三种方法检测超广谱β—内酰胺酶敏感性比较

目的 比较３种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株所产的超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）的敏感性。方法 首先用纸片扩散初筛法从７３株大埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选中２０株可疑产ＥＳＢＬｓ的菌株,同时用纸片扩散确证法、浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ）法和双纸片协同法进行测定比较。结果 对可疑产生ＥＳＢＬｓ的１４株大肠埃希菌和６株肺炎克雷伯菌,用纸片扩散确证法头孢噻肟和头怨噻肟－克拉维酸组检测,此２０株全     

三种方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β—内酰胺酶？…

目的 用纸片协同试验、纸片确证试验和克拉维酸纸片叠加法检测产ＥＳＢＬｓ的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,并调查了医院感染这两种菌产ＥＳＢＬｓ的流行现状。方法 采用头孢他啶、头孢曲松、头孢噻噻肟和氨曲南方底物,用上述三种试验对临床分离的９９株大肠埃希菌和４８株肺炎克雷伯菌检测ＥＳＢＬｓ的产生。结果 纸片确证试验和克拉维酸纸片叠加法检测结果没有显著差异,总检出率在大肠埃希菌中为３５．４％,在肺炎克雷伯菌中为     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测

目的 选择和适用于检测产超广谱β－内酰安酶（ＥＳＢＬｓ）临床大肠埃希菌、肺炎克雷伯耐药菌株的最佳方案。方法 临床分离的１１０株大肠埃希菌和８４株肺炎克雷伯菌经初筛试验,用浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ）、单纸片加抑制剂舒巴坦扩散法、阿莫西林及氨苄西林双纸片协同试验,比较５种方法的检出率极度其差异。结果 Ｅｔｅｓｔ法对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出存在明显的差异（Ｐ〈０．０１）,肺炎克雷伯菌的检出率（４／２０）有显低于大肠埃希菌（１６／２６）;单纸片扩散法加克拉维酸对两种菌的检出均较高（１６／２６、１２／２０）。检测产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌时,除氨 苄西林双纸片协同法（８／２６）检出率低以外,其他４种方法的检出率无明显差异（Ｐ〉０．０５）,５种方法有较好的一致性。检测产ＥＳＢＬｓ肺炎克雷伯菌时,单纤片扩散法加克     

评价三种筛选方法检测超广谱β—内酰胺酶及其临床应用

目的 评价３种超广谱β－内酰胺酶筛选方法检测产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的可靠性与临床应用。方法 以头孢三嗪,头孢噻肟,头孢他啶和氨曲南为指示底物,用双纸片协同试验,三维试验和双纸片增效试验３种方法检测４５株ＥＳＢＬｓ阳性和６４株ＥＳＢＬｓ阴性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及临床分离的７４株大肠埃镣菌和３１株肺炎克雷伯菌ＥＳＢＬｓ产生情况。     

三种方法检测超广谱β—内酰胺酶的结果比较

比较三种文坛法检测广州地区１２家医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯各产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）敏感性,用纸片扩散初筛法,初筛出１６７株可疑产ＥＳＢＬｓ的菌株,然后进行纸片扩散确证法,双纸片协同法和浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ法）,结果有１４７株菌产ＥＳＢＬｓ（３２％大肠埃希菌的４２．６％克雷伯菌属ＥＳＢＬｓ菌性）,纸片扩散确下法和双纸片协同法检出率相似,但双纸片协同法的缺点的纸片中心间距不好控制,ＥｔｅｓｔＥＳＢＬ初筛试条检测ＥＳＢＬｓ有一定局限性,纸片扩散确证法适合临床常规测定。     

超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌大肠埃希菌耐药监测

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌是产超广谱 β 内酰胺酶(ＥＳＢＬｓ)的代表菌种。本研究对上海地区 4家医院分离的930株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌做药敏监测 ,并用双纸片协同扩散法 (ＤＤＳ)检测ＥＳＢＬｓ,以了解上海部分地区肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产ＥＳＢＬｓ及耐药情况。一、材料与方法1.菌株来源 :1999年 3～ 10月上海长海医院、长征医院、肺科医院和华山医院 4家医院提供从住院患者的各种临床标本中分离出的肺炎克雷伯菌 5 99株 ,大肠埃希菌 331株。2 .抗生素纸片 :头孢呋新 (ＣＸＭ 30 μｇ)、头孢噻肟 (ＣＴＸ30 μｇ)、头孢他啶 (Ｃ…     

评价三种筛选方法检测超广谱β-内酰胺酶及其临床应用

目的　评价３ 种超广谱β内酰胺酶（ Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ） 筛选方法检测产 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的可靠性与临床应用。方法　以头孢三嗪、头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南为指示底物,用双纸片协同试验、三维试验和双纸片增效试验３ 种方法检测４５ 株 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 阳性和６４ 株 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 阴性大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌及临床分离的７４ 株大肠埃希菌和３１ 株肺炎克雷伯菌 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 产生情况。结果　３ 种方法的敏感性分别为８６ ．７ ％ 、９５ ．６ ％ 和８４ ．４ ％ ,特异性分别为１００ ％ 、９８ ．５ ％ 和１００ ％ ,检测效率分别为９４ ．５ ％ 、９７ ．３ ％ 和９３ ．６ ％ 。临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 检出率分别为３２ ．４ ％ 和２５ ．８ ％ 。头孢三嗪和头孢噻肟为本院检测 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 最适指示底物。结论　三维试验是一种敏感、可靠的 Ｅ Ｓ Ｂ Ｌｓ 筛选方法,但操作繁琐,仅适用于标本量较少的医院;双纸片协同试验和双纸片增效试验操作简便、结果可靠,适合于各级医院常规应用。     

产超广谱β-内酰胺酶菌株检出方法的探讨

目的 提高产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）细菌的检出率。方法 采用标准纸片扩散法、筛选法、确认法和双纸片协同法进行试验。结果 头孢他啶（ＣＡＺ）、头孢噻肟（ＣＴＸ）、氨曲南（ＡＺＴ）对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌筛选率分别为１１．２％、１８．５％、１８．５％。ＣＡＺ／克拉维酸（ｃｌａｖ）对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌确认率分别为７２．３％（３４／４７）、７５．０％（１２／１６）;     

仪器法与纸片协同法检测超广谱β—内酰胺酶的结果比较

目的 了解ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）的可靠性,并调查本院这两种菌的产ＥＳＢＬｓ情况。方法 用ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ专用药敏卡ＧＮＳ－５０６进行ＥＳＢＬｓ检测,并以头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南为底物,用纸片协同试验作对照。结果 仪器检测４８株肺炎克雷伯菌中有２４株ＥＳＢＬｓ为阳性,用纸片协同法对照结果一致。检测１０２株大肠埃希菌中,仪器检出４１株阳性,纸协同法对照也为阳性,但仪器检测的６１株阴性菌中,纸片协同法对照有１９株为阳性。结论 ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ检测本地区产ＥＳＢＬｓ菌株尚可能存在一定的局限性,建议各地根据感染菌株的特点及三代头孢菌素的使用情况,用多种底物检测ＥＳＢＬｓ。     

超广谱β—内酰胺酶的两种实验室检测方法比较

医院实验室多数采用双纸片协同试验检测超广谱 β -内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ) ,而ＮＣＣＬＳ推荐双纸片增效试验为ＥＳＢＬｓ的确证试验。我们根据ＮＣＣＬＳ推荐的纸片扩散法筛出可疑产ＥＳＢＬｓ的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,再用双纸片协同试验与双纸片增效试验方法进行测试 ,结果分析如下。1　材料与方法1 1　菌株　我院 1999年 10月～ 2 0 0 0年 1月从临床各类标本中分离鉴定出的Ｅ ｃｏｌｉ(大肠埃希菌 )和Ｋ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ(肺炎克雷伯菌 ) ,根据ＮＣＣＬＳ 1999年版推荐的纸片扩散法 ,头孢噻肟 (ＣＴＸ)≤ 2 7ｍｍ、头孢他啶 (Ｃ…     

VITEK 2 Compact AST-GN13药敏条检测超广谱β-内酰胺酶试验结果的评价

目的了解VITEK 2 Compact检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和血培养中分离的奇异变形杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的可靠性。方法同时用美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的纸片扩散确证法和VITEK 2 Compact仪器对临床标本分离的102株大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和血培养中分离的奇异变形杆菌进行ESBLs检测。结果仪器法、确证法检测ESBLs菌株阳性率分别为52.9%、51.0%;仪器法检测ESBLs的灵敏度和特异性分别为98.2%、97.9%。结论 VITEK2Compact AST-GN13药敏条是检测ESBLs准确快速的检测方法 ,VITEK 2 Compact高级专家系统的ESBLs判定结果准确可靠。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法细菌药敏试验采用琼脂纸片扩散法(K-B法)、双纸片协同试验及纸片扩散确诊试验检测ESBLs。结果大肠埃希菌中产ESBLs占25.0%,肺炎克雷伯菌中占28.8%;产ESBLs菌株对青霉素类和头孢类抗菌药物大多耐药,而对亚胺培南敏感,产ESBLs菌株对抗菌药物的耐药率高于非产ESBLs菌株。结论ESBLs是细菌对青霉素类和头孢类抗菌药物耐药的重要机制,及时监测产ESBLs菌的发生率及耐药趋势,对指导临床用药至关重要。     

下呼吸道感染革兰阴性杆菌的分布及耐药分析

目的:调查下呼吸道感染革兰阴性杆菌的分布、耐药性及其产超广谱β-内酰胺酶情况,指导临床用药。方法:痰培养分离的病原菌用全自动微生物分析系统鉴定,纸片扩散法进行抗生素敏感试验,双纸片协同筛选试验和纸片扩散法表型确证试验检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)。结果:克雷伯菌属和大肠埃希菌仍是下呼吸道感染的主要病原菌;引起下呼吸道感染的革兰阴性杆菌对氨苄西林、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢呋辛、阿莫西林/棒酸、庆大霉素、环丙沙星的耐药率均超过40%。对亚胺培南、头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、头孢噻肟、妥布霉素呈现良好的敏感性,耐药率均小于36%。产ESBLs菌株对头孢他啶、头孢噻肟、头孢噻吩、头孢唑啉、头孢呋新、庆大霉素、环丙沙星的耐药率比非产ESBLs菌株耐药明显升高,经卡方检验示有显著差异(P<0.001),对阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦和阿莫西林/棒酸的耐药率与非产ESBLs菌株无显著差异(P>0.05)。细菌的多重耐药性与产ESBLs有关。结论:下呼吸道感染应根据抗生素敏感试验选择敏感药物治疗,并检测ESBLs。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及其基因分析

目的了解临床分离菌中产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌发生率,分析其耐药表型,探讨其ESBLs基因类别。方法采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的纸片扩散法,对364株大肠埃希菌和71株肺炎克雷伯菌进行产ESBLs菌株初筛试验,并用双纸片确证试验和双纸片协同试验进行产ESBLs菌株确证。按照NCCLS文件标准,用KirbyBauer纸片扩散法进行产ESBLs株21种抗生素药敏试验。用PCR方法扩增168株ESBLs表型阳性菌中blaTEM1、blaSHV1、CTXM1组、TOHO1组等4种基因。结果(1)大肠埃希菌和克雷伯菌中产ESBLs的检出率分别为46.7%和32.4%。(2)产ESBLs菌对青霉素类100%耐药;对第1、2代头孢菌素耐药率达85%～100%;对除头孢他定以外的第3代头孢菌素,产ESBLs大肠埃希菌耐药率为80%以上,产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药率为65%～75%以上;产ESBLs菌对复方新诺明的耐药率为75%～85%;产ESBLs大肠埃希菌对环丙沙星耐药率为80%～90%、庆大霉素耐药率为50%～75%;产ESBLs菌对阿米卡星、头孢替坦、亚胺培南有较好的敏感性(80%～90%以上)。(3)产ESBLs大肠埃希菌中,blaTEM1、blaSHV1、CTXM1组等3种基因扩增阳性率分别为93.9%、7.4%和53.4%。51.4%的菌株同时携带2种耐药基因,2.7%的菌株同时携带3种耐药基因。产ESBLs肺炎克雷伯菌中blaTEM1、blaSHV1、CTXM1组等3种基因扩增阳性率分别为50.0%、95.0%和20.0%。同时携带2种耐药基因的菌株占35.0%,同时携带3种耐药基因的菌株占15.0%。两种细菌中均未检出TOHO1组基因。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高,大肠埃希菌中产ESBLs菌比例有逐年上升趋势。产ESBLs菌对头孢噻肟的耐药率远高于头孢他定,且多数菌株对青霉素类,第1、2、3代头孢菌素、喹诺酮类、磺胺类、氨基糖甙类等抗生素呈多重耐药。大肠埃希菌中以TEM型和CTXM型基因为主。肺炎克雷伯菌以SHV型基因为主,同时存在TEM型和CTXM型基因。     

医院产超广谱β-内酰胺酶细菌耐药性动态观察

目的对医院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌的检出率及耐药性进行动态观察,为临床应用抗菌药物提供指导。方法对我院2004至2007年临床标本分离的395株大肠埃希菌和262株肺炎克雷伯菌用双纸片扩散法检测其ESBLs,并用纸片扩散法进行药敏试验。结果4年来大肠埃希菌产ESBLs阳性率从25.3%上升至37.7%;肺炎克雷伯菌产ESBLs阳性率从25.0%上升至36.0%。产ESBLs株对头孢菌素类、氟喹诺酮类等常用抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs株,对碳青霉烯类抗菌药物敏感。结论4年来,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率逐年升高,并呈现出多重耐药性,对产ESBLs菌株的治疗应首选碳青霉烯类抗菌药物。     

19家医院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中TEM型β-内酰胺酶的研究

目的 检测全国19家医院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中的TEM型ESBLs.方法 收集2004～2005年全国19家医院对头孢他啶耐药的大肠埃希菌98株和肺炎克雷伯菌109株,琼脂稀释法测定菌株MICs,PCR扩增blaTEM基因.扩增阳性菌株进行接合实验,测定接合子MICs并PCR扩增blaTEM基因.扩增阳性的菌株和接合子以等电聚焦电泳(IEF)检测其β-内酰胺酶等电点.对具有典型TEM型ESBLs表型的菌株进行测序和变性高效液相色谱(DHPLC)分析.进一步收集检出突变菌株的宿主患者及其所在病房分离的对头孢他啶不敏感的菌株,进行测序、DHPLC分析,以及ERIC-PCR和RAPD分型.结果 实验菌株中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBL阳性率分别为84.7%和68.8%,blaTEM基因阳性率分别为67.3%和69.7%.仅1株大肠埃希菌P34表达TEM-12型ESBL,其他均为TEM-1(广谱β-内酰胺酶).P34宿主患者分离的21株大肠埃希菌中有18株表达TEM-12,且所有菌株均为同一克隆.该患者住院期间所在病房分离的11株对头孢他啶不敏感大肠埃希菌均表达TEM-1,与P34均不是同一克隆,但不同患者间存在菌株的水平传播.结论 TEM型ESBLs已在中国出现,但仍罕见,不是导致菌株对头孢他啶耐药的主要原因.本研究在国内首次报道了TEM-12型ESBL,该菌株虽未引起流行,但仍应引起重视.必须加强感染控制,防止TEM型ESBLs在中国的传播.