容易逃脱核糖核酸酶的消化.并且不易受酸碱度、温度及放置时间长短的影响,具有非常好的稳定性.肿瘤患者血清中发现了许多miRNA,一些已经被证实与肿瘤发生发展相关的miRNA在血清中高表达,并且对某些肿瘤具有高度敏感性及特异性,因此血清中的miRNA有望作为肿瘤标记物进行测定.     

微小RNA与乳腺癌

微小RNA（miRNA）是一类小分子的非编码RNA,已发现这类RNA在乳腺癌中可扮演癌基因和抑癌基因的角色,在肿瘤侵袭转移级联反应各阶段也起到促进或者抑制作用,与肿瘤的上皮-间质转化及肿瘤干细胞的生成也高度相关.最新研究表明,miRNA可作为肿瘤诊断预后的一项重要指标,为靶向miRNA生物治疗方式作用于乳腺癌临床诊断治疗提供了理论依据.