灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠骨髓巨噬细胞的激活作用

为研究灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠巨噬细胞的激活作用,用灵芝活性多糖GLIS刺激体外培养的正常和荷瘤小鼠的巨噬细胞,检测GLIS刺激后巨噬细胞分泌至培养基中的TNF-α、IL-1β和NO的含量,以及小鼠巨噬细胞对乳胶颗粒的吞噬率的变化,并检测GLIS刺激的巨噬细胞对肿瘤细胞的抑制作用,同时研究灵芝活性多糖GLIS组成的糖和蛋白部分对活性的影响。结果显示经灵芝活性多糖GLIS刺激后,能显著刺激巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β,并产生大量的NO。小鼠巨噬细胞对乳胶颗粒的吞噬功能也明显的增强,且荷瘤小鼠的巨噬细胞对GLIS的敏感度要优于正常小鼠,GLIS中的糖部分对它的活性作用起主要作用。该研究表明,灵芝活性多糖GLIS对正常和荷瘤小鼠巨噬细胞均具有明显的激活作用。     

灵芝孢子粉对糖皮质激素抑制模型小鼠的免疫调节作用

目的：探讨灵芝孢子粉对糖皮质激素（Glucocorticiods,GC）免疫抑制模型小鼠的免疫功能调节作用。方法：用不同剂量灵芝孢子粉对糖皮质激素模型小鼠灌胃,检测小鼠免疫器官重量,巨噬细胞和中性粒细胞的吞噬功能;外周血细胞CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD49b^＋、CD19^＋的表达;血清中溶血素效价、总补体活性以及T细胞产生主要细胞因子的含量。结果：灵芝孢子粉可显著增强GC免疫抑制小鼠的免疫功能,能显著提高小鼠的胸腺指数和脾指数、溶血素效价,增加腹腔巨噬细胞和中性粒细胞吞噬功能,对外周血中T、B、NK细胞的数量、血清总补体活性和主要细胞因子的含量均有一定影响。结论：灵芝孢子粉对GC免疫抑制小鼠的免疫功能恢复具有正调节作用。     

薄盖灵芝对小鼠腹腔巨噬细胞的作用

<正> 薄盖灵芝是祖国医学中常用的补益药之一,从薄盖灵芝菌丝体提取制成的注射液(简称薄芝液)的免疫药理我们已作过报道,但目前有关薄芝液对小鼠腹腔巨噬细胞的作用研究较少。薄芝液可促进小鼠巨噬细胞吞噬功能虽有所报道,但由于巨噬细胞是一种具有多种功能的免疫细胞,吞噬功能是巨噬细胞的基本功能之一。因此,我们采用多种测定巨噬细胞功能的方法,以分析薄芝液对巨噬细胞活性的影响。     

赤灵芝孢子粉对老年小鼠的免疫调节作用

目的: 探讨"盈康活"灵芝孢子粉对正常老年小鼠免疫调节作用方法: 用不同剂量灵芝孢子粉给正常老年小鼠灌胃,检测小鼠免疫器官重量,巨噬细胞和中性粒细胞的吞噬功能;外周血细胞CD3+、 CD4+、 CD8+、 CD49b+、 CD19+的表达;血清中溶血素效价、总补体活性以及T细胞产生主要细胞因子的含量结果: 灵芝孢子粉能明显提高小鼠的胸腺指数和脾指数、溶血素效价,增加腹腔巨噬细胞和中性粒细胞吞噬功能,对外周血中T、 B、 NK细胞的数量、血清总补体活性和主要细胞因子的含量均有一定影响结论: 灵芝孢子粉对正常老年小鼠的免疫功能恢复具有正调节作用.     

灵芝孢子粉对荷HAC肝癌小鼠抗肿瘤的实验性研究

本文通过荧光细胞检测技术、体外细胞毒试验以及肿瘤抑瘤率的测定 ,观察了灵芝孢子粉对荷HAC小鼠T细胞表面分化抗原 ,体外细胞杀伤功能以及肿瘤抑瘤率的影响。结果显示灵芝孢子粉治疗组中总T细胞的百分率 (6 3 4% )高于对照组 (5 6 3% ) ,其中对总T细胞、T辅助细胞的上调较为明显。在对HAC、YAC 1和P815肿瘤细胞的杀伤活性中灵芝孢子粉组的杀伤活性分别为 2 7 3%、 2 3 4%和 2 0 0 % ,高于对照组。灵芝孢子粉组的总抑瘤率为 42 2 %。结果表明灵芝孢子粉是一种能激活和提高特异性 (CTL )和非特异性杀伤细胞 (NK、LAK )的抗肿瘤作用 ,抑制肿瘤细胞的增殖以及调控机体免疫功能的中药。     

猪苓多糖对巨噬细胞RAW264.7的双向免疫调节作用

目的观察猪苓多糖对γ干扰素(IFN-γ)诱导M1亚型巨噬细胞膜表面蛋白的影响及对相关细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-αm RNA的作用,探讨猪苓多糖对巨噬细胞的免疫调节作用。方法实验分为空白对照组、IFN-γ模型组、猪苓多糖组和IFN-γ加猪苓多糖组。IFN-γ诱导巨噬细胞极化为M1型后用猪苓多糖干预,采用流式细胞术检测膜蛋白CD14、TLR4、CD86、CD40、CD16/32的阳性表达率,ELISA法检测细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β、IL-17及IL-10的表达量,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测TNF-α、IL-1β、IL-6、TGF-β及IL-10 m RNA的相对表达量。结果 IFN-γ可单独诱导M1巨噬细胞模型,猪苓多糖作用于M1型巨噬细胞,分泌的因子增加,但是对膜蛋白影响不大;猪苓多糖单独作用于巨噬细胞,可以增加膜白蛋的表达量,分泌的因子和空白对照组比较有统计学差异。结论猪苓多糖可以极化巨噬细胞为M1型,可以增加由IFN-γ诱导的M1炎症因子的表达,同时也增加抑炎因子的表达,有着双向的调节作用。     

海带硫酸多糖对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节作用

近年来人们发现某些藻类多糖具有明显的抗肿瘤作用[1]。我们从海带中提取了一种天然生物大分子海带多糖(Ｌａｍｉｎａｒｉｎｓｕｌｆａｔｅ,ＬＡＳ),由Ｌ岩藻糖、Ｄ半乳糖等糖基组成的硫酸酯化多聚物,平均分子量为1.5×105。该多糖对小鼠肉瘤Ｓ180的抑制率可达86.5%。本研...     

灵芝多糖对小鼠脾脏树突状细胞的增殖作用

目的 观察灵芝多糖（GP）对小鼠脾脏树突状细（dendrirtie cells,DCs）的增殖作用。方法采用MTT法,以细胞因子（GM-CSF＋IL-4）作比较,观察不同质量浓度GP以及细胞因子＋不同浓度的GP对小鼠脾脏DCs的增殖作用。结果GP（5-80μg/mL）可明显刺激小鼠脾脏DCs增殖,与细胞因子组相比,其较高质量浓度组（20、40、80μg／mL）作用明显;GP＋细胞因子,与对照组相比均有显著的增殖作用,且明显高于细胞因子组。结论GP不仅能促进小鼠脾脏DCs的增殖,而且与细胞因子有显著的协同作用。具有类生长因子和协同生长因子的作用。     

八种中药多糖对小鼠巨噬细胞释放细胞因子的影响

常规提取黄芪、枸杞、当归、香菇、地黄、蒲公英、板蓝根、柴胡等8味中药的多糖组份,体外与小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,ELISA法检测培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等细胞因子的含量,并与巨噬细胞对照组比较,借以观察黄芪等中药的多糖对巨噬细胞释放细胞因子的影响,探索巨噬细胞甘露糖受体在中药多糖免疫干预效应中的作用。结果表明,黄芪、枸杞、当归、香菇和蒲公英等5味中药多糖组份一定浓度组TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8中一个或多个细胞因子水平明显升高(P<0.05或P<0.01),且具有浓度差异性(P<0.05或P<0.01)。提示黄芪等5味中药多糖组分刺激巨噬细胞释放细胞因子是他们干预机体免疫功能的部分机制。     

灵芝孢子粉提取物在体内外的免疫效应

灵芝孢子粉醇提取物（ＧＬＳＥ）在体内能抑制小鼠的迟发型过敏反应和对绵羊红细胞的初次抗体应答以及鸡红细胞诱导的循环抗体水平，在体外可抑制有丝分裂原刺激小鼠脾淋巴细胞和人扁桃体淋巴细胞的增殖反应。另外，ＧＬＳＥ可降低小鼠脾细胞ＩＬ－２产生水平，并可抑制同种异型小鼠脾细胞的混合培养反应。ＧＬＳＥ对机体的细胞免疫和体液免疫功能的抑制作用可能是其用于治疗自身免疫与过敏反应有关疾病有效的免疫学基础。     

灵芝孢子粉对青春期糖尿病大鼠糖耐量和肠道菌群的影响

目的 观察灵芝孢子粉对链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠糖耐量和肠道菌群的影响.方法 将用STZ诱导的糖尿病模型大鼠分为灵芝治疗组和模型对照组,分别灌胃灵芝孢子粉(每天250mg/kg)和等体积的蒸馏水,连续10周,而后检测两组大鼠血糖及肠道菌群的变化.结果 治疗组大鼠糖耐量基本恢复正常,肠道菌群中的双歧杆菌数量有所回升,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 灵芝孢子粉对实验大鼠有一定降血糖及菌群调节作用.     

灵芝孢子油及灵芝提取物孢子油对乳腺癌血管生成调节因子的作用

目的探讨灵芝孢子油及灵芝提取物孢子油对人源高恶性乳腺癌血管生成调节因子的作用。方法不同剂量的灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油分别刺激体外培养的人源高恶性乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞及MDA-MB-231细胞制作的荷廇小鼠,Western blotting检测表皮生长因子受体(EGFR)的蛋白表达变化,Real-time PCR检测肿瘤血管生成相关因子EGFR、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMPs)、血小板反应素-1(TSP-1)、血小板衍生因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)转录水平的基因表达变化。结果灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油均可在体内和体外抑制人源高恶性乳腺癌细胞MDA-MB-231的EGFR蛋白表达,且有剂量依赖性;均可在体内和体外抑制VEGF RNA表达,增强血管生成抑制因子TSP-1 RNA表达;灵芝提取物孢子油比灵芝孢子油的作用更为显著。结论灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油均有抑制肿瘤血管生成因子表达和促进血管生成抑制因子表达的作用,其中灵芝提取物孢子油比灵芝孢子油的作用更为显著。     

赤灵芝中醇溶性蛋白提取工艺研究

目的研究不同工艺参数对赤灵芝醇溶性蛋白提取率的影响,为探索赤灵芝醇溶性蛋白的工业化生产提供参考。 方法以赤灵芝为原料,采用乙醇提取醇溶性蛋白,并通过单因素实验和正交实验研究浸提时间、温度、pH、液料比及提取次数对醇溶性蛋白提取率的影响,确定赤灵芝醇溶性蛋白提取的最佳工艺。 结果单因素实验结果表明,提取时间2b,料液比1：40,醇溶性蛋白含量最高。正交实验得出各因素对灵芝醇溶性蛋白提取率的影响程度大小依次为：pH值〉料液比〉提取温度〉乙醇浓度,醇溶性蛋白提取的最佳工艺参数为：乙醇浓度60％,pH2．5,料液比1：40,提取温度60℃。 结论通过单因素实验和正交实验确定了赤灵芝醇溶性蛋白的最佳提取工艺参数,为赤灵芝醇溶性蛋白的工业化生产提供了参考依据。     

灵芝的抗肿瘤作用机制

70 年以来国内外一系列研究证明灵芝[ Ganodermalucidum(Leyss.ex Fr.)Karst.] 对动物移植性肿瘤具有抑制作用,可使瘤重减轻,生存时间延长。并认为灵芝多糖可能是灵芝抗肿瘤作用的重要有效成份[1]。然而,灵芝的抗肿瘤作用是如何产生的？灵芝是直接杀死肿瘤细胞,还是像一些学者推测的那样：灵芝是通过机体内部的抗肿瘤机制间接杀死肿瘤细胞,这些均是目前学术界关注的焦点。为此,我们采用体内外抗肿瘤实验方法和细胞分子生物学技术以及血清药理学方法探讨了灵芝的抗肿瘤作用及其机制。1 灵芝的体内抗肿瘤作用给Blab/c 小鼠皮下接种肉…     

Effect of the heme oxygenase gene on mycelial growth and polysaccharide synthesis in Ganoderma lucidum

The heme oxygenase gene has antioxidant and cytoprotective effects in organisms, but no related research has been conducted in Ganoderma lucidum. For the first time, we cloned the HMX1 gene in G. lucidum. The CDS is 1092 bp in length and encodes 363 amino acids. The HMX1 protein was prokaryotically expressed and purified, and the enzyme activity of the purified protein was measured. The value of K_m was 0.699 μM, and V_m was 81.9 nmol BV h⁻¹ nmol⁻¹ protein. By constructing the silencing vector pAN7-dual-HMX1i, the transformants HMX1i1 and HMX1i2 were obtained. Compared with the wild-type (WT), the average growth rate of HMX1i1 and HMX1i2 decreased by 31% and 23%, respectively, and the mycelium biomass decreased by 53% and 48%, respectively. Compared with the WT, the extracellular polysaccharide content of HMX1i1 and HMX1i2 increased by 59% and 51%, and the intracellular polysaccharide content increased by 24% and 22%, respectively. These results indicate that the HMX1 gene affects mycelial growth and polysaccharide synthesis in G. lucidum.     

戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素和神经营养因子-4表达的变化及灵芝孢子粉的干预作用

目的: 观察戊四氮致痫大鼠脑神经型钙黏附素(N-cadherin)和神经营养因子-4(NT-4)表达的变化及灵芝孢子粉的干预治疗作用,研究癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的作用机制。方法: 健康雄性Wistar实验大鼠30只,随机分为正常对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉治疗组,每组10只。模型组和治疗组均用致痫亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型。在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化和Western blotting检测皮质和海马区N-cadherin和NT-4的变化。结果: 实验性癫痫大鼠模型制作成功,灵芝孢子粉组和癫痫模型组实验动物均达到点燃标准,与癫痫模型组动物相比,灵芝孢子粉组大鼠潜伏期明显延长, 但持续时间无显著差异。免疫组化和Western blotting检测实验结果表明:癫痫模型组实验大鼠脑海马和皮质N-cadherin含量比正常对照组增高(P<0.01);灵芝孢子粉组N-cadherins含量比癫痫模型组下降(P<0.01)。同时癫痫模型组大脑海马和皮质NT-4含量比正常对照组增加(P<0.05);灵芝孢子粉组NT-4含量比癫痫模型组增加(P<0.01)。结论: 灵芝孢子粉能够降低N-cadherin的表达,调整病变神经元兴奋性,起到抗癫痫作用,还能增强NT-4的表达从而减轻癫痫发作对神经系统的损伤。