ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达及临床意义

目的探讨ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达特点与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测17例胆管癌及其癌旁正常胆管组织中ECHS1和PKM2蛋白的表达情况,并分析两种蛋白表达与胆管癌临床病理特征及预后的关系。结果ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌组织中的阳性率分别为58.8%和64.7%,高于癌旁组织中的阳性率17.9%和21.4%,差异有统计学意义(P0.05);ECHS1和PKM2蛋白与胆管癌患者性别、年龄及肿瘤直径无相关性,而与胆管癌分化程度、TNM分期及生存时间有相关性。结论 ECHS1和PKM2蛋白表达水平与胆管癌发生、发展及转移关系密切。     

miR-504在原发性肝细胞癌中的表达及其临床意义

背景:microRNA表达失调与肿瘤的形成相关。miR-504在多种肿瘤中表达,但在肝癌中的表达目前尚未见相关报道。目的:探讨miR-504在原发性肝细胞癌(HCC)和肝癌细胞株中的表达及其与预后的关系。方法:收集85例HCC患者手术标本,常规培养5株肝癌细胞株和永生化肝细胞株。以CCK8法检测miR-504表达对HepG 2细胞增殖的影响,实时荧光定量PCR法检测miR-504表达,分析miR-504表达与HCC患者临床病理特征和预后的关系。结果:与正常肝细胞相比,5种肝癌细胞中miR-504表达显著降低(P0.05)。上调miR-504表达明显抑制HepG 2细胞增殖,而下调miR-504表达则促进细胞增殖。HCC患者miR-504表达显著低于相应癌旁组织,且与肿瘤分化程度(P=0.002)、TNM分期(P=0.021)、甲胎蛋白(P=0.012)和门静脉癌栓(P=0.003)密切相关,但与患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数量无关。miR-504低表达者的生存时间较高表达者明显缩短(P0.05)。结论:miR-504在HCC中表达下调,其表达与患者的临床预后相关,提示miR-504可作为判断HCC患者预后的独立预测因子。     

CYP27A1基因表达与肝癌患者临床表型相关性及其预后作用瞿兵

背景：肝癌是引起肿瘤相关死亡的三大肿瘤之一,其目前临床预后极差。基因表达水平探讨其独立预后因素,将有助于开发新的治疗肝癌靶向药物。方法：本研究通过在GEO数据下载肝癌基因表达数据GSE14520,分析CYP27A1与肝癌患者年龄、性别、 PRMS分类、血清ALT水平、肿瘤大小、结节数目、肝硬化、TNM分期、BCLC分期、CLIP分期以及血清AFP水平等临床表型的相关性,以及CYP27A1与肝癌患者临床预后指标(无进展生存期、总生存期)的关系,明确CYP27A1在对肝癌细胞的作用机制。结果：相较于正常肝脏组织,CYP27A1在肝癌中表达明显下调;CYP27A1高表达组和CYP27A1低表达组患者在年龄和性别分布上无明显差异。两组肝癌患者血清ALT水平及肝硬化情况无明显差异,CYP27A1高表达组患者中PRMS分类、肿瘤大小、肿瘤类型、TNM分期、BCLC分期、CLIP分期、血清AFP水平等临床表型均明显优于CYP27A1低表达组肝癌患者(相应的P值分别为P<0.0001、P=0.003、P=0.071、P=0.01,P=0.007,P=0.004及0.009),CYP27A1高表达组肝癌患者的无进展生存期和总生存期明显优于CYP27A1低表达肝癌患者。CYP27A1可能有丝分裂纺锤体、精子发生、G2M检查点、DNA修复、E2F基因相关分子、MYC基因相关分子、PI3K_AKT_mTOR信号通路以及去折叠蛋白反应等生物学过程影响肝癌细胞增殖。结论：CYP27A1或可作为肝癌患者独立预后因素,高表达CYP27A1的肝癌患者的临床预后明显优越与CYP27A1低表达肝癌患者,基于CYP27A1影响肝癌的具体作用机制有待进一步被证实。     

转录因子Foxp3在肝癌细胞中的表达及意义

目的研究转录因子Foxp3在肝癌细胞中的表达及其对肿瘤免疫微环境的作用。方法用常规RT-PCR和基因表达谱芯片检测Foxp3在10种肝癌细胞系中的表达,进一步用Western blot、免疫组化和流式细胞术验证其蛋白水平的表达;将表达Foxp3的肿瘤细胞及用Foxp3 shRNA沉默后的肿瘤细胞分别与CD4＋CD2-5T细胞共培养,CFSE评价免疫效应细胞增殖情况。结果 Foxp3在所有的肝癌细胞系中均出现表达;肝癌细胞与CD4＋T细胞进行共培养,可显著抑制共培养体系中CD＋4T细胞增殖及其表面标记的表达;肝癌细胞Foxp3表达沉默后,可显著逆转共培养体系中肝癌细胞对CD4＋T细胞增殖的表达抑制。结论在肝细胞癌（HCC）细胞系及部分HCC患者组织中均发现Foxp3的表达,肝癌细胞Foxp3的表达参与对肿瘤微环境中效应性T细胞增殖的抑制。     

siRNA沉默PKM2对胃癌BGC-823细胞增殖和迁移的抑制作用

在恶性肿瘤组织中,丙酮酸激酶（PK）的组织特异性同工酶（L型、R型、M1型PK）表达减少,而PKM2表达升高,在肿瘤细胞生长、增殖、迁移等方面发挥重要作用。目的：探讨siRNA沉默PKM2对胃癌BGC-823细胞增殖和迁移的抑制作用。方法：以蛋白质印迹法筛选出高表达PKM2的胃癌细胞株BGC-823。构建PKM2siRNA干扰质粒,稳定转染胃癌BGC-823细胞,同时以转染空质粒pU6作为阴性对照组。以荧光定量PCR和蛋白质印迹法在mRNA和蛋白质水平上验证干扰效果,以CCK8法和细胞迁移实验检测细胞增殖和迁移能力。结果：与阴性对照组相比,PKM2siRNA转染组PKM2mRNA和蛋白表达明显下降,细胞增殖能力和迁移能力明显下降（P〈0．05）。结论：PKM2在人胃癌的发展中发挥重要作用,并对胃癌BGC-823细胞增殖和迁移有一定的促进作用。     

siRNA沉默PKM2抑制人胃腺癌SGC-7901细胞增殖能力和糖酵解水平

背景:M2型丙酮酸激酶(PKM2)在肿瘤组织中呈特异性高表达,与肿瘤的生长和糖酵解水平密切相关,是潜在的治疗靶点。目的:探讨siRNA沉默PKM2对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭以及糖酵解水平的影响。方法:选择未转染SGC-7901细胞、转染空质粒pU6 SGC-7901细胞以及转染PKM2 siRNA的SGC-7901细胞,采用蛋白质印迹法和Real-time PCR检测PKM2 mRNA和蛋白表达;免疫荧光法检测PKM2在细胞内的表达和分布;CCK-8法、流式细胞分析、细胞迁移和细胞侵袭实验检测细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭能力;蛋白质印迹法、分光光度法分别检测葡萄糖转运蛋白-1(Glut-1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)蛋白表达以及葡萄糖、乳酸浓度、乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:与其余两组相比,PKM2 siRNA转染组细胞PKM2 mRNA和蛋白表达明显下降(P0.05),胞内表达明显减弱,细胞增殖、迁移和侵袭能力明显下降,细胞凋亡明显增加(P0.05),Glut-1、LDHA蛋白表达明显下降(P0.05),葡萄糖摄取率、乳酸产量、LDH活性明显减低(P0.05)。结论:RNA干扰能抑制胃癌SGC-7901细胞PKM2mRNA和蛋白表达,进而抑制胃癌细胞的增殖能力和糖酵解水平。     

mTOR/PKM2和STAT3/c-Myc信号通路串话调节胃癌能量代谢和酸性微环境的机制研究

背景:c-Myc和PKM2在多种肿瘤中高表达,但m TOR/PKM2和STAT3/c-Myc信号通路对胃癌调节作用的研究不多见。目的:探讨m TOR/PKM2和STAT3/c-Myc信号通路串话调节胃癌能量代谢和酸性微环境的机制。方法:PKM2和c-Myc慢病毒转染人胃癌AGS和HGC-27细胞,构建敲减PKM2、c-Myc的细胞模型。采用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR和蛋白质印迹法分别检测PKM2、c-Myc、LDHA、STAT3、p-STAT3、GLUT-1 mRNA和蛋白表达,比色法检测乳酸和葡萄糖水平。结果:PKM2和c-Myc表达在胃癌细胞中上调。敲减c-Myc可抑制胃癌细胞增殖能力,细胞迁移能力明显降低,LDHA、GLUT-1蛋白表达明显降低,葡萄糖和乳酸含量明显降低。共同敲减PKM2和c-Myc对胃癌细胞增殖能力和糖酵解代谢的抑制作用更明显。m TOR/PKM2与STAT3/c-Myc信号通路之间存在相关性。结论:PKM2联合c-Myc可能成为胃癌新的治疗靶点。     

CYP27A1基因表达与肝癌临床表型和预后的相关性

目的:从基因表达水平探讨肝癌患者的独立预后因素。方法:从GEO数据库中下载肝癌基因表达数据GSE14520,分析CYP27A1与肝癌患者年龄、性别、PRMS分类、血清ALT水平、肿瘤大小、结节数目、肝硬化、TNM分期、BCLC分期、CLIP分期以及血清AFP水平等临床表型的相关性,以及线粒体胆固醇27-羟化酶(CYP27A1)与肝癌患者预后指标(无进展生存期、总生存期)的关系,及CYP27A1对肝癌细胞的作用机制。结果:与正常肝脏组织比较,CYP27A1在肝癌中表达明显下调;CYP27A1高表达组和CYP27A1低表达组患者在年龄和性别分布及血清ALT水平和肝硬化情况无明显差异,CYP27A1高表达组患者中PRMS分类、肿瘤大小、肿瘤类型、TNM分期、BCLC分期、CLIP分期、血清AFP水平等临床表型均明显优于CYP27A1低表达组肝癌患者,CYP27A1高表达组肝癌患者的无进展生存期和总生存期明显优于CYP27A1低表达肝癌患者。CYP27A1可能在细胞分裂、DNA复制及肿瘤增殖相关信号通路影响肝癌细胞增殖。结论:高表达CYP27A1的肝癌患者的临床预后明显优于CYP27A1低表达肝癌患者。     

ST8SIA6-AS1与hnRNPA2B1相互作用通过激活AKT活性并下调P21促进肝癌进展

目的筛选肝癌中具有临床意义的潜在药物靶点并研究此靶点在肝癌发生、发展中的功能和分子机制。方法通过临床数据库GEPIA找到在肝癌中差异表达的lncRNA,进一步筛选到相比于肝正常组织表达差异性明显的lncRNA;通过细胞增殖实验筛选到影响肝癌细胞生长明显的lncRNA;通过GEPIA数据库探讨目的lncRNA在各肿瘤及肝癌中的表达情况及其与肝癌的临床预后相关性;最后通过与目的lncRNA相互作用的蛋白预测其参与的信号通路并进行Western blotting验证,从而说明目的lncRNA在肝癌中发挥功能的潜在分子机制。结果 ST8SIA6-AS1、MIR4435-2HG和HULC在肝癌相比于肝正常组织中显著高表达;通过敲低ST8SIA6-AS1、MIR4435-2HG和HULC的细胞增殖实验结果显示,ST8SIA6-AS1显著促进肝癌细胞的生长,从而确定ST8SIA6-AS1为研究目的lncRNA;ST8SIA6-AS1在肝癌中显著高表达且具有明显的临床预后相关性即高表达预后差的特征;ST8SIA6-AS1与hnRNPA2B1相互作用,敲低ST8SIA6-AS1和hnRNPA2B1表达均可降低cleaved caspase-3和P21的表达从而激活PI3K/AKT信号通路,促进肝癌细胞生长增殖。结论 ST8SIA6-AS1有望作为肝癌的潜在药物治疗靶点。     

PKM2在克罗恩病组织中的表达及意义

目的检测M2型丙酮酸激酶(PKM2)蛋白在克罗恩病(CD)组织中的表达水平,探究其与患者疾病严重程度及预后的关系。方法前瞻性选取2015年3月至2017年8月在上海市浦东新区浦南医院就诊的126例CD患者作为研究对象,设为CD组;另选取同期在该院接受结直肠镜检查并切除肠息肉组织的52例患者作为对照组。采用蛋白质印迹法检测CD组织和息肉组织中PKM2蛋白表达水平,分析PKM2蛋白表达水平与CD患者疾病严重程度和预后的关系。结果与对照组相比较,CD组PKM2蛋白表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.05)。CD组患者PKM2蛋白表达水平与CD简化内镜评分(SES-CD)呈负相关(P<0.05)。预后不良的CD患者PKM2蛋白表达水平低于预后良好者,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,疾病行为、肛周病变和PKM2蛋白表达水平与CD患者的预后关系密切(P<0.05)。结论CD患者PKM2蛋白表达水平越低提示其病情越严重。检测CD组织中PKM2蛋白表达水平有助于评估CD患者疾病严重程度及预后情况。     

Pathogenesis of carcinoma of the papilla of Vater

Most adenomas and carcinomas of the small intestine and extrahepatic bile ducts arise in the region of the papilla of Vater. In familial adenomatous polyposis (FAP) it is the main location for carcinomas after proctocolectomy. In many cases symptoms due to stenosis lead to diagnosis at an early tumor stage. In about 80%, curative intended resection is possible. Operability is the most relevant prognostic factor. Most ampullary carcinomas resp. carcinomas of the papilla of Vater develop from adenomatous or flat dysplastic precursor lesions. They can be sited in the ampulloduodenal part of the papilla of Vater, which is lined by intestinal mucosa. They also can develop in deeper parts of the ampulla, which are lined by pancreaticobiliary duct mucosa. Intestinal-type adenocarcinoma and pancreaticobiliary-type adenocarcinoma represent the main histological types of ampullary carcinoma. Furthermore, there exist unusual types and undifferentiated carcinomas. Many carcinomas of intestinal type express the immunohistochemical marker profile of intestinal mucosa (keratin 7?, keratin 20+, MUC2+). Carcinomas of pancreaticobiliary type usually show the immunohistochemical profile of pancreaticobiliary duct mucosa (keratin 7+, keratin 20?, MUC2?). Even poorly differentiated carcinomas, as well as unusual histological types, may conserve the marker profile of the mucosa they developed from. These findings underline the concept of histogenetically different carcinomas of the papilla of Vater which develop either from intestinal- or from pancreaticobiliary-type mucosa of the papilla of Vater. Molecular alterations in ampullary carcinomas are similar to those of colorectal as well as pancreatic carcinomas, although they appear at different frequencies. In future studies, molecular alterations in ampullary carcinomas should be correlated closely with the different histologic tumor types. Consequently, the histologic classification should reflect the histogenesis of ampullary tumors from the two different types of papillary mucosa.     

Demonstration of the mechanism of action of biguanides

Summary Palmitic acid oxidation in rat diaphragm homogenate is depressed by biguanide concentrations that are still incapable of inhibiting oxidative phosphorylation. Glucose oxidation is not directly effected by the same biguanide concentrations: however, the inhibitory effect of palmitic acid on glucose oxidation is partly removed by biguanides. Inhibition of fatty acid oxidation, which accounts for most of the metabolic effects caused by these drugs, can be regarded as the fundamental mechanism of action of biguanides. There is some evidence suggesting that these drugs might interact with carnitine, thus preventing long-chain fatty acids from being transported across the mitochondrial membrane to the site of oxidation. Traduzione a cura degli AA.     

胰岛素瘤的解剖分布特点分析

目的胰岛素瘤是最常见的胰腺神经内分泌肿瘤，因其临床表现多样，导致诊断困难。影像学诊断尤其是超声内镜(EUS)在胰岛素瘤的诊断中起着重要作用，拥有较高的敏感性和特异性。本研究拟通过明确胰岛素瘤的解剖分布特点，以期有助于提高影像学的诊断准确率和降低漏诊率，尤其是在教育和培训实践中对于EUS的学习者更具有指导价值。 方法回顾性分析解放军总医院第一医学中心病案资料数据库1993年1月至2019年11月经外科手术、病理确诊为胰岛素瘤的患者的临床资料，检索方法采取搜索术后病理诊断为"胰岛素瘤"的病例，通过查阅病例的方法，提取出胰岛素瘤的大小和解剖分布等数据，进一步分析其特点。 结果共检索到确诊为胰岛素瘤的患者116例，其中，男45例、女71例，年龄13～76岁，平均年龄(44.4±14.85)岁。胰岛素瘤单发110例(94.8%)、多发6例(5.2%)。位置分布：头颈部46例(39.7%)，单发45例、多发1例；体尾部68例(58.6%)，单发65例、多发3例；全胰腺多发2例(1.7%)。病变大小特点：最大径0.4～3.4 cm，平均大小(1.53±0.58)cm。≤1 cm 29例、>1 cm而≤1.5 cm41例、>1.5 cm而≤2.0 cm28例，≤3 cm 15例，>3 cm 3例。年龄与肿瘤的大小相关，≤44岁患者肿瘤平均大小为(1.36±0.51)cm、>44岁患者肿瘤平均大小为(1.70±0.60)cm，P<0.05。头颈部的肿瘤大于体尾部的肿瘤，头颈部肿瘤平均大小(1.66±0.63)cm，体尾部(1.42±0.52)cm，P<0.05。 结论胰岛素瘤在胰腺体尾部较头颈部更好发；绝大多数单发，但可以全胰腺多发；多数小于1.5 cm，肿瘤的大小与患者年龄和肿瘤的解剖分布相关。     

氯硝柳胺悬浮剂的毒性评价

目的评价氯硝柳胺悬浮剂的毒性，为现场大规模应用灭螺提供依据。方法按照中华人民共和国国家标准GB 15670-1995《农药登记毒理学试验方法》和鱼类毒性试验方法进行。结果经口、经皮肤的LDso雌、雄性大鼠均>5 000 mg/kg，经呼吸道的LCso雌、雄性大鼠均>5 000mg/m3，该药经口、经皮肤、经呼吸道毒性均属微毒类药物；兔眼用药后，观察期内无不良反应，对眼无刺激性；皮肤用药后对皮肤无刺激性。与氯硝柳胺原药、氯硝柳胺乙醇胺盐原药和氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂相比，氯硝柳胺悬浮剂对鱼急性毒性最低。结论氯硝柳胺悬浮剂属微毒类药物，对鱼的毒性低于其乙醇胺盐可湿性粉剂，适合于现场应用。     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.     

血吸虫童虫生长发育及其机制的研究进展

血吸虫童虫是宿主免疫系统攻击的重要靶标,包括皮肤型、肺型和肝门型童虫。宿主分子对童虫生长发育具有重要作用。童虫生长发育机制包括免疫调节、信号转导、性别发育及凋亡等。肌动蛋白、组织蛋白酶、烯醇化酶和葡萄糖基转移酶等分子为血吸虫童虫生长发育的重要分子。本文对血吸虫童虫生长发育及其机制的研究进展做一综述。     

124例耐多药结核分枝杆菌基因突变特征分析

目的对临床分离的耐多药结核分枝杆菌相关基因的突变特征进行分析。方法对124例耐多药结核分枝杆菌以及50株敏感株的耐药相关基因(包括异烟肼inh A、kat G、oxyR-ahp C间隔区以及利福平rpo B)进行序列测定,分析其基因突变情况。结果异烟肼耐药inh A基因突变率为14.5%;kat G基因突变率为70.2%(87/124),主要位于315位;oxyR-ahp C间隔区突变率为15.3%;inh A、kat G两种基因同时突变率75.0%,三种基因同时突变率为89.5%。利福平rpo B基因突变的检出率高达95.2%,突变主要发生在531、526、516位点。结论我省耐多药菌异烟肼耐药相关基因最常见突变为kat G 315、inh A C-T(-15)、axyR-ahp C间隔区(-10)C-T,利福平为rpo B531、526、516。结合MDR-TB耐药相关基因的特征分析,可以建立一种快速、准确、特异的适合于我省的检测结核菌耐多药性的新方法。     

Assessment of quality of life of parents of children with juvenile chronic arthritis

The aim of the study was to assess the quality of life (QOL) and the psychological status of parents of children with juvenile chronic arthritis (JCA). The QOL, anxiety and depression of the parents of 28 children with JCA were evaluated and compared to those of the parents of 28 healthy children. Mothers of JCA children and mothers of healthy children reported similar QOL. The reported anxiety and depression levels were similar for mothers and fathers in both groups. The parents of children with pauciarticular-type JCA reported lower QOL and higher levels of anxiety and depression than the parents of children with other types, namely polyarticular and systemic JCA. These findings may be explained by the fact that the pauciarticular patients had shorter disease duration and were less frequently seen in the outpatient clinic. The QOL of mothers of children with JCA was found to be slightly impaired in the group of children with pauciarticular JCA. Future larger studies are needed to confirm these results, as the number of subjects in the three groups was rather low. Received: 26 September 2001 / Accepted: 8 February 2002     

CagA-Hp抗体IgG与胃炎的组织学分析

研究幽门螺杆菌(Hp)感染与胃炎的关系。方法对204例慢性胃炎患者胃粘膜进行观察分析,并测定其中137例Hp阳性患者血清CagA-Hp抗体IgG水平,与组织学对照。结果慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生患者血清CagA抗体IgG明显高于对照组(P＜0.01);其他类型胃炎患者血清CagA抗体IgG水平无明显增高(P＞0.05)。结论CagA-Hp可能是导致慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生的因素之一,对这类患者应密切随访观察。     

慢阻肺急性加重期患者预后的影响因素分析

目的探讨慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)患者预后的相关危险因素。方法回顾性调查、收集58例AECOPD患者可能影响其预后的相关因素,并对其分别进行单因素分析。并进行Logistic多元逐步回归进行多因素分析,筛选影响AECOPD患者预后的独立危险因素。结果单因素分析后将结果 P0.1的因素纳入多因素Logistic回归,分析发现是否合并呼吸衰竭、气促程度、白细胞计数、APACHEⅡ、应用抗氧化剂、慢阻肺治疗依从性为影响AECOPD患者预后不佳的独立因素(P0.05)。结论根据AECOPD患者预后的独立危险因素,及早判断,选择合适的后续治疗方案,对提高其生存率及生存质量具有重要意义。