硝酸甘油耐受大鼠主动脉差异microRNA筛选与生物信息学分析

目的: 筛选硝酸甘油耐受大鼠主动脉差异表达的microRNA（miRNA）,并分析预测差异miRNA调控的靶基因及功能。方法: SD大鼠皮下注射给予硝酸甘油连续3 d造成硝酸甘油耐受模型,胸主动脉提取RNA后,应用miRNA测序技术筛选差异miRNA,并用qRT-PCR进行验证。利用生物信息学方法预测差异表达miRNA调控的靶基因,分析靶基因富集的基因功能（gene ontology,GO）和信号通路（pathway）。结果: 与对照组比较,硝酸甘油耐受组共有28个miRNA表达发生显著变化,其中16个为已知miRNA,其中12个上调,4个下调（P<0.05）。qRT-PCR检测了miR-487b-3p和miR-503-5p,变化趋势与测序结果一致。生物信息学分析显示,差异miRNA的靶基因主要富集于蛋白结合和代谢途径。结论: 硝酸甘油耐受大鼠主动脉miRNA表达明显变化,这些差异miRNA通过调控靶基因参与硝酸甘油耐受发生。     

乳腺癌中具有双重功能的miRNA

乳腺癌是全球女性中最常见的恶性肿瘤,是一种异质性疾病,其确切原因目前尚不明确,但乳腺癌是由不同的亚型组成,在临床特征,遗传背景和分子标志物方面差异很大;microRNAs （miRNAs）是一种小的非编码RNA,可以在转录后调控参与关键细胞过程各个阶段的基因调控。miRNA的持续失调在乳腺癌细胞的恶性转化中起着至关重要的作用,取决于它们所处的细胞环境,作为致癌物或肿瘤抑制物发挥作用。作为一种有前途的生物标志物,miRNA表达的失调似乎为各种癌症的诊断和预后领域开辟了新的机会。很多研究揭示了miRNA在不同癌症类型中的确切功能,然而结果并不一致,这需要进一步研究以确定潜在的机制。本综述中将miRNA与乳腺癌遗传和分子背景相关联,描述miRNA在乳腺癌中的两重作用并进行总结。     

miRNA与药物反应个体差异

目前关于药物反应个体差异研究集中在药物代谢和药物靶点基因的单核苷酸多态性位点(SNPs)和其他基因突变(例如拷贝数的变化)的表型效应,而仅分析DNA序列不能完全解释药物反应个体差异。miRNA的发现,为其提供了新的研究方向。miRNA是一类内源性的非编码小RNA,其与靶基因mRNA 3'非翻译区(3'UTR)互补结合,引起mRNA切割或翻译抑制,从而在转录后水平下调基因表达。miRNA可负调控大量人类基因的表达,其中包括许多药物疗效相关基因。越来越多的研究结果表明,miRNA是导致药物反应个体差异的又一重要因素。本文从miRNA调控药物代谢、药物转运和药物靶点,miRNA及其结合位点多态性等方面对miRNA在药物反应个体差异中所起作用进行综述。     

调节Sirt1的microRNA的研究进展

沉默信息调节因子1(Silent information regulator 1, Sirt1)是沉默信息调节因子(Silent information regulator,sir2)家族中的一员,是NAD⁺依赖的Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶。Sirt1在细胞的生存、凋亡、肿瘤的发生发展、代谢性疾病以及抗衰老等方面扮演着非常重要的角色。microRNA(miRNA)是一组广泛存在于真核生物中的、短小的、不编码蛋白质的单链RNA。近年来研究表明,miRNA能从转录后水平调控Sirt1的表达。因此,调控Sirt1的miRNA可能成为治疗许多疾病的新靶点而倍受研究者们广泛关注。     

N-乙酰半胱氨酸活性炭缓释微囊对幼鼠非酒精性脂肪肝病miRNA的影响

目的: 初步研究N-乙酰半胱氨酸活性炭缓释微囊对幼鼠非酒精性脂肪肝病的保护作用,并且探讨其对miRNA及相应的靶基因的影响。方法: 采用高脂饲料喂养的方法复制幼鼠非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）模型。HE染色观察幼鼠肝组织脂肪变性程度;microRNA芯片检测肝组织的miRNA表达谱;荧光定量PCR对miRNA进行验证;采用荧光定量PCR和Western blot法对目标miRNA进行靶基因预测并进行验证。 结果: 根据检测结果,初步确定miRNA199a-5p和miRNA-378-5p是NAFLD的关键miRNA,脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,Lpl）是miRNA199a-5p的靶基因,固醇调节元件结合蛋白（sterol regulatory element binding proteins-1,Srebp1）、CCAAT增强子结合蛋白α（CCAAT enhancer binding protein alfa,C/EBP-α）是miRNA-378-5p的靶基因。结论: 推测N-乙酰半胱氨酸活性炭缓释微囊可能通过上调Lpl表达水平,下调Srebp1和C/EBP-α表达水平。这些基因与脂肪肝密切相关,可能对幼鼠NAFLD具有保护作用。     

miRNA调控肿瘤相关基因c-met的研究进展

C-met属于酪氨酸激酶受体（receptor tyrosinekinases,RTKs）超家族成员,当与其配体肝细胞生长因子结合后可以引起细胞不同信号通路的改变。微小RNA (microRNA,miRNA)是一类高度保守、内源性、非编码的单链小分子RNA,其长度约为19～25个核苷酸,通过影响靶mRNA的稳定性或抑制其翻译从而对基因进行转录后表达的调控, 其在生物的多种生物学过程中发挥着重要作用。研究表明,miRNAs可以通过调控c-met的表达,抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭。现就miRNA对肿瘤相关基因c-met调控的研究进展进行综述。     

翻译起始因子与肿瘤翻译调控异常研究进展

蛋白合成是维持细胞稳态和细胞增殖的关键步骤。翻译过程的调控多发生在蛋白合成起始过程,多种翻译起始因子(eIFs)参与此过程。在细胞恶性表型转化过程中,常伴随这些因子的磷酸化、过表达及降解过程异常。如帽结合蛋白eIF4E高表达,甲硫氨酸-tRNA结合蛋白eIF2过度活跃,eIF3的活性增高等现象。eIFs在蛋白合成及细胞增殖过程中的重要地位使得其成为抗肿瘤研究的热点及潜在的治疗靶点。本文对eIFs及肿瘤翻译调控的研究进展及研究方法进行综述。     

microRNA在前列腺癌诊断和治疗方面的研究进展

前列腺癌（prostate cancer, PCa）是发生于前列腺组织的上皮性恶性肿瘤,它是仅次于肺癌的男性第二大常见癌症,影响着全球数百万男性。microRNA（miRNA）是一种长度为20～22nt的非编码小RNA,在转录后调控基因表达,miRNA参与了细胞周期进展、细胞增殖、细胞凋亡、细胞迁移等几乎所有重要的生物生命过程的调控。最近越来越多的研究表明,miRNA参与了包括PCa在内的各种人类肿瘤的发生,本综述总结了现阶段与PCa相关的miRNA的研究进展,分析了PCa患者体内表达失调的miRNA在PCa发病机制、诊断和治疗中的作用,并且重点阐述了miRNA在去势抵抗性前列腺癌（castration-resistant prostate cancer, CRPC）诊断和治疗中的作用。     

miRNA对骨质疏松症的调控

microRNA (miRNA)是一种内源性的单链非编码小RNA。通过与靶mRNA的3'UTR结合,参与调控约30%的基因表达,是重要的转录后水平调控因子。在细胞的增殖、分化、凋亡、代谢等生理过程中发挥广泛的作用。研究表明,miRNA与肿瘤、心脏病、糖尿病、帕金森综合症等多种复杂疾病的发生有关,且与多药耐药有关,本文将就miRNA对骨质疏松症的调控等作一综述。     

深II度烧伤皮肤miRNA差异表达研究

目的: 研究深II度烧伤皮肤与正常皮肤组织中miRNA差异表达谱，探讨差异表达miRNAs在创面愈合中的作用。方法: 利用miRNA基因芯片检测技术筛选出深II度烧伤皮肤与正常皮肤组织差异表达的miRNA，运用实时定量RT-PCR验证部分miRNA表达情况。通过基因数据库TargetScan、miRanda和mirbase进行靶基因预测。对预测的靶基因利用GO-Analysis进行靶向性功能分析及Pathway进行信号通路分析。结果: 深II度组与正常组相比，上调的有41个，下调的有124个；其中miR-210-3P，miR-99a-5P，miR-99b-3P，miR-99b-5P，miR-143-5P，miR-29c-5P，miR-15b-5P，miR-323a-3P，miR-424-5P，miR-125b-1-3P，miR-125a-3P，miRNA-184差异表达显著，且参与创面炎症反应、免疫应答及愈合过程。结论: 在基因水平上确定差异表达的miRNAs及其对应靶基因在烧伤创面愈合中的调控机制，为烧伤创面精准治疗提供靶点。     

microRNA与药物性肝损伤

肝脏是人体中最重要的器官之一，参与人体代谢，并具有解毒功能，较易被各种药物和代谢产物所影响。药物性肝损伤是指药物或代谢物引起的肝损害或肝脏对药物及其代谢物的过敏反应所致的疾病，也称作药物性肝病。microRNA（miRNA）是一类小分子的非编码RNA，在多种疾病中具有重要调控作用。本文就microRNA在药物性肝损伤中的调控作用及机制作简要综述。     

miR-150对药物代谢酶CYP3A4的调控作用

目的: 观察miR-150对药物代谢酶CYP3A4的调控作用。方法: 用不同浓度游离长链脂肪酸（FFA）刺激张氏肝细胞,使之成为脂肪变性肝细胞。通过荧光定量PCR和Western blot测定CYP3A4 mRNA和蛋白表达以及miR-150表达。生物信息学分析并构建野生型CYP3A4 3′-UTR双荧光素酶报告载体,与miR-150模拟物共转染。另外,在张氏肝细胞和脂肪变性肝细胞中分别转染miR-150模拟物和抑制剂,检测CYP3A4 mRNA和蛋白表达。 结果: 张氏肝细胞经1 mmol/L FFA诱导24 h后,与对照组相比,脂肪变性肝细胞中CYP3A4 mRNA和蛋白表达均显著下降（P<0.05）,miR-150表达上升（P<0.05）。经生物信息学分析发现CYP3A4为miR-150的靶基因,转染质粒和miR-150模拟物后,荧光活性下降。miR-150模拟物可使CYP3A4 mRNA表达呈浓度梯度下降（P<0.05）,也可使CYP3A4蛋白表达下降;miR-150抑制剂使CYP3A4 mRNA表达上升（P<0.05）。结论: miR-150可直接与CYP3A4的3'-UTR结合,进而直接调控CYP3A4的表达。